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黄曲霉毒素B_1降解菌活性产物的提取及其应用性质研究

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食品工业科技 2017年第20期38卷 137-140,158页

作者：岳晓禹陈威风邹健李欣杨娜李军霞河南牧业经济学院食品工程学院河南郑州450046 中国农业大学食品学院北京100083

对嗜麦芽窄食单胞菌Stenotrophomonas sp.42-2降解黄曲霉毒素B_1的活性产物进行了提取,并对其应用性质进行了初步研究。结果表明,活性物质主要来自菌株Stenotrophoonas sp.42-2胞外的代谢产物,采用65%硫酸铵沉淀的活性物质的降解能力最... 详细信息

对嗜麦芽窄食单胞菌Stenotrophomonas sp.42-2降解黄曲霉毒素B_1的活性产物进行了提取,并对其应用性质进行了初步研究。结果表明,活性物质主要来自菌株Stenotrophoonas sp.42-2胞外的代谢产物,采用65%硫酸铵沉淀的活性物质的降解能力最强,其分子量大于30 k Da。该活性物质最适应用条件为:反应温度为40℃,p H为8.0,反应时间为72 h,Mg^(2+)、Cu^(2+)对活性物有激活作用,Fe^(2+)对其有抑制作用。

关键词：黄曲霉毒素B1 生物脱毒活性产物

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粘细菌来源的生物活性产物的筛选

河北农业大学学报 2009年第3期32卷 43-45页

作者：程付强张利平张华河北大学生命科学学院河北省微生物多样性研究与应用实验室河北保定071002 华北制药集团河北石家庄050015

为筛选粘细菌来源的生物活性产物,利用肿瘤细胞、谷胱甘肽转移酶和乙酰胆碱酯酶的抑制剂体外筛选模型,对不同来源的粘细菌菌株进行了高通量筛选。结果表明:3类不同的筛选模型均筛选获得了活性菌株,但利用不同的模型筛选得到的活性菌株... 详细信息

为筛选粘细菌来源的生物活性产物,利用肿瘤细胞、谷胱甘肽转移酶和乙酰胆碱酯酶的抑制剂体外筛选模型,对不同来源的粘细菌菌株进行了高通量筛选。结果表明:3类不同的筛选模型均筛选获得了活性菌株,但利用不同的模型筛选得到的活性菌株差异很大,活性菌株筛出率不同,其中抗L1210(小鼠白血病)细胞模型的活性菌株筛出率最高。各种肿瘤细胞模型筛选出的活性菌株也存在很大差异,这说明粘细菌产生的抗肿瘤生物活性产物对不同肿瘤细胞的抑制效果是不同的。

关键词：粘细菌活性产物体外筛选

除莠活性链霉菌的系统发育研究及其活性产物分析

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微生物学报 2004年第2期44卷 148-152页

作者：石楠张利平吕志堂杨润蕾刘志恒郭辉娟渠辉孙红启河北大学生命科学学院教育部微生物资源重点实验室保定071002 中国科学院微生物研究所北京100080 河北大学生命科学学院

从云南地区土壤中分离到一株具有除莠活性的放线菌 (Actinomycetes) ,对其产生的活性物质进行了分离、纯化及分析。从该菌株的发酵液中获得了有除莠活性的黄色结晶 ,薄板层析的结果表明 ,该结晶为多组分混和物 ,且每一组分均具有除莠活... 详细信息

从云南地区土壤中分离到一株具有除莠活性的放线菌 (Actinomycetes) ,对其产生的活性物质进行了分离、纯化及分析。从该菌株的发酵液中获得了有除莠活性的黄色结晶 ,薄板层析的结果表明 ,该结晶为多组分混和物 ,且每一组分均具有除莠活性。通过红外分析对其组分作了初步鉴定。同时对该菌株进行了形态、化学及系统发育学研究 ,根据 16SrDNA全序列构建了系统发育树 ,结果表明此菌株应属于链霉菌属 (Streptomyces) ,同时具有耐低温和耐盐的特性。

关键词：除莠活性链霉菌系统发育活性产物土壤放线菌发酵液杂草危害

三种中草药提取物对北虫草子实体生长及活性产物形成的影响

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黑龙江大学自然科学学报 2016年第3期33卷 376-380页

作者：李伟杨鹏翟李欣郑春英黑龙江大学生命科学学院微生物黑龙江省高校重点实验室哈尔滨150080

研究三种中草药的水提物对北虫草培养过程中子实体的生长和活性产物产量的影响。将不同剂量的三种中草药水提物分别加入到北虫草培养基中栽培后,检测北虫草子实体产量及活性成分含量。甘草添加量为20 mg獉m L-1、刺五加添加量为10 mg獉m... 详细信息

研究三种中草药的水提物对北虫草培养过程中子实体的生长和活性产物产量的影响。将不同剂量的三种中草药水提物分别加入到北虫草培养基中栽培后,检测北虫草子实体产量及活性成分含量。甘草添加量为20 mg獉m L-1、刺五加添加量为10 mg獉m L-1时,不仅可缩短北虫草子实体的培养周期,提高子实体产量(p<0.01),还对北虫草子实体中腺苷及虫草素的形成具有非常显著的促进作用(p<0.01);而五味子提取物则抑制北虫草的生长。研究结果为改善北虫草质量以及北虫草的进一步开发利用提供了一定的实验依据。

关键词：中草药提取物北虫草子实体活性产物

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点状念珠藻培养条件及其活性产物的研究

点状念珠藻培养条件及其活性产物的研究

作者：林金新福建师范大学

学位级别：硕士

念珠藻是一种可以食用的微藻，它能产生许多稀有的天然活性物质，它们在医药、食品、水产养殖、农业和环保等领域具有重要的开发价值。人们已经从念珠藻中已经发现了极具商业价值的色素类、抗生素类、抗病毒类、抗真菌类、抗癌类及细胞... 详细信息

念珠藻是一种可以食用的微藻，它能产生许多稀有的天然活性物质，它们在医药、食品、水产养殖、农业和环保等领域具有重要的开发价值。人们已经从念珠藻中已经发现了极具商业价值的色素类、抗生素类、抗病毒类、抗真菌类、抗癌类及细胞毒素，还有多糖、维生素、甾醇等化合物，念珠藻也是其它有应用价值的医药品的重要来源。本论文将神经网络的研究方法引入藻类学研究当中，用神经网络优化点状念珠藻生物量、胞外多糖的培养条件，优化后的生物量和胞外多糖产量分别比对照组提高了14.3％和66.2％。检测了点状念珠藻胞外粗多糖和脱蛋白多糖的体外抗氧化能力，发现点状念珠藻胞外多糖在体外有良好的清除超氧阴离子、羟自由基的功能，并能够有效抑制亚油酸自动氧化。检测了点状念珠藻醇提物和念珠藻胞外多糖对五种常见致病菌的抑制能力，结果表明点状念珠藻胞外多糖和醇提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有比较明显的抑制效果。分离纯化点状念珠藻蛋白，检测各蛋白组分对两种典型的癌细胞HL60和K562的体外抑制作用，点状念珠藻五种蛋白组分对HL60和K562细胞都用不同程度的抑制作用，其中NP2组分对这两种细胞的抑制效果最明显。

关键词：点状念珠藻 BP神经系统活性产物均匀设计

降解黄曲霉毒素B1解淀粉芽孢杆菌的筛选及其毒素降解活性产物分析

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降解黄曲霉毒素B1解淀粉芽孢杆菌的筛选及其毒素降解活性产物分析

作者：张杨杨河南农业大学

学位级别：硕士

黄曲霉毒素（Aflatoxin,AFT）是一种具有强毒性和高致癌性的天然污染物,它易污染玉米、花生等农作物及其加工制成的食品、饲料,给人类和动物的健康带来巨大威胁。黄曲霉毒素污染的控制急需一种效率高、特异性强以及对饲料和环境没有污... 详细信息

黄曲霉毒素（Aflatoxin,AFT）是一种具有强毒性和高致癌性的天然污染物,它易污染玉米、花生等农作物及其加工制成的食品、饲料,给人类和动物的健康带来巨大威胁。黄曲霉毒素污染的控制急需一种效率高、特异性强以及对饲料和环境没有污染的技术。本研究旨在筛选出能够高效降解黄曲霉毒素B1（AFB1）的菌株,并对其培养条件进行优化,同时对其产生的AFB1降解活性成分进行了分析。研究内容包括如下几个方面:试验一黄曲霉毒素B1降解菌株的筛选与鉴定以香豆素为唯一碳源,从采集的样品及实验室保存菌株中初步筛选到24株能够在初筛培养基生长良好的菌株,进一步复筛从中筛选出12株能够降解AFB1的菌株,其中以菌株Y1-B1对AFB1的降解率最高,AFB1降解率高达73.18%。通过对菌株Y1-B1进行形态学、生理生化试验和16S rRNA序列比对分析,确定其为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。试验二解淀粉芽孢杆菌Y1-B1培养条件的优化以对AFB1的降解率为指标,确定选取LB培养基作为菌株Y1-B1的基础培养基。菌株Y1-B1发酵条件经优化后为:接种量2%、装液量25 mL、摇瓶转速180 r/min、培养基初始pH 7.5、发酵时间72 h、发酵温度30℃,优化后其对AFB1的降解率由最初的76.14%提升至85.96%。随着降解时间的延长,其对AFB1的降解率逐渐增加,72 h后基本不再增加。试验三解淀粉芽孢杆菌Y1-B1降解黄曲霉毒素B1的活性产物分析在优化解淀粉芽孢杆菌Y1-B1培养条件的基础上,对其降解AFB1的活性物质进行了分析。菌株Y1-B1培养物上清液表现出较强的AFB1降解活性,其对AFB1的降解率为87.8%。培养物上清液中降解AFB1的活性成分稳定性较好,对高温和紫外线照射处理抵抗性较强。经酸沉淀、甲醇提取及反向-高效液相色谱（RP-HPLC）从上清液中分离到3种具有较高AFB1降解能力的活性物质,结合PCR鉴定和液相色谱-质谱联用系统鉴定结果,最终确定3种物质为伊枯草菌素（Iturin）族脂肽同系物。利用上清液降解AFB1后,AFB1对鸡肝癌细胞的毒性作用明显下降,细胞凋亡效应显著减弱。

关键词：黄曲霉毒素B1 解淀粉芽孢杆菌培养条件优化活性产物生物降解

烟草青枯病拮抗真菌的筛选、鉴定及活性产物研究

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烟草青枯病拮抗真菌的筛选、鉴定及活性产物研究

作者：董夏伟扬州大学

学位级别：硕士

烟草青枯病是由茄青枯劳尔氏菌属的假单胞杆菌（Ralstonia solanacearum）引起的细菌性病害,多发于热带、亚热带烟区,在我国主要是长江流域及其以南烟区,其中以四川、广东、福建、湖南及贵州烟区最为严重,发病重的地块产量损失可达80%... 详细信息

烟草青枯病是由茄青枯劳尔氏菌属的假单胞杆菌（Ralstonia solanacearum）引起的细菌性病害,多发于热带、亚热带烟区,在我国主要是长江流域及其以南烟区,其中以四川、广东、福建、湖南及贵州烟区最为严重,发病重的地块产量损失可达80%以上。传统的化学防治方法成本高、污染重,轮作和微生物防治成为解决此问题的重要方案。其中,微生物防治方法具有无污染、无公害、长效性等优点,能从根本上解决了药剂残留、病原菌抗药性等问题的影响,有利于环境的净化和生态资源的良性循环。本研究针对烟草青枯病菌,主要进行了拮抗真菌的筛选、鉴定、发酵条件优化、发酵液育苗试验及活性产物稳定性的研究。主要研究结果如下： 1.采用稀释法从重庆黔江烟区健康土壤中分离到59株真菌。采用滤纸片法进行筛选,获得了对烟草青枯病菌具有较强拮抗活性的2个真菌菌株,编号为3F03和7F06,其抑菌圈直径分别为：10.0mm和9.5mm。经反复平板拮抗试验,抑菌圈直径无明显差异。 2.通过对菌株3F03和7F06的形态和培养特征观察、全细胞脂肪酸分析和rDNA ITS序列分析,初步鉴定结果显示：拮抗真菌3F03和7F06分别为烟曲霉（Aspergillus fumigatus）和浅黄新萨托菌（Neosartorya aureola）。 3.以菌株3F03和7F06发酵液处理的烟苗生长状况良好,与对照相比,在种子发芽率、苗高、苗重、根长及根重方面都没有显著的变化。其中,稀释10倍的3F03发酵液和稀释100倍的7F06发酵液两个处理有一定程度的促生作用。 4.以代谢产物的抑菌活性及产量为指标,初步确定了菌株3F03的最佳发酵条件为：发酵温度28℃、发酵时间96h、接种量5%、装液量50mL／150mL;菌株7F06的最佳发酵条件为：发酵温度28℃、发酵时间120h、接种量3%、装瓶量1OOmL／150mL。 5.以不同处理下代谢产物的抑菌活性为指标,测定了菌株3F03和7F06活性产物的稳定性。发现菌株3F03的活性产物的热、pH和紫外稳定性较好,经蛋白酶K和胰蛋白酶处理抑制率仅分别下降了17.0%、14.5%;菌株7F06的活性产物抗紫外线和蛋白酶的能力较强,酸性环境下抑菌活性仅稍有下降,活性产物经80℃以上高温处理后抑菌能力基本丧失。

关键词：烟草青枯病拮抗真菌活性产物鉴定发酵条件稳定性

Bacillus subtilis pda0426鉴定及抑菌活性产物研究

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Bacillus subtilis pda0426鉴定及抑菌活性产物研究

作者：李燕山东轻工业学院

学位级别：硕士

微生物产生的抑菌活性物质是筛选抗菌新药的重要来源,为新药的开发提供了大量的原材料。随着耐药性菌株的大量出现,新型抗菌药开发显得尤为重要。本文以抑菌活性为导向,分离到一株具有强烈抑制金黄色葡萄球菌的细菌菌株pda0426,并对该... 详细信息

微生物产生的抑菌活性物质是筛选抗菌新药的重要来源,为新药的开发提供了大量的原材料。随着耐药性菌株的大量出现,新型抗菌药开发显得尤为重要。本文以抑菌活性为导向,分离到一株具有强烈抑制金黄色葡萄球菌的细菌菌株pda0426,并对该菌株进行了形态学及分子生物学的鉴定,确定pda0426菌株为一株枯草芽孢杆菌,命名为Bacillus subtilis pda0426。以发酵液的抑菌活性为指标,对Bacillus subtilis pda0426的发酵条件进行了初步优化,确定其发酵的最佳培养基组成为蛋白胨、葡萄糖、NaCl,最佳培养条件:最初pH为8.0,培养温度为30°C,转速为180 r/min,培养时间为3天。同时,以组分回收率为指标,研究了发酵液的最佳粗分离方法,采用LH-20葡聚糖凝胶柱层析与反相柱层析进行活性产物的粗分离。经过发酵液的粗分离以及活性组分的纯化与精制,得到了9个主要的组分。经过1H-NMR,13C-NMR、二维核磁数据、质谱等数据进行分析,其中确定结构的组分有4-11-1、4-11-2、R6-5-13.14-1与R7-1.2.3-13.18-5,4-11-2与R6-5-13.14-1为同一种化合物,属于大环内酯类,4-11-1为环二肽。采用高通量及MTT法,对确定结构的化合物进行生物活性研究,主要测定了其对供试菌株的最小抑制浓度(MIC)以及对肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)。结果表明化合物4-11-2与R6-5-13.14-1对金黄色葡萄球菌的MIC为2.0μg/mL,对PC3的IC50为41.0μg/mL,对真菌没有非常明显的活性,是发酵液中抑制金黄色葡萄球菌的主要有效成分。由于发酵液粗提物对一些植物致病真菌具有一定的抑制活性,具有抗真菌活性的化合物仍然需要继续分离。

关键词：抑菌枯草芽孢杆菌活性产物鉴定活性

三七根腐病拮抗菌的筛选及活性产物的初步分离

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云南大学学报（自然科学版） 2004年第4期26卷 357-359,363页

作者：刘立志王启方张克勤李世东云南大学云南省生物资源保护与利用重点实验室云南昆明650091 中国农业科学院生物防治研究所北京100081

以文山州三七根腐病主体病原菌坏损柱孢(Cylindrocaipondestructans)为靶标,对其拮抗菌进行了筛选,获得了抑菌作用明显的3株拮抗细菌:Y-4-70,X-5-15和X-5-32;并对拮抗菌X-5-15代谢产物的抑菌活性进行了初步研究,发现该菌株发酵液石油醚... 详细信息

以文山州三七根腐病主体病原菌坏损柱孢(Cylindrocaipondestructans)为靶标,对其拮抗菌进行了筛选,获得了抑菌作用明显的3株拮抗细菌:Y-4-70,X-5-15和X-5-32;并对拮抗菌X-5-15代谢产物的抑菌活性进行了初步研究,发现该菌株发酵液石油醚萃取物对病原菌有较好的活性.

关键词：三七根腐病拮抗菌筛选活性产物五加科中药材拮抗能力