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水解乳蛋白的制备及在细胞培养中的初步应用

天然产物研究与开发 2014年第1期26卷 100-104,135页

作者：田伟冯玉萍李明生崔梦楠靳冬武龙仕和马忠仁西北民族大学生命科学与工程学院甘肃省动物细胞工程技术研究中心兰州730030

采用正交法优化复合酶(胰酶和中性蛋白酶)水解凝乳酶干酪素制备水解乳蛋白(lacto-protein hydrolysate,LPH)的制备工艺,通过BHK和Vero细胞的培养效果检测水解乳蛋白的促细胞生长作用。结果显示水解乳蛋白的最佳制备工艺为:胰酶∶中性蛋... 详细信息

采用正交法优化复合酶(胰酶和中性蛋白酶)水解凝乳酶干酪素制备水解乳蛋白(lacto-protein hydrolysate,LPH)的制备工艺,通过BHK和Vero细胞的培养效果检测水解乳蛋白的促细胞生长作用。结果显示水解乳蛋白的最佳制备工艺为:胰酶∶中性蛋白酶=2∶1(质量比),40℃,pH 7.0,酶/底物(E/S)=1∶5(质量比)水解6 h。所得产物氨基氮含量3.21 g/L,多肽含量35.63 g/L,游离氨基酸含量14.17 mg/mL,收率达40.20%。BHK和Vero细胞培养24 h,细胞密度均为各自空白的2.0倍,分别为Hyclone产品的1.0倍和0.86倍;培养48h,分别为各自空白的5.0倍和4.0倍,均为Hyclone产品的0.88倍。因此,该工艺简单,耗时短,制备得水解乳蛋白对BHK和Vero细胞生长有明显的促进作用。

关键词：水解乳蛋白制备细胞培养应用

水解乳蛋白及酪蛋白对破伤风梭菌产毒力的影响

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中国兽药杂志 1997年第1期31卷 42-43页

作者：胡鸿刘玉明孟红宗晓龙李毅恒农业部兰州生物制品厂

水解乳蛋白及酪蛋白对破伤风梭菌产毒力的影响胡鸿刘玉明孟红宗晓龙李毅恒农业部兰州生物制品厂兰州７３００４６在破伤风毒素培养中，用１０％水解乳蛋白制造的产毒培养基（Ⅰ号产毒培养基）进行产毒培养，产毒能力较低，而用酪蛋白消... 详细信息

水解乳蛋白及酪蛋白对破伤风梭菌产毒力的影响胡鸿刘玉明孟红宗晓龙李毅恒农业部兰州生物制品厂兰州７３００４６在破伤风毒素培养中，用１０％水解乳蛋白制造的产毒培养基（Ⅰ号产毒培养基）进行产毒培养，产毒能力较低，而用酪蛋白消化液制造的产毒培养基（Ⅱ号产毒培养...

关键词：水解乳蛋白酪蛋白毒素培养破伤风梭菌产毒力

水解乳蛋白的制备及其在BHK-21细胞培养中的应用研究

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水解乳蛋白的制备及其在BHK-21细胞培养中的应用研究

作者：靳冬武西北民族大学

学位级别：硕士

蛋白水解物(Proteinhydrolysates)是蛋白质经酶、酸、碱等方法水解得到的混合物,其主要成分为肽类,还包含少量氨基酸、糖类、脂类、矿物质和维生素。水解乳蛋白(Lactoalbuminhydrolysate)是一种重要的蛋白水解物,是乳蛋白经蛋白酶或肽... 详细信息

蛋白水解物(Proteinhydrolysates)是蛋白质经酶、酸、碱等方法水解得到的混合物,其主要成分为肽类,还包含少量氨基酸、糖类、脂类、矿物质和维生素。水解乳蛋白(Lactoalbuminhydrolysate)是一种重要的蛋白水解物,是乳蛋白经蛋白酶或肽酶水解的产物,含有丰富的氨基酸和多肽,可为细胞生长提供多种营养成分、贴壁因子及生长因子类似物等,广泛用于生物制药、疫苗、食品等行业。首先,本研究以酪蛋白(Casein)为原料,采用超高压生物反应器结合酶水解的方法,以游离氨基酸含量、水解度、分子量为指标,从胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和胰酶六种不同的酶中筛选出水解酪蛋白最佳的酶。再通过单因素和正交试验对最佳用酶水解酪蛋白的最佳工艺进行了研究,结果表明胰酶水解效果较好,其氨基酸含量达到47.187%。水解度为41.06%,分子量分布在10kD以下。胰酶水解酪蛋白的最佳工艺为底物浓度15%,水解压力为150 MPa,温度为50℃,pH为7.5条件下水解4 h。在该条件下制备的酪蛋白水解产物(Casein hydrolysates,CH)的游离氨基酸含量为52.178%。其次,本研究通过SDS-PAGE、电镜、红外吸收光谱、X射线衍射、氨基酸分析仪、分子筛等方法对CH的理化性质进行了分析,同时以Hyclone水解乳蛋白(Hyclone lactoalbumin hydrolysate,HLH)为对照。结果表明CH的理化性质与HLH的结构极其相似。即形态结构均属于矩阵型;分子量小于10 KD,二级结构主要以α-螺旋和β-转角结构存在;主要含有蛋白质(amid I)、羧基、纤维素、核酸、脂类和多糖;有19种相同的氨基酸,其总含量差异显著(P水解乳蛋白为对照组。结果表明CH,LH35,LH80和HLH四种水解乳蛋白对BHK-21贴壁/悬浮细胞均有明显的促生长效果。CH对BHK-21贴壁细胞促生长效果优于HLH,对BHK-21悬浮细胞的促细胞生长效果与HLH没有明显的差异,但低于LH35和LH80。水解乳蛋白对BHK-21悬浮细胞的生化、酶和氨基酸的代谢均有不同程度的影响。总之,本研究建立了水解乳蛋白制备工艺,按该工艺制备的水解乳蛋白可作为无血清培养基(Serum free medium,SFM)的添加剂,这为酪蛋白的进一步开发利用和蛋白质水解产物在细胞培养中的应用奠定基础。

关键词：酪蛋白水解乳蛋白动物细胞培养 BHK-21细胞

国内外法规对水解乳蛋白在婴幼儿配方食品中使用的规定

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中国食品卫生杂志 2018年第2期30卷 164-168页

作者：王星国家食品药品监督管理总局保健食品审评中心北京100070

目的整理分析国内外对水解乳蛋白在婴幼儿配方食品中的应用规定及研究文献,为该类产品的研发、使用和监管提供参考。方法系统整理国内外水解乳蛋白在婴幼儿配方食品中使用的相关研究、法律法规和临床应用,并结合我国现状进行讨论分析。... 详细信息

目的整理分析国内外对水解乳蛋白在婴幼儿配方食品中的应用规定及研究文献,为该类产品的研发、使用和监管提供参考。方法系统整理国内外水解乳蛋白在婴幼儿配方食品中使用的相关研究、法律法规和临床应用,并结合我国现状进行讨论分析。结果通过整理比较,我国相关法规及标准明确了水解乳蛋白在特殊医学用途婴儿配方食品中使用的技术要求;国际法典委员会和欧盟也对水解乳蛋白在婴儿配方食品中的使用有相应规定;美国虽未出台具体法规,但有大量的权威文献及科学研究资料;中国台湾地区食品标准对水解乳蛋白的使用要求与国际法典委员会一致;澳大利亚/新西兰、日本等国家和地区暂未查询到相关规定。结论我国应当借鉴国际先进经验,加强水解乳蛋白的基础性研究和临床研究,不断完善相关标准、法规和技术要求,促进并规范水解乳蛋白在婴幼儿配方食品中的应用。

关键词：水解乳蛋白婴幼儿配方食品特殊医学用途配方食品致敏蛋白食品安全标准法规

水解乳蛋白和水解酪蛋白对黄独试管苗生长发育的影响

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湖南农业科学 2009年第7期 132-133页

作者：洪森荣尹明华田芸上饶师范学院生命科学系江西上饶334001

通过植物组织培养的方法研究了不同浓度水解乳蛋白和水解酪蛋白对黄独试管苗生长发育的影响。结果表明,随着水解乳蛋白和水解酪蛋白浓度的增加,黄独苗的株高、芽数、芽长、根数和净增鲜重较对照有所降低,当水解乳蛋白和水解酪蛋白浓度... 详细信息

通过植物组织培养的方法研究了不同浓度水解乳蛋白和水解酪蛋白对黄独试管苗生长发育的影响。结果表明,随着水解乳蛋白和水解酪蛋白浓度的增加,黄独苗的株高、芽数、芽长、根数和净增鲜重较对照有所降低,当水解乳蛋白和水解酪蛋白浓度分别达到2%和5%时,黄独试管苗出现毒害现象。

关键词：水解乳蛋白水解酪蛋白黄独试管苗生长发育

植物生长物质和水解乳蛋白对蓖麻再生体系建立的影响

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淮北师范大学学报（自然科学版） 2016年第4期37卷 69-74页

作者：杜雪玲余如刚宋运贤张慧君淮北师范大学生命科学学院安徽省资源植物学重点实验室安徽淮北235000

为筛选蓖麻再生体系建立的最佳配方,本研究以云杂N-2蓖麻种子为供试材料,对蓖麻种子消毒后,取胚轴分别接种在MS(Murashige and Skoog)为基本培养基上,并附加不同浓度的IAA(0.1 mg/L、0.3 mg/L和0.5 mg/L)、6-BA(0.5 mg/L、0.7 mg/L和0.9... 详细信息

为筛选蓖麻再生体系建立的最佳配方,本研究以云杂N-2蓖麻种子为供试材料,对蓖麻种子消毒后,取胚轴分别接种在MS(Murashige and Skoog)为基本培养基上,并附加不同浓度的IAA(0.1 mg/L、0.3 mg/L和0.5 mg/L)、6-BA(0.5 mg/L、0.7 mg/L和0.9 mg/L)及不同浓度水解乳蛋白(0 mg/L、250 mg/L、500 mg/L和750 mg/L),进行愈伤组织培养和分化培养.结果表明:在IAA浓度为0.3 mg/L、6-BA浓度为0.7 mg/L时蓖麻愈伤组织诱导率最高为80%;在IAA和6-BA浓度最适,水解乳蛋白的浓度为500 mg/L时,愈伤组织生长状况最佳,呈淡黄色,褐化程度低;诱导芽增殖的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.02 mg/L NAA,芽的增殖系数达6.15.

关键词：蓖麻植物生长物质水解乳蛋白愈伤组织芽增殖

不同水解乳蛋白培养液对牛环形泰勒焦虫裂殖体寄生细胞生长增殖的对比试验

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宁夏农林科技 2006年第5期47卷 40-40,34页

作者：郑丽侠史哓鲍嘉铭张国玲闫红军马旸旸宁夏农科院畜牧兽医研究所宁夏银川750002

采用不同水解乳蛋白配制的培养液,进行牛环形泰勒焦虫裂殖体寄生细胞培养。结果表明:英国产的OXOID和北京海淀区微生物培养制品厂进口分装的水解乳蛋白均不能用于牛焦虫苗的细胞培养,从北京欣经科公司购入美国产的DIFCO水解乳蛋白为生... 详细信息

采用不同水解乳蛋白配制的培养液,进行牛环形泰勒焦虫裂殖体寄生细胞培养。结果表明:英国产的OXOID和北京海淀区微生物培养制品厂进口分装的水解乳蛋白均不能用于牛焦虫苗的细胞培养,从北京欣经科公司购入美国产的DIFCO水解乳蛋白为生产首选,其次为从上海购入美国产的GIBCOBRL水解乳蛋白。

关键词：水解乳蛋白细胞生长增殖

桑树茎尖培养中碳源、激素、水解乳蛋白的应用

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河北农业科学 2000年第1期4卷 20-23页

作者：张小苹河北省农林科学院蚕桑研究所承德067000

以茎尖为外植体,探讨了碳源、激素和水解乳蛋白在建立桑树无性系中的作用。1.各种碳源在桑树茎尖培养中作用不同。果糖是桑树芽外植体诱导与继代培养的重要碳源。葡萄糖在继代培养中能替代果糖;2.在0.2～1mg/L浓度范围内,培养基中相对提... 详细信息

以茎尖为外植体,探讨了碳源、激素和水解乳蛋白在建立桑树无性系中的作用。1.各种碳源在桑树茎尖培养中作用不同。果糖是桑树芽外植体诱导与继代培养的重要碳源。葡萄糖在继代培养中能替代果糖;2.在0.2～1mg/L浓度范围内,培养基中相对提高IAA浓度,降低6-BA浓度,有利于桑材芽外植体诱导及茎的伸长,反之,有利于丛生芽分化;3.水解乳蛋白能加速试管苗生长,增加芽化能力。

关键词：碳源激素水解乳蛋白组织培养桑树茎尖

芋芽继代培养中激素、水解乳蛋白、碳源的调节研究

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西南农业学报 2006年第5期19卷 928-930页

作者：汤青林牛义王志敏王小佳宋明李启波西南大学园艺园林学院重庆市蔬菜学重点实验室重庆北碚400716 重庆市荣昌县农业局重庆荣昌402406

在继代培养中，为提高芋组培苗的增殖效果，降低组培苗生产成本，获得健壮的芋头组培苗。实验从激素、水解乳蛋白、碳源三个方面研究了其对芋组培芽继代培养的调节作用。结果表明：BA4．0mg／L＋NAA0．1～0．2,mg／L的激素配比有利于芋... 详细信息

在继代培养中，为提高芋组培苗的增殖效果，降低组培苗生产成本，获得健壮的芋头组培苗。实验从激素、水解乳蛋白、碳源三个方面研究了其对芋组培芽继代培养的调节作用。结果表明：BA4．0mg／L＋NAA0．1～0．2,mg／L的激素配比有利于芋芽的增殖，但当NAA的浓度为0．1mg／L时，可大大抑制多次继代后根的发生。不同浓度水解乳蛋白（LH）对芋芽的分化率无显著差异，但添加LH可提高芋芽的生长速度，当LH为500mg／L时，芋苗最高。蔗糖、食用白糖、葡萄糖对芋芽的增殖和生根效果较好，麦芽糖稍差；从降低生产成本度考虑，可选用食用白糖作为芋芽继代培养的碳源。

关键词：芋继代培养激素碳源水解乳蛋白