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当归芍药散对肾病综合征大鼠水肿的改善作用及机制

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中国药理学通报 2024年第6期40卷 1172-1178页

作者：马晓雯范胜楠许在平项庆镇宣自华王运来许钒安徽中医药大学药学院中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的探究当归芍药散对肾病综合征大鼠水肿的改善作用及作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、当归芍药散组(17.2 g·kg^(-1)·d^(-1))、氯沙坦组(30 mg·kg^(-1)·d^(-1))、托伐普坦组(3 mg·kg^(-1)·d^(-1))。尾静脉注射阿霉... 详细信息

目的探究当归芍药散对肾病综合征大鼠水肿的改善作用及作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、当归芍药散组(17.2 g·kg^(-1)·d^(-1))、氯沙坦组(30 mg·kg^(-1)·d^(-1))、托伐普坦组(3 mg·kg^(-1)·d^(-1))。尾静脉注射阿霉素建立肾病综合征大鼠模型。给药4周后,检测各组大鼠肾功能指标及24 h尿蛋白含量变化;免疫组化法检测肾组织中水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)和pS256-AQP2的分布;放射免疫法测定血浆精氨酸加压素(arginine vasopressin,AVP)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)水平;Western blot和RT-PCR法分别检测肾脏AQP2、pS256-AQP2、血管紧张素1型受体(angiotensin type 1 receptor,AT1R)、精氨酸加压素受体2(arginine vasopressin receptor 2,V2R)蛋白及mRNA的表达。结果3种药物均可改善肾病综合征大鼠肾功能,减轻蛋白尿,降低血浆AVP及AngⅡ水平,下调AQP2、pS256-AQP2蛋白和mRNA表达。当归芍药散与托伐普坦对于降低血浆AVP水平的效果优于氯沙坦。结论当归芍药散可能通过降低AVP及AngⅡ水平,进而调节AQP2的表达,改善肾病综合征大鼠水肿。

关键词：肾病综合征水肿水通道蛋白2 精氨酸加压素血管紧张素Ⅱ 当归芍药散

血管加压素-水通道蛋白2调控通路与内耳膜迷路积水

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2020年第4期55卷 426-431页

作者：蒋丽元浙江中医药大学附属广兴医院针灸康复科杭州310007

在肾脏集合管,血管加压素(arginine vasopressin,AVP)通过AVP-血管加压素受体2(vasopressin type 2 receptor,V2R)-环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)-水通道蛋白2(aquaporin2,AQP2)调控通路引起AQP2表达改变,实现对肾集合管水通透性的调节,参与人体水电解质的调节机制改变。膜迷路积水是梅尼埃病的重要病理特征,AVP-AQP2调控通路功能失常与膜迷路积水的病理生理学改变密切相关。本文综述了近年来AVP-AQP2调控通路的研究进展,并重点讨论其在梅尼埃病膜迷路积水发生发展中的作用。

关键词：膜迷路积水水通道蛋白2 梅尼埃病调控通路功能失常 AQP2 血管加压素肾集合管

Elabela通过调节水通道蛋白2改善糖尿病肾病作用及机制研究

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中华内分泌代谢杂志 2022年第8期38卷 651-657页

作者：石敏徐玉迪王子葳宋婧张红南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科 223300

目的观察Elabela(Ela)对糖尿病肾病(DKD)保护作用及可能机制。方法db/db小鼠随机分为糖尿病组和Ela干预组,db/m小鼠为正常对照组。Ela干预组小鼠腹腔注射Ela-215 mg·kg^(-1)·d^(-1),持续8周。实验结束测尿白蛋白/肌酐比值(UACR)等代... 详细信息

目的观察Elabela(Ela)对糖尿病肾病(DKD)保护作用及可能机制。方法db/db小鼠随机分为糖尿病组和Ela干预组,db/m小鼠为正常对照组。Ela干预组小鼠腹腔注射Ela-215 mg·kg^(-1)·d^(-1),持续8周。实验结束测尿白蛋白/肌酐比值(UACR)等代谢指标,HE染色和PAS染色观察肾脏病理学改变,免疫组化观察水通道蛋白2(AQP2)表达,Western blot分析肾脏Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)和AQP2水平。Ela处理高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2),Western blot观察HK2细胞外基质主要成分Col-Ⅳ及AQP2的表达;进一步敲除HK2细胞apelin受体(APJ),观察Ela的干预效应。最后,利用NanoBit?技术,研究Ela诱导的APJ激活与抗利尿激素(AVP)诱导的抗利尿激素2型受体(AVPR2)活化间的相互作用,以明确Ela调节AQP2的可能机制。结果(1)在不影响血糖、体重等代谢指标的情况下,Ela干预明显降低了db/db小鼠的UACR水平,且肾脏病理损害显著改善,肾组织Col-Ⅳ水平下降,AQP2表达明显降低。(2)Ela干预可明显抑制高糖诱导的Col-Ⅳ表达和AQP2水平,进一步干扰APJ后,Ela对Col-Ⅳ和AQP2调节作用被逆转。(3)Ela激活APJ可明显拮抗AVP诱导的AVPR2下游信号β-Arrestin-2(ARRB2)传递,进一步提示Ela对AQP2的抑制作用可能与拮抗AVP/AVPR2信号有关。结论Ela可能通过APJ介导作用,抑制AQP2水平,发挥DKD保护作用。

关键词： Elabela 糖尿病肾病水通道蛋白2

甘遂半夏汤中甘遂-甘草反药组合加减对腹水大鼠利水药效及RAAS系统的影响

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中华中医药杂志 2022年第6期37卷 3445-3452页

作者：霍敏李娜李慕云于雪范盎然贺佳廖文勇任彧娜柳海艳钟赣生北京中医药大学北京102488

目的:探究甘遂半夏汤中甘遂-甘草反药组合加减治疗腹水大鼠的利水药效及其机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、甘遂半夏汤全方组(全方组)、甘遂半夏汤全方去生甘遂组(去遂组)、甘遂半夏汤全方去炙甘草组(去草... 详细信息

目的:探究甘遂半夏汤中甘遂-甘草反药组合加减治疗腹水大鼠的利水药效及其机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、甘遂半夏汤全方组(全方组)、甘遂半夏汤全方去生甘遂组(去遂组)、甘遂半夏汤全方去炙甘草组(去草组)、甘遂半夏汤全方去生甘遂炙甘草组(双去组)。腹腔注射Walker-256细胞复制大鼠腹水模型。造模后第2天给药,第3天收集24 h尿液,记录尿量,检测尿液上清液中Na^(+)、K^(+)、Cl^(-)含量;第9天选取造模成功大鼠,腹主动脉取血后摘取双侧肾脏,检测血清Na^(+)、K^(+)、Cl^(-)含量,血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)、抗利尿激素(ADH)含量及肾脏水通道蛋白2(AQP2)mRNA和蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组尿量显著减少(P2 mRNA和蛋白表达显著升高(P2 mRNA和蛋白表达显著降低(P2 mRNA表达显著升高(P2 mRNA和蛋白表达的抑制。通过以上两方面甘遂半夏汤全方对水液的重吸收减少,体液排出增多,利水药效增加,并且改善了腹水引起的血尿电解质紊乱。

关键词：甘遂甘草甘遂半夏汤肾素-血管紧张素-醛固酮系统电解质紊乱水通道蛋白2 机制药效

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6-姜酚抗大鼠运动病作用的内耳机制研究

中华航海医学与高气压医学杂志 2022年第5期29卷 587-591页

作者：马永勤刘琦徐丽华王国华周鑫姜正林南通大学特种医学研究院南通226019

目的探讨生姜有效成分6-姜酚抗运动病作用的内耳相关机制。方法SD大鼠30只,按照实验设计分为对照组、旋转组、6-姜酚(50 mg/kg)组、6-姜酚+钌红(5 mg/kg)组、单独钌红(5 mg/kg)组,每组6只。按照实验设计旋转刺激SD大鼠,诱导其产生对0.15... 详细信息

目的探讨生姜有效成分6-姜酚抗运动病作用的内耳相关机制。方法SD大鼠30只,按照实验设计分为对照组、旋转组、6-姜酚(50 mg/kg)组、6-姜酚+钌红(5 mg/kg)组、单独钌红(5 mg/kg)组,每组6只。按照实验设计旋转刺激SD大鼠,诱导其产生对0.15%糖精溶液的条件性厌饮行为,模拟运动病。利用qRT-PCR、Western blotting、ELISA等生物技术检测大鼠内耳水通道蛋白2(AQP2)、血浆精氨酸加压素(AVP)的V2受体(V2R)和瞬时感受器电位离子通道4(TRPV4)mRNA和蛋白的表达水平,并观察TRPV4拮抗剂钌红对6-姜酚抗运动病效果的影响。结果6-姜酚抑制旋转刺激后,大鼠内耳AQP2 mRNA和蛋白的表达水平明显升高(P蛋白表达水平明显降低(P蛋白的表达水平(P<0.05)。单独使用钌红(5 mg/kg)诱导,大鼠对糖精溶液的饮用量明显减少(P<0.01);在给予6-姜酚的同时使用钌红(5 mg/kg),则消除了6-姜酚预处理对旋转刺激后大鼠糖精溶液饮用量减少的抑制作用(P<0.01)。结论6-姜酚的抗运动病机制可能与其影响内耳V2R、TRPV4的转录和表达,进而影响AQP2的表达有关。

关键词：运动病 6-姜酚内耳水通道蛋白2 V2受体瞬时感受器电位离子通道4

从“V2R-cAMP-PKA-AQP2”通路探讨针刺对正常高值血压大鼠的舒张压调控机制

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中华中医药学刊 2022年第5期40卷 122-126,266页

作者：魏肖禹曲怡张立德周鸿飞辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

目的通过观察针刺“曲池”“足三里”对盐敏感正常高值血压大鼠肾水通道蛋白2(Aquaporin2,AQP2)通路表达的影响,从而探讨针刺降低舒张压的作用机制。方法SPF级8周龄盐抵抗大鼠(DR)8只作为空白组,SPF级8周龄盐敏感大鼠(DS)24只,随机分为... 详细信息

目的通过观察针刺“曲池”“足三里”对盐敏感正常高值血压大鼠肾水通道蛋白2(Aquaporin2,AQP2)通路表达的影响,从而探讨针刺降低舒张压的作用机制。方法SPF级8周龄盐抵抗大鼠(DR)8只作为空白组,SPF级8周龄盐敏感大鼠(DS)24只,随机分为模型组、针刺组、和非穴位组,每组8只。大鼠适应性喂养1周后,各组改用8%高盐饲料喂养4周,进行模型评价,对模型评价成功的大鼠,改普通饲料喂养并同时针刺治疗4周。针刺组取“足三里”“曲池”穴施针,1次/d,6次/周,治疗4周。非穴位组针刺鼠尾距尾根部0.5 cm处,治疗方法同针刺组。治疗后测量大鼠血压值;ELISA法检测血清精氨酸加压素(AVP)含量;免疫组化法检测大鼠肾脏AQP2蛋白表达;RT-PCR检测大鼠肾脏精氨酸加压素2受体(V2R)、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)、AQP2 mRNA表达。结果治疗后,与空白组比较,模型组血压升高(P2蛋白表达明显上调(P2R、cAMP、PKA、AQP2mRNA表达均明显上调(P2蛋白表达降低(P2R、cAMP、PKA、AQP2mRNA表达明显下调(P2蛋白表达明显上调(P2R、cAMP、PKA、AQP2mRNA表达均明显上调(P2的表达降低舒张压,其机制可能与抑制V2R/cAMP/PKA信号传导通路实现。

关键词：舒张压针刺水通道蛋白2 体液调节精氨酸加压素

真武汤对NRK-52E细胞“AVP-V2R-AQP2”通路的调控作用研究

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中国中药杂志 2018年第3期43卷 603-608页

作者：周小杰包玉婷陈红淑宣玲陈学明张洁颖杨元宵李昌煜浙江中医药大学浙江杭州310053 浙江中医药大学附属第一医院浙江杭州310006 杭州医学院浙江杭州310053

该实验探讨真武汤对体外培养NRK-52E细胞AQP2相关的＂AVP-V2R-AQP2＂通路的调控作用,初步揭示真武汤调节水分转运平衡的部分分子机制。取SPF级雄性SD大鼠48只,随机分成8组,每组6只。分别给予蒸馏水或真武汤22.68 g·kg^-1·d^-1（按生... 详细信息

该实验探讨真武汤对体外培养NRK-52E细胞AQP2相关的＂AVP-V2R-AQP2＂通路的调控作用,初步揭示真武汤调节水分转运平衡的部分分子机制。取SPF级雄性SD大鼠48只,随机分成8组,每组6只。分别给予蒸馏水或真武汤22.68 g·kg^-1·d^-1（按生药量计）灌胃,心脏采血,3 000 r·min^-1离心分离制备含药血清。然后体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E细胞,给予上述不同给药天数和日给药次数制备的真武汤含药血清和血管加压素类似物1-去氨基-8-右旋-精氨酸加压素（1-desamino-8-D-arginine vasopressin,d DAVP）进行干预,采用实时无标记动态细胞分析技术（Real time cell analysis,RTCA）检测细胞增殖情况;免疫荧光法检测细胞中V2R,AQP2蛋白的分布情况;Western blot法检测V2R,PKA,AQP2的蛋白表达量;Real-time PCR法检测AQP2 mRNA水平。结果显示,与正常大鼠血清组比较,每天给药2次连续给药7 d制备的真武汤含药血清作用于NRK-52E细胞约24 h,可显著上调其AQP2的mRNA水平（P〈0.01）;显著增加V2R,PKA,AQP2的蛋白表达量（P〈0.05,P〈0.01,P〈0.05）;该方法制备的真武汤含药血清与d DAVP合用干预NRK-52E细胞后,可显著增加V2R,p-AQP2和AQP2的蛋白表达量（P〈0.01,P〈0.05,P〈0.01）。以上实验结果表明,真武汤含药血清能增加NRK-52E细胞＂AVP-V2R-AQP2＂通路中V2R,PKA及AQP2的蛋白表达量,与d DAVP合用存在协同效应,提示＂AVP-V2R-AQP2＂通路可能是真武汤调节水分转运平衡的分子机制之一。

关键词：真武汤含药血清血管加压素类似物血管加压素受体2 蛋白激酶A 水通道蛋白2

水通道蛋白2在胆总管结扎大鼠肝硬化肾组织中的表达及丹参注射液对其表达的影响

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世界华人消化杂志 2012年第25期20卷 2393-2396页

作者：王建华郭永泽张晓岚河北工程大学附属医院消化内科河北省邯郸市056029 河北医科大学第二医院消化内科河北省石家庄市050000

目的:探讨胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)大鼠肝硬化不同阶段肾组织中水通道蛋白2(aquaporins-2,AQP2)表达的变化;用丹参注射液干预肝硬化腹水大鼠,观察丹参注射液对其表达的影响.方法:将70只♂SD大鼠随机分成假手术组、模型组.模... 详细信息

目的:探讨胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)大鼠肝硬化不同阶段肾组织中水通道蛋白2(aquaporins-2,AQP2)表达的变化;用丹参注射液干预肝硬化腹水大鼠,观察丹参注射液对其表达的影响.方法:将70只♂SD大鼠随机分成假手术组、模型组.模型组分别于结扎后1、2、3、4wk麻醉10只动物.假手术组与4wk模型组同批麻醉.4wk末时,再从剩余存活造模大鼠中,随机选取16只腹腔穿刺证实有腹水的大鼠,随机分为治疗组和对照组.从造模第5周开始进行治疗观察.治疗组给予丹参注射液2mL腹腔注射,1次/d,连用2wk.对照组给予蒸馏水2mL腹腔注射,1次/d,连用2wk,6wk末2组同批麻醉.采用HE染色、Masson三色染色确定模型建立情况;肾脏组织标本采用HE染色,光镜下观察组织学变化,应用免疫组织化学方法测定AQP2的表达及分布.结果:造模1-4wk大鼠肾组织AQP2的阳性染色平均吸光度A值(皮质:0.4703±0.0313,0.4832±0.0212,0.5081±0.0417,0.6802±0.0531;髓质:0.4320±0.0237,0.4724±0.0284,0.4796±0.0451,0.5187±0.0612)均高于假手术组(皮质:0.4197±0.0295;髓质:0.4139±0.0152,P2在肾皮质和肾髓质的表达均逐渐增强.治疗组(皮质:0.4233±0.0521,髓质:0.4158±0.0413)大鼠肾组织AQP2的阳性染色平均A值显著低于对照组(皮质:0.5536±0.0476,髓质:0.4764±0.0536,P2表达的上调,提示在肝硬化进程中,肾脏集合管可能参与了水重吸收的增加;而丹参注射液可以下调肝硬化腹水大鼠肾脏AQP2的高表达.

关键词：肝硬化腹水水通道蛋白2 丹参

基于cAMP/PKA通路研究当归芍药散提取液对阿霉素诱导IMCD3细胞损伤的保护作用

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中国药理学通报 2019年第12期35卷 1765-1770页

作者：欧美凤刘浩坤杨沫王运来许钒安徽中医药大学药学院中药复方安徽省重点实验室

目的观察当归芍药散(Danggui-Shaoyao-San,DSS)提取液对阿霉素(adramycin,ADR)诱导损伤的内髓集合管(inner medullary collecting duct cell,IMCD3)细胞Na^+,K^+-ATP酶、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)及水通道蛋白-2(aquaporin 2,AQP2)的影响,从水液平衡的角度探讨其相关的保护机制。方法以IMCD3细胞为研究对象,MTT法观察不同浓度ADR对IMCD3细胞增殖的影响;将细胞分为正常组、模型组、DSS提取液低、中、高剂量组(0.8、1.6、3.2 g·L^-1)、H-89抑制剂组;ELISA法检测细胞cAMP含量;试剂盒检测Na^+,K^+-ATP酶活性变化;Real-time PCR法检测PKA、CREB、水通道蛋白2(AQP2)mRNA表达;Western blot法检测Na^+,K^+-ATP酶、PKA、CREB、AQP2蛋白表达。结果ADR对IMCD3细胞的损伤最适浓度为1×10^-8 mol·L^-1;不同浓度的DSS提取液均可有效抑制ADR诱导IMCD3细胞损伤,提高Na^+,K^+-ATP酶活性及细胞上清cAMP含量(P蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论DSS提取液对ADR诱导IMCD3细胞损伤模型具有一定的保护作用,与提高Na+,K+-ATP酶活性、激活cAMP-PKA-CREB通路有关。

关键词：当归芍药散提取液 Na^+,K^+-ATP酶环磷酸腺苷蛋白激酶A 水通道蛋白2 IMCD3细胞