检索结果-南通市图书馆

中国生物防治学报 2017年第3期33卷 304-312页

作者：黄天宇方琦王桂荣林克剑叶恭银植物病虫害生物学国家重点实验室/中国农业科学院植物保护研究所北京100193 浙江大学昆虫科学研究所/农业部农业昆虫学重点实验室杭州310058

为明确黑尾叶蝉肽聚糖识别蛋白(Nephotettix cincticeps peptidoglycan recognition protein,Nc PGRP)的功能,利用RT-PCR克隆长度为552 bp的Nc PGRP开放阅读框,其编码蛋白大小为19.9 k D,无信号肽,含3个锌离子结合/酰胺酶催化位点,1个... 详细信息

为明确黑尾叶蝉肽聚糖识别蛋白(Nephotettix cincticeps peptidoglycan recognition protein,Nc PGRP)的功能,利用RT-PCR克隆长度为552 bp的Nc PGRP开放阅读框,其编码蛋白大小为19.9 k D,无信号肽,含3个锌离子结合/酰胺酶催化位点,1个二氨基庚二酸型(Dap型)肽聚糖识别位点。系统发育分析表明,Nc PGRP与其他昆虫亲缘关系较远。利用显微注射技术对黑尾叶蝉进行病原细菌诱导,定量PCR结果显示Nc PGRP在受大肠杆菌及藤黄微球菌刺激后,其转录水平显著上调。组织分布研究表明,Nc PGRP的m RNA在各组织中均有表达,且头部表达量最高。黑尾叶蝉取食感染水稻普通矮缩病毒RDV的水稻后,Nc PGRP转录水平受抑制。本文研究表明,Nc PGRP是一种诱导型表达的PGRP,黑尾叶蝉感染RDV能显著抑制其转录,进而削弱黑尾叶蝉免疫能力,这可能有利于RDV与黑尾叶蝉共生。

关键词：黑尾叶蝉肽聚糖识别蛋白水稻普通矮缩病毒表达模式免疫

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Bt水稻-RDV-黑尾叶蝉三者关系的初探

Bt水稻-RDV-黑尾叶蝉三者关系的初探

引用

作者：韩乃顺浙江大学

学位级别：硕士

水稻在生产中面临着水稻病虫害的严重侵袭。近几十年来,水稻普通矮缩病在我国部分地区高发,造成水稻产量的严重损失。2014年我国农业部再次授予转cry1Ab/crylAc水稻华恢1号和汕优63安全证书,允许其在湖北省进行为期五年(2014～2019)的... 详细信息

水稻在生产中面临着水稻病虫害的严重侵袭。近几十年来,水稻普通矮缩病在我国部分地区高发,造成水稻产量的严重损失。2014年我国农业部再次授予转cry1Ab/crylAc水稻华恢1号和汕优63安全证书,允许其在湖北省进行为期五年(2014～2019)的田间生产应用。这预示着中国极有可能成为第一个进行转基因抗虫水稻商业化种植的国家。转基因抗虫水稻-水稻矮缩病病毒.黑尾叶蝉三者之间的关系如何,转基因水稻的广泛种植能否引起水稻病害和虫害的严重发生。本文以转基因抗虫水稻-水稻矮缩病病毒-黑尾叶蝉为研究对象,研究了转cry1C和cry2A基因抗虫水稻对水稻普通矮缩病抗性及其对水稻普通矮缩病介体-黑尾叶蝉生物学特性的影响,以评判转Bt基因水稻是否有引起水稻其他病害和虫害的潜在风险,旨在为转基因水稻的成功商业化及推广提供科学依据;另外,本文还对黑尾叶蝉单雌纯合系的生物学特征与获毒能力随世代变化进行研究,探究黑尾叶蝉纯合系种群难以维持的原因及获毒能力随杂合度的变化趋势。主要结果如下： 1.转Bt基因抗虫水稻对水稻普通矮缩病抗性在非选择条件下,转cry1C和cry2A基因抗虫水稻品系T1C-19和T2A-1的发病率和病情指数均显著高于其亲本对照MH63,而两种转基因水稻品系间的发病率和病情指数无显著差异。在选择条件下,T2A-1的抗性最强,发病率和病情指数较另两个品系显著降低。取食选择性结果表明,感染RDV的黑尾叶蝉对三种水稻的定向反应存在一定差异,接虫后2小时内,感染RDV的黑尾叶蝉对各品系的偏好性无显著差异;随着取食时间的延长,感染RDV的黑尾叶蝉对T1C-19及亲本MH63的偏好性均显著高于T2A-1,而对T1C-19及亲本MH63间的偏好性无显著差异。 2.感染RDV的转Bt基因抗虫水稻对黑尾叶蝉生物学特征的影响水稻类型(Bt vs non-Bt)对黑尾叶蝉卵历期、若虫发育历期、成虫初羽化鲜重和产卵量均有显著影响,其中转Bt基因水稻较亲本MH63：卵历期和产卵量降低、若虫发育历期增加、T1C-19成虫初羽化鲜重降低、T2A-1雄成虫初羽化鲜重降低而雌成虫初羽化鲜重增加。 RDV病毒(RDV vs non-RDV)对黑尾叶蝉卵历期、若虫存活率、雄成虫初羽化鲜重、雄成虫寿命和产卵量均有显著影响,其中MH63感染RDV后：卵历期、若虫存活率、雌成虫初羽化鲜重、雄成虫寿命和产卵量均升高;T1C-19感染RDV后：卵历期缩短,而若虫存活率、雌成虫初羽化鲜重、雄成虫寿命和产卵量均升高。T2A-1感染RDV后：卵历期、若虫存活率、雄成虫寿命和产卵量均升高,而雌虫初羽化鲜重降低。转Bt基因与RDV二者综合因素只对黑尾叶蝉雄成虫寿命有显著影响,而对其他生物学参数影响不显著。 3.黑尾叶蝉单雌纯合系的生物学参数及获毒能力引起黑尾叶蝉种群随种群杂合度降低而降低的主要因素是卵的孵化率和若虫存活率的显著降低,其他生物学特征随种群杂合度的降低无显著变化规律。获毒能力随种群杂合度的降低而显著下降。

关键词： Bt水稻黑尾叶蝉水稻普通矮缩病毒生物学参数单雌纯合系

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

黑尾叶蝉NcPGRP基因克隆及RDV感染对其转录水平的影响

黑尾叶蝉NcPGRP基因克隆及RDV感染对其转录水平的影响

引用

作者：黄天宇中国农业科学院

学位级别：硕士

黑尾叶蝉Nephotettix cincticeps(Uhler)属于半翅目叶蝉科,是我国水稻上重要害虫之一。黑尾叶蝉除刺吸取食水稻汁液为害外,还能传播水稻矮缩病毒(rice dwarf virus,RDV),对水稻造成了严重危害。昆虫先天免疫是昆虫防御病原微生物的首道... 详细信息

黑尾叶蝉Nephotettix cincticeps(Uhler)属于半翅目叶蝉科,是我国水稻上重要害虫之一。黑尾叶蝉除刺吸取食水稻汁液为害外,还能传播水稻矮缩病毒(rice dwarf virus,RDV),对水稻造成了严重危害。昆虫先天免疫是昆虫防御病原微生物的首道防线,而肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition protein,PGRP)则是昆虫免疫系统中的重要免疫识别蛋白,在昆虫产生抗菌肽等免疫物质的过程中起到重要调控作用。黑尾叶蝉作为RDV的介体昆虫,目前关于RDV对黑尾叶蝉免疫能力影响的相关报道较少。本文通过转录组分析,得到数个黑尾叶蝉PGRPs基因,筛选出其中转录水平被RDV所抑制的PGRPs,通过基因克隆及原核表达研究NcPGRP分子特性和蛋白特性,利用定量PCR和RNAi技术研究NcPGRP在黑尾叶蝉免疫反应中的功能。主要研究内容如下:1.以各常见昆虫PGRP基因作为参考序列,通过本地blast从黑尾叶蝉转录组数据中筛选到12个E值(E-Value)较高的PGRPs基因。利用定量PCR检测感染RDV黑尾叶蝉体内各PGRPs的表达量,筛选出3个转录水平会受到RDV抑制的PGRPs基因。***基因克隆结果显示,NcPGRP基因开放阅读框大小为552 bp,预测蛋白大小约19.9 kDa,等电点(pI)为7.29,N端无信号肽,154位氨基酸为跨膜结构域,含3个锌离子结合/酰胺酶催化位点,1个二氨基庚二酸型(Dap型)肽聚糖识别位点。系统发育分析表明,NcPGRP与其他昆虫亲缘关系较远。组织分布研究表明,NcPGRP基因的mRNA在各组织中均有表达,且头部表达量最高。3.利用黑尾叶蝉NcPGRP基因序列构建重组表达载体,并在大肠杆菌Rosetta菌株中进行诱导表达。结果显示NcPGRP蛋白大小约20 kDa。利用其氨基酸序列制作多肽抗体。Western blot检测结果表明黑尾叶蝉体内NcPGRP蛋白的表达量很低。4.利用显微注射技术对黑尾叶蝉进行病原细菌感染,定量PCR结果显示,NcPGRP的转录水平在大肠杆菌Escherichia coli DH 及藤黄微球菌Micrococcus luteus感染叶蝉后显著上调,且两种病原细菌上调NcPGRP转录水平的能力没有显著差异。成虫羽化后NcPGRP转录水平逐渐上升,在羽化后第10天达到峰值,后开始逐渐下降。黑尾叶蝉在取食感染水稻普通矮缩病毒RDV的水稻后,NcPGRP转录水平受抑制。使用dsPGRP对黑尾叶蝉进行RNA干扰,当注射剂量为10 ng时,NcPGRP的沉默效果最为显著,且持续时间最长,然后分别用两种病原菌对RNA干扰后的虫体进行感染。结果显示,与对照相比,大肠杆菌*** DH和藤黄微球菌***均没有显著提高黑尾叶蝉的死亡率,并且两种病原细菌对黑尾叶蝉的致死能力也没有显著差异。

关键词：黑尾叶蝉水稻普通矮缩病毒肽聚糖识别蛋白免疫反应表达模式

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：