检索结果-南通市图书馆

本研究以其汕头湾表层沉积物中的微生物为研究对象,以16S rDNA和几丁质酶保守基因片段为切入点,对沉积物中微生物种的种群多样性进行了较系统的研究;并在沉积物中分离了多株几丁质酶产生菌,对其几丁质酶编码基因和产几丁质酶条件进行了探索性的研究。采用PCR-DGGE技术和16S rDNA文库方法在汕头湾表层沉积物的宏基因组中获得97条16S rDNA序列,分别归属于10个细菌类群:变形菌门、酸杆菌门、拟杆菌门、脱铁杆菌门、螺旋体门、绿弯菌门、疣微菌门、硝化螺旋菌门、异常球菌-栖热菌门和浮霉菌门。其序列信息与NCBI收录的序列相似率分布在81%～100%之间,以97%为分界点,大于97%的有47个克隆子,占48.5%,小于或等于97%的共有50个克隆子,占到51.5%,其中有4个克隆子因为相似率太低,尚不能确定其分类地位,说明汕头湾表层沉积物中蕴含有丰富的微生物资源,并且,大部分的微生物是目前还没有被发现和研究的新种。采用PCR方法在沉积物扩增得到63条几丁质酶编码基因片段,其编码的蛋白序列与NCBI收录的序列的相似率分布在41%～97%之间,且大多数在70%以下,只有8个克隆子的相似率在70%以上,NCBI数据库中与其相似性最高的几丁质酶蛋白序列有18条,其中与橙色滑柱菌株（Herpetosiphon aurantiacus） ATCC 23779的几丁质酶存在着最高相似性的序列有27条,另外,还包括一些未可培养细菌的几丁质酶,说明汕头湾表层沉积物中存在着多样性程度非常高的几丁质酶编码基因,并且,其中有很多是目前尚未研究的。另外,在沉积物中分离得到产几丁质酶菌株69株,根据16S rDNA序列确定了SWCH-1、SWCH-2、SWCH-3、SWCH-5、SWCH-6和SWCH-9六株几丁质酶活力较高的菌株的属,分别为:短芽孢杆菌属（Brevibacillus）、类芽孢杆菌属（Paenibacillus）、芽孢杆菌属（Bacillus）、气单胞菌属（Aeromonas）和寡养单胞菌属（Stenotrophomonas）;对着六株菌的几丁质酶编码基因片段进行扩增,显示其均含有18家族的几丁质酶编码基因,但其编码的蛋白序列与NCBI收录的序列存在着差异,其中SWCH-1和SWCH-3的序列的差异比较大;根据菌株SWCH-6的形态特征、生理生化特征进一步鉴定其为嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophlilla）。采用单因素优化方法结合正交实验,得到菌株SWCH-6产几丁质酶的最佳发酵条件:胶体几丁质25.0g/L,胰蛋白胨10.0g/L,陈海水1.0L,pH8.5,32℃,150rpm培养72h;在该条件下酶活力达0.39U/ml。此外,菌株所产几丁质酶的最适催化pH值为5.0;最适催化温度为40℃;Cu2+、Fe3+及表面活性剂Tween-80能增强该酶的催化活性;Zn2+、Mn2+及表面活性剂SDS、洗衣粉对该酶的催化活性有抑制作用,与其它几丁质酶存在着一些不同;另外,实验发现SWCH-6有一段90kDa左右的胞外几丁质酶蛋白,但其编码基因尚未克隆到,还发现一段60kDa左右的胞内差异蛋白,是否与几丁质降解有关尚需进一步的实验。

关键词：汕头海湾几丁质酶微生物多样性 DGGE 16S rDNA文库嗜水气单胞菌

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国内最大直径海湾隧道盾构机始发

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市政技术 2018年第2期36卷 154-154页

国内最大直径海湾盾构隧道，也是国内首条兼具城市道路与一级公路功能的水下盾构隧道——广东省汕头市海湾隧道东线盾构机近日成功始发，标志着汕头海湾隧道工程取得重大进展。

关键词：盾构隧道汕头海湾最大直径盾构机国内一级公路城市道路隧道工程

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国内最大直径海湾隧道盾构机始发

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市政技术 2018年第3期36卷 117-117页

国内最大直径海湾盾构隧道，也是国内首条兼具城市道路与一级公路功能的水下盾构隧道——广东省汕头市海湾隧道东线盾构机近日成功始发，标志着汕头海湾隧道工程取得重大进展。此次始发的盾构机是中铁隧道局集团通过全球招标采购，针对... 详细信息

国内最大直径海湾盾构隧道，也是国内首条兼具城市道路与一级公路功能的水下盾构隧道——广东省汕头市海湾隧道东线盾构机近日成功始发，标志着汕头海湾隧道工程取得重大进展。此次始发的盾构机是中铁隧道局集团通过全球招标采购，针对海湾隧道工程特殊的水文地质条件“量身订制”的。盾构刀盘直径15．01m，相当于5层楼高度，全长130m，总质量4600t，总功率1．08万kW，具备常（带）压换刀、刀盘伸缩摆动、超前地质预报、超前钻探等功能。

关键词：盾构隧道汕头海湾最大直径盾构机国内水文地质条件超前地质预报隧道工程

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