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肥大细胞在平滑肌细胞源性泡沫细胞形成中的作用

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免疫学杂志 2009年第2期25卷 130-133页

作者：甘露朱东兴黄明元杨永宗南方医科大学公共卫生与热带医学学院湖南师范大学生命科学院广州市海珠区疾病预防控制中心南华大学心血管病研究所

目的研究肥大细胞(或肥大细胞裂解上清液)、平滑肌细胞与氧化低密度脂蛋白(oxLDL)共孵育时,肥大细胞对平滑肌细胞源性泡沫细胞形成的影响。方法用oxLDL处理大鼠腹腔肥大细胞后,采用荧光分光光度仪检测组胺释放率,通过倒置显微镜、甲苯... 详细信息

目的研究肥大细胞(或肥大细胞裂解上清液)、平滑肌细胞与氧化低密度脂蛋白(oxLDL)共孵育时,肥大细胞对平滑肌细胞源性泡沫细胞形成的影响。方法用oxLDL处理大鼠腹腔肥大细胞后,采用荧光分光光度仪检测组胺释放率,通过倒置显微镜、甲苯胺蓝染色、透射电镜观察肥大细胞脱颗粒状态。将肥大细胞(或肥大细胞裂解上清液)、平滑肌细胞与60mg/LoxLDL共育48h,以油红O染色观测细胞内中性脂质,高效液相色谱法检测细胞内胆固醇和胆固醇酯含量。结果肥大细胞被oxLDL激活脱颗粒,肥大细胞脱颗粒度与oxLDL呈剂量依赖性关系,以60mg/LoxLDL处理肥大细胞时,肥大细胞脱颗粒度达71.70%±3.02%;甲苯胺蓝染色和透射电镜均显示,oxLDL处理后肥大细胞明显脱颗粒。在60mg/LoxLDL存在时,以肥大细胞(或肥大细胞裂解上清液)处理平滑肌细胞48h后,油红O染色显示,处理组胞浆内脂滴明显多于未处理组;高效液相色谱分析结果显示,肥大细胞裂解上清液处理组细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量明显高于未处理组,总胆固醇增高了0.57倍,胆固醇酯增高了0.83倍。结论oxLDL以剂量依赖性方式诱导肥大细胞脱颗粒;肥大细胞脱颗粒后促进oxLDL诱导的平滑肌细胞源性泡沫细胞形成。

关键词：动脉粥样硬化肥大细胞平滑肌细胞泡沫细胞 oxLDL

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人单核源性泡沫细胞疾病模型的建立

中国老年学杂志 2008年第12期28卷 1094-1096页

作者：吴鹏刘映峰梁东辉陈允钦缪绯刘永源南方医科大学附属珠江医院心血管内科广东广州510282 南方医科大学附属珠江医院中医科广东广州510282 复旦大学附属中山医院上海市心血管病研究所

目的建立人单核源性泡沫细胞的疾病模型,为动脉粥样硬化(AS)的发生发展机制及其防治研究提供新途径。方法采用密度梯度离心法分离冠心病患者外周血单核细胞,以80nmol/L佛波酯(PMA)诱导48h使之转化为巨噬细胞,然后与80mg/L氧化低密度脂蛋... 详细信息

目的建立人单核源性泡沫细胞的疾病模型,为动脉粥样硬化(AS)的发生发展机制及其防治研究提供新途径。方法采用密度梯度离心法分离冠心病患者外周血单核细胞,以80nmol/L佛波酯(PMA)诱导48h使之转化为巨噬细胞,然后与80mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)共孵育48h,使之转化为泡沫细胞。结果经PMA诱导后,光镜下观察发现单核细胞已转化为形态典型的巨噬细胞。与ox-LDL共孵育48h后,油红O染色和透射电镜观察发现细胞内出现了大量的红染颗粒或脂质空泡。高效液相色谱检测发现细胞内胆固醇(TC)明显增加,其中胆固醇酯(CE)含量大于TC的60%,符合泡沫细胞的定义。结论从离体细胞培养方面探寻并建立了人单核源性泡沫细胞的疾病模型,该模型的病生特性与人类AS疾病接近,具有制备方法简易、细胞材料来源广等优点。

关键词：单核细胞巨噬细胞泡沫细胞动脉粥样硬化模型

通脉降浊煎剂含药血清对泡沫细胞胆固醇流出率的影响

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中国中西医结合杂志 2018年第9期38卷 1112-1117页

作者：田苗王凤荣张冰王帅刘英楠辽宁中医药大学附属医院心血管内科沈阳110032 辽宁中医药大学研究生院沈阳110032 辽宁中医药大学附属医院医务处沈阳110032 北京毒物药物研究所北京100850 辽宁中医药大学附属医院中医住院医师规范化培训基地沈阳110032

目的研究通脉降浊煎剂含药血清(TDMS)对泡沫细胞胆固醇流出率的影响及可能机制。方法采用50mg/L ox-LDL诱导巨噬细胞48h,建立巨噬细胞源泡沫细胞模型,添加TDMS,将细胞分为对照组(正常巨噬细胞),ox-LDL组(50mg/L ox-LDL),β-环糊精(β-CD... 详细信息

目的研究通脉降浊煎剂含药血清(TDMS)对泡沫细胞胆固醇流出率的影响及可能机制。方法采用50mg/L ox-LDL诱导巨噬细胞48h,建立巨噬细胞源泡沫细胞模型,添加TDMS,将细胞分为对照组(正常巨噬细胞),ox-LDL组(50mg/L ox-LDL),β-环糊精(β-CD)组(50mg/L ox-LDL+10mmol/Lβ-CD),正常血清(CS)组(50mg/L ox-LDL+等体积正常血清),TDMS组(50mg/L oxLDL+5%TDMS)。检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇含量和细胞胆固醇流出率;采用Western blot方法检测细胞内三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达;Real-time PCR方法检测细胞内ABCA1、miR-33a、miR-33bmRNA表达。结果与对照组比较,ox-LDL组细胞内总胆固醇、游离胆固醇含量和胆固醇流出率均增加(P细胞内总胆固醇和游离胆固醇含量均下降,胆固醇流出率增大(P细胞内miR-33a和miR-33bmRNA表达水平均降低(P泡沫细胞内胆固醇含量。

关键词：通脉降浊煎剂含药血清泡沫细胞胆固醇三磷酸腺苷结合盒转运体A1 miR-33a/b基因

SIRT1激动剂通过降低ACAT1表达抑制平滑肌泡沫细胞形成

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第三军医大学学报 2017年第9期39卷 846-851页

作者：王旭陈雪孙梦姣张明杰郭露朱洁李敬诚张莉莉第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科重庆400042 成都军区总医院神经内科成都610083

目的探讨沉默信息调节因子1(silent mating type information regulation 2 homolog-1,SIRT1)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)泡沫化的作用和相关的分子机制。方法用组织贴块法体外培养原代VSMC,用80μg/mL ox-LDL刺激VSMC诱导泡沫细胞形成。检测SIRT1在ox-LDL刺激不同时间(24、48、72 h)的表达变化。SIRT1的活性调控分别应用SIRT1激动剂(SRT1720,SRT,1μmol/L)和抑制剂(nicotinamide,Nic,100μmol/L)进行干预。干预24 h后采用Western blot检测VSMC过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(A-cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)的蛋白表达,干预48 h后采用油红O染色检测细胞内脂质沉积和泡沫细胞形成情况。应用PPARγ激动剂(Rosiglitazone,RSG,50μmol/L)和抑制剂(GW9662,10μmol/L)调控PPARγ的表达,Western blot检测VSMC中ACAT1的表达。结果 1ox-LDL诱导的VSMC泡沫细胞中,SIRT1蛋白表达在48 h降低约47%(P泡沫细胞形成,而Nic可逆转SRT的抑制作用;2ox-LDL诱导的VSMC泡沫细胞中ACAT1的表达显著增加[(2.77±0.70),P泡沫细胞中PPARγ的表达减少[(0.73±0.12),P泡沫样变。

关键词：泡沫细胞血管平滑肌细胞沉默信息调节因子1 酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1 氧化型低密度脂蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ

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西红花酸对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响

中国中药杂志 2011年第10期36卷 1374-1377页

作者：邓远雄钱之玉何丽华陈玉霜陈蓉杨昌华湖南师范大学医学院湖南长沙410013 中国药科大学药理教研室江苏南京210009

目的:研究西红花酸对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响。方法:分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,与氧化性低密度脂蛋白温孵培养建立泡沫细胞模型。采用高效液相法测定细胞内胆固醇的含量,观察西红花酸对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响。结果:... 详细信息

目的:研究西红花酸对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响。方法:分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,与氧化性低密度脂蛋白温孵培养建立泡沫细胞模型。采用高效液相法测定细胞内胆固醇的含量,观察西红花酸对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响。结果:小鼠腹腔巨噬细胞与20 mg.L-1氧化型低密度脂蛋白作用72 h后,细胞内胆固醇酯占总胆固醇的65.97%,形成泡沫细胞。加入不同浓度的西红花酸后,西红花酸能剂量依赖性地抑制氧化型低密度脂蛋白所致的巨噬细胞胆固醇酯的堆积(P细胞源性泡沫细胞的形成,这提示西红花酸能减少巨噬细胞内胆固醇酯的堆积可能是西红花酸抗动脉粥样硬化的作用机制之一。

关键词：西红花酸泡沫细胞巨噬细胞动脉粥样硬化

罗格列酮对RAW264.7细胞源性泡沫细胞炎症反应及SOCS1和SOCS3表达的影响

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中国病理生理杂志 2013年第2期29卷 261-265页

作者：李飞袁勇董吁钢董剑廷冯力邓志华中山市人民医院心血管内科广东中山528400 中山大学附属第一医院心血管内科广东广州510080

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)配体罗格列酮是否能够调节泡沫细胞促炎/抗炎反应以及细胞因子信号抑制物1(SOCS1)和细胞因子信号抑制物3(SOCS3)的表达。方法:采用ELISA法测定泡沫细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、... 详细信息

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)配体罗格列酮是否能够调节泡沫细胞促炎/抗炎反应以及细胞因子信号抑制物1(SOCS1)和细胞因子信号抑制物3(SOCS3)的表达。方法:采用ELISA法测定泡沫细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-10的水平,并计算TNF-α/IL-10和IL-6/IL-10的比值。采用RT-PCR及Western blotting技术分别观察RAW 264.7细胞源性泡沫细胞SOCS1和SOCS3 mR-NA及蛋白的表达。结果:RAW 264.7细胞源性泡沫细胞组细胞培养液中TNF-α、IL-6和IL-10的水平以及TNF-α/IL-10和IL-6/IL-10的比值均明显高于对照组(control)组。而罗格列酮加入泡沫细胞培养液24 h后,TNF-α、IL-6和IL-10的浓度以及TNF-α/IL-10和IL-6/IL-10的比值均明显低于泡沫细胞组。Control组和泡沫细胞组只有少量SOCS1和SOCS3 mRNA及蛋白的表达,罗格列酮作用于泡沫细胞后SOCS1和SOCS3 mRNA及蛋白的表达均明显高于control组和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组。结论:罗格列酮上调泡沫细胞SOCS1和SOCS3的表达,抑制泡沫细胞分泌TNF-α、IL-6和IL-10,调节了泡沫细胞促炎/抗炎反应。

关键词：动脉硬化炎症细胞因子类细胞因子信号抑制物泡沫细胞

格列本脲对平滑肌细胞及肌源性泡沫细胞内ACAT转录水平的影响

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中国医院药学杂志 2006年第5期26卷 510-512页

作者：成蓓狄鸣雷健戴康马志强余其振王毅华中科技大学同济医学院附属协和医院湖北武汉430022 武汉市第一医院湖北武汉430033 美国科罗拉多康复科学中心麻醉系美国科罗拉多625014 解放军第161医院湖北武汉430020 上海交通大学第一附属人民医院上海200080

目的:研究格列本脲(glibenclamide,优降糖)对酰基辅酶A[胆固醇酰基转移酶(ACAT)]mRNA水平的影响,探讨其对ACAT酶的调节水平。方法:在小鼠主动脉平滑肌细胞及肌源性泡沫细胞分别加入格列本脲,孵育24h,用半定量RT-PCR检测ACAT酶mRNA表达... 详细信息

目的:研究格列本脲(glibenclamide,优降糖)对酰基辅酶A[胆固醇酰基转移酶(ACAT)]mRNA水平的影响,探讨其对ACAT酶的调节水平。方法:在小鼠主动脉平滑肌细胞及肌源性泡沫细胞分别加入格列本脲,孵育24h,用半定量RT-PCR检测ACAT酶mRNA表达。结果:(1)平滑肌细胞转变为泡沫细胞后,ACATmRNA的表达均增加。(2)格列本脲抑制平滑肌源性泡沫细胞中ACAT酶的mRNA的表达。结论:格列本脲在转录水平抑制ACATmRNA的表达,抑制平滑肌细胞向泡沫细胞的转化,可作为防止动脉粥样硬化的有效药物。

关键词：胆固醇酰基转移酶平滑肌细胞泡沫细胞格列本脲动脉粥样硬化

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单核细胞源性泡沫细胞TREM-1的表达

中国老年学杂志 2010年第9期30卷 1247-1249页

作者：王宇石刘心刚吉林大学第一医院吉林长春130021

目的探讨髓系细胞触发受体-1(TREM-1)在氧化型低密度脂蛋白胆固醇(ox-LDL)诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞中的表达情况。方法先后用PMA、ox-LDL诱导人U937细胞,使其转化为泡沫细胞。用RT-PCR法及Western印迹法检测PMA诱导组、低密度脂蛋白(... 详细信息

目的探讨髓系细胞触发受体-1(TREM-1)在氧化型低密度脂蛋白胆固醇(ox-LDL)诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞中的表达情况。方法先后用PMA、ox-LDL诱导人U937细胞,使其转化为泡沫细胞。用RT-PCR法及Western印迹法检测PMA诱导组、低密度脂蛋白(LDL)组和ox-LDL组细胞中TREM-1 mRNA及蛋白的表达。结果与PMA诱导组、PMA+LDL组细胞比较,PMA+ox-LDL组细胞TREM-1 mRNA及蛋白表达水平均明显增高(P泡沫细胞的形成,与动脉粥样硬化(AS)斑块的发生发展密切相关,可能成为AS治疗的一个新的靶点或监测AS进展的一项新指标。

关键词：泡沫细胞髓系细胞触发受体-1 动脉粥样硬化

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第三军医大学学报 2012年第22期34卷 2288-2291页

作者：蒙颖徐芳王志禄李万玲贾军正郭文芬谢宛霞胡海英胡旭堂兰州大学第一临床医学院心内科兰州730000 兰州大学第一医院心内科兰州730000

目的观察罗格列酮对RAW264.7巨噬源性泡沫细胞形成中胆固醇含量及酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶-1(acyl coenzyme A cholesterol acyl transfer enzyme 1,ACAT-1)、三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A-1(ATP combination box oftransporter 1,ABCA-1)表达的影响,探讨罗格列酮对泡沫细胞形成的影响及可能的作用机制。方法在DMEM高糖培养基中培养RAW264.7巨噬细胞,按完全随机分组方法分为:①空白对照组(常规培养基培养巨噬细胞);②氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)组(用终浓度为30 mg/L的oxLDL孵育48 h);③oxLDL+罗格列酮组(分别用终浓度5、10、20μmol/L的罗格列酮+30 mg/L oxLDL共同孵育48 h)(n=10)。采用油红O染色观察泡沫细胞,胆固醇检测试剂盒测定各组细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)和游离胆固醇(free cholesterol,FC)的含量,Western blot法检测各组细胞ACAT-1和ABCA1的表达水平。结果 oxLDL组中大量泡沫细胞的胞质被油红O染色,oxLDL+罗格列酮组泡沫细胞胞质染色明显浅于oxLDL组的细胞;与oxLDL组相比,oxLDL+罗格列酮组TC及FC显著降低(P泡沫细胞形成,从而发挥其抗动脉粥样硬化的作用。

关键词：罗格列酮泡沫细胞胆固醇动脉粥样硬化