检索结果-南通市图书馆

日粮营养水平对山羊前胃上皮Na+/H+交换蛋白及氨转运蛋白表达的影响

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

日粮营养水平对山羊前胃上皮Na+/H+交换蛋白及氨转运蛋白表达的影...

作者：姚磊南京农业大学

学位级别：硕士

本研究包括两个部分：1、日粮对山羊瓣胃上皮Na+/H+交换蛋白表达的影响及其机制;2、日粮对山羊瘤胃和瓣胃上皮氨转运蛋白表达的影响及其机制。系列一：日粮对山羊瓣胃上皮Na+/H+交换蛋白表达的影响及其机制本系列分为两个试验,试验一日... 详细信息

本研究包括两个部分：1、日粮对山羊瓣胃上皮Na+/H+交换蛋白表达的影响及其机制;2、日粮对山羊瘤胃和瓣胃上皮氨转运蛋白表达的影响及其机制。系列一：日粮对山羊瓣胃上皮Na+/H+交换蛋白表达的影响及其机制本系列分为两个试验,试验一日粮对山羊瓣胃上皮Na+/N+交换蛋白表达影响的体内研究。选取青年波杂山羊34头用于本试验研究,分别进行两个试验试验一和试验二,在两个试验中山羊均被分为两组：PNSC组和PNS组,两组山羊均自由采食花生秆和饮水,且PNSC组山羊在每天分四次分别饲喂精料100g。饲喂持续42天,试验一的山羊在第43天禁食16h后屠宰取样,而试验二的山羊在第43天采食后2h屠宰取样。山羊屠宰后检测表明,在禁食和连续饲喂条件下,PNSC组山羊瓣胃液的SCFA显著高于PNS组,而pH则显著低于PNS组;Real-time PCR和Western-blot结果显示,试验一在禁食条件下PNSC组山羊瓣胃上皮Na+/H+交换蛋白NHE1基因和蛋白的表达水平显著高于PNS组;NHE2和NHE3基因和蛋白的表达水平在PNSC组与PNS组间均没有差异;试验二在连续饲喂条件下,PNSC组山羊瓣胃上皮NHE1基因和蛋白的表达水平显著高于PNS组,而NHE2和NHE3基因和蛋白的表达水平在两组间没有差异。试验二SCFA和pH对原代培养山羊瓣胃上皮细胞Na+/H+交换蛋白表达影响的体外研究。体外试验选取4只健康山羊,屠宰后采集瓣胃上皮样品用于细胞培养,用胰蛋白酶消化获得单个瓣胃细胞后进行原代培养,24 h细胞附着后,分别用高SCFA和低pH处理细胞,继续培养24 h后收集细胞检测。利用Real- time PCR和Western-blot的方法检测体外培养的山羊瓣胃上皮细胞。体外研究显示,SCFA显著上调原代培养山羊瓣胃上皮细胞NHE1基因和蛋白的表达,低pH对其基因和蛋白的表达没有影响;升高SCFA、降低pH或SCFA和pH共处理显著下调山羊瓣胃上皮细胞NHE2和NHE3基因和蛋白的表达。系列二：日粮对山羊瘤胃和瓣胃上皮氨转运蛋白表达的影响及其机制本系列分为两个试验,试验一日粮营养水平对山羊瘤胃和瓣胃上皮氨转运蛋白mRNA表达影响的体内研究选取15头波尔山羊用于本实验研究,实验将山羊随机分为高营养组(HL组)和低营养组(LL组)。高营养组每次饲喂精料327g,羊草78.48g,苜蓿30.52g,低营养组每次饲喂羊草348.8g,苜蓿69.76g,预混料17.44g,每天饲喂两次,经过一段时间的精料添加,最终低营养组每顿饲喂羊草390.47g,苜蓿78.09g,预混料17.44g,高营养组每顿饲喂精料700g,羊草171g,苜蓿68g,饲喂两周后屠宰。体内结果显示,HL组山羊瘤胃液和瓣胃液的SCFA含量显著升高,而pH显著降低;HL组山羊瘤胃液中氨氮的浓度显著升高,瓣胃液中的氨氮浓度在两组间没有差异;山羊瘤胃与瓣胃上皮中氨转运蛋白Rhbg和Rhcg mRNA的表达水平在HL组均显著高于LL组。试验二SCFA和pH及含氮化合物对原代培养山羊瘤胃和瓣胃上皮细胞氨转运蛋白mRNA表达影响的体外研究体外试验选取4只健康山羊,屠宰采集瘤胃和瓣胃上皮样品后用于细胞培养,胰蛋白酶消化获得单个瘤胃和瓣胃细胞后进行原代培养,24h细胞附着后,分别用pH、SCFA、NH4Cl和Urea处理,继续培养24h后收集细胞用于检测。利用Real- time PCR方法检测体外培养的山羊瘤胃和瓣胃上皮细胞。体外研究显示,低pH显著上调原代培养山羊瘤胃上皮细胞Rhbg和Rhcg mRNA的表达,SCFA、尿素及SCFA+NH4Cl处理均能显著下调原代培养山羊瘤胃上皮细胞Rhbg和Rhcg的mRNA表达。低pH和NH4Cl处理显著上调原代培养山羊瓣胃上皮细胞Rhbg和Rhcg mRNA的表达,SCFA和尿素处理显著下调两者的表达。

关键词：日粮营养水平 pH SCFA Na+/H+交换蛋白氨转运蛋白

氨转运蛋白Rh C型糖蛋白在低蛋白饮食大鼠肾脏的表达

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药物与临床 2014年第11期14卷 1471-1473页

作者：刘伟罗静太原市第三人民医院检验科 030012 山西医科大学第二医院风湿科

目的观察氨转运蛋白Rh C型糖蛋白(Rhcg)在低蛋白饮食大鼠肾脏皮质部、内髓部和外髓部的表达。方法利用蛋白印迹法分别检测低蛋白饮食组和正常对照组氨转运蛋白Rhcg在大鼠肾脏皮质、内髓部、外髓部的表达。结果低蛋白饮食不能改变Rhcg在... 详细信息

目的观察氨转运蛋白Rh C型糖蛋白(Rhcg)在低蛋白饮食大鼠肾脏皮质部、内髓部和外髓部的表达。方法利用蛋白印迹法分别检测低蛋白饮食组和正常对照组氨转运蛋白Rhcg在大鼠肾脏皮质、内髓部、外髓部的表达。结果低蛋白饮食不能改变Rhcg在大鼠肾脏皮质部、内髓和外髓的表达(P>0.05)。结论饮食中蛋白的限制不能影响Rhcg在大鼠肾脏的表达。

关键词：氨转运蛋白肾皮质膳食,限制蛋白质

日粮添加尿素对育肥湖羊空肠菌群结构及氨和尿素转运蛋白表达的影响

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南京农业大学学报 2023年第2期46卷 345-353页

作者：孙美杰郑文金申军士朱伟云南京农业大学国家动物消化道营养国际联合研究中心/江苏省消化道营养与动物健康重点实验室/动物科技学院消化道微生物研究室江苏南京210095

[目的]本试验旨在探究日粮添加尿素对育肥湖羊空肠发酵、菌群结构以及氨和尿素转运蛋白表达的影响。[方法]将42只3月龄育肥公湖羊(约24.3 kg)随机均分为3个处理组,在饲喂基础日粮的基础上分别添加0 g·kg-1(U0组)、10 g·kg-1(U10组)、3... 详细信息

[目的]本试验旨在探究日粮添加尿素对育肥湖羊空肠发酵、菌群结构以及氨和尿素转运蛋白表达的影响。[方法]将42只3月龄育肥公湖羊(约24.3 kg)随机均分为3个处理组,在饲喂基础日粮的基础上分别添加0 g·kg-1(U0组)、10 g·kg-1(U10组)、30 g·kg^(-1)(U30组)尿素。试验预饲期1周,正试期10周。试验结束每组随机选取6只屠宰,采集空肠内容物,测定发酵参数和定量总菌,并利用Illumina MiSeq测序分析空肠细菌组成;采集空肠上皮组织样品检测氨转运蛋白b(Rhbg)、氨转运蛋白c(Rhcg)和尿素转运蛋白B(UT-B)基因mRNA表达。[结果]与U0组相比,U10和U30组空肠氨态氮含量显著升高(P0.05),PCoA分析结果显示各组间空肠细菌群落组成明显区分。添加尿素对湖羊空肠中细菌门水平相对丰度无显著影响,但细菌属水平相对丰度存在差异。各处理组主要优势菌属为Lachnospiraceae NK3A20 group、Ruminococcus 2、Acetitomaculum和Bifidobacteriaceae unclassified,其中Lachnospiraceae NK3A20 group和Ruminococcus 2的相对丰度均在U10组中最高。此外,U10组Ruminococcus gauvreauii group和Olsenella的相对丰度相较于U30组显著升高(P0.05)。[结论]日粮补充适宜尿素(10 g·kg^(-1))可提高空肠内氨态氮含量,促进氮利用细菌的生长定殖,改善菌群结构。此外,添加尿素会影响空肠上皮Rhbg基因的表达,但不影响Rhcg基因和UT-B基因的表达。

关键词：湖羊尿素菌群结构氨转运蛋白尿素转运蛋白

维普期刊数据库博看期刊

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

低盐度下脊尾白虾碳酸盐碱度适应机制研究

低盐度下脊尾白虾碳酸盐碱度适应机制研究

作者：张伟丽河南师范大学

学位级别：硕士

我国拥有丰富的盐碱水资源,但由于具有高盐度、高碱度、高p H、主要离子比例失衡、缓冲性能差等特点,大部分仍处于闲置状态。发展盐碱地渔业是开发利用盐碱地水域重要有效途径之一。但耐盐碱品种的相对不足已成为制约盐碱水渔业高质量... 详细信息

我国拥有丰富的盐碱水资源,但由于具有高盐度、高碱度、高p H、主要离子比例失衡、缓冲性能差等特点,大部分仍处于闲置状态。发展盐碱地渔业是开发利用盐碱地水域重要有效途径之一。但耐盐碱品种的相对不足已成为制约盐碱水渔业高质量发展的主要瓶颈。因此,亟需筛选、培育耐盐碱水产品种,以促进盐碱渔业可持续发展。脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)具有生长快、食性杂、繁殖周期短等优良特性,由于其对盐度、温度适应性广,已经成为我国沿海地区特色养殖品种。脊尾白虾对盐碱具有较强的耐受力,尤其是对低盐度表现出很强的适应性,可通过逐级淡化在淡水中生存。本研究以脊尾白虾为研究对象,研究了其在1盐度下6 mmol/L碳酸盐碱度急性和慢性胁迫下的生长、生理变化,利用转录组测序技术筛选鳃组织差异表达基因,解析脊尾白虾在低盐碱胁迫下的适应机制。实验结果将为脊尾白虾在低盐碱水域中规模化养殖提供理论依据,并为脊尾白虾低盐碱人工繁育奠定理论基础。主要研究结果如下:1.低盐度下碳酸盐碱度胁迫对脊尾白虾生长、生化指标、免疫相关酶活力及其基因表达的影响在盐度1水平下,对脊尾白虾分别进行3 d和60 d的6 mmol/L碳酸盐碱度急性和慢性胁迫,实验结束后测定生长指标、计算成活率。取脊尾白虾血清、鳃、肝胰腺,测定血清渗透压、离子含量、转氨酶活力、鳃组织Na-K-ATPase活力,分析血糖、血氨、血脂含量,检测血清、鳃、肝胰腺抗氧化酶、免疫酶及免疫相关基因表达量。结果显示,碳酸盐碱度急性胁迫对脊尾白虾的存活率无明显影响;慢性胁迫下,与对照组相比,脊尾白虾终末体重、增重率、特定生长率均无显著性差异(P>0.05)。急性胁迫下,脊尾白虾血清渗透压极显著低于对照组(P0.05),鳃组织Na-K-ATPase活力极显著低于对照组(P0.05);慢性胁迫下,GLU、BA、T-CHO极显著高于对照组(P0.05)。急性胁迫下,鳃组织中SOD、CAT、pro PO、Crustin表达量极显著上调(P氨转运蛋白Rh基因,序列全长2 777 bp,开放阅读框(ORF)1 437 bp,编码氨基酸478个,分子量为52.60 KDa,理论等电点(PI)为5.26。系统进化树分析显示,脊尾白虾Rh与甲壳动物的亲缘关系最近。组织特异性分析显示,脊尾白虾Rh在各个组织中均有表达,在鳃组织中的表达量最高,肝胰腺次之。碳酸盐碱度急性和慢性胁迫下,取脊尾白虾鳃、肝胰腺、胃、肠进行Rh荧光定量检测,结果显示,急性和慢性胁迫下,脊尾白虾鳃组织中Rh表达量极显著高于对照组(P0.05);胃中Rh表达量在急性胁迫下极显著高于对照组(P<0.01),慢性胁迫下极显著低于对照组(P<0.01);肠中Rh表达量在急性胁

关键词：脊尾白虾碳酸盐碱度氨转运蛋白转录组测序表皮蛋白

肿瘤坏死因子α上调脑血管内皮细胞RH蛋白C表达的机制

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤坏死因子α上调脑血管内皮细胞RH蛋白C表达的机制

作者：陆慧中国医科大学

学位级别：硕士

目的:急性肝衰竭是一种罕见但却威胁生命的疾病,通常为既往无肝病史的病人伴随着急速的大量肝细胞失去功能。慢加急性肝衰竭与急性失代偿性肝衰竭不同,在慢性肝功能不全的基础上发生,伴随失代偿期诸多并发症,并且与较高的脏器衰竭率有... 详细信息

目的:急性肝衰竭是一种罕见但却威胁生命的疾病,通常为既往无肝病史的病人伴随着急速的大量肝细胞失去功能。慢加急性肝衰竭与急性失代偿性肝衰竭不同,在慢性肝功能不全的基础上发生,伴随失代偿期诸多并发症,并且与较高的脏器衰竭率有关。它们均会伴随许多严重的神经系统并发症,包括脑水肿及肝性脑病,以及以严重认知和精神损伤为特征的,从意识变化至昏迷的精神系统疾病。数十年来,氨在急性肝衰竭神经系统并发症的病理生理基础中具有至关重要作用。但是在近期的研究中,无论是在人或者是在动物模型中都强烈的提示我们,炎症反应,也作为单独或者与氨共同作用的因子参与其中。炎症反应是急性肝衰竭的一个重要的特征,促炎细胞因子水平的升高更是独立于潜在肝病病因学之外的危险因素。在这些促炎细胞因子中肿瘤坏死因子TNF-α发挥强效作用,它通过激发多种炎症反应并且可以触发下游靶点如白介素-6的合成来实现免疫功能。在肝性脑病的氨中毒学说中,NH具有干扰三羧酸循环使脑细胞能量供应不足、增加抑制脑功能的中性氨基酸的吸收、使星形胶质细胞及神经元细胞肿胀致脑水肿、干扰神经的电活动等毒性作用都能促进和加剧HE的发生。氨转运蛋白家族Rh糖蛋白为NH和NH的跨膜转运提供便利与途径。其中,RhCG存在非红细胞中,同时表达于各种不同的组织,包括肝脏、肾脏、胃肠道、皮肤等,且被认为可以对氨进行转运。本文章旨在研究RhCG与TNF-α之间的作用机制。研究方法:HBMEC复苏、传5代,以2×10 cells/孔铺2个6孔板,培养2天。分别于不同时间点加入人TNF-α(0.1μg/mL ECM),放入37℃,5%CO2孵箱中继续培养,同时收集细胞运用PCR及Western Blot检测RhCG RNA及蛋白。并统计RhCG RNA及蛋白随着不同作用时间的TNF-α的变化而变化的趋势。根据不同时间点加PKC抑制剂处理,分组:(1)TNF-α处理0小时组;(2)TNF-α处理24小时组;(3)Safingol单独处理组;(4)TNF-α+抑制剂组:预先处理HBMEC细胞1小时后,再予TNF-α刺激24小时。应用Western blot方法检测HBMEC细胞中RhCG蛋白的表达水平。并统计RhCG蛋白不同组别的变化趋势。研究成果:成功复苏、培养HBMEC,并获得稳定传代。分别于不同时间点加入人TNF-α并收集细胞后,运用Western Blot检测到RhCG蛋白随着TNF-α作用时间的延长表达增加,24小时表达量最高。运用PCR检测到RhCG RNA随着TNF-α作用时间的延长表达增加,24小时表达量最高。在证明肿瘤坏死因子TNF-α可以增加HBMEC细胞中RhCG mRNA及蛋白的表达的基础上,加入PKC-α特异性抑制剂Safingol,RhCG蛋白的表达随之下降,差异有统计学意义。结论:肿瘤坏死因子TNF-α可以上调HBMEC细胞中RhCG mRNA及蛋白的表达。PKC-α参与TNF-α上调HBMEC细胞中RhCG的表达的作用。

关键词：肝衰竭肿瘤坏死因子人脑微血管内皮细胞氨转运蛋白

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

水葫芦氮代谢相关基因的克隆及表达研究

水葫芦氮代谢相关基因的克隆及表达研究

作者：严国花广东工业大学

学位级别：硕士

植物在氮有关的代谢过程中,谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase, GS)及铵转运蛋白(AMY)都具有重要的作用,对植物的生长繁殖有很大的影响。为了探讨水葫芦对富营养化水体中铵态氮吸收的分子机理。采用简并引物克隆了3种水葫芦铵转运蛋... 详细信息

植物在氮有关的代谢过程中,谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase, GS)及铵转运蛋白(AMY)都具有重要的作用,对植物的生长繁殖有很大的影响。为了探讨水葫芦对富营养化水体中铵态氮吸收的分子机理。采用简并引物克隆了3种水葫芦铵转运蛋白基因(EcAMT1、EcAMT2和EcAMT3)片段,并对这3个基因在不同形态的氮素条件下的表达进行了研究。相比缺氮,铵态氮和硝态氮条件下,EcAMT1基因的表达被抑制, 而EcAMT2和EcAMT3的表达刚好相反, 铵态氮和硝态氮条件反而能够促进基因表达。说明不同类型的铵转运蛋白基因的表达对外界环境因素的响应各不相同。利用PCR技术扩增出GS1三条全长片段,再连接到PYES2酿酒酵母质粒中,通过链接转化反应再导入转化到单倍体的GS突变株Y25454(该突变株无法在脯氨酸、铵离子作为唯一氮源YNB培养基的情况下生长),经过酿酒酵母突变互补功能鉴定试验证明,转化了GS基因的酵母突变株能够在1%浓度的脯氨酸、铵离子浓度低于5mM的情况下生长,而且比野生型的BY4741还生长的更好更快,因此表面该GS基因具有较高的铵的转运功能。实验通过对培养的水葫芦施加不同强度的光照、不同种类的抑制剂、不同浓度蔗糖,提取其根和叶的谷氨酰胺合成酶,检测分析其活性变化大小,来探究光照强度、抑制剂、蔗糖对水葫芦根和叶谷氨酰胺合成酶活性的影响。结果表明：不同强度的光照对水葫芦谷氨酰胺合成酶活性有一定的影响。光照第一天GS活性明显增高,即短时间内光照对GS酶活性有一定的提高作用,且随着光照强度的增加,GS活性增加。但在光照强度达到一定强度后,随着光照时间的增加,GS活性随之下降。蔗糖对水葫芦叶子谷氨酰胺合成酶的活性无显著影响,低溶度蔗糖水葫芦根谷氨酰胺合成酶的活性无显著影响,高浓度蔗糖提高水葫芦谷氨酰胺合成酶活性。蛋氨酸亚氨基代砜(MSX)对水葫芦根和叶子的GS酶活性有抑制作用,然而随着时间的增加,GS活性又呈现下降的趋势。谷氨酰胺(Gln)对GS的酶活性也有抑制作用。实验中同时添加MSX和Gln时,GS的活性基本没有,抑制作用更强。

关键词：水葫芦氨转运蛋白荧光定量PCR 谷氨酰胺合成酶克隆表达酶活性功能鉴定