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氨基脲敏感型胺氧化酶在心肌缺血再灌注中的作用

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氨基脲敏感型胺氧化酶在心肌缺血再灌注中的作用

作者：杨伟汕头大学

学位级别：硕士

氨基脲敏感型胺氧化酶（Semicarbazide-sensitive amine oxidase, SSAO;EC1.***.3.6）是一组含铜胺氧化酶的统称,广泛分布于器官和组织中,尤其在脂肪细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞中酶活性较高,它的可溶性形式也存在于血浆中。脂肪细胞... 详细信息

氨基脲敏感型胺氧化酶（Semicarbazide-sensitive amine oxidase, SSAO;EC1.***.3.6）是一组含铜胺氧化酶的统称,广泛分布于器官和组织中,尤其在脂肪细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞中酶活性较高,它的可溶性形式也存在于血浆中。脂肪细胞和平滑肌细胞表达的SSAO酶可促进葡萄糖转运,具有类胰岛素效应;而内皮细胞表达的SSAO酶即血管黏附蛋白-1（VAP-1）参与炎症过程中白细胞的运输与外渗。生化方面,SSAO催化伯胺的氧化脱胺生成相应的醛、氨和过氧化氢（RCH2NH2 + O2 + H2O→RCHO + NH3 + H2O2）。有研究表明在离体肺缺血再灌注损伤模型中SSAO参与过多活性氧族的生成。然而SSAO在心肌缺血再灌注损伤中是否起作用尚未见报道。因此,我们用大鼠缺血再灌注模型来验证这一假设。所有SD大鼠心脏都给予缺血30 min再灌注180 min的处理。所有大鼠随机分成八组,每组十只: 1)缺血再灌注对照组:缺血前后不给予任何干预;2)氨基脲处理组:实验前10 min给予氨基脲（30 mg/kg,溶解于1 ml生理盐水）处理;3)缺血预适应组:长时间缺血前给予5 min缺血10 min再灌注;4)缺血预适应+氨基脲处理组:实验前10 min给予氨基脲处理,然后长时间缺血前给予5 min缺血10 min再灌注;5)缺血后适应组:长时间再灌注前给予3个循环10 s再灌注和10 s再缺血的后处理。 6)缺血后适应+氨基脲处理组:实验前10 min给予氨基脲处理,然后长时间再灌注前给予3个循环10 s再灌注和10 s再缺血的后处理。 7)假手术组:实验过程同其他组,但穿线不结扎。 8)假手术+氨基脲处理组:实验前10 min给予氨基脲处理,然后穿线不结扎。在本实验中,采用NBT（氯化硝基四氮唑兰）染色法测定心肌梗塞范围;比色法测定大鼠血浆肌酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）、羟自由基（·OH）等水平;高效液相色谱法测定血浆SSAO酶活性;HE染色法进行组织学评估。在本实验中我们得到如下结果: （1）各组的心肌梗塞范围为:缺血再灌注对照组（43.2±1.0%）;氨基脲处理组（27.7±1.2%）;缺血预适应组（29.3±2.2%）;缺血预适应+氨基脲处理组（13.9±3.2%）;缺血后适应组（33.6±1.9%）;缺血后适应+氨基脲处理组（41.1±4.2%）。与缺血再灌注对照组相比,除了缺血后适应+氨基脲处理组没有统计学差异外,其他组均有统计学差异。（2）各组血浆肌酸激酶活力（U/ml）为:缺血再灌注对照组（2.83±0.33）;氨基脲处理组（2.64±0.26）;缺血预适应组（2.22±0.25）;缺血预适应+氨基脲处理组（2.51±0.32）;缺血后适应组（2.28±0.40）;缺血后适应+氨基脲处理组（2.61±0.26）;假手术组（2.26±0.40）;假手术+氨基脲处理组（2.28±0.28）。各组之间没有统计学差异。（3）各组血浆丙二醛水平（nmol/ml）为:缺血再灌注对照组（2.58±0.14）;氨基脲处理组（1.74±0.16）;缺血预适应组（2.13±0.15）;缺血预适应+氨基脲处理组（1.78±0.06）;缺血后适应组（2.47±0.21）;缺血后适应+氨基脲处理组（1.77±0.17）;假手术组（2.11±0.12）;假手术+氨基脲处理组（1.66±0.10）。与缺血再灌注对照组相比,所有氨基脲处理组血浆丙二醛水平都显著降低了;与缺血后适应组相比,所有氨基脲处理组血浆丙二醛水平也显著降低。（4）各组血浆髓过氧化物酶活性（U/L）为:缺血再灌注对照组（27.53±2.93）;氨基脲处理组（14.16±1.78）;缺血预适应组（14.16±1.85）;缺血预适应+氨基脲处理组（13.37±1.49）;缺血后适应组（13.57±2.56）;缺血后适应+氨基脲处理组（12.39±1.63）;假手术组（13.18±2.23）;假手术+氨基脲处理组（17.90±2.61）。与缺血再灌注对照组相比,其他组血浆髓过氧化物酶活性都显著降低。（5）各组血浆羟自由基水平（U/ml）为:缺血再灌注对照组（628.4±15.7）;氨基脲处理组（502.6±27.8）;缺血预适应组（509.6±29.9）;缺血预适应+氨基脲处理组（505.4±26.9）;缺血后适应组（526.6±16.8）;缺血后适应+氨基脲处理组（496.9±32.6）;假手术组（502.8±25.7）;假手术+氨基脲处理组（525.7±29.8）。与缺血再灌注对照组相比

关键词：缺血再灌注氨基脲敏感型胺氧化酶活性氧族血管黏附蛋白-1

氨基脲敏感型胺氧化酶介导的甲胺代谢产物对成纤维细胞的毒性作用

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汕头大学医学院学报 2009年第3期22卷 129-132,F0002页

作者：匡薇林哲绚李慧罗文鸿汕头大学医学院分析测试实验室广东汕头515041

目的：研究氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）催化甲胺（MA）产生的代谢产物对大鼠皮肤成纤维细胞（RSFCs）的毒性作用。方法：原代分离培养新生SDRSFCs，用高效液相色谱法检测细胞及培养基酶活性。MTT法检测细胞经过不同浓度MA和不同活性S... 详细信息

目的：研究氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）催化甲胺（MA）产生的代谢产物对大鼠皮肤成纤维细胞（RSFCs）的毒性作用。方法：原代分离培养新生SDRSFCs，用高效液相色谱法检测细胞及培养基酶活性。MTT法检测细胞经过不同浓度MA和不同活性SSAO处理后的细胞活力，β半乳糖苷酶染色检测细胞衰老。结果：当SSAO为1．02×10^-3u／mL时，成纤维细胞活力随着培养体系中MA浓度的升高（0．2—1．0mmol／L）而降低。当MA为1．0mmol／L时，随着酶活性的增高（0．6×10^-3-1．58×10^-3u／mL），细胞活力逐渐降低。给予SSAO抑制剂氨基脲或肼届嗪可显著抑制细胞活力下降。给予抗氧化剂谷胱苷肽可显著提高细胞活力，并显著降低培养基中甲醛浓度（P〈0．05）；如同时给予过氧化氢酶和谷胱苷肽，则细胞活力升高更明显。此外，0．2mmol／LMA作用3代，可引起肛半乳糖苷酶染色增强。结论：SSAO催化的MA氧化对RSFCs有明显的毒性作用，这种毒性作用由其代谢产物引起；在SSAO催化下低浓度MA可能与细胞衰老有关。

关键词：氨基脲敏感型胺氧化酶大鼠皮肤成纤维细胞毒性衰老

重组氨基脲敏感型胺氧化酶在293T细胞中的定位及酶活性测定

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癌变．畸变．突变 2017年第4期29卷 277-283页

作者：钱九战李蕊罗红军林哲绚施金婉罗文鸿汕头大学医学院生物分析实验室广东汕头515041

目的:构建氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)基因真核表达载体,并在293T细胞中进行瞬时表达,确定SSAO体外表达效率、亚细胞定位及酶活性。方法:以pcDNA3-SSAO质粒为模板,PCR扩增获取SSAO编码区全序列,分别构建SSAO与绿色荧光蛋白(GFP)的融合... 详细信息

目的:构建氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)基因真核表达载体,并在293T细胞中进行瞬时表达,确定SSAO体外表达效率、亚细胞定位及酶活性。方法:以pcDNA3-SSAO质粒为模板,PCR扩增获取SSAO编码区全序列,分别构建SSAO与绿色荧光蛋白(GFP)的融合表达质粒pEGFP-N3-SSAO和共表达质粒pIRES2-EGFP-SSAO,并通过酶切和测序验证。再分别将pcDNA3-SSAO、pEGFP-N3-SSAO、pIRES2-EGFP-SSAO和pcFLAG-SSAO重组质粒瞬时转染293T细胞,在荧光显微镜下观察目的蛋白的分布及表达情况。采用高效液相色谱法(HPLC)测定转染上述4种重组质粒及相应空质粒细胞的SSAO活性。结果:测序结果表明重组真核表达质粒构建正确。在瞬时转染pEGFP-N3-SSAO和pIRES2-EGFP-SSAO重组质粒的293T细胞中,转染后3~36 h各组均可观察到绿色荧光,且转染36 h为最佳观察时间点。转染pIRES2-EGFP-SSAO质粒的绿色荧光分布于细胞质中;转染pEGFP-N3-SSAO和pcFLAG-SSAO质粒的绿色荧光及红色荧光均分布于细胞膜上。酶活性检测结果显示转染pcFLAG-SSAO、pIRES2-EGFP-SSAO和pcDNA3-SSAO载体质粒的293T细胞中的SSAO活性分别为111.50±7.07、117.22±9.54、215.74±21.44 nmoL/(mg·h),较各自的空白质粒对照组均显著升高(P均<0.01),但转染pEGFP-N3-SSAO质粒的细胞SSAO活性极低,仅为2.09±0.29 nmoL/(mg·h)。结论:293T细胞中,体外重组表达的SSAO蛋白主要分布于细胞膜上,以pcDNA3为载体外源表达的天然状态SSAO活性最高。

关键词：氨基脲敏感型胺氧化酶重组表达亚细胞定位酶活性测定

急性肺炎模型中血浆氨基脲敏感型胺氧化酶活性的研究

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急性肺炎模型中血浆氨基脲敏感型胺氧化酶活性的研究

作者：张美汕头大学

学位级别：硕士

氨基脲敏感型胺氧化酶是一系列对氨基脲敏感的胺氧化酶的统称，活性位点由1个二价铜离子，一个辅酶TPQ和三个组氨酸残基组成。其生理功能和病理意义尚不完全清楚。在人体组织中，SSAO以游离形式分布在血浆中，也以膜结合形式分布在组织... 详细信息

氨基脲敏感型胺氧化酶是一系列对氨基脲敏感的胺氧化酶的统称，活性位点由1个二价铜离子，一个辅酶TPQ和三个组氨酸残基组成。其生理功能和病理意义尚不完全清楚。在人体组织中，SSAO以游离形式分布在血浆中，也以膜结合形式分布在组织和器官中，尤其在脂肪细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞中酶活性较高。已有研究发现在某些病理状态下存在SSAO的活性变化，如急性腹膜炎、慢性皮肤炎、慢性肺炎的炎症部位酶活性上调、肝硬化患者血浆酶活性上升等。然而有趣的是在已报道的急性肺炎动物模型中，肺组织的SSAO及酶活性都没有发生变化，这和我们的预期不同。本实验就是在原有研究的基础上选择合适的动物模型，对血浆中SSAO活性在急性肺炎模型中的变化情况进行研究，并对血浆中是否存在SSAO内源性抑制剂进行探讨。主要研究内容和方法： 1．建立Wistar、SD大鼠、新西兰兔急性肺炎模型，通过比较，选择适合SSAO活性研究需要的模型动物，并对造模方法进行适当改进。 2．通过动物症状观察、白细胞计数、病理切片等方法，评价新的急性肺炎模型造模方法的造模质量。 3．比较不同给药方式与给药剂量对急性肺炎动物模型血浆SSAO活性的影响。 4．检测在急性肺炎发生过程中新西兰兔血浆SSAO活性的变化。 5．对正常血浆和低活性血浆分别进行变性、纯化等处理，寻找可能参与SSAO活性调控的内源性物质。研究结果： 1．实验证明，采用腹腔或耳缘静脉等全身给药方式，副作用较大，而气管内给药造模时药物对其他部位的伤害较小，优于全身性给药;大鼠SSAO活性很低，测量误差较大，采用兔作模型比大鼠更理想;采用气管直接插管给药造模较传统的气管切开插管给药产生的副作用小，操作时间短，可避免机械损伤产生的并发炎症。该造模方法可能存在药物在肺组织内分布不均匀的缺点，有待进一步改进。 2．以新西兰兔为模型动物，通过气管直接插管法分别给入脂多糖1.0 mg·kg、1.5mg·kg、2.0 mg·kg、3.0 mg·kg。当给入脂多糖2.0 mg·kg时，酶活性变化最明显，因此选择2.0 mg·kgLPS为兔急性肺炎造模的剂量。 3．在给入脂多糖后，新西兰兔血浆SSAO活性发生有规律的波动。SSAO活性在给药后迅速上升，在第16 h达到最高，然后大幅下降，在第48 h降到最低点，并开始逐渐恢复，最终保持在略高于正常水平直至康复。若以给药前酶活性为对照，其最大升幅为23.33±9.63％，最大降幅为17.83±8.69％，均有统计意义(P＜0.05) 4．经70℃水浴变性除蛋白等处理后的血浆提取物对正常血浆酶活性有很大影响，其中正常血浆提取物可使酶活性下降幅度达到9.05％，而低活性血浆提取物可使降幅达到21.15％，由于该分离方法不能完全除去蛋白，含有其他成分的杂质也很多，因此仍需进一步对提取物分离纯化，才可能得到其内源性抑制物。结论及意义： 1．通过新西兰兔气管直接插管给药代替气管切开等给药方式，副作用小，造模质量稳定;兔血浆SSAO活性比大鼠高，而且兔体型较大，适合连续、大量采血，是用于SSAO性质研究的理想实验动物。 2．制作新西兰兔急性肺炎模型的最佳剂量为气管插管给予脂多糖2.0 mg·kg。 3．新西兰兔血浆SSAO活性在急性肺炎模型中会发生有规律的变化，说明SSAO可能参与了肺损伤过程。 4．经变性处理后的血浆表现出对SSAO活性的抑制现象，初步推测兔血浆中可能有SSAO的内源性抑制剂存在。

关键词：氨基脲敏感型胺氧化酶内源性抑制剂急性肺炎

甲胺及其代谢产物甲醛在动物体内的药代动力学

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中国药理学与毒理学杂志 2006年第2期20卷 120-124页

作者：罗红军李慧罗文鸿汕头大学医学院中心实验室广东汕头515031

目的进一步了解血浆氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）活性与内源性甲醛的生理学与病理学意义。方法采用高效液相色谱法测定小鼠、大鼠和兔血浆中SSAO活性和静脉给予甲胺后甲胺及其代谢产物甲醛浓度。结果小鼠、大鼠和兔血浆中SSAO活性... 详细信息

目的进一步了解血浆氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）活性与内源性甲醛的生理学与病理学意义。方法采用高效液相色谱法测定小鼠、大鼠和兔血浆中SSAO活性和静脉给予甲胺后甲胺及其代谢产物甲醛浓度。结果小鼠、大鼠和兔血浆中SSAO活性分别为（4．1±1．0），（2．0±0．3）和（325．8±3．9）μmol·h^-1·L^-1。3种动物单次iv甲胺后，甲胺的分布和代谢迅速。小鼠单次iv 4．2mg·kg^-1甲胺后甲醛浓度在代谢初期缓慢上升，在20-40min达峰后缓慢消除。而大鼠单次iv 4．2mg·kg^-1甲胺后血浆甲醛浓度无明显改变。兔单次iv 2．3，9．6和36．8mg·kg^-1甲胺后，甲胺AUC与剂量不成比例，Cl随剂量增加明显减少，呈非线性动力学特征。甲醛在兔体内消除较快，甲醛AUC与甲胺剂量的比值和全身清除率Cl无明显差异，但ke随给予甲胺剂量的增大而减少，t1／2显著延长。结论甲胺在3种动物间代谢情况相似，其代谢产物甲醛则明显不同。甲胺给予剂量的不同可能导致甲胺代谢动力学的改变，进而可能影响甲醛的代谢。

关键词：氨基脲敏感型胺氧化酶甲胺甲醛药代动力学

SSAO介导的氧化脱氨反应对3T3-L1脂肪细胞的氧化应激作用

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中国病理生理杂志 2015年第3期31卷 468-474页

作者：张琼丽罗红军李慧林哲绚罗文鸿汕头大学医学院生物分析实验室广东汕头515041

目的：观察氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）催化其底物甲胺（MA）和苯甲胺（BZA）的氧化脱氨反应对成熟3T3-L1脂肪细胞的氧化应激作用。方法：3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞;高效液相色谱法检测不同分化天数下细胞SSAO活性的变... 详细信息

目的：观察氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）催化其底物甲胺（MA）和苯甲胺（BZA）的氧化脱氨反应对成熟3T3-L1脂肪细胞的氧化应激作用。方法：3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞;高效液相色谱法检测不同分化天数下细胞SSAO活性的变化;MTT法检测不同浓度的MA或BZA对细胞活力的影响;荧光探针方法检测细胞在药物作用下产生的活性氧;以0.5 mmol/L MA或BZA处理成熟脂肪细胞或未经诱导分化的前脂肪细胞4 h,观察细胞产生的甲醛（FA）、苯甲醛（BZ）、脂质过氧化指标丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和谷胱甘肽（GSH）的变化。结果：SSAO活性随细胞分化天数的增加而增加,并于第8天达到高峰;不同浓度MA或BZA作用细胞4 h对细胞活力无显著影响（P〉0.05）;0.5 mmol/L MA或BZA孵育后,细胞产生的活性氧增高,约为阴性对照组的3~4倍,差异有统计学意义（P〈0.05）;在成熟脂肪细胞中,MDA的含量增加,而T-SOD和GSH的活性和含量减少,与阴性对照组相比,差别有统计学意义（P〈0.05）;MA和BZA作用未经诱导分化的前脂肪细胞,其MDA和SOD和GSH的变化不明显,差别无统计学意义（P〉0.05）。结论：SSAO可能通过其介导的氧化脱氨反应引起3T3-L1成熟脂肪细胞产生氧化应激。

关键词：氨基脲敏感型胺氧化酶脂肪细胞甲胺苯甲胺氧化应激

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兔血浆SSAO的分离纯化及其酶动力学研究

癌变．畸变．突变 2008年第5期20卷 385-388页

作者：门华涛罗红军李慧罗文鸿汕头大学医学院中心实验室广东汕头515041

背景与目的:血浆中含有氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)。本文研究以甲胺为底物的兔血浆中具有SSAO酶活性的蛋白组分的酶动力学参数。材料与方法:利用弱阴离子交换柱层析分离兔血浆蛋白,测定各收集组分的SSAO酶活性;以甲胺为底物测定SSAO酶... 详细信息

背景与目的:血浆中含有氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)。本文研究以甲胺为底物的兔血浆中具有SSAO酶活性的蛋白组分的酶动力学参数。材料与方法:利用弱阴离子交换柱层析分离兔血浆蛋白,测定各收集组分的SSAO酶活性;以甲胺为底物测定SSAO酶动力学参数。结果:从兔血浆蛋白中分离得到两个具有SSAO酶活性的蛋白组分A和B。以甲胺为底物,未处理的血浆SSAO的酶动力学参数Km=(1.83±0.13)mmol/L,Vmax=(0.12±0.003)nmol/(min·mg)。蛋白组分B的酶动力学参数Km值(2.05±0.43)mmol/L小于蛋白组分A的Km值(3.14±0.63)mmol/L。组分B的酶动力学参数Vmax值(1.46±0.10)nmol/(min·mg)小于组分A的Vmax值(2.85±0.20)nmol/(min·mg)。结论:兔血浆含有两种SSAO酶,均可以催化甲胺氧化脱氨生成甲醛;组分A、B动力学特征有所不同。

关键词：氨基脲敏感型胺氧化酶甲胺酶动力学

甲胺及其代谢产物甲醛在动物体内的药代动力学

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甲胺及其代谢产物甲醛在动物体内的药代动力学

作者：罗红军汕头大学

学位级别：硕士

氨基脲敏感型胺氧化酶(Semicarbazide-sensitive amine oxidase，SSAO;EC1．4．3．6)是一类对氨基脲和其它肼类化合物敏感、含有铜离子和6-羟基多巴醌的胺氧化酶。SSAO可催化多种伯胺脱氨生成相应的醛、过氧化氢和氨(RCHNH+O+HO→RCHO+H... 详细信息

氨基脲敏感型胺氧化酶(Semicarbazide-sensitive amine oxidase，SSAO;EC1．4．3．6)是一类对氨基脲和其它肼类化合物敏感、含有铜离子和6-羟基多巴醌的胺氧化酶。SSAO可催化多种伯胺脱氨生成相应的醛、过氧化氢和氨(RCHNH+O+HO→RCHO+HO+NH)。甲胺是SSAO的生理底物之一，经SSAO催化脱氨生成甲醛、HO和氨。甲胺在尿液中大量存在，同时也分布在血液和组织中。甲胺可经体内代谢生成，或从食物、饮料及香烟烟雾中摄取。甲醛性质非常活泼，易与多种生物分子反应形成大分子加合物，可与蛋白质或单链DNA形成交联物。研究显示，内源性甲醛能增强蛋白糖基化，与体内蛋白质发生交联，从而可能造成血管内皮细胞的损伤，是引发动脉粥样硬化和糖尿病并发症如视网膜病变的潜在危险因素之一。此外，研究发现SSAO在葡萄糖摄取及抑制脂肪水解中起重要作用，而具有调节淋巴细胞黏附与迁移、与炎症相关的血管黏附蛋白-1(VAP-1)被发现与SSAO相同。SSAO催化的反应在这两个生理功能中起关键作用，采用小分子SSAO抑制剂可明显阻断其调控作用。因此，在第一部分的研究中，我们观察了3种常见的实验动物小鼠、大鼠和兔的血浆SSAO活性、甲胺和甲醛浓度，进而分析甲胺及其代谢产物甲醛在动物体内的药代动力学，为进行长期毒理实验打下基础，以进一步了解SSAO与内源性甲醛的病理生理学意义。在第二部分，我们采用SSAO高效抑制剂N′-(2-Phenylallyl) hydrazine hydrochloride (LJP1207)及SSAO首选底物苯甲胺，观察SSAO对细菌脂多糖(LPS)诱导急性炎症大鼠血浆一氧化氮(NO)和葡萄糖浓度的影响。

关键词：氨基脲敏感型胺氧化酶甲胺甲醛药代动力学脂多糖一氧化氮葡萄糖

SSAO介导的甲胺氧化对大鼠皮肤成纤维细胞的毒性作用

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SSAO介导的甲胺氧化对大鼠皮肤成纤维细胞的毒性作用

作者：匡薇汕头大学

学位级别：硕士

目的:探讨氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）介导的甲胺氧化对大鼠皮肤成纤维细胞的毒性作用。方法:原代培养SD大鼠皮肤成纤维细胞。细胞分成不同的组给予药物处理之后,MTT法检测细胞活力;β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;流式细胞仪分析细... 详细信息

目的:探讨氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）介导的甲胺氧化对大鼠皮肤成纤维细胞的毒性作用。方法:原代培养SD大鼠皮肤成纤维细胞。细胞分成不同的组给予药物处理之后,MTT法检测细胞活力;β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;流式细胞仪分析细胞周期变化,AnnexinV联合PI法,及Hoechst-PI双染色法来检测细胞的凋亡和坏死。结果:与培养体系内不含甲胺的组相比:在1.0 mM甲胺和1.02×10-3 U/ml SSAO共同作用48 h后,细胞活力降为（16.3±2.9）%（P＜0.05）,而同时给予抑制剂氨基脲和肼屈嗪,细胞活力分别为（121.5±22.6）%﹑（ 93.6±16.6）%;0.5mM甲胺和1.02×10-3 U/ml SSAO共同作用36 h后,细胞活力降为（54.0±6.6）%,而给予谷胱甘肽可使细胞活力恢复至（100.1±13.1）%。在0.2 mM甲胺和1.02×10-3 U/ml SSAO共同作用下传代3次之后,β-半乳糖苷酶阳性细胞显著增多,细胞周期没明显变化。1.0 mM甲胺和1.02×10-3 U/ml SSAO共同作用48 h后,细胞凋亡率和细胞增殖指数都显著提高（P＜0.05）,坏死程度较对照组加重。1.0mM甲胺和1.60×10-3 U/ml SSAO共同作用48 h后,细胞凋亡率和细胞增殖指数较对照组没明显变化,但坏死程度较酶活性为1.02×10-3 U/ml,甲胺浓度为1.0mM的处理组更为严重。结论:SSAO催化的甲胺氧化对大鼠皮肤成纤维细胞有明显毒性作用。谷胱甘肽可以缓解SSAO活性所带来的细胞的损伤。这种损伤与大鼠皮肤成纤维细胞的衰老,凋亡和坏死都有关系。

关键词：成纤维细胞氨基脲敏感型胺氧化酶衰老凋亡