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Chinese Journal of Catalysis 2015年第11期36卷 1837-1845页

作者： Bahaa M. Abu-Zied 阿卜杜勒阿齐兹国王大学高级材料杰出研究中心沙特阿拉伯吉达21589 艾斯尤特大学理学院化学系埃及艾斯尤特71516 阿卜杜勒阿齐兹国王大学理学院化学系沙特阿拉伯吉达21589

考察了一系列碱金属促进和未促进的NiO催化剂上N2O直接分解反应性能,并采用X射线衍射,X射线光电子能谱(XPS)和前场扫描电镜对这些催化剂进行了表征.XPS结果表明,催化剂表面的Ni以金属颗粒,NiO和Ni(OH)2三种形式存在.研究发现,在催化剂... 详细信息

考察了一系列碱金属促进和未促进的NiO催化剂上N2O直接分解反应性能,并采用X射线衍射,X射线光电子能谱(XPS)和前场扫描电镜对这些催化剂进行了表征.XPS结果表明,催化剂表面的Ni以金属颗粒,NiO和Ni(OH)2三种形式存在.研究发现,在催化剂表面主要是Ni0原子与N2O分子发生相互作用.未促进的NiO催化剂表现出非常低的催化N2O分解活性;碱金属的加入使得NiO催化剂活性大大提高.

关键词：一氧化二氮分解温室气体氧化镍碱金属促进活性增加

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TEV酶在大肠杆菌中的融合表达及其分析方法研究

TEV酶在大肠杆菌中的融合表达及其分析方法研究

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作者：张军辉华南农业大学

学位级别：硕士

TEV蛋白酶(tobacco etch virus protease)是烟草蚀斑病毒编码的NIa蛋白中27 KD的催化区域。由于它能特异性识别含有6个氨基酸(ENLYFQ)特定序列的蛋白,并进行酶切,酶切活性较高,且酶切的条件具有宽容性。因此在重组蛋白领域中应用广泛。... 详细信息

TEV蛋白酶(tobacco etch virus protease)是烟草蚀斑病毒编码的NIa蛋白中27 KD的催化区域。由于它能特异性识别含有6个氨基酸(ENLYFQ)特定序列的蛋白,并进行酶切,酶切活性较高,且酶切的条件具有宽容性。因此在重组蛋白领域中应用广泛。本实验室依据大肠杆菌偏爱密码子和TEV的基因序列,通过重叠PCR的方法成功克隆了TEV基因。目前对TEV酶的研究主要集中在通过不同的方法提高TEV酶的表达量、精确的活性分析以及对TEV酶进行固定化,其中对于TEV酶的活性检测大部分是通过半定量进行分析,即通过酶切后蛋白的SDS-PAGE上条带的大小和结合蛋白浓度分析软件进行分析。本实验通过构建p ET28b-MBP-his-TEV、p ET28b-MBP-his-ACP-TEV、p ET28b-MBP-ybb R-his-TEV重组载体,成功表达和纯化出目的蛋白,并且通过酶活分析发现ACP蛋白和ybb R短肽对TEV酶的活性有促进作用,其中ybb R短肽的促进作用较大。ACP和ybb R标签经修饰后可介导TEV的固定化,精确的酶活分析将为TEV酶的定向固定化研究提供技术支撑,为此,本实验构建了p BAD24-α,p BAD24-his-MBP-α、p BAD24-his-MBP2-α载体,转化大肠杆菌DH5α,初步发现可以通过α-互补形成的β-半乳糖苷酶的显色反应来间接研究TEV酶的活性,将为用分光光度法定量分析TEV酶活性奠定基础。

关键词： TEV酶活性增加 α-互补酶活测定

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