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泡球蚴冰冻保存后感染力的初步观察

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1992年第4期10卷 307-310页

作者：蒋次鹏兰州医学院包虫病研究室兰州730000

将泡球蚴保存于-10℃130d后,再移植至小鼠腹腔内,并分别于接种后第67d和225d剖检,均见虫周围有淋巴细胞浸润和纤维组织增生,有的形成淋巴性坏死、坏死腔、钙颗粒,示泡球蚴已丧失活力;而将泡球蚴保存于-30℃200d后,在接种后第157d剖检,... 详细信息

将泡球蚴保存于-10℃130d后,再移植至小鼠腹腔内,并分别于接种后第67d和225d剖检,均见虫周围有淋巴细胞浸润和纤维组织增生,有的形成淋巴性坏死、坏死腔、钙颗粒,示泡球蚴已丧失活力;而将泡球蚴保存于-30℃200d后,在接种后第157d剖检,可见囊壁角质层、生发膜清晰,囊内有多个原头节及其小钩结构、母囊泡、子囊泡和大小不等的钙颗粒等,表明其有活力和感染力。结果提示冰冻保存离体泡球蚴的活力与温度有关,-30℃比-10℃更有利于泡球蚴的存活。

关键词：泡球蚴多房棘球绦虫冰冻保存

泡球蚴蛋白对脂肪间充质干细胞迁移和分化的影响

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中国病原生物学杂志 2021年第3期16卷 282-286页

作者：马文梅毕晓娟杨宁柯颖李亮刘辉吕国栋孙立林仁勇新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室

目的探讨泡球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)蛋白对小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose Tissue-Derived Stromal Cells, ADSCs)迁移能力、向血管内皮细胞分化能力和细胞增殖能力的影响。方法从小鼠腹股沟脂肪组织中提取和培养ADSCs,采... 详细信息

目的探讨泡球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)蛋白对小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose Tissue-Derived Stromal Cells, ADSCs)迁移能力、向血管内皮细胞分化能力和细胞增殖能力的影响。方法从小鼠腹股沟脂肪组织中提取和培养ADSCs,采用P3代ADSCs,培养基添加5μg/ml Em蛋白处理作为实验组,常规培养基处理ADSCs作为阴性对照组,培养基添加10 ng/ml PDGF-BB处理ADSCs作为阳性对照组。通过Transwell试验、CCK8试验、血管形成试验分别确定Em蛋白对ADSCs迁移能力、增殖能力、向血管内皮细胞分化能力的影响。结果分离获得的C57BL/6小鼠ADSCs细胞具有向脂肪细胞(油红O染色)、骨细胞(茜素红)分化的能力。5μg/ml Em蛋白可提高ADSCs的迁移能力,实验组和阴性对照组迁移细胞数(279.33±34.20)个和(134.27±21.98)个,差异有统计学意义(P均0.05)。Em蛋白处理ADSCs 48h A450值为(0.87±0.16),对照组为(0.74±0.12),96 h A450值为(1.34±0.12),对照组为(1.33±0.19),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Em蛋白可显著提高ADSCs的迁移能力和向血管内皮细胞分化的能力,该研究为探索ADSCs移植修复泡球蚴感染所致的肝损伤提供了实验基础。

关键词：泡球蚴脂肪间充质干细胞迁移血管新生

泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA表达水平的研究

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中国免疫学杂志 2011年第5期27卷 395-399页

作者：庞楠楠丁剑冰赵慧王晶李博李玉娇姜涛马秀敏新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011 新疆医科大学附属中医医院乌鲁木齐830000

目的:研究泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17mRNA表达水平的变化特点,初步探讨Th17细胞与Th1/Th2在棘球蚴感染中的相互关系。方法:通过腹腔接种多房棘球绦虫的幼虫原头蚴混悬液制备泡球蚴感染小鼠模型,持续观察10个月... 详细信息

目的:研究泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17mRNA表达水平的变化特点,初步探讨Th17细胞与Th1/Th2在棘球蚴感染中的相互关系。方法:通过腹腔接种多房棘球绦虫的幼虫原头蚴混悬液制备泡球蚴感染小鼠模型,持续观察10个月,分别在感染2天、8天、1月、3月、6月和10月处死小鼠,收集肝脏组织。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组小鼠肝脏组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA的表达水平。结果:T-bet mRNA的表达水平在感染早期开始增高,1月时达高峰后又开始缓缓下降至感染前水平;GATA-3 mRNA的表达水平在感染1月时明显升高,随后一直保持较高的表达水平;ROR-γt mRNA的表达水平在感染早期开始增高,感染1月时达到高峰,随后缓慢下降。IL-17 mRNA表达水平自感染早期开始持续性增高,到感染3月时达高峰,之后又逐渐降低至感染前水平。各组小鼠肝组织ROR-γt mRNA表达水平与T-bet mRNA表达水平呈正相关(r=0.67),IL-17 mRNA表达水平与ROR-γt mRNA表达水平有相关性(r=0.35),P值均泡球蚴感染宿主早期,主要以Th1型和Th17型细胞免疫为主,感染中后期出现Th1向Th2转化,机体呈现出以Th2细胞为主的优势应答。

关键词：泡球蚴 IL-17 T-bet GATA-3 ROR-γt mRNA

泡球蚴感染小鼠肝脏α-SMA和Ⅰ型胶原的表达及其意义

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中国病原生物学杂志 2020年第11期15卷 1324-1327页

作者：谭雅超李亮李智德章宁尚琳琳王慧张传山林仁勇张爱莲新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室新疆乌鲁木齐830046 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室

目的探讨α-SMA和Ⅰ型胶原在不同剂量泡球蚴感染C57BL/6小鼠肝脏中的表达及其意义。方法采用门静脉注射法建立泡球蚴感染C57BL/6小鼠模型,分别设假手术(生理盐水)组、低剂量泡球蚴感染组(250个原头蚴)和高剂量泡球蚴感染组(1000个原头蚴... 详细信息

目的探讨α-SMA和Ⅰ型胶原在不同剂量泡球蚴感染C57BL/6小鼠肝脏中的表达及其意义。方法采用门静脉注射法建立泡球蚴感染C57BL/6小鼠模型,分别设假手术(生理盐水)组、低剂量泡球蚴感染组(250个原头蚴)和高剂量泡球蚴感染组(1000个原头蚴),16周后采集小鼠肝脏标本,HE和天狼猩红染色鉴定肝脏纤维化程度,免疫组化法检测ɑ-SMA和Ⅰ型胶原的表达。结果HE染色显示高剂量泡球蚴感染组小鼠肝脏以成囊病灶为主要病理表现,低剂量泡球蚴感染组小鼠肝脏以修复病灶为主;天狼猩红染色显示高剂量泡球蚴感染组小鼠肝脏纤维化阳性面积比值为(32.63±9.24)%,低剂量泡球蚴感染组为(3.48±0.67)%,和假手术组为(0.50±0.17)%,差异有统计学意义(P泡球蚴感染组小鼠肝脏中阳性表达面积比值为(10.68±1.18)%,低剂量泡球蚴感染组(2.38±0.35)%,假手术组为(0.36±0.09)%,差异有统计学意义(P泡球蚴感染组小鼠肝脏中阳性表达面积比值为(7.93±0.78)%,低剂量泡球蚴感染组为(2.38±0.35)%,假手术组为(0.26±0.08)%,差异有统计学意义(P泡球蚴感染剂量的增加和小鼠肝脏纤维化程度的加重呈正相关。

关键词：泡球蚴 α-SMA Ⅰ型胶原纤维化

复频高能聚焦超声治疗小鼠泡球蚴病的实验研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第5期29卷 353-357页

作者：叶华王炜景涛韩俭包根书范临兰梁晓萍鲁俊兰州大学病原生物学研究所兰州730000 兰州大学生物医学工程研究所兰州730000 兰州大学基础医学院。兰州730000

目的研究复频高能聚焦超声治疗昆明小鼠皮下泡球蚴病灶的效果。方法将皮下接种泡球蚴的昆明小鼠随机分为3组,每组10只,分别用不同强度的复频聚焦超声照射小鼠的泡球蚴病灶。对照组(A组)未照射,其他实验组均一次性照射5 min。其中小功率... 详细信息

目的研究复频高能聚焦超声治疗昆明小鼠皮下泡球蚴病灶的效果。方法将皮下接种泡球蚴的昆明小鼠随机分为3组,每组10只,分别用不同强度的复频聚焦超声照射小鼠的泡球蚴病灶。对照组(A组)未照射,其他实验组均一次性照射5 min。其中小功率联合照射组(B组)的3个换能器的照射功率为4 W+4 W+5 W,大功率联合照射组(C组)换能器的照射功率为10 W+11 W+10 W。治疗后用透射电镜观察泡球蚴组织的形态结构变化。用美兰染色法观察原头节存活率。用激光共聚焦显微镜观察泡球蚴组织中的线粒体含量。用考马斯亮蓝染色法检测泡球蚴的总蛋白含量。用琥珀酸脱氢酶试剂盒检测泡球蚴的琥珀酸脱氢酶活性。结果复频聚焦超声照射后,透射电镜观察显示,B组和C组泡球蚴生发层细胞减少,线粒体肿胀破裂,内质网扩张,核膜不清,微绒毛变短或消失,且C组较B组损伤更严重。原头节存活率,B组(70.50%)和C组(59.83%)与A组(82.33%)相比,差异有统计学意义(P0.05)。线粒体含量,B组(105.46 a.u./个)和C组(70.90 a.u./个)较A组(133.45 a.u./个)均下降,且C组与A、B组相比,差异均有统计学意义(P0.05)。结论复频高能聚焦超声可对小鼠皮下泡球蚴病灶造成损伤,对其有一定治疗效果。

关键词：复频聚焦超声泡球蚴透射电镜激光共聚焦显微镜琥珀酸脱氢酶

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泡球蚴感染小鼠所致肝损伤基因表达谱的变化

中华实验外科杂志 2010年第2期27卷 189-191页

作者：谢文娟吕国栋李瑶张传山温浩林仁勇新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046 新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室

目的观察泡球蚴感染小鼠肝脏基因表达谱的变化.方法采用开腹直视下肝左叶注射泡球蚴混悬液构建小鼠肝泡型包虫病动物模型.运用包含25000个小鼠基因的36 K小鼠全基因组寡核苷酸芯片,检测感染8周后小鼠肝脏的基因表达.荧光定量逆转录.... 详细信息

目的观察泡球蚴感染小鼠肝脏基因表达谱的变化.方法采用开腹直视下肝左叶注射泡球蚴混悬液构建小鼠肝泡型包虫病动物模型.运用包含25000个小鼠基因的36 K小鼠全基因组寡核苷酸芯片,检测感染8周后小鼠肝脏的基因表达.荧光定量逆转录.聚合酶链反应（RT-PCR）法验证芯片结果 .结果小鼠肝脏受泡球蚴侵染8周后,共有108条基因表达发生改变,功能聚类分为新陈代谢、信号转导、细胞生长、转录调节、细胞骨架、凋亡、免疫应答及运输等11类.荧光定量RT-PCR验证正确.结论泡球蚴感染可以导致小鼠肝脏基因表达谱发生的改变,涉及多个基因表达调控途径.

关键词：肝脏泡球蚴基因芯片

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泡球蚴长期保存后生物活性的研究

中国人兽共患病学报 2007年第6期23卷 540-543页

作者：胡文洁景涛张睿罗益民蒲秀瑛王琪兰州大学基础医学院病原生物学研究所

目的继发性泡球蚴经液氮冻存后传代健康小鼠,观察其体内泡球蚴的生长情况并判定其生物活性,以探讨泡球蚴保种传代的新方法。方法将继发性感染泡球蚴的小鼠,液氮冻存7d后,常规复苏剖取包囊接种健康小鼠,生长两个月后颈椎脱臼处死,剖检并... 详细信息

目的继发性泡球蚴经液氮冻存后传代健康小鼠,观察其体内泡球蚴的生长情况并判定其生物活性,以探讨泡球蚴保种传代的新方法。方法将继发性感染泡球蚴的小鼠,液氮冻存7d后,常规复苏剖取包囊接种健康小鼠,生长两个月后颈椎脱臼处死,剖检并与常规接种方法相比较,从以下方面评价冻存效果:(1)大体观察及测量包囊湿重;(2)普通光学显微镜及透射电子显微镜观察组织学结构及超微结构;(3)检测包囊囊液中总蛋白含量、血清中特异性免疫球蛋白活动状态等免疫学指标;(4)检测血清碱性磷酸酶及囊液中钙离子含量等生化指标。结果液氮低温冻存后泡球蚴所接种试验组小鼠与常规接种组小鼠体内泡球蚴在包囊湿重、包囊组织结构、囊液蛋白及钙离子含量、血清碱性磷酸酶及特异性免疫球蛋白活动状态等方面均无显著差异(P>0.05)。结论液氮冻存后泡球蚴仍具有感染小鼠的能力,且接种后所生长泡球蚴组织与常规接种泡球蚴组织生物活性无显著差异。液氮冻存可以长期保存泡球蚴组织的活性。

关键词：泡球蚴长期保存液氮生物活性

泡球蚴感染中自噬相关蛋白对巨噬细胞极化的影响

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中国病原生物学杂志 2021年第6期16卷 634-638页

作者：蔡璇琳李斌古力米热·买买提吐尔逊周璇吕洁麦迪乃姆·艾比布拉赵慧单骄宇齐新伟马秀敏新疆医科大学附属肿瘤医院检验科省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院新疆医科大学第一附属医院

目的通过对感染泡球蚴小鼠肝脏的自噬相关蛋白以及巨噬细胞不同分型的检测,探讨在泡球蚴感染过程中自噬对巨噬细胞极化的影响及可能机制。方法取雌性BALB/c小鼠16只,随机分为实验组与对照组。实验组建立泡球蚴感染小鼠模型,于感染90天处... 详细信息

目的通过对感染泡球蚴小鼠肝脏的自噬相关蛋白以及巨噬细胞不同分型的检测,探讨在泡球蚴感染过程中自噬对巨噬细胞极化的影响及可能机制。方法取雌性BALB/c小鼠16只,随机分为实验组与对照组。实验组建立泡球蚴感染小鼠模型,于感染90天处死,通过HE染色观察小鼠肝脏的病理学变化,利用免疫组化等技术检测肝脏中自噬相关蛋白的表达,利用免疫荧光激光共聚焦法进行肝脏组织巨噬细胞与自噬相关蛋白共定位,采用流式细胞术检测肝脏巨噬细胞M1、M2表达水平。结果感染90天时,实验组小鼠肝脏自噬相关蛋白LC3、p62表达均增高,相对表达量分别为2.08±0.3和1.85±0.2,与对照组比较差异均有统计学意义(F值分别为260.114和434.116,均P泡球蚴感染小鼠肝脏自噬相关蛋白高表达,促进巨噬细胞以M1型极化,抑制M2型极化,以减轻炎症反应,帮助机体清除病原体。

关键词：泡球蚴自噬相关蛋白巨噬细胞极化

泡球蚴感染中期小鼠肝脏中miR-100/125b/126/122的表达变化

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中国病原生物学杂志 2013年第5期8卷 417-422页

作者：叶建蔚苗娜刘辉吕国栋刘莲王云海新疆医科大学临床医学研究院新疆重大疾病省部共建国家重点实验室培育基地新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054 乌鲁木齐市第一人民医院心胸外科新疆乌鲁木齐830011

目的观察小鼠泡球蚴感染中期(3月)肝内miR-100、miR-125b、miR-126和miR-122的表达并探讨其意义。方法肉眼直视下穿刺小鼠肝脏,注射0.1ml泡球蚴组织匀浆液,建立泡球蚴感染小鼠模型。3个月后处死小鼠,采集肝脏标本,提取肝脏总RNA,采用RT-... 详细信息

目的观察小鼠泡球蚴感染中期(3月)肝内miR-100、miR-125b、miR-126和miR-122的表达并探讨其意义。方法肉眼直视下穿刺小鼠肝脏,注射0.1ml泡球蚴组织匀浆液,建立泡球蚴感染小鼠模型。3个月后处死小鼠,采集肝脏标本,提取肝脏总RNA,采用RT-qPCR法检测miR-100、miR-125b、miR-126和miR-122的相对表达量,预测并初步分析差异表达miRNA的靶基因。结果实验组小鼠在感染3月肝内miR-122相对表达量为6.335±1.815,是对照组的2.41倍(P0.05)。预测hfe是miR-122的直接靶基因,参与肝脏铁离子代谢的调节。结论小鼠泡球蚴感染中期肝脏miR-122表达上调,推测其通过下调hfe等基因的表达影响肝脏铁离子和脂类代谢,造成肝损伤。

关键词： microRNA 泡球蚴肝损伤 RT-qPCR