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基于斑马鱼模型的补骨脂不同炮制品水提物急性毒性及肝毒性差异比较

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中草药 2024年第1期55卷 101-113页

作者：赵竟成李治建霍仕霞祖力皮卡尔·吾斯曼钟雅韵张数数高姝燕麦丽克姆·麦图如孜张云新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830011 新疆维吾尔自治区维吾尔医医院新疆乌鲁木齐830049 齐鲁工业大学(山东省科学院) 山东省科学院生物研究所山东济南250103 山东省人类疾病斑马鱼模型与药物筛选工程技术研究中心山东济南250103

目的根据历代医籍和本草记载的炮制方法,对比补骨脂Psoraleae Fructus不同炮制品水提物的急性毒性和肝毒性差异,为补骨脂的炮制方法使用提供参考。方法采用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱和标准曲线法对补骨脂生品和补骨脂不同炮制... 详细信息

目的根据历代医籍和本草记载的炮制方法,对比补骨脂Psoraleae Fructus不同炮制品水提物的急性毒性和肝毒性差异,为补骨脂的炮制方法使用提供参考。方法采用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱和标准曲线法对补骨脂生品和补骨脂不同炮制品水提物进行补骨脂素和异补骨脂素的含量测定,并以AB野生型斑马鱼、Tg(lfabp:EGFP)肝脏细胞绿色荧光标记转基因斑马鱼和Tg(lysc:DsRed2)中性粒细胞红色荧光标记转基因斑马鱼为实验动物模型,给予补骨脂生品和补骨脂不同炮制品的水提物通过观察补骨脂不同炮制品对斑马鱼的半数致死浓度(median lethal concentration,LC50)、最小致死浓度(minimum lethal concentration,LC1)、斑马鱼形态变化、畸形评分等的影响,比较补骨脂不同炮制品的急性毒性差异。通过观察不同给药组对斑马鱼肝脏荧光强度、肝脏面积和体积、肝脏病理切片情况、肝脏区域中性粒细胞数量的影响,以及检测炎症相关基因的m RNA水平变化情况,综合评价补骨脂不同炮制品的肝毒性差异。结果补骨脂不同炮制品水提物中补骨脂素和异补骨脂素含量存在差异,补骨脂生品中补骨脂素和异补骨脂素含量最高,雷公法制品中异补骨脂素含量最低,清炒法制品中补骨脂素含量最低。补骨脂不同炮制品水提物急性毒性存在差异,补骨脂生品水提物会导致斑马鱼出现严重的急性毒性,表现为出现心包水肿、脊柱弯曲、鱼鳔消失、卵黄囊吸收延滞,而不同炮制品中补骨脂雷公法制品的急性毒性减毒效果最优,补骨脂酒炙法制品、补骨脂盐炙法制品和补骨脂清炒法制品急性毒性的减毒效果依次减弱。补骨脂生品水提物会导致斑马鱼出现严重的肝脏毒性,包括肝脏结构缺失、肝脏荧光强度减弱、肝脏荧光面积和体积减少、肝脏细胞间出现空泡化,并导致肝脏区域的中性粒细胞聚集,上调炎症相关因子表达水平。基于斑马鱼模型不同炮制法中补骨脂雷公法的肝脏毒性减毒效果最优,补骨脂酒炙法和补骨脂清炒法肝毒性的减毒效果依次减弱,而补骨脂盐炙法则增强肝脏毒性毒效果。结论不同炮制法对补骨脂急性毒性均有减毒作用,这可能与补骨脂素和异补骨脂素含量的减少有关,对肝毒性的影响存在差异。基于斑马鱼模型雷公法炮制对急性毒性和肝毒性的减毒效果最佳,且通过减少肝脏区域炎症发生和中性粒细胞的聚集减轻了补骨脂的肝毒性,而盐炙法则增加肝脏区域炎症发生和中性粒细胞聚集加重肝毒性。

关键词：补骨脂炮制品水提物急性毒性肝毒性斑马鱼炎症补骨脂素异补骨脂素

基于烟草水提物的Maillard反应产物影响因素

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烟草科技 2022年第3期55卷 39-49页

作者：徐秀娟茅中一杨春强伊勇涛周培琛胡军谢金栋史清照张峰中国烟草总公司郑州烟草研究院郑州450001 福建中烟工业有限责任公司技术中心福建省厦门市361021

为充分利用烟叶资源,提高其使用价值,以亚临界萃取后的烟叶残渣为原料制备了烟草水提物,利用GC-MS法对Maillard反应产物进行定量分析,系统探讨了氨基酸种类及用量、反应时间对Maillard反应产物化学组成及卷烟感官质量的影响;并探讨了Mai... 详细信息

为充分利用烟叶资源,提高其使用价值,以亚临界萃取后的烟叶残渣为原料制备了烟草水提物,利用GC-MS法对Maillard反应产物进行定量分析,系统探讨了氨基酸种类及用量、反应时间对Maillard反应产物化学组成及卷烟感官质量的影响;并探讨了Maillard反应产物中的18种成分与卷烟感官指标的相关关系。结果表明:(1)谷氨酸和天冬氨酸的Maillard反应产物与水提物自身的Maillard反应相似,以5-羟甲基糠醛为主,其次为羟基丙酮、2-乙酰基吡咯;脯氨酸参与的反应产物则以羟基丙酮、糠醇和5-羟甲基糠醛为主。(2)以感官作用为依据,基于烟草水提物Maillard反应的最佳条件为还原糖(以葡萄糖计)与谷氨酸的摩尔比n还原糖:n谷氨酸=1:0.5、反应温度110℃、反应时间2 h。(3)18种成分中,2-甲基四氢呋喃-3-酮与烟气浓度相关关系密切,糠醛、5-甲基糠醛、2-呋喃基羟基甲基酮和5-羟甲基糠醛与透发性关系密切,羟基丙酮和3-甲基-1,2-环戊二酮与烘焙香关系密切。

关键词：烟草水提物 Maillard反应氨基酸还原糖感官评价相关分析

基于磷酸二酯酶抑制活性的清金化痰汤抗炎活性评价方法建立

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中国实验方剂学杂志 2022年第15期28卷 15-20页

作者：肖顺丽孙正霄刘陆张琼玲丁世兰许静廖福龙游云中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:基于磷酸二酯酶(PDE)抑制活性,建立清金化痰汤抗炎活性测定方法,补充与完善该经典名方的质量控制体系。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)建立PDE活性测定方法,考察清金化痰汤抑制PDE活性的量效关系,流动相甲醇-0.5%乙酸水溶液(5∶95)... 详细信息

目的:基于磷酸二酯酶(PDE)抑制活性,建立清金化痰汤抗炎活性测定方法,补充与完善该经典名方的质量控制体系。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)建立PDE活性测定方法,考察清金化痰汤抑制PDE活性的量效关系,流动相甲醇-0.5%乙酸水溶液(5∶95),检测波长254 nm。通过测定多批清金化痰汤水提物冻干粉对PDE的抑制率,以中和酶的活性国际单位U标示其生物活性。结果:选择4 U·m L^(-1)PDE溶液,在反应底物环磷酸腺苷(c AMP)浓度为50μmol·L^(-1)、反应时间为60 min时,酶促反应稳定。在此反应体系下,当清金化痰汤水提物冻干粉终质量浓度为0.11~3.0 g·L^(-1)时,其对PDE的抑制作用呈现浓度依赖性。确定清金化痰汤水提物冻干粉待检质量浓度1 g·L^(-1),在该质量浓度下对PDE呈显著且稳定抑制作用,抑制率>45%,即1 mg的清金化痰汤水提物冻干粉至少可中和1.8 U PDE的活性。结论:建立了基于PDE抑制活性的清金化痰汤生物活性评价方法,以PDE活性国际单位U表征了清金化痰汤的抗炎活性,可为中药复方生物活性测定研究提供新方法。

关键词：清金化痰汤水提物经典名方磷酸二酯酶(PDE) 高效液相色谱法(HPLC) 生物活性质量控制

黄精超微粉及水提物对自然围绝经期综合征模型大鼠的作用研究

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中国中药杂志 2023年第4期48卷 1054-1065页

作者：陈思敏苏洁金小虎郑佳亿颜美秋俞静静吴雯琰施梦琳陈素红吕圭源浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 浙江工业大学浙江杭州310014

该实验将观察黄精超微粉及水提物对自然围绝经期综合征模型大鼠的作用,并探讨其可能的作用机制。将14~15月龄雌性SD大鼠经阴道涂片,筛选出60只动情周期紊乱的大鼠,随机分为6组,即模型对照组、苯甲酸雌二醇组(0.1 mg·kg-1)、黄精超微粉... 详细信息

该实验将观察黄精超微粉及水提物对自然围绝经期综合征模型大鼠的作用,并探讨其可能的作用机制。将14~15月龄雌性SD大鼠经阴道涂片,筛选出60只动情周期紊乱的大鼠,随机分为6组,即模型对照组、苯甲酸雌二醇组(0.1 mg·kg-1)、黄精超微粉组(0.25、0.5 g·kg^(-1))、黄精水提物组(0.25、0.5 g·kg^(-1)),另设10只6~7月龄雌性SD大鼠为青年对照组,连续给药6周,测定体温、耳面部微循环血流量、眩晕时间、唾液分泌量、抓力、骨强度、旷场实验等围绝经期综合征症状相关指标;检测胸腺和脾脏湿重及系数、外周血T淋巴细胞及其亚群占比、血液学指标等免疫系统相关指标;检测动情周期、子宫、卵巢湿重及系数、卵巢组织形态学及细胞凋亡情况等卵巢相关指标;检测血清性激素水平、卵巢组织中细胞色素P450-11A1(CYP11A1)、芳香化酶(CYP19A1)、细胞色素P450-17A1(P45017A1)蛋白表达等下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPO)相关指标。结果显示,黄精超微粉及水提物能显著降低围绝经期大鼠体温(肛、面、背温),耳部微循环血流量,眩晕时间,增加唾液分泌量、抓力、骨强度、旷场中水平运动总距离及总速度;显著升高胸腺和脾脏湿重及系数、淋巴细胞比率、CD3^(+)水平、CD4^(+)/CD8^(+)比值,减少中性粒细胞数量及比率;显著降低动情周期紊乱比率、血清促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)含量,改善卵巢组织形态及细胞凋亡情况,增加子宫湿重及系数、卵巢湿重、血清抑制素B(inhibin B,INHB)、雌二醇(estradiol,E2)、抗缪勒管激素(anti-müllerian hormone,AMH)含量及卵巢CYP11A1、CYP19A1蛋白表达。提示黄精超微粉及水提物能够改善自然围绝经期综合征模型大鼠相关症状,并能改善卵巢功能和提高免疫功能,其作用机制可能与促进雌激素合成从而调节HPO轴功能有关。

关键词：黄精超微粉水提物围绝经期综合征雌激素合成

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胃肠安丸对大鼠离体回肠平滑肌收缩的影响

中国药理学通报 2023年第9期39卷 1774-1781页

作者：王娜陆兴玥高盼微贾思童王怡苗琳张晗柴丽娟天津中医药大学中医药研究院天津市中药药理重点实验室天津301617

目的研究胃肠安丸(Weichang′an pill,WCA)、胃肠安丸醇提物(Ethanol extract of Weichang′an pill,EE)、胃肠安丸水提物(Water extract of Weichang′an pill,WE)及其活性成分对乙酰胆碱(Acetylcholine,ACh)诱导的大鼠离体回肠平滑肌收缩的影响及机制。方法采用离体组织浴实验,在ACh的作用下,加入WCA、EE、WE或其活性成分,记录离体大鼠回肠平滑肌的收缩张力;通过分子对接的方法探究活性成分与毒蕈碱型乙酰胆碱M3受体的结合亲和力。结果WCA、EE、WE均可明显抑制ACh诱导的回肠平滑肌兴奋性收缩。活性成分木香烃内酯、去氢木香内酯、檀香醇、麝香酮、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、巴豆苷、厚朴酚及和厚朴酚也对ACh诱导的回肠平滑肌收缩有明显的抑制作用。结论WCA、EE、WE及其活性成分可能通过阻断回肠平滑肌细胞膜上的M3受体与ACh的结合,发挥促进肠平滑肌松弛的作用。

关键词：胃肠安丸醇提物水提物活性成分回肠平滑肌 ACh

HPLC测定灵芝子实体水提物及相关产品中三萜的含量

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菌物学报 2022年第2期41卷 309-317页

作者：梁锐冯娜张劲松李振皓李明焱张国亮徐靖王金艳唐庆九上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江金华321200

灵芝药品大多以灵芝子实体水提物为原料,为快速准确测定灵芝子实体水提物及相关产品中三萜的含量,建立了具有较好分离效果的HPLC分析测定方法。通过优化色谱柱和洗脱条件,优选出Agilent Zorbax SB-Aq C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),... 详细信息

灵芝药品大多以灵芝子实体水提物为原料,为快速准确测定灵芝子实体水提物及相关产品中三萜的含量,建立了具有较好分离效果的HPLC分析测定方法。通过优化色谱柱和洗脱条件,优选出Agilent Zorbax SB-Aq C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-乙酸水溶液(0.01%)为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长252 nm,柱温30℃,该条件下灵芝酸A、灵芝酸F等10种灵芝酸得到较好的分离。方法学考察显示该分析方法精密度、重复性、稳定性和加样回收率的RSD值均小于5%,可以用于灵芝酸C2、灵芝酸G、灵芝烯酸B、灵芝酸B等10种灵芝酸的定量检测。通过对灵芝子实体原料、水提物和市售灵芝产品中10种三萜类成分分析发现,灵芝子实体水提物中均含有这10种三萜,含量为2.52%–6.83%,较子实体原料大幅提高,市售的灵芝产品中的三萜含量为0.27%–0.84%。该方法的建立为灵芝水提物及其产品质量标准的建立奠定基础。

关键词：灵芝水提物三萜高效液相色谱

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款冬花水提物对肥胖小鼠糖脂代谢的影响

中国现代应用药学 2023年第16期40卷 2210-2215页

作者：韩毅丽邓凡莹王文慧郭福贵王艳贺润丽山西中医药大学山西晋中030619 山西省现代中药工程重点实验室山西晋中030619

目的研究款冬花水提物对肥胖小鼠血脂血糖的调节作用。方法采用化学方法对款冬花水提物成分进行鉴定;用紫外可见分光光度法测定款冬花水提物中总萜的含量;将小鼠随机分为空白组,模型组,奥利司他组以及款冬花水提物低、中、高剂量组,空... 详细信息

目的研究款冬花水提物对肥胖小鼠血脂血糖的调节作用。方法采用化学方法对款冬花水提物成分进行鉴定;用紫外可见分光光度法测定款冬花水提物中总萜的含量;将小鼠随机分为空白组,模型组,奥利司他组以及款冬花水提物低、中、高剂量组,空白组给予普通饲料喂养,其余各组采用高脂高糖饲料喂养制备肥胖动物模型,边造模边给药45 d。实验结束后,检测血清中甘油三酯(triglyceride,TG)、胆固醇(cholesterol,CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(highdensity lipoprotein-C,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-C,LDL-C)、葡萄糖(glucose,GLU)、糖化血清蛋白(glycosylatedserum protein,GSP)含量,采用苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察小鼠肝脏组织形态变化和脂滴分布。结果款冬花水提物含有黄酮类和萜类化合物;与空白组相比,模型组TG、CHO、LDL-C、GLU、GSP水平显著升高(P水提组均能显著降低TG、LDL-C、CHO、GLU、GSP,升高HDL-C,减少脂滴的蓄积,给药各组血脂血糖状况均较模型组显著降低,其中款冬花水提物高剂量组效果最好。结论款冬花水提物能够通过降低血脂、CHO,改善肝脏组织病理形态,起到改善肥胖小鼠糖脂代谢的作用。

关键词：款冬花水提物糖脂代谢肥胖

不同松花粉提取物对环磷酰胺诱导大鼠卵巢损伤的保护作用

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食品科学 2023年

作者：刘其耸陈阳杨长军何毓婕陈秋铭何志勇王召君陈洁曾茂茂烟台新时代健康产业有限公司食品科学与资源挖掘全国重点实验室江南大学

环磷酰胺是临床上针对多种肿瘤及自身免疫性疾病应用较为广泛的一种烷化剂药物，会造成患者卵巢损伤，严重至不育及危害终身健康。松花粉作为我国传统的药食两用物质，其全粉已被证实具有对环磷酰胺诱导的卵巢损伤的保护作用。然而，松... 详细信息

环磷酰胺是临床上针对多种肿瘤及自身免疫性疾病应用较为广泛的一种烷化剂药物，会造成患者卵巢损伤，严重至不育及危害终身健康。松花粉作为我国传统的药食两用物质，其全粉已被证实具有对环磷酰胺诱导的卵巢损伤的保护作用。然而，松花粉中对卵巢损伤起到保护作用的主要成分尚不明确。本文通过制备松花粉水提物、水提大分子化合物（> 5 kDa）、乙醇提物和乙醇提小分子化合物（物中的总糖、粗多糖、总酚和总黄酮含量，并考察了其对摄入环磷酰胺的SD大鼠的卵巢保护作用。结果表明，相对模型组，松花粉乙醇提物及乙醇提小分子化合物组有效提升了卵巢指数（分别相对提升了34.94%和33.70%）、成熟卵泡数量、卵巢抗氧化酶活力（T-AOC、CAT、GSH-Px和SOD分别相对提升了16.03%、25.81%，138.42%、237.09%，104.31%、109.90%和91.62%、120.63%）和抗细胞凋亡蛋白表达，及抑制闭锁卵泡和卵巢脂质氧化（MDA分别相对降低了53.42%和48.43%）等，效果优于松花粉水提物及水提大分子化合物组，但松花粉水提物及水提大分子化合物可以通过降低促炎因子TNF-α（分别相对降低了61.73%和61.11%）保护卵巢。本研究可为进一步探明松花粉的卵巢保护作用机制提供理论基础，为开发基于松花粉提取物的新产品提供技术指导。

关键词：松花粉水提物乙醇提物水提大分子化合物乙醇提小分子化合物卵巢损伤

绞股蓝水提物对科宝肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质和气味组分的影响

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同方期刊数据库

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动物营养学报 2023年第4期35卷 2209-2219页

作者：胡建胡忠泽安徽科技学院动物科学学院凤阳233100

本试验旨在探究绞股蓝水提物(GPW)对科宝肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质和气味组分的影响。试验将300只1日龄科宝肉鸡分为5组,组内设6个重复,每个重复10只。空白对照组(CT组)饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加0.5%、1.0%、2.0%... 详细信息

本试验旨在探究绞股蓝水提物(GPW)对科宝肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质和气味组分的影响。试验将300只1日龄科宝肉鸡分为5组,组内设6个重复,每个重复10只。空白对照组(CT组)饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加0.5%、1.0%、2.0%、4.0%GPW,连续饲喂42 d。试验结束后,测定肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质和气味组分。结果表明:1)与CT组相比,添加2.0%GPW可以显著降低肉鸡平均日采食量(P物、有机硫化物类芳香成分、醇类和醛酮产生不同响应,即添加2.0%、4.0%的GPW使鸡肉香气更加浓郁。综上所述,GPW可以提高肉鸡的生长性能、屠宰性能,改善肉品质及气味组分,以添加2.0%GPW效果最佳。

关键词：绞股蓝水提物生长性能屠宰性能肉品质气味组分