检索结果-南通市图书馆

食品工业科技 2019年第4期40卷 75-81页

作者：高兆建陈雪莲王先凤许祥李宝林焦魏芦宁尚业成徐州工程学院食品(生物)工程学院江苏徐州221018 江苏智荟生物科技有限公司江苏徐州221018 邳州市金大地肥料有限公司江苏徐州221018

从泡盛曲霉(Aspergillus awamori) xf发酵液中分离纯化普鲁兰酶(Pulxf)并研究其酶学性质。通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和疏水层析,纯化得到一种电泳纯的Pulxf。纯化倍数8.16倍,比活力为309.28 U/mg。SDS-PAGE检测得... 详细信息

从泡盛曲霉(Aspergillus awamori) xf发酵液中分离纯化普鲁兰酶(Pulxf)并研究其酶学性质。通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和疏水层析,纯化得到一种电泳纯的Pulxf。纯化倍数8.16倍,比活力为309.28 U/mg。SDS-PAGE检测得单条带,表明Pulxf为单亚基蛋白,分子量63.7 kDa。在50-80℃,pH4.5~8.0范围内,酶能保持高活性,最适反应温度60℃,最适pH5.0。在较广的pH范围内(pH3.0~8.0),28℃下,经过24 h酶活能保持80%以上活性。K_m值和V_(max)分别为0.92 mg/mL和11.90μmol/min。酶活测定及TLC分析显示Pulxf对普鲁兰多糖有强水解活性,终产物麦芽三糖;对支链淀粉和可溶性淀粉有较弱活性,对直链淀粉、α-环糊精、β-环糊精和糖原无活性。表明从泡盛曲霉xf分离的Pulxf属于Ⅰ型普鲁兰酶。Ca^(2+)、Zn^(2+)和Mg^(2+)能够促进酶的活性,其中Ca^(2+)激活作用最强。而Pulxf在5%浓度的SDS、CTAB、Tween 80和30%的乙醇中保持高稳定性。基于Pulxf在苛刻环境下的高稳定性及高活性,很有希望在淀粉加工、食品饮料等领域以及需要在高温、高酸环境下使用的生物技术工业中使用。

关键词：普鲁兰酶泡盛曲霉xf 分离纯化酶学性质

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