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氯胺t法测定羟脯氨酸含量的方法改进

海军总医院学报 1995年第2期8卷 116-117页

作者：金博李玉彬王援朝王立秋海军总医院传染科

胶原蛋白是人体内含量最丰富的蛋白质,约占体内总蛋白的1/3.许多疾病都与胶原代谢有关,例如肝纤维化、肺纤维化、系统性硬化等.羟脯氨酸是胶原特有的氨基酸,其含量可代表胶原的多少.但传统的测定方法测定范围窄.结果不稳定.对此,我们进... 详细信息

胶原蛋白是人体内含量最丰富的蛋白质,约占体内总蛋白的1/3.许多疾病都与胶原代谢有关,例如肝纤维化、肺纤维化、系统性硬化等.羟脯氨酸是胶原特有的氨基酸,其含量可代表胶原的多少.但传统的测定方法测定范围窄.结果不稳定.对此,我们进行了部分改进.材料与方法一。

关键词：生物化学检验羟脯氨酸氯胺t法

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氯胺t法测定羟脯氨酸含量的方法改进

陕西医学检验 1994年第3期9卷 176-176页

作者：金博李玉彬王援朝王立秋海军总医院传染科北京100037

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^(131)I标记槲皮素的方法

中国老年学杂志 2014年第17期34卷 4874-4877页

作者：魏凯李悦张苗苗王博崔亚利哈尔滨医科大学附属第三临床医学院黑龙江哈尔滨150081

目的探索131I标记槲皮素的方法并对其相关实验进行研究。方法用氯胺t法对槲皮素进行131I标记,对标记产物用薄层色谱法分析其标记率及放化纯,产物于37℃温育以观察其体外稳定性,用甲状腺癌细胞FtC-133/8505C观察其生物活性。结果氯胺t法... 详细信息

目的探索131I标记槲皮素的方法并对其相关实验进行研究。方法用氯胺t法对槲皮素进行131I标记,对标记产物用薄层色谱法分析其标记率及放化纯,产物于37℃温育以观察其体外稳定性,用甲状腺癌细胞FtC-133/8505C观察其生物活性。结果氯胺t法为最佳标记方法,标记率达96.5%,放化纯达98.3%。产物在体外稳定。结论用氯胺t法对Qu进行131I标记简单高效,稳定性好,且标记产物生物活性未受到明显破坏。

关键词： 131I 槲皮素氯胺t法放射性核素标记

蛋清高F值寡肽对受试小鼠皮肤中羟脯氨酸含量影响的研究

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食品科学 2008年第11期29卷 612-615页

作者：王世巍刘静波王莹张文博高鑫林松毅吉林大学军需科技学院营养与功能食品研究室吉林长春130062

蛋清高F值寡肽就是一种由2～5个氨基酸残基所组成的混合小肽体系,已知具有辅助治疗肝性脑病,抗疲劳、耐缺氧、降血脂等生理功能。本实验主要针对蛋清高F值寡肽是否对小鼠皮肤中羟脯氨酸含量存在影响进行实验研究,综合分析了不同浓度蛋清... 详细信息

蛋清高F值寡肽就是一种由2～5个氨基酸残基所组成的混合小肽体系,已知具有辅助治疗肝性脑病,抗疲劳、耐缺氧、降血脂等生理功能。本实验主要针对蛋清高F值寡肽是否对小鼠皮肤中羟脯氨酸含量存在影响进行实验研究,综合分析了不同浓度蛋清高F值寡肽液对小鼠灌胃30d和90d的小鼠皮肤中羟脯氨酸含量的变化。研究发现:不同浓度蛋清高F值寡肽均可以明显提高受试小鼠皮肤中羟脯氨酸含量,其中浓度为10%的蛋清高F值寡肽液无论是对灌胃30d还是灌胃90d的小鼠皮肤中羟脯氨酸含量影响都是极显著。

关键词：蛋清高F值寡肽羟脯氨酸氯胺t法

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^(125)I标记紫杉醇的方法

同位素 2008年第2期21卷 82-87页

作者：汪梅花许玉杰王宗站刘敏李智慧翁婉雯范我苏州大学放射医学与公共卫生学院基础核医学教研室江苏苏州215123

采用改良的氯胺t法,先用稳定的NaI与紫杉醇(Paclitaxel)作用,再以放射性Na125I标记紫杉醇,建立125I标记紫杉醇的方法。采用纸层析及HPLC测定标记产物的标记率、纯化后的放化纯度,采用纸层析法测定标记产物在不同温度及不同的储存溶剂中... 详细信息

采用改良的氯胺t法,先用稳定的NaI与紫杉醇(Paclitaxel)作用,再以放射性Na125I标记紫杉醇,建立125I标记紫杉醇的方法。采用纸层析及HPLC测定标记产物的标记率、纯化后的放化纯度,采用纸层析法测定标记产物在不同温度及不同的储存溶剂中的体外稳定性,红外光谱鉴定产物。结果显示,采用改良氯胺t法标记率约63.1%±5.7%,放化纯度约96.3%±1.3%;标记物储存于4℃生理盐水或乙醇储存体系中241、20 h,放化纯度分别>95%和约90%;在血浆中稳定性也较好,在4、37℃放置24 h,放化纯度分别为92.3%±0.4%、89.5%±0.6%。以上结果表明,改良氯胺t法标记紫杉醇具有方法简便、标记率高、标记产物稳定性较好的特点,能够满足放射性示踪实验的要求。

关键词： ^125I 氯胺t法紫杉醇

胶原在胎兔、成兔正常发育及创伤愈合过程中的变化

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第四军医大学学报 2003年第22期24卷 2097-2099页

作者：李望舟石冰柳大烈第四军医大学唐都医院整形外科陕西西安710038 第一军医大学珠江医院整形外科广东广州511400

目的 :为了探索胎兔及成兔在正常发育及创伤愈合过程中胶原合成特点 ,分析胎儿型及成年型创伤愈合差别的原因 .方法 :用胃蛋白酶对胎兔及成兔皮肤的胶原进行提取 ,用酸水解法使胶原水解 ,采用氯胺t法进行羟脯氨酸 (HP)测定 .结果 :①正... 详细信息

目的 :为了探索胎兔及成兔在正常发育及创伤愈合过程中胶原合成特点 ,分析胎儿型及成年型创伤愈合差别的原因 .方法 :用胃蛋白酶对胎兔及成兔皮肤的胶原进行提取 ,用酸水解法使胶原水解 ,采用氯胺t法进行羟脯氨酸 (HP)测定 .结果 :①正常成兔的HP含量明显高于正常胎兔 ,而正常胎兔不同孕期之间却无差别 .②胎兔皮肤创伤后 (1～ 6d)与对应的正常胎兔相比 ,只表现出第 1dHP显著增高 .③成兔皮肤创伤后与正常成兔相比 ,除第 1日无差别外 ,后 5dHP显著增高 .④胎兔皮肤创伤后HP动态变化呈现线性下降趋势 ,而成兔呈现线性上升趋势 .结论 :成兔皮肤合成胶原的能力高于胎兔皮肤 ;创伤后 ,胎兔及成兔均表现出胶原合成增加 ,而前者持续短暂 ,预示着愈合迅速 ;而后者持续增高。

关键词：羟脯氨酸胎兔成兔正常发育创伤愈合胶原氯胺t法胚胎

抗ProGRP_((31-98))单克隆抗体D-D_3的^(131)I标记及其体内生物学分布研究

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重庆医学 2011年第8期40卷 752-754页

作者：陈传新石怡珍杨仪唐军刘增礼徐巧玲苏州大学附属第二医院核医学科江苏苏州251004 安徽省马鞍山市中心医院影像中心 243000 江苏省无锡市第四人民医院核医学科 214062

目的探讨抗胃泌素释放肽前体(ProGRP)(31-98)单克隆抗体D-D3的131I标记方法及其在健康昆明小鼠体内的生物学分布规律与特点。方法采用氯胺-t法用131I标记单克隆抗体D-D3,利用纸层析法测定其标记率、放化纯度和稳定性。取健康昆明小鼠50... 详细信息

目的探讨抗胃泌素释放肽前体(ProGRP)(31-98)单克隆抗体D-D3的131I标记方法及其在健康昆明小鼠体内的生物学分布规律与特点。方法采用氯胺-t法用131I标记单克隆抗体D-D3,利用纸层析法测定其标记率、放化纯度和稳定性。取健康昆明小鼠50只,随机分为10组,每组5只,自昆明小鼠尾静脉注射131I-D-D31.48 kBq/100μL(4μCi/100μL),各组小鼠分别于注射后5、153、0 min及1、2、4、8、12、244、8 h处死,取血液、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、小肠、骨骼(右下肢)、肌肉(右下肢)和脑组织,称质量(g)后测放射性计数(cpm),计算各脏器组织的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)及药物动力学参数。结果 131I-D-D3标记率为(86.56±3.8)%,比活度为(2.25±0.05)MBq/μg,放化纯度为(99.27±0.6)%,标记物置于37℃水浴箱放置48 h后的放化纯度为(88.38±0.4)%,与鼠血清充分混合后24 h的放化纯度为(64.43±0.7)%1。31I-D-D3在健康昆明小鼠体内代谢过程符合一级血药动力学二室模型,代谢公式为c=50.234e-2.793t+26.128e-0.018t,t1/2α=0.25 h,t1/2β=37.89 h,在体内主要通过肾脏和肝脏代谢,血液清除较快,胃、肠等组织摄取稍多,脑、肌肉、心脏等组织摄取较少。结论 131I-D-D3标记率及放化纯度高,在体内、外有很好的稳定性。

关键词：碘放射性同位素胃泌素释放肽前体ProGPP(31-98) 单克隆抗体D-D3 氯胺t法

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碱性成纤维细胞生长因子的放射免疫分析

白求恩医科大学学报 1999年第4期25卷 339-340页

作者：张萱张铭李凤兰马晓辉卫生部放射生物重点实验室长春130021

目的：建立及评价碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的１２５Ⅰ标记及放射免疫分析（ＲＩＡ）方法。方法：采用氯胺Ｔ氧化法进行ｂＦＧＦ１２５Ⅰ标记，并以双抗体 ＰＥＧ的ＲＩＡ测定家兔血清ｂＦＧＦ水... 详细信息

目的：建立及评价碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的１２５Ⅰ标记及放射免疫分析（ＲＩＡ）方法。方法：采用氯胺Ｔ氧化法进行ｂＦＧＦ１２５Ⅰ标记，并以双抗体 ＰＥＧ的ＲＩＡ测定家兔血清ｂＦＧＦ水平。结果：１２５Ⅰ标记ｂＦＧＦ的碘利用率为８１９８％，比放射性为３０３ＭＢｑ／μｇ，放化纯度达９５０％以上；ｂＦＧＦ放免分析灵敏度可达０４ｎｇ。结论：本研究为ｂＦＧＦ的１２５Ⅰ标记及定量测定提供了简便可靠的方法。

关键词： bFGF 氯胺t法放射免疫分析

抗人共刺激分子B7-2单克隆抗体的免疫放射分析试剂盒的研制及应用研究

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抗人共刺激分子B7-2单克隆抗体的免疫放射分析试剂盒的研制及应用...

作者：文正伟苏州大学

学位级别：硕士

目的建立稳定的单克隆抗体6C8的125I标记方法;固相抗体6A5包被试管法;人血清中可溶性B7-2分子的免疫放射检测方法学的建立并初步探讨其临床意义。方法应用氯胺t法125I标记单克隆抗体6C8及标记抗体的纯化;纸层析法检测标记率和放化纯;活... 详细信息

目的建立稳定的单克隆抗体6C8的125I标记方法;固相抗体6A5包被试管法;人血清中可溶性B7-2分子的免疫放射检测方法学的建立并初步探讨其临床意义。方法应用氯胺t法125I标记单克隆抗体6C8及标记抗体的纯化;纸层析法检测标记率和放化纯;活化管技术;采用物理吸附法和多聚赖氨酸活化管化学连接方法对单克隆抗体在聚苯乙烯试管上的固定方法进行了研究;用标准原来检测标记抗体和包被抗体的活性;加入不同的血清体积和0.1%吐温80、反应不同的时间摸索最佳反应条件;双抗体法分离技术;建立可溶性B7-2分子的免疫放射分析法。结果经过反复的实验分析,建立了标记抗体6C8的最佳实验条件:Na125I 7.4MBq、氯胺-t 20μg、抗体6C8 6μg、Na2S2O5100μg、反应时间30秒、总体积为200～300μl;最佳固相包被条件:聚苯乙烯试管经γ射线照射12h后,用0.2mol/L PH 7.4磷酸盐缓冲液400μl稀释抗体,选择抗体6A5的浓度为5mg/L,4℃冰箱中放置24小时,吸出抗体溶液,0.2mol/L PH 7.4磷酸盐缓冲液洗5次。加入500μl/管的3%的BSA封闭液,封闭时间选择6h时,吸干后用0.2mol/L PH 7.4磷酸盐缓冲液洗5次,控干备用;反应条件的选择:每管加入血清200μl,加0.1%吐温80 20μl,反应时间为4小时。用SPSS11.5软件进行标准曲线的拟和,Y= 787.484 + 42.86X,调整R2=0.969,P= 0.0137(法能对血清中的B7-2分子进行定量分析,结果显示,Graves患者的含量比健康献血者高,而肿瘤患者的含量偏低。结论本研究获取的检测方法在该分子的临床研究中有重要意义。

关键词： B7-2 氯胺t法固相包被免疫放射分析 6C8 6A5