检索结果-南通市图书馆

中国免疫学杂志 2022年第3期38卷 270-274页

作者：于红红陈茜李芳罗瑞熙王腊赵立凤俞琦许滔田维毅(指导) 贵州中医药大学贵阳550025

目的:探究四妙勇安汤含药血清对ox-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞活化与自噬的影响,并探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:灌胃给予SD大鼠不同剂量四妙勇安水煎液制备含药血清。油红O染色观察泡沫化巨噬细胞脂滴变化;CCK-8法观察含药... 详细信息

目的:探究四妙勇安汤含药血清对ox-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞活化与自噬的影响,并探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:灌胃给予SD大鼠不同剂量四妙勇安水煎液制备含药血清。油红O染色观察泡沫化巨噬细胞脂滴变化;CCK-8法观察含药血清对泡沫巨噬细胞活化的影响;ELISA检测炎症性细胞因子IL-6、IL-10和IFN-γ表达;透射电镜观察细胞自噬水平;免疫荧光标记法检测LC3Ⅱ表达;RT-PCR及Western blot检测细胞AMPK/mTOR/p70S6K通路相关因子表达变化。结果:油红O染色显示,ox-LDL干预后胞质内可见大量橘红色脂滴;CCK-8显示浓度30%以下的含药血清干预泡沫化巨噬细胞OD值无明显变化(P>0.05)。与模型组相比,含药血清刺激后,IL-6、IFN-γ表达降低,IL-10表达升高(P细胞自噬小体形成增加,LC3Ⅱ、AMPK表达提高,mTOR、p70S6K表达降低(P泡沫化巨噬细胞活化以及AMPK/mTOR/p70S6K信号通路,抑制炎症反应,诱导细胞自噬,可能是其防治AS的作用机制之一。

关键词：四妙勇安汤泡沫化巨噬细胞 AMPK/mTOR/p70S6K信号通路动脉粥样硬化氧化低密度脂蛋白

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

IL-17及JAK抑制剂AG490对泡沫化巨噬细胞ABCA1表达的影响

IL-17及JAK抑制剂AG490对泡沫化巨噬细胞ABCA1表达的影响

引用

作者：应宁宁南昌大学

学位级别：硕士

目的: 白介素-17（Interleukin-17，IL-17）是新近发现的一个促炎症细胞因子，具有致动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）的作用，酪氨酸蛋白激酶-信号转导及转录激活因子（Janus kinase signal transducers and activators of transcription，JAKs-STATs）是其发挥作用的途径之一。三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ATP-binding cassette transporter，ABCA1）在细胞中的主要作用为促进细胞内胆固醇运输和减少细胞内的炎症因子。双面神激酶（Janus kinase，JAK）抑制剂2-氰基-3-(3，4-二羟基苯基)-N-(苯甲基)-2-丙烯酰胺(2-cyano-3-(3，4-dihydroxyphenyl)-N-(phenylmethyl)-2-propenamide，AG490)为JAK抑制剂，能阻断JAKs-STATs信号通路。本文通过观察IL-17及AG490对泡沫化巨噬细胞ABCA1mRNA及蛋白的表达情况，探讨IL-17及AG490对泡沫化巨噬细胞的作用。方法: 1.检测IL-17对泡沫化巨噬细胞ABCA1mRNA及蛋白的表达情况：THP-单核（Thp-1monocyte，THP-1）细胞经佛波酯（phorbol12-myristate13-acetate，PMA）（100nmol/L）诱导24h-48h形成巨噬细胞，经氧化低密度脂蛋白（oxidizedlow density lipoprotein，ox-LDL）(50μg/mL)泡沫化后建立巨噬细胞泡沫化模型，油红O乙醇染液鉴定泡沫化巨噬细胞。上述泡沫化巨噬细胞中分别加入IL-17（100ng/mL），不同时间点（0h，6h，12h，24h）收取细胞，分别提取RNA及蛋白，RT-PCR、Western blotting检测ABCA1mRNA及蛋白的表达。上述泡沫化巨噬细胞中加入IL-17(0ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），24h后收取细胞，分别提取RNA及蛋白，RT-PCR、Western blotting检测ABCA1mRNA及蛋白的表达。 2.检测JAK抑制剂AG490与IL-17对泡沫化巨噬细胞ABCA1mRNA及蛋白的表达情况: IL-17（100ng/mL）及AG490（0umol/L、10umol/L、20umol/L、30umol/L）共处理泡沫化巨噬细胞24h后收取细胞，分别提取RNA及蛋白，RT-PCR、Western blotting检测ABCA1mRNA及蛋白的表达。结果: 1.THP-1细胞呈圆形，悬浮生长，经PMA（100nmol/L）诱导24h-48h后成为梭形的贴壁巨噬细胞，并伸出伪足，ox-LDL(50μg/mL)诱导巨噬细胞形成泡沫化巨噬细胞，其特征为脂质成份增多，聚集成滴，能被油红O乙醇染液染成红色。 2.随着泡沫化巨噬细胞中IL-17浓度的增加（0ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），RT-PCR、Western blotting检测ABCA1mRNA及蛋白的表达随着IL-17浓度增加而减少（p＜0.05），随着泡沫化巨噬细胞中IL-17作用时间的延长（0h、6h、12h、24h），RT-PCR、Western blotting检测ABCA1mRNA及蛋白的表达随IL-17作用时间增加而减少（p＜0.05）。 3.JAK抑制剂AG490与IL-17（100ng/mL）共同处理泡沫化巨噬细胞后，RT-PCR、Western blotting检测ABCA1mRNA及蛋白的表达随着泡沫化巨噬细胞中AG490浓度增加（0umol/L、10umol/L、20umol/L、30umol/L）而增加（p＜0.05）。结论: 1.通过ox-LDL诱导巨噬细胞能够成功构建巨噬细胞泡沫化模型。 2.IL-17能够减少泡沫化巨噬细胞ABCA1mRAN及蛋白的表达，并呈时间和浓度依赖性。 3.AG490能够减弱IL-17对泡沫化巨噬细胞ABCA1mRNA及蛋白的表达，提示IL-17可能通过JAKs-STATs信号通路影响ABCA1表达。

关键词：三磷酸腺苷结合盒转运体A1 白介素-17 JAKs-STATs 泡沫化巨噬细胞动脉粥样硬化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

四妙勇安汤含药血清对OX-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞自噬及炎症反应的影响

四妙勇安汤含药血清对OX-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞自噬及炎症反应...

引用

作者：陈茜贵州中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过体外实验探究四妙勇安汤含药血清对OX-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞自噬及炎症反应的影响。方法:1.选用低、中、高剂量的四妙勇安水煎液对清洁级SD大鼠进行灌胃,制备含药血清。2.细胞增殖毒性检测（CCK8）法观察含药血清对巨噬细... 详细信息

目的:通过体外实验探究四妙勇安汤含药血清对OX-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞自噬及炎症反应的影响。方法:1.选用低、中、高剂量的四妙勇安水煎液对清洁级SD大鼠进行灌胃,制备含药血清。2.细胞增殖毒性检测（CCK8）法观察含药血清对巨噬细胞增殖的影响。3.采用油红O染色法观察巨噬细胞脂滴变化。4.ELISA检测上清液IL-6、IL-10和IFN-γ炎症因子水平变化。5.透射电镜下观察细胞自噬水平。6.细胞免疫荧光标记检测细胞自噬蛋白LC3-Ⅱ。7.Western blot检测细胞p-AMPK、p-mTOR、p-p70S6K蛋白的表达变化。结果:1.CCK8结果显示浓度在20%以下的四妙勇安汤含药血清干预巨噬细胞OD值无明显变化。2.油红O染色显示,OX-LDL造模干预后,巨噬细胞胞质内可见大量橘红色脂滴。3.ELISA检测显示经四妙勇安汤含药血清各组干预后,降低了细胞IL-6和IFN-γ炎症因子水平,促进了 IL-10因子的分泌（P＜0.05）。4.透射电镜下观察显示用四妙勇安汤含药血清各组干预的泡沫化巨噬细胞可见自噬小体增多。5.免疫荧光分析结果显示,LC3-Ⅱ在四妙勇安汤含药血清各组干预的泡沫化巨噬细胞中表达增多。6.Western blot结果表明四妙勇安汤含药血清各组抑制了泡沫化巨噬细胞p-mTOR和p-p70S6K的表达,从而上调了 p-AMPK的表达（P＜0.05）。结论:四妙勇安汤含药血清可以降低泡沫细胞炎症因子的表达,调控AMPK/mTOR/p70S6K信号通路,上调自噬相关基因LC3-Ⅱ的表达,诱导泡沫化巨噬细胞自噬,这可能是四妙勇安汤治疗AS的作用机制之一。

关键词：四妙勇安汤泡沫化巨噬细胞动脉粥样硬化自噬炎症 AMPK/mTOR/p70S6K

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：