检索结果-南通市图书馆

尿石素B对骨髓来源巨噬细胞向破骨细胞分化的调控机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2201-2209页

作者：罗晰陈建权苏州大学苏州医学院骨科研究所江苏省苏州市215000

背景:尿石素B在机体免疫应答中起重要调节作用,具备抗炎、抗氧化和抗癌的特性,并能抑制Raw 264.7细胞向破骨细胞分化,但其对于骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化的具体作用及机制尚未阐明。系统性研究破骨细胞过度活化的调控机制,有助... 详细信息

背景:尿石素B在机体免疫应答中起重要调节作用,具备抗炎、抗氧化和抗癌的特性,并能抑制Raw 264.7细胞向破骨细胞分化,但其对于骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化的具体作用及机制尚未阐明。系统性研究破骨细胞过度活化的调控机制,有助于探索新的治疗靶点,筛选研发更安全、有效的治疗药物,为阻断破骨细胞过度活化提供新思路。目的:利用骨髓来源的巨噬细胞建立体外破骨细胞分化模型,探究尿石素B对核因子κB受体活化因子配体介导破骨细胞分化的影响,并系统性分析其作用机制。方法:(1)采用CCK-8法筛选尿石素B干预骨髓来源巨噬细胞的安全工作浓度;(2)用不同浓度(0,12.5,25,50μmol/L)尿石素B干预骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化,进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞的数目及面积大小;(3)不同浓度(0,12.5,25,50μmol/L)尿石素B干预骨髓来源巨噬细胞的破骨分化,通过实时荧光定量PCR检测破骨特异性基因的相对表达水平;(4)蛋白印迹实验观察尿石素B对骨髓来源巨噬细胞P65、ERK信号通路的影响;(5)蛋白印迹实验检测尿石素B对骨髓来源巨噬细胞的破骨分化关键转录因子活化t细胞核因子1和c-Fos的影响。结果与结论:(1)50μmol/L及以下浓度的尿石素B对骨髓来源巨噬细胞的增殖无影响,能显著抑制骨髓来源巨噬细胞的破骨分化;(2)尿石素B主要在破骨形成前中期抑制骨髓来源巨噬细胞的破骨分化;(3)尿石素B可下调骨髓来源巨噬细胞中破骨特异性基因的相对表达水平;(4)50μmol/L的尿石素B抑制骨髓来源巨噬细胞的P65和ERK磷酸化水平,进而抑制破骨细胞形成;(5)50μmol/L的尿石素B抑制骨髓来源的巨噬细胞中破骨分化关键转录因子活化t细胞核因子1和c-Fos的表达;(6)提示尿石素B通过P65/ERK信号轴下调破骨关键转录因子活化t细胞核因子1、c-Fos的表达,抑制下游破骨特异性基因的表达,从而抑制骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化。

关键词：尿石素B P65 ERK 活化t细胞核因子1 c-Fos 骨髓来源巨噬细胞破骨细胞分化

骨碎补影响破骨细胞分化的程度与含药血清浓度有关

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2020年第29期24卷 4620-4625页

作者：许金松邓娜张潇濮阳市安阳地区医院骨一科河南省安阳市455000

背景:已有报道骨碎补总黄酮有防治骨质疏松症的效果,但其作用机制多集中于对成骨细胞的作用,而对破骨细胞分化的影响研究较少。目的:探讨骨碎补通过活化t细胞核因子1信号通路对破骨细胞分化的影响。方法:40只SD大鼠随机分为4组,分别以0,... 详细信息

背景:已有报道骨碎补总黄酮有防治骨质疏松症的效果,但其作用机制多集中于对成骨细胞的作用,而对破骨细胞分化的影响研究较少。目的:探讨骨碎补通过活化t细胞核因子1信号通路对破骨细胞分化的影响。方法:40只SD大鼠随机分为4组,分别以0,11.6,34.8,104.4 g/kg的骨碎补总黄酮灌胃,获得阴性对照血清及低、中、高浓度含药血清。另取5周龄大鼠分离获取骨髓巨噬细胞,采用CCK-8法检测不同含药血清对巨噬细胞活性的影响;取巨噬细胞分为低、中、高浓度组、阴性对照组、空白组,每孔5个复孔,分别加入低、中、高浓度含药血清、阴性对照血清培养液、正常培养液;所有培养液均用20μg/L巨噬细胞集落刺激因子、100μg/L核因子κB受体活化因子配体进行破骨细胞诱导分化。诱导分化7 d,抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞数、融合指数,实时荧光定量PCR、Western blot检测各组细胞c-Fos、Fra-1、Fra-2、活化t细胞核因子1、组织蛋白酶KmRNA和蛋白表达;诱导分化14 d,骨片吸收陷窝试验检测破骨细胞骨吸收陷窝数、陷窝面积占比。实验方案经濮阳市安阳地区医院动物实验伦理委员会批准,批准号为PYSAYDQ-2019096。结果与结论:①不同浓度骨碎补含药血清对巨噬细胞活性影响无明显变化;②诱导分化前巨噬细胞形态规则,诱导分化后行抗酒石酸酸性磷酸酶染色证实为破骨细胞;③与空白组、阴性对照组比较,低、中、高浓度组破骨细胞数、融合指数、骨吸收陷窝数、陷窝面积占比、c-Fos、Fra-1、Fra-2、活化t细胞核因子1、组织蛋白酶K mRNA和蛋白相对表达量均明显降低(P中浓度组>高浓度组,各浓度组间比较差异均有显著性意义(P活化t细胞核因子1信号通路抑制大鼠巨噬细胞向破骨细胞的分化,且分化抑制程度与骨碎补含药血清浓度有关。

关键词：骨碎补活化t细胞核因子1 破骨细胞分化抑制

蛇床子素对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响及其机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

北京中医药大学学报 2018年第11期41卷 950-958页

作者：王礼宁马勇郑苏阳潘娅岚涂鹏程孙杰郭杨南京中医药大学骨伤研究所骨伤修复与重建新技术实验室江苏210023 南京中医药大学附属医院骨伤科

目的探讨蛇床子素(OSt)对小鼠单核细胞RAW264. 7细胞系向破骨细胞分化的影响及相关机制。方法通过使用RAW264. 7细胞系体外诱导培养破骨细胞;将RAW264. 7细胞系分为阴性组、对照组及OSt组。以核因子κB受体活化因子配基(RANKL)诱导细胞... 详细信息

目的探讨蛇床子素(OSt)对小鼠单核细胞RAW264. 7细胞系向破骨细胞分化的影响及相关机制。方法通过使用RAW264. 7细胞系体外诱导培养破骨细胞;将RAW264. 7细胞系分为阴性组、对照组及OSt组。以核因子κB受体活化因子配基(RANKL)诱导细胞分化,OSt组以高、中、低浓度(100、10、1μmol/L)根据实验要求干预细胞系相应时间;采用CCK-8法筛选无细胞毒性的药物浓度组;通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tRAP)染色法测定阳性细胞数和融合指数;通过测定骨吸收板上溶解坑面积和培养液中的荧光强度评估OSt对骨吸收功能的影响;使用荧光素酶报告基因法观察OSt对RAW264. 7细胞系中活化t细胞核因子(NFAt)和核因子κB(NF-κB)表达的影响;应用q-PCR法检测OSt对RAW264. 7细胞系中相关破骨基因活化t细胞核因子1(NFAtc1)、组织蛋白酶K(CtSK)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、tRAP、干扰素β3(INtE-BEtAβ3)、酪氨酸激酶(c-Src)表达的影响;应用Western Blot技术检测OSt对RAW264. 7细胞系中NF-κB信号通路上相关蛋白膜p65、IκB、p-IκB、核p65表达的影响。结果通过CCK-8法筛选出1μmol/L和10μmol/L 2组药物浓度; OSt组中的tRAP阳性细胞数和融合指数较对照组明显减少(P t组的骨吸收相对面积和荧光强度较对照组均受到明显抑制(P t可以明显抑制转录因子NFAt和NF-κB的启动(P t可以抑制NFAtc1等破骨相关基因的表达,除了Integrin-BEtA3、c-Src外,2个浓度组组间比较差异均有统计学意义(P t可明显抑制细胞膜中p-IκB蛋白的表达(P 细胞核中p65的蛋白表达(P t可通过抑制NF-κB信号通路的表达而引起NFAtc1等相关转录因子的下调来抑制破骨细胞的分化。

关键词：蛇床子素破骨细胞活化t细胞核因子1 骨质疏松症分化核因子κB信号通路

蛇床子素/壳聚糖衍生物胶束对破骨细胞分化及其特异性分子表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 2020年第3期13卷 229-235页

作者：王礼宁郭杨马勇郑苏阳潘娅岚孙杰司誉豪涂鹏程徐桂华南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学慢性病中医护理干预实验室南京210029

目的观察蛇床子素(osthale,OSt)/壳聚糖衍生物胶束(osthole-loaded N-octyl-O-sulfonyl chitosan micelles,NSC-OSt)对破骨细胞分化及其特异性分子表达的影响,初步探讨其抗骨质疏松的分子机制。方法通过使用大鼠骨髓单核细胞体外建立破... 详细信息

目的观察蛇床子素(osthale,OSt)/壳聚糖衍生物胶束(osthole-loaded N-octyl-O-sulfonyl chitosan micelles,NSC-OSt)对破骨细胞分化及其特异性分子表达的影响,初步探讨其抗骨质疏松的分子机制。方法通过使用大鼠骨髓单核细胞体外建立破骨细胞诱导模型;将细胞分为空白组、对照组、OSt组、NSC-OSt组,以巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)和核因子κB受体活化因子配基(receptor activator of nuclear factor kappa-Βligand,RANKL)诱导细胞分化,药物组以相同的有效浓度干预细胞;采用CCK-8法观察NSC-OSt对细胞活性的影响;通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,tRAP)染色法测定阳性细胞数;制备骨磨片并将其与细胞共培养,通过甲苯胺蓝染色测定各组骨吸收陷窝面积;通过扫描电镜观察骨吸收陷窝的微观结构;使用荧光素酶报告基因法观察NSC-OSt对细胞中活化t细胞核因子(nuclear factor of activated t cells,NFAt)转录表达的影响;应用Western blot法检测NSC-OSt对细胞中NFAtc1等相关破骨特异分子蛋白表达的影响。结果CCK-8法发现OSt和NSC-OSt对骨髓前体细胞均没有细胞毒性;对照组、OSt组、NSC-OSt组tRAP染色阳性细胞数分别为148.8±12.5、107.6±9.7、75.0±7.4(个),OSt和NSC-OSt均可抑制破骨细胞的生成(Pt的抑制效果更明显(P细胞生成的骨陷窝吸收面积分别为:1344942±164150、824080±37484、597716±14659(μm^2/片),两药物组的骨吸收活性均受到明显抑制(Pt组的抑制效果更明显(Pt组和NSC-OSt组的荧光素酶报告基因表达量分别为29174±1540、9073±824、21661±1430、13434±879,两药物组均可明显抑制NFAt的转录表达,且NSC-OSt组的抑制效果更好;与对照组相比,药物组均可抑制破骨特异分子NFAtc1、Fos蛋白(cellular oncogene fos,c-Fos)、组织蛋白酶K(cathepsin K,CtSK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,tRAP)的蛋白表达(Pt组的效果更显著(Pt可以抑制破骨细胞的分化以及NFAtc1等相关破骨特异分子的表达,且其效果优于OSt。

关键词：蛇床子素/壳聚糖衍生物胶束骨吸收活化t细胞核因子1 骨质疏松症破骨细胞

中国汉族人群高血压脑出血患者NFAtC1基因rs754093多态性观察

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山东医药 2011年第2期51卷 7-9页

作者：肖健齐许晶李新颖康铁江邱丽莎吴安华王运杰齐齐哈尔市第一医院黑龙江齐齐哈尔161005 中国医科大学附属第一医院

目的观察中国汉族人群高血压脑出血患者活化t细胞核因子1(NFAtC1)基因rs754093的多态性。方法选择中国汉族人脑出血患者230例(观察组)和健康体检者233例(对照组),采用多聚酶链反应—限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测其血清... 详细信息

目的观察中国汉族人群高血压脑出血患者活化t细胞核因子1(NFAtC1)基因rs754093的多态性。方法选择中国汉族人脑出血患者230例(观察组)和健康体检者233例(对照组),采用多聚酶链反应—限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测其血清中NFAtC1基因rs754093的多态性。结果观察组基因型t/t、t/G、G/G及等位基因t、G的频率分别为34.1%、48.3%、17.4%、58.5%、41.5%,对照组分别为44.2%、44.6%、11.2%、66.5%、33.5%,两组比较,P均tt基因型者,携带GG+tG基因型者脑出血发病风险增加51.4%;相对于携带t等位基因,携带G等位基因脑出血发病风险增加41.1%。结论中国汉族人群高血压脑出血患者NFAtC1基因rs754093存在多态性,其中携带G/G基因型者易发生脑出血。

关键词：活化t细胞核因子1 脑出血单核苷酸多态性高血压病

基于多层螺旋Ct新指数LCI及血清学CML变化在糖尿病动脉钙化中的作用评价

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于多层螺旋CT新指数LCI及血清学CML变化在糖尿病动脉钙化中的作...

作者：耿跃江苏大学

学位级别：硕士

血管钙化是羟基磷灰石结晶、无定形钙等在多种细胞的介导下主动沉积在血管系统的复杂病理改变,可导致血管壁僵硬、血管狭窄度升高及顺应性下降等。糖尿病是血管钙化的高危因素之一;相比非糖尿病患者,糖尿病患者的血管钙化好发部位不同,... 详细信息

血管钙化是羟基磷灰石结晶、无定形钙等在多种细胞的介导下主动沉积在血管系统的复杂病理改变,可导致血管壁僵硬、血管狭窄度升高及顺应性下降等。糖尿病是血管钙化的高危因素之一;相比非糖尿病患者,糖尿病患者的血管钙化好发部位不同,起病更为隐匿,呈多发性且更为严重,显著增加了心血管事件及截肢等不良预后的发生。而晚期钙化的治疗手段有限:多数上市治疗药物如焦磷酸盐等已被发现有严重副反应而使用受限;介入旋磨及激光消蚀等手术治疗可造成冠脉穿孔及下游小血管的栓塞。鉴于以上血管钙化的临床意义及晚期治疗的瓶颈,我们迫切的需要为糖尿病性血管钙化建立更为合理的早期诊断体系,以便对其采取及时的临床干预。目前临床上现有的针对血管钙化的检测以影像学检测手段为主,包括平扫Ct、X线摄影、普通超声及血管内超声(intravenous ultrasound,IVUS)等。平扫Ct准确度较高,但仅应用于冠状动脉钙化的评估,未在外周大血管钙化的检测广泛使用;IVUS是钙化检测的金标准,但其为侵袭性检测,不适合人群普查;普通超声及X线片对血管钙化检查的部位有限,B超目前仅适用于浅表血管钙化的探测,对深部血管无能为力;使用X线片的钙化积分因其他部位缺乏类似脊椎骨的天然分段标志,仅应用于腹主动脉钙化的计算。以上检查种种原因的限制,导致了血管钙化的检出率低,且相关诊断标准尚未覆盖所有糖尿病血管钙化的多发部位,如膝以下的下肢动脉;另外,也无法对患者进行全身性血管钙化检测和全方位的评估,这是目前血管钙化检测的瓶颈。因此,我们期望能够开发新的钙化评估方法或生物学靶标,为糖尿病血管钙化提供早期预防、早期诊断及早期治疗的新思路。在本研究中,我们从影像学及血清免疫学两个方面对糖尿病患者的血管钙化评估方法进行了探讨。影像学方面,我们提出了一种基于螺旋Ct的下肢血管钙化评价指数(LCI)并在临床和病理学实验中证实了其准确性和有效性;血清免疫学方面,我们通过临床实验对一种或可用于糖尿病全身性初期血管钙化免疫诊断的血清成分,即Nε-羧甲基赖氨酸水平(Nε-carboxymethyl lysine,CML)的有效性进行了确认,并对其具体作用机制进行了深入研究。各部分内容概括如下:第一部分:基于多层螺旋Ct新钙化指数的构建及其在糖尿病足患者下肢动脉钙化中的作用评价目的:因现有的糖尿病下肢动脉钙化程度的评估方法存在一定缺陷,本研究期望构建一种新下肢动脉钙化指数(lower limb arterial calcification index,LCI),并观察其在下肢动脉钙化评估中的应用。方法:选取2016.1-2019.1在江苏大学附属医院住院治疗的糖尿病足(diabetic foot,DF)患者254例,依据Wagner诊断标准分为6组。尝试构建下肢动脉新钙化指数,参考Bollinger的血管分段方法,将膝以下的下肢血管(胫前动脉/胫后动脉/腓动脉)分成六个部分,参考已在临床广泛应用的Kaupplila的腹主动脉钙化指数(abdominal aortic calcification index,ACI)评分标准,为每个血管段进行评分;将所有血管段的得分相加计算LCI总得分。探究了患者DF等级以及随访中截肢事件发生与LCI的相关性;对DF等级5级患者的截肢部位血管进行病理学钙含量检测,探究LCI与血管钙含量的一致性。针对钙化指数对斑块内部钙化考虑不足的问题,研究血管狭窄度(vascular stenosis,VS)对钙含量及LCI之间的调节作用,以对LCI进行必要的补充。结果:我们成功构建了下肢动脉钙化指数的评价体系,其能够对糖尿病足患者下肢动脉钙化进行有效定量评估,并可以在一定程度上预测糖尿病足患者截肢的风险。在LCI有效性的验证上,临床试验结果表明,LCI得分随DF等级显著提高;终点事件为下肢或足部截肢的2年随访结果中,被截肢患者的平均LCI分数远高于其他患者;在钙含量病理实验中,截肢患者提供的下肢动脉中LCI和钙含量之间具有显著一致性(W=0.373,P<0.05)。VS是钙含量和LCI的有效调节因素,0.907为临界点。结论:LCI是评估下肢动脉钙化程度有效且易于操作的方法,具备一定程度的截肢风险预测作用。第二部分:糖尿病患者血清Nε-羧甲基赖氨酸水平与颈动脉钙化关系的临床研究目的:已有的钙化评估方法多为针对特定部位的影像学检查,但尚没有对早期全身钙化的评估方法。本研究以早期血管钙化的血清免疫学检查为目标,使用已在课题组前期研究中被证实具有强烈钙化促进作用的糖毒性代谢产物血清CML为标志物,暂选择糖尿病人群中发病率高且发病时间早可以较为准确反应DM患者钙化情况的颈动脉钙化,探究CML与1型和2型DM人群中不同程度钙化的相关性。方法:选取2016.1-2017.6在江苏大学附属医院就诊患者506例,其

关键词：糖尿病足血管钙化多层螺旋Ct 下肢动脉钙化指数糖尿病颈动脉钙化主要心脑血管事件超声 Nε-羧甲基赖氨酸钙化血管平滑肌细胞 Nε-羧甲基赖氨酸活化t细胞核因子1

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

超声波加速正畸牙移动的动物实验研究

超声波加速正畸牙移动的动物实验研究

作者：栾俐阳滨州医学院

学位级别：硕士

目的:本实验选用SD大鼠,尝试建立大鼠的正畸模型,初步探究超声波振动刺激对大鼠正畸牙移动的影响及分子机制。方法:选用100只SD大鼠,建立以中切牙为支抗,移动单侧第一磨牙的正畸模型,分为常规正畸组和超声波振动组。分别于加力第1、3、5... 详细信息

目的:本实验选用SD大鼠,尝试建立大鼠的正畸模型,初步探究超声波振动刺激对大鼠正畸牙移动的影响及分子机制。方法:选用100只SD大鼠,建立以中切牙为支抗,移动单侧第一磨牙的正畸模型,分为常规正畸组和超声波振动组。分别于加力第1、3、5、7、14天进行A组形态学检测:测量牙齿移动距离,即第一磨牙远中边缘嵴与第二磨牙近中边缘嵴之间的距离,HE染色观察第一磨牙周围组织的形态变化,tRAP(抗酒石酸磷酸酶)染色计数压力侧破骨细胞,B组进行分子生物学分析:Rt-PCR(Real-timePCR)检测大鼠第一磨牙牙周组织中破骨细胞相关因子tRAP、CtSK、JDP-2、NFACt-1及成骨相关因子BSP的表达情况。结果:(1)牙齿移动距离检测结果:牙周组织接受超声波振动刺激后,大鼠第一磨牙在第5、7、14天移动速率显著高于常规正畸组(PtRAP阳性的破骨细胞数在第5、7、14天时显著多于常规正畸组(PtimePCR结果显示CtSK在5、7、14天时超声波振动实验组与常规正畸组比较有统计学差异(PtRAP在14天时表达量出现峰值差异具有统计学意义(Pt-1在超声振动第3天时表达量达到最高(P细胞形成数量,增强成骨细胞活性,促进了牙槽骨组织的改建,此效应可能导致了大鼠正畸模型的牙齿移动的加速。

关键词：高强度脉冲超声波加速牙移动抗酒石酸酸性磷酸酶组织蛋白酶K 活化t细胞核因子1 Jun二聚化蛋白2 骨涎蛋白

不同浓度RANKL对破骨细胞中NFAtcl,c-Src和RANK基因表达的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

不同浓度RANKL对破骨细胞中NFATcl,c-Src和RANK基因表达的影响

作者：张永晟厦门大学

学位级别：硕士

目的：体外实验观察不同浓度核因子KB受体活化因子配体(RANKL)对大鼠破骨细胞活化t细胞核因子1(NFAtcl)、原癌基因c-Src、核因子KB受体活化因子(RANK)mRNA表达的影响;研究破骨细胞中活化t细胞核因子1、原癌基因c-src和核因子KB受体活化... 详细信息

目的：体外实验观察不同浓度核因子KB受体活化因子配体(RANKL)对大鼠破骨细胞活化t细胞核因子1(NFAtcl)、原癌基因c-Src、核因子KB受体活化因子(RANK)mRNA表达的影响;研究破骨细胞中活化t细胞核因子1、原癌基因c-src和核因子KB受体活化因子在骨质疏松中的发病过程中基因的表达是否与核因子KB受体活化因子配体的浓度存在相关性。方法：实验采用5周龄SD大鼠获取骨髓基质细胞(BMSC),加入集落刺激因子(M-CSF)及RANKL体外诱导培养破骨细胞,在实验过程中每组分别加入低、中、高(50ng/ml、75ng/ml、100ng/ml)3种浓度的RANKL及均加入M-CSF (25ng/ml),实验对照组加入RANKL(0ng/ml)及M-CSF(25ng/ml);培养7天后,采用实时荧光定量PCR法检测NFAtcl、c-Src、RANK mRNA的表达。结果：NFAtcl、c-Src、RANK基因表达与RANKL的浓度呈依赖性,与实验对照组M-CSF (25ng/ml)+RANKL (0ng/ml)组相比,中、高浓度的RANKL均促进了NFAtcl及c-Src mRNA (ptcl mRNA(p=0.013,ptcl,c-Src和RANK(ptc1,c-Src和RANK mRNA的表达并促进破骨细胞的分化、成熟,且表现出一定的浓度依赖性。RANKL作为OPG/RANK/RANKL信号传导通路中的因子,NFAtc1,c-Src和RANK作为其下游及调控因子,调控了破骨细胞的分化、成熟,在骨质疏松的发病机制中发挥着重要的作用。

关键词：骨质疏松活化t细胞核因子1 原癌基因c-Src 核因子κB受体活化因子核因子κB受体活化因子配体

粪肠球菌对大鼠实验性根尖周炎NFAtcl和CathepsinK的表达影响研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

粪肠球菌对大鼠实验性根尖周炎NFATcl和CathepsinK的表达影响研究

作者：毕峻溢大连医科大学

学位级别：硕士

目的:建立大鼠根尖周炎模型，研究粪肠球菌对活化t细胞核因子1(NFAtc1)以及组织蛋白酶K(Cathepsin K)的表达影响。方法:选取SD大鼠24只，右侧下颌第一磨牙牙合面行开髓术后，随机分为A、B两组，每组12只。A组开髓后，髓腔直接暴露;B组... 详细信息

目的:建立大鼠根尖周炎模型，研究粪肠球菌对活化t细胞核因子1(NFAtc1)以及组织蛋白酶K(Cathepsin K)的表达影响。方法:选取SD大鼠24只，右侧下颌第一磨牙牙合面行开髓术后，随机分为A、B两组，每组12只。A组开髓后，髓腔直接暴露;B组开髓后，髓腔内封入粪肠球菌，玻璃离子封闭髓腔。左侧下颌第一磨牙为正常对照组。分别于术后1周、2周、3周、4周四个时间点取3只鼠，进行多聚甲醛心内固定，取下颌骨组织，拍摄Micro-Ct，脱钙，制作冰冻切片，HE染色观察根尖区的病理特征，采用NFAtc1和Cathepsin K多克隆抗体进行免疫组织化学染色，酶组织化学染色方法对破骨细胞进行染色，检测NFAtc1和Cathepsin K的表达与分布。结果：1. Micro-CtA、B组术后1周，右侧下颌第一磨牙牙周膜增宽;术后2周，右侧下颌第一磨牙根尖区出现低密度影;随着时间的推移，至术后4周，牙根和根尖周牙槽骨明显破坏，形成根尖阴影。正常对照组仅见牙周膜轻微增宽，未见低密度影。2． HE染色A、B组术后1周，根尖周区域可见少量中性粒细胞浸润;术后2周，根管内的牙髓全部坏死，根尖周区域可见大量的中性粒细胞和巨噬细胞浸润;术后3周到4周，淋巴细胞浸润逐渐增多，在根尖周的牙槽骨区域出现Howship陷窝，正常对照组根尖周的牙槽骨未见异常。3．免疫组织化学染色右侧下颌第一磨牙根尖周牙槽骨骨吸收区域可见CathepsinK阳性细胞。1周到2周，CathepsinK的表达增加，达到高峰;2周到4周，CathepsinK的表达下降，正常对照组偶见CathepsinK阳性细胞。NFAtc1在根尖脓肿周围以及根尖渗出液中的炎症细胞上表达，术后1周到4周表达逐渐增加，正常对照组无NFAtc1阳性细胞。两种因子在B组的表达量明显高于A组，均高于正常对照组，差异具有统计学意义（P﹤0.05）。4．酶组织化学染色右侧下颌第一磨牙根尖牙槽骨骨吸收区域可见大量tRAP染色阳性的破骨细胞。术后1周到2周，破骨细胞的数量明显增加;术后3周到4周，破骨细胞的数量降低，B组高于A组，均高于正常对照组，差异具有统计学意义（P﹤0.05）。正常对照组根尖周区域的牙槽骨边缘偶见单个破骨细胞前体。结论：1.活化t细胞核因子1（NFAtc1）和组织蛋白酶K(CathepsinK)在实验性根尖周炎模型中高表达，提示NFAtc1和CathepsinK参与了根尖周炎的炎症反应和骨吸收过程。2.粪肠球菌在实验性根尖周炎模型当中，使活化t细胞核因子1（NFAtc1）和组织蛋白酶K(CathepsinK)的表达上调，提示粪肠球菌促进了破骨细胞的分化，加快了根尖周区域的骨破坏进程。

关键词：粪肠球菌根尖周炎活化t细胞核因子1 组织蛋白酶K