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不同类型鸡泄殖腔棉拭子禽白血病病毒p27抗原检测与病毒分离的相关性分析

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中国兽医学报 2017年第4期37卷 637-642页

作者：陈俊霞范建华许书珍孙鹏王一新李思菲韩妮张言坤徐步赵鹏崔治中山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 中国农业科学院家禽研究所江苏扬州225125

为探讨泄殖腔棉拭子或种蛋中禽白血病病毒(ALV)-p27抗原检测与病毒分离检测之间的相关性,对不同类型鸡编号后分别对应采集泄殖腔棉拭子或蛋清后以ALV-p27抗原检测试剂盒检测,同时无菌采集抗凝血接种DF-1细胞进行ALV的分离鉴定。结果显示... 详细信息

为探讨泄殖腔棉拭子或种蛋中禽白血病病毒(ALV)-p27抗原检测与病毒分离检测之间的相关性,对不同类型鸡编号后分别对应采集泄殖腔棉拭子或蛋清后以ALV-p27抗原检测试剂盒检测,同时无菌采集抗凝血接种DF-1细胞进行ALV的分离鉴定。结果显示,人工感染A亚群ALV的SPF鸡群泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原检测与病毒分离有很高的吻合率,相对于病毒分离法,119次泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原检测中出现有1例假阳性和3例假阴性;从美国进口的200只祖代肉鸡3次采血DF1细胞分离病毒结果均为阴性,而泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原阳性率依次为4.00%(8/200),2.97%(5/168)和2.61%(4/153),假阳性率为3.30%。相对于病毒分离法,正在实施ALV净化的不同遗传背景地方品系鸡泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原检测的假阳性率高达93.20%~100.00%,还有一定比例假阴性(1/9,1/4,1/3)。本研究大量对应比较的数据表明,相对于血浆病毒分离法,不同类型鸡的泄殖腔棉拭子ALVp27抗原检测法不仅有很高的假阳性率,还有一定比例的漏检率。在种鸡场的ALV净化过程中考虑到成本,不建议以泄殖腔棉拭子作为检测材料。本试验为我国鸡群禽白血病净化检测和临床鉴别诊断提供参考依据。

关键词：禽白血病病毒泄殖腔棉拭子病毒分离 p27抗原相关性分析 ALV净化

基因芯片和ELISA检测临床样品中禽白血病的比较研究

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黑龙江畜牧兽医 2016年第6期 169-171,286页

作者：朱瑞豪苏霞周宏专赵坤杨兵河南科技学院动物科学学院河南新乡453003 北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室北京100097

为了鉴定实验室建立的禽白血病基因芯片检测方法与商品化ELISA方法的符合情况,试验从北京市某种鸡场挑选疑似禽白血病的蛋鸡13只,分别采集蛋清、血清、全血及泄殖腔棉拭子样品,利用基因芯片方法和商品化ELISA试剂盒进行检测比较。结果表... 详细信息

为了鉴定实验室建立的禽白血病基因芯片检测方法与商品化ELISA方法的符合情况,试验从北京市某种鸡场挑选疑似禽白血病的蛋鸡13只,分别采集蛋清、血清、全血及泄殖腔棉拭子样品,利用基因芯片方法和商品化ELISA试剂盒进行检测比较。结果表明:基因芯片方法检测全血和泄殖腔棉拭子的阳性率均为69.23%;ELISA试剂盒检测蛋清和泄殖腔棉拭子样品中p27抗原的阳性率为23.08%。说明利用基因芯片方法检测全血和泄殖腔棉拭子样品的阳性检出率较高。

关键词：禽白血病病毒基因芯片全血蛋清泄殖腔棉拭子 ELISA 符合率

4种ELISA试剂盒检测禽白血病病毒效率比较

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中国兽医杂志 2016年第8期52卷 95-97页

作者：杨永立王培坤邹广珍吴科敏焦鹏涛韦平广西大学养禽与禽病学研究所广西南宁530004

对采集鸡蛋清、泄殖腔肛拭子以及蛋清或泄殖腔肛拭子检测阳性的鸡只之血清接种DF-1细胞的上清液,分别采用A、B、C、D 4种ELISA试剂盒进行ALV-P27抗原的3次试验检测。结果显示,A试剂盒的蛋清和病毒分离的敏感度最高,B试剂盒对肛拭敏感性... 详细信息

对采集鸡蛋清、泄殖腔肛拭子以及蛋清或泄殖腔肛拭子检测阳性的鸡只之血清接种DF-1细胞的上清液,分别采用A、B、C、D 4种ELISA试剂盒进行ALV-P27抗原的3次试验检测。结果显示,A试剂盒的蛋清和病毒分离的敏感度最高,B试剂盒对肛拭敏感性最高。A试剂盒的3次试验检测的符合率都在87%以上,并且较稳定,结果可信度高;C试剂盒的符合率在79%以上,相对稳定;B和D试剂盒的符合率都不稳定。

关键词：禽白血病病毒酶联免疫吸附试验蛋清泄殖腔棉拭子病毒分离

禽白血病病毒p27抗原不同检测方法在禽白血病净化中的应用与比较

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禽白血病病毒p27抗原不同检测方法在禽白血病净化中的应用与比较

作者：陈俊霞山东农业大学

学位级别：硕士

禽白血病（Avian Leukemia,AL）是我国鸡群中流行最为广泛的肿瘤性疾病之一。其病原体是禽白血病病毒（Avian Leukosis Virus,ALV）。自1908年首次报道禽白血病以来,世界各地不断有该病的报道流行。现今,我国鸡群中普遍存在ALV感染,尤... 详细信息

禽白血病（Avian Leukemia,AL）是我国鸡群中流行最为广泛的肿瘤性疾病之一。其病原体是禽白血病病毒（Avian Leukosis Virus,ALV）。自1908年首次报道禽白血病以来,世界各地不断有该病的报道流行。现今,我国鸡群中普遍存在ALV感染,尤其在我国地方品种鸡中感染率较高,对地方品种资源造成严重威胁的同时,也给家禽养殖业带来巨大经济损失,因而对ALV的监测和净化越来越受到业界的关注。目前,对待检鸡群进行病毒分离或者通过检测不同样品中p27抗原确定阳性个体进而淘汰是ALV净化过程中不可或缺的重要措施。在净化的过程中,选择何种样品和何种检测手段来确定感染的鸡只进行淘汰是实施净化进而精简净化程序的核心,本研究不仅对应用ALV-p27抗原的单克隆抗体进行间接免疫荧光（IFA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）进行了对比,也对感染鸡群中同一样品的病毒分离及其泄殖腔棉拭子或蛋清p27抗原检测进行了系统对比,以期为科学设定ALV净化检测规程提供技术指导。1.不同类型鸡其泄殖腔棉拭子或蛋清p27抗原检测与病毒分离相关性分析为探讨泄殖腔棉拭子或种蛋中ALV-p27抗原检测与病毒分离检测之间的相关性,本研究对几种不同类型鸡群,包括不同方式人工接种A亚群ALV的SPF鸡、完成ALV净化的进口祖代肉鸡以及处于ALV净化过程中的绿壳蛋鸡、琅琊鸡、仙居鸡、芦花鸡4个地方品系鸡,对其进行一一编号后分别对应采集泄殖腔棉拭子或蛋清用ELISA抗原检测试剂盒检测p27抗原,同时无菌采集抗凝血接种DF-1细胞进行ALV的分离鉴定,来观察和比较泄殖腔棉拭子或种蛋中ALV-p27抗原检测与病毒分离检测之间的吻合率。结果显示,人工感染A亚群ALV的SPF鸡群泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原检测与病毒分离有很高的吻合率,相对于病毒分离法,119次泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原检测中出现有1例假阳性和3例假阴性;从美国进口的200只祖代肉鸡3次采血DF1细胞病毒分离结果均为阴性,而泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原阳性率依次为4.0%（8/200）,2.97%（5/168）和2.61%（4/153）,平均假阳性率为3.3%（17/521）。相对于病毒分离法,正在实施ALV净化的不同遗传背景地方品系鸡泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原检测的假阳性率高达93.2%00%,还有一定比例假阴性（1/9,1/4,1/3）。本研究大量一一对应比较的数据表明,相对于血浆病毒分离法,不同类型鸡的泄殖腔棉拭子p27检测法不仅有很高的假阳性率,还有一定比例漏检率。在种鸡场的ALV净化过程中考虑到成本,不建议以泄殖腔棉拭子作为检测材料。本研究将为我国鸡群中禽白血病的净化检测和临床鉴别诊断提供参考依据。2.针对p27蛋白的ELISA与IFA检测不同亚群ALV的灵敏性比较为了评估以p27单克隆抗体（4F12腹水）进行的IFA检测与p27抗原的ELISA检测的灵敏性,本研究将A亚群SDAU14A1株、B亚群SDAU09C2株、J亚群733株及K亚群JS11C1株和JS11C3株四种不同ALV亚群五个毒株分别以细胞维持液做10倍有限梯度稀释（10-1～10-8）,每个稀释度各取100μL接种于96孔细胞培养板的一列DF-1细胞共8个孔,接种2 h后换液维持。每个毒株做3个重复,分别在3、6、9 d对细胞培养上清p27抗原进行ELISA检测,细胞固定进行IFA检测,Reed-Muench法计算两种方法测定的病毒TCID50。结果显示,IFA检测A、B、J、K各个ALV亚群感染的DF-1细胞时,荧光显微镜下均出现特异性绿色荧光信号,而对照组无荧光显现;与ELISA检测结果相比,IFA检测不同ALV亚群时均可检测到更高的病毒稀释度和更多的阳性细胞孔;采用Reed-Muench法计算所得ELISA和IFA两种检测方法测定的各个病毒毒株TCID50分别是SDAU14A1株10-4.33 TCID50/0.1 m L与10-4.80 TCID50/0.1 m L、SDAU09C2株10-4.50 TCID50/0.1 mL与10-5.43 TCID50/0.1 mL、733株10-5.20 TCID50/0.1 m L与10-5.43TCID50/0.1 m L、JS11C1株10-4.80 TCID50/0.1 mL与10-5.20 TCID50/0.1 mL、JS11C3株10-4.67TCID50/0.1 mL与10-5.33 TCID50/0.1 mL,可以看出,IFA测定的病毒TCID50均明显高于ELISA。本研究结果证明p27单克隆抗体4F12腹水能够特异性结合A、B、J、K亚群ALV p27蛋白,以其进行的IFA检测具有比ELISA检测p27抗原更高的灵敏性。本研究建立的评估方法为禽白血

关键词：禽白血病泄殖腔棉拭子病毒分离单克隆抗体酶联免疫吸附试验间接免疫荧光相关性分析 ALV净化

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中国畜牧兽医文摘 2013年第4期 24+29+80-82+84-85+97-98+102+106-107+109+111+119-120+122-124+126-127+130-132+134+137-138+140+142-143+147-148+150+152+154+160+175+180+199-200页

家蚕品种野三元耐微量拟除虫菊酯类农药污染新品系的筛选/吴阳春(江苏科技大学江苏省镇江市212003),覃光星,许平震…//蚕业科学.-2012,(4).-688～693基于为培育耐农药污染家蚕品种和研究家蚕对农药的耐受性机制提供基础材料的目的,对包... 详细信息

家蚕品种野三元耐微量拟除虫菊酯类农药污染新品系的筛选/吴阳春(江苏科技大学江苏省镇江市212003),覃光星,许平震…//蚕业科学.-2012,(4).-688～693基于为培育耐农药污染家蚕品种和研究家蚕对农药的耐受性机制提供基础材料的目的,对包括家蚕四元杂交品种野三元中2个含野桑蚕血统的中系亲本野A、野B和2个日系亲本84Y2、784等在内的160份家蚕品种资源,以0.01mg/L杀灭菊酯添食后进行耐药性筛选,供试家蚕品种中的野B、辐射诱变品种辐7对微量杀灭菊酯

关键词：金霉素预混剂剂量肉仔鸡胴体品质试验鸡日龄泄殖腔棉拭子用药量霉变玉米断奶仔猪平均日增重脂肪肝出血综合征家蚕品种地面平养健脾消食散雏鸭平均日采食量新疆细毛羊新疆羊大黄乙醇提取物科技文摘

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鸽沙门氏菌病的病理学研究

畜牧兽医学报 1987年第1期 70-73页

作者：凌育燊郭予强杨连楷广东省家禽科学研究所

通过对自然病例和人工感染病例的病理学研究,结果表明本病的发生可能是经毒血症,进而发展成为菌血症和败血症的过程。本病在临诊表现、眼观病变和病理组织学变化上都具有一定的特征性,可作为现场临诊诊断的参考。

关键词：沙门氏菌病肠道细菌感染病理组织学变化眼观病变自然病例泄殖腔棉拭子卡他性肠炎坏死灶剖检副伤寒下痢淋巴细胞白细胞法氏囊腔上囊淋巴组织细菌分离淋巴增生菌血症小叶性肺炎支气管肺炎病理学基础医学

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禽白血病病毒研究新进展

畜牧兽医科技信息 1998年第17期 1-1页

作者：凌育焱广东省家禽科学研究所研究员广州510430

英国康普顿动物保健研究所的研究人员,10前年从肉用型种鸡中分离到一种新的禽白血病病毒(ALV)。因其外层囊膜的特性既不同于已知的5种鸡ALVs(ANE亚群),也不同于分离自观赏鸟的4种ALVs(F—I亚群),故而定为ALV-J亚群,原始分离株称为HPRS-... 详细信息

英国康普顿动物保健研究所的研究人员,10前年从肉用型种鸡中分离到一种新的禽白血病病毒(ALV)。因其外层囊膜的特性既不同于已知的5种鸡ALVs(ANE亚群),也不同于分离自观赏鸟的4种ALVs(F—I亚群),故而定为ALV-J亚群,原始分离株称为HPRS-103。经分子病毒学的研究证实,ALV-J是一种ALV与鸡肉源性反转录病毒科(EAV)的囊膜样遗传序列(envelope-tike ge-

关键词：禽白血病病毒病毒血症骨髓性白血病生物学行为 ELISA技术分子病毒学雏鸡泄殖腔棉拭子 J亚群群特异性

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鸡大肠杆菌的分离和鉴定及耐药性监测

农民致富之友 2013年第10期 205-205页

作者：张雪王晓瑞滑县畜牧局

鸡大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的一种常见疾病。包括大肠杆菌性腹膜炎,输卵管炎,滑膜炎,脐炎,气囊炎,肉芽肿,炎和其他疾病,大肠杆菌到处是广泛存在于自然环境中,因此,形成一个鸡威胁整个过程,对家禽业的重大损失。大肠杆菌血清型,对当... 详细信息

鸡大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的一种常见疾病。包括大肠杆菌性腹膜炎,输卵管炎,滑膜炎,脐炎,气囊炎,肉芽肿,炎和其他疾病,大肠杆菌到处是广泛存在于自然环境中,因此,形成一个鸡威胁整个过程,对家禽业的重大损失。大肠杆菌血清型,对当地流行菌株和不同血清型,同时,随着抗生素的广泛使用,并在强大肠杆菌的耐药性,为临床合理用药,我们确定了滑县境内的大肠杆菌菌株,大型养鸡场,并在此基础上对药物耐药性的监测。

关键词：大肠杆菌血清型大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属血清变种伊红美蓝琼脂泄殖腔棉拭子大肠杆菌菌株耐药性监测