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海参肠乙酰胆碱酯酶亲和层析洗脱条件的优化

食品科学 2012年第8期33卷 6-10页

作者：杜英朱蓓薇吴海涛大连工业大学食品学院辽宁大连116034

以3-羧基苯基-乙基二甲基铵为配基,与溴化氰活化琼脂糖凝胶交联制备亲和层析柱,分离海参肠中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE),对其洗脱条件进行优化。结果显示:其适宜平衡体系为含0.3mol/L NaCl的PBS(0.05mol/L,pH7.4)缓冲溶液... 详细信息

以3-羧基苯基-乙基二甲基铵为配基,与溴化氰活化琼脂糖凝胶交联制备亲和层析柱,分离海参肠中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE),对其洗脱条件进行优化。结果显示:其适宜平衡体系为含0.3mol/L NaCl的PBS(0.05mol/L,pH7.4)缓冲溶液,适宜洗脱体系为含0.2mol/L四乙基碘化铵的PBS(0.05mol/L,pH7.4)缓冲溶液。此条件下,海参肠AChE可得到较好的吸附和分离,初步纯化后的AChE经Native-PAGE电泳分离出3条具有酶活性的条带,说明AChE在海参肠内可能以多种形式存在,呈现多态性。

关键词：海参乙酰胆碱酯酶亲和层析洗脱条件

硅胶吸附纯化含Pre S蛋白的重组乙肝表面抗原的最佳洗脱条件

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华西药学杂志 2004年第4期19卷 271-273页

作者：袁进金瓯蒋丽明谭昌耀成都生物制品研究所基因工程室四川成都610063

目的　确定重组乙肝表面抗原吸附于熔融硅胶后的最佳洗脱条件。方法　以表面抗原活性收率和纯度为考察指标 ,通过正交实验对影响表面抗原硅胶洗脱的主要因素 (pH值 ,盐浓度和表面活性剂浓度 )进行了研究。结果　pH值、盐浓度和表面活性... 详细信息

目的　确定重组乙肝表面抗原吸附于熔融硅胶后的最佳洗脱条件。方法　以表面抗原活性收率和纯度为考察指标 ,通过正交实验对影响表面抗原硅胶洗脱的主要因素 (pH值 ,盐浓度和表面活性剂浓度 )进行了研究。结果　pH值、盐浓度和表面活性剂浓度都对表面抗原收率有显著性影响 ,且pH值对表面抗原纯度有显著性影响。结论　用含 1mol·L-1氯化钠的0 .0 2 5mol·L-1碳酸钠缓冲液 (pH 10 )洗脱 ,表面抗原的收率和比活最优。

关键词：硅胶吸附含Pre S蛋白乙肝表面抗原洗脱条件正交实验

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微生物肥料中苏云金芽孢杆菌洗脱条件的优化

黑龙江科学 2016年第10期7卷 5-7页

作者：樊川安琦曹亚彬李艳波杨瑶黑龙江省科学院微生物研究所哈尔滨150010 哈尔滨学院哈尔滨150000

本研究以苏云金芽孢杆菌作为供试液,分别以草炭、褐炭、鸡粪作为载体,通过改变p H、时间、温度、离子强度、缓冲液等环境条件,分别测出苏云金芽孢杆菌的解析率,确定出最佳解析条件,从而提高菌体洗脱率和回收率。

关键词：苏云金芽孢杆菌肥料洗脱条件优化

人乳寡糖的高分辨质谱结构分析及液相色谱条件的比较

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分析化学 2022年第2期50卷 278-289页

作者：王海燕张曦美崔秀秀康鹏张艳张佳莹葛武鹏西北农林科技大学食品科学与工程学院西安百跃羊乳集团有限公司陕西省羊乳产品质量监督检验中心

人乳寡糖(Human milk oligosaccharides, HMOs)与婴幼儿生命初期的生长发育密切相关,揭示其组成及结构有助于阐明HMOs功能。本研究通过超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术,对19个HMOs(16个中性HMOs、 3个酸性HMOs)进行了结构解析,在寡... 详细信息

人乳寡糖(Human milk oligosaccharides, HMOs)与婴幼儿生命初期的生长发育密切相关,揭示其组成及结构有助于阐明HMOs功能。本研究通过超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术,对19个HMOs(16个中性HMOs、 3个酸性HMOs)进行了结构解析,在寡糖异构体裂解规律的基础上详细探讨了4组异构体的特征碎片离子,比较了3种超高效液相色谱条件下HMOs异构体分离效果的差异,为复杂HMOs异构体的结构解析及高效液相色谱条件的选择提供了科学依据。

关键词：人乳寡糖超高效液相色谱-高分辨质谱洗脱条件同分异构体结构解析

麦类作物体细胞基因组原位杂交(GISH)效果影响因素的分析

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实验生物学报 2005年第2期38卷 126-132页

作者：林小虎李兴锋王黎明陆文辉王洪刚山东农业大学农学院国家小麦改良中心泰安分中心

以八倍体小滨麦、八倍体小黑麦、八倍体小偃麦、小麦-中间偃麦草双体异附加系为实验材料对影响麦类作物体细胞GISH技术实验效果的因素进行分析,研究结果表明:细胞分裂相多、染色体分散良好、无杂质影响的高质量的染色体制片是取得理想... 详细信息

以八倍体小滨麦、八倍体小黑麦、八倍体小偃麦、小麦-中间偃麦草双体异附加系为实验材料对影响麦类作物体细胞GISH技术实验效果的因素进行分析,研究结果表明:细胞分裂相多、染色体分散良好、无杂质影响的高质量的染色体制片是取得理想实验效果的基础;探针DNA浓度与封阻DNA浓度的比例及杂交后洗脱条件的控制是取得理想实验效果的关键。此外,还对麦类作物体细胞基因组原位杂交实验中出现的染色体丢失、外源染色体无杂交信号、杂交信号的强弱、杂交信号过多(杂交背景重)或过少、噪音信号及杂交污点产生的原因进行了分析,并提出了相应的解决方法或注意事项。

关键词：麦类作物基因组原位杂交体细胞 DNA浓度八倍体小滨麦八倍体小黑麦八倍体小偃麦双体异附加系杂交信号理想实验中间偃麦草染色体制片染色体丢失外源染色体 GISH 实验材料细胞分裂研究结果杂质影响洗脱条件

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大孔吸附树脂分离富集土贝母总皂苷的研究

中国中药杂志 2005年第10期30卷 744-746页

作者：马挺军屠鹏飞吕飞杰北京大学药学院中国农业科学院北京100081

目的:优化大孔吸附树脂分离纯化土贝母总皂苷的工艺条件。方法:以土贝母总皂苷的吸附量和解吸率为指标,大范围筛选树脂,并通过单因素试验、正交试验及方差分析确定了土贝母总苷分离富集的优选操作条件。结果:NKA树脂具有较好的吸附性能... 详细信息

目的:优化大孔吸附树脂分离纯化土贝母总皂苷的工艺条件。方法:以土贝母总皂苷的吸附量和解吸率为指标,大范围筛选树脂,并通过单因素试验、正交试验及方差分析确定了土贝母总苷分离富集的优选操作条件。结果:NKA树脂具有较好的吸附性能和解吸效果;优选吸附条件为上样含生药量30mg·mL-1,树脂色谱柱的径高比1∶7,药材∶树脂为1∶4;吸附完全后,先以水洗脱,除去杂质,再以80%乙醇洗脱,可以得到纯度较好的土贝母总苷。结论:NKA树脂对土贝母总苷的吸附量大,解吸容易,确定的吸附与洗脱条件简单可行,所得产品的色泽好、纯度高,此工艺具有良好的产业化前景。

关键词：土贝母总皂苷大孔吸附树脂分离富集单因素试验工艺条件分离纯化操作条件方差分析正交试验吸附性能吸附条件洗脱条件吸附量 NKA 解吸率大范围总苷色谱柱产业化优选纯度

梯度洗脱反相高效液相色谱法测定拉呋替丁纯度及含量

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药物分析杂志 2005年第7期25卷 831-834页

作者：娄艳红李小青谢剑炜军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

目的:建立梯度洗脱反相高效液相色谱法测定拉呋替丁纯度及含量,并对其未知杂质进行研究。方法:采用梯度洗脱方法,色谱柱为大连依利特科学仪器有限公司Hypersil ODS C18柱(250 mm ×4.6 mm,5μm)。流动相A:0.01 mol.L-1磷酸二氢钾溶液,0... 详细信息

目的:建立梯度洗脱反相高效液相色谱法测定拉呋替丁纯度及含量,并对其未知杂质进行研究。方法:采用梯度洗脱方法,色谱柱为大连依利特科学仪器有限公司Hypersil ODS C18柱(250 mm ×4.6 mm,5μm)。流动相A:0.01 mol.L-1磷酸二氢钾溶液,0.1%三乙胺,用磷酸调节pH 5.0;流动相B:乙腈。梯度洗脱条件:0-12 min,A-B(80:20);12-20min,A-B(40 :60);20-25min,A-B(80:20)。检测波长:220 nm;流速:1.0 mL·min-1。结果:拉呋替丁在0.01-0.50 mg·mL-1范围内线性良好,回归方程为Y=57.72X-21.31(n=5),r=0.9999。结论:建立的液相色谱法可完全分离拉呋替丁、各中间体、副产物等,该方法准确、灵敏、简便,专属性好。经液相色谱、质谱等鉴定确证,本品主要未知杂质为二氢拉呋替丁。

关键词：反相高效液相色谱法拉呋替丁梯度洗脱含量纯度测定未知杂质磷酸二氢钾科学仪器 C18柱洗脱条件检测波长回归方程流动相色谱柱 ODS 三乙胺中间体副产物专属性

干血斑样本用于HIV抗体检测方法学优化与应用

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中国艾滋病性病 2018年第6期24卷 536-539页

作者：赫晓霞粟斌程焕义王月华马仲慧邢文革蒋岩中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室北京102206 首都医科大学附属北京佑安医院临床实验室北京100069

目的探讨用于干血斑样本中艾滋病病毒（HIV）抗体检测的最佳洗脱条件。方法选取并制备中值（24）与低值（26）的干血斑样本,利用HIV抗体诊断试剂盒（酶联免疫吸附试验法）,对不同洗脱温度、不同洗脱液组分、不同洗脱液体积、不同洗脱时... 详细信息

目的探讨用于干血斑样本中艾滋病病毒（HIV）抗体检测的最佳洗脱条件。方法选取并制备中值（24）与低值（26）的干血斑样本,利用HIV抗体诊断试剂盒（酶联免疫吸附试验法）,对不同洗脱温度、不同洗脱液组分、不同洗脱液体积、不同洗脱时间分别进行组合后,进行干血斑（DBS）样本洗脱液中抗体OD值测定分析,从而选出最适宜、最方便用于HIV抗体检测的DBS洗脱条件。结果室温与4℃条件下洗脱样本差异无统计学意义（P=0.979,P=0.704）;不同洗脱液体积对样本洗脱的影响差异无统计学意义（P=0.183）;洗脱液组分对低值（26）样本的洗脱效果有统计学意义（P=0.033）,其中以含0.5‰Tween20的PBS对样本洗脱的影响更为显著（P=0.02,P=0.004）;洗脱时间对中值（24）与低值（26）样本均有显著影响（P=0.00,P=0.00）,其中4小时和6小时为显著差异分界点。670份临床已知样本的检测应用中,试剂盒现成Cutoff值计算判定阳性样本时,存在2.63%的假阳性,无假阴性。结论用于DBS中HIV抗体最佳洗脱条件为：用300μL含有0.5‰Tween20的PBS在室温下（24±2℃）洗脱4～6小时。试剂盒Cutoff值不适用于DBS样本结果判定,需进一步研究设定用于该方法的Cutoff值。

关键词：艾滋病病毒抗体检测干血斑洗脱条件

二次回归正交旋转组合设计优化苦参生物碱薄层层析条件研究

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黑龙江畜牧兽医 2013年第5期 141-142,182页

作者：徐馨周庆民冯万宇黄健秦博侯美如徐宗香韩欢胜黑龙江省兽医科学研究所黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江省农垦科学院哈尔滨特产研究所哈尔滨150038

科学高效地从药用植物中分离、纯化出单体生物碱成分是提高实践应用的核心问题，而确定出生物碱单体定性、定量分析的薄层层析条件及柱层析洗脱条件则是解决这一核心问题的关键技术。二次回归正交旋转组合设计是一种具有正交、回归、均... 详细信息

科学高效地从药用植物中分离、纯化出单体生物碱成分是提高实践应用的核心问题，而确定出生物碱单体定性、定量分析的薄层层析条件及柱层析洗脱条件则是解决这一核心问题的关键技术。二次回归正交旋转组合设计是一种具有正交、回归、均匀和较高饱和程度的试验设计方法，

关键词：二次回归正交旋转组合设计苦参生物碱薄层层析设计优化药用植物洗脱条件定量分析设计方法