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氢醌对人胚肺成纤维细胞中DNA及细胞核的影响

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中华预防医学杂志 2003年第3期37卷 183-185,F004页

作者：江高峰庄志雄刘起展何云杜柳涛中山大学公共卫生学院预防医学系毒理学教研室广州510080 深圳市疾病预防控制中心卫生毒理室 518020

目的　研究氢醌 (HQ)对人胚肺成纤维细胞 (HLF)DNA及细胞核的损伤作用 ,探讨其遗传毒性。方法　分别用 0、10、2 0、4 0和 80 μmol/L的HQ染毒HLF细胞 3h ,用彗星试验检测DNA损伤。再用相同剂量组HQ染毒HLF细胞 1h ,继续培养 2 4h后进... 详细信息

目的　研究氢醌 (HQ)对人胚肺成纤维细胞 (HLF)DNA及细胞核的损伤作用 ,探讨其遗传毒性。方法　分别用 0、10、2 0、4 0和 80 μmol/L的HQ染毒HLF细胞 3h ,用彗星试验检测DNA损伤。再用相同剂量组HQ染毒HLF细胞 1h ,继续培养 2 4h后进行微核试验。结果　彗星试验结果表明 ,各剂量组细胞DNA拖尾率分别为 12 %、19%、4 2 %、79%和 95 % ,彗星尾长分别为 7 87、9 35、11 0 3、19 2 8和 2 3 32 μm ,有明显的剂量效应关系 ,其中 2 0、4 0和 80 μmol/L剂量组的拖尾率和彗星尾长明显增加 ;且随着HQ剂量的升高 ,高度、重度DNA损伤的比例也逐渐增加。HQ也可致微核、核异常形成 ,各剂量组的微核率分别为 2 %、3%、10 %、9%和 15 % ,核异常率分别为 6 %、7%、16 %、2 7%和 2 8% ,剂量效应关系显著 ,其中 2 0、4 0和 80 μmol/L剂量组的微核率和核异常率显著增加。结论　HQ可致HLF细胞DNA和细胞核损伤 ,产生遗传毒性作用。

关键词：氢醌人胚肺成纤维细胞 DNA 细胞核损伤作用

氢醌诱导下肝细胞XPV基因mRNA表达规律的研究

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卫生研究 2008年第5期37卷 522-524,528页

作者：胡恭华庄志雄黄海燕杨淋清纪卫东胡大林赣南医学院预防医学系赣州341000 深圳市疾病预防控制中心深圳市疾病预防控制中心毒理研究室中山大学公共卫生学院预防医学系

目的研究氢醌(HQ)对L-02肝细胞XPV基因mRNA表达的影响及其规律,探讨XPV基因在HQ所致肝细胞毒性过程中分子作用机制。方法体外培养的L-02肝细胞经40μmol/L的HQ诱导后,采用实时荧光定量PCR法检测不同时间点(6、12、24和48h)XPV基因mRNA... 详细信息

目的研究氢醌(HQ)对L-02肝细胞XPV基因mRNA表达的影响及其规律,探讨XPV基因在HQ所致肝细胞毒性过程中分子作用机制。方法体外培养的L-02肝细胞经40μmol/L的HQ诱导后,采用实时荧光定量PCR法检测不同时间点(6、12、24和48h)XPV基因mRNA的表达;并检测不同剂量(0、5、10、20、40、80和160μmol/L)HQ诱导24h后,各浓度组XPV基因mRNA的表达。结果在24h的时间范围内,XPV基因在mRNA水平上的表达无论是染毒组(40μmol/L)还是正常对照组,均具有随时间的延长而增加的趋势;到24h时,相对表达量达到最大值,当培养时间达到48h时,该基因的表达则有所下降;此外,在各时间处理组(6h、12h、24h和48h)中,染毒组L-02肝细胞内XPV基因在mRNA水平上的表达均高于正常对照组。各剂量HQ作用24h后,L-02肝细胞内XPV基因mRNA的表达在0～80μmol/L范围内随着剂量的增加而增加,以正常对照组XPV基因的相对表达量为1,各染毒剂量组内XPV基因mRNA的相对表达量分别增至1.20、2.02、2.37、2.67、4.40和2.32倍;80μmol/L时其相对表达量达到峰值,160μmol/L的HQ作用后,其表达却有所下降,但仍高于正常对照组。结论HQ可以诱导XPV基因mRNA的表达变化,并且呈现一定的时间和剂量依赖性,提示XPV基因可能参与了肝细胞对HQ的应答过程。

关键词：氢醌 XPV mRNA L-02肝细胞

氢醌化合物对针叶木硫酸盐纸浆氧脱木素的影响

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中国造纸学报 2004年第2期19卷 32-36页

作者：付时雨 Lucia A.Lucian 柴欣生詹怀宇华南理工大学制浆造纸工程国家重点实验室广州510641 乔治亚理工大学造纸研究所亚特兰大乔治亚美国GA30332

研究了具有氧化还原性的氢醌类化合物作为氧脱木素过程的添加物。结果表明 ,氢醌的加入可以降低纸浆的卡伯值 ,提高氧脱木素的选择性。其原因是氢醌的存在可以提高O2 转化成为含氧的活性反应产物 ,加速木素中甲氧基的脱除 ,有利于破坏... 详细信息

研究了具有氧化还原性的氢醌类化合物作为氧脱木素过程的添加物。结果表明 ,氢醌的加入可以降低纸浆的卡伯值 ,提高氧脱木素的选择性。其原因是氢醌的存在可以提高O2 转化成为含氧的活性反应产物 ,加速木素中甲氧基的脱除 ,有利于破坏木素的结构和脱除木素。

关键词：氧脱木素纸浆针叶木卡伯值醌类脱除氢醌含氧类化合物硫酸盐

ATM在氢醌诱导肝细胞自噬中的作用及机制研究

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ATM在氢醌诱导肝细胞自噬中的作用及机制研究

作者：陶怡赣南医学院

学位级别：硕士

目的:自噬是细胞内最主要的降解系统,可将细胞质内容物传递到溶酶体中并降解。然而,自噬的目的并不是简单地清除物质,而是作为一个动态的循环系统,为细胞更新和稳态提供动力和能量。本课题组前期的研究阐明了氢醌(Hydroquinone,HQ)可以... 详细信息

目的:自噬是细胞内最主要的降解系统,可将细胞质内容物传递到溶酶体中并降解。然而,自噬的目的并不是简单地清除物质,而是作为一个动态的循环系统,为细胞更新和稳态提供动力和能量。本课题组前期的研究阐明了氢醌(Hydroquinone,HQ)可以诱导肝细胞发生自噬,并发现其对肝细胞的DNA损伤作用。近年来,共济失调-毛细血管扩张突变激酶(Ataxia-telangiectasia mutated kinase,ATM)在自噬中的作用逐渐被发现。ATM是磷脂酰肌醇-3激酶相关激酶家族的重要成员,由于其在DNA损伤反应中的关键作用而被鉴定出来。目前,在缺氧、饥饿、活性氧、电离辐射等作用下,ATM在自噬中的作用及其调节机制已经被广泛研究,但是对于ATM在HQ诱导自噬中的作用及其调节机制还尚未明确。本研究旨在阐明ATM在HQ诱导自噬中的作用及其调节机制,以期为HQ中毒预防及治疗提供科学的理论依据,同时探索ATM对自噬调控的新途径,进一步了解其在细胞动力学和稳态中的作用。方法:(1)ATM活性抑制对HQ诱导肝细胞自噬中的作用及机制研究:首先,通过CCK-8和Western blot的方法确定ATM抑制剂(KU-60019)在不影响细胞活力的基础上达到抑制ATM蛋白活性的最适作用浓度;其次,HQ联合ATM抑制剂作用于L02肝细胞后,采用倒置显微镜观察细胞形态、CCK-8法检测细胞活力、流式细胞术检测细胞凋亡、透射电子显微镜观察自噬形态、m Cherry-GFP-LC3B串联荧光蛋白检测自噬流、MDC法检测自噬囊泡聚集状况、Western blot检测自噬相关蛋白及其自噬信号通路蛋白表达的影响、免疫荧光实验检测自噬相关蛋白的亚细胞定位及表达。(2)ATM基因沉默对HQ诱导肝细胞自噬中的作用及机制研究:首先,利用sh RNA基因技术构建缺陷细胞株,通过Western blot对目的基因的干扰效果进行鉴定,确认ATM缺陷细胞的稳定性;其次,在HQ作用下,采用倒置显微镜观察细胞形态、Western blot检测自噬相关蛋白的表达、免疫荧光实验检测自噬相关蛋白的亚细胞定位及表达。结果:1.不同浓度HQ对肝细胞中ATM磷酸化蛋白表达的影响Western blot实验结果显示,40μmol/L和80μmol/L浓度组p-ATM的相对灰度值明显高于0μmol/L浓度组(P0.05)。细胞凋亡实验结果显示,与对照组相比,HQ组和HQ+KU组的细胞凋亡率均明显升高(P0.05)。表明抑制ATM活性不影响HQ对肝细胞的存活率和凋亡率。4.ATM活性抑制降低HQ诱导的肝细胞自噬水平透射电镜观察结果显示,在对照组、DMSO组、HQ+KU组内,可见自噬体;KU组可见少量自噬溶酶体;HQ组可观察到自噬体和自噬溶酶体增多。与HQ组相比,HQ+KU组的自噬溶酶体数量减少。m Cherry-GFP-LC3B串联荧光蛋白结果显示,与对照组相比,HQ组黄色荧光斑点数量增多。与HQ组相比,HQ+KU组黄色荧光斑点数量明显减少(P<0.05),且红色的片状斑点也呈现减少趋势。Western blot实验结果显示,HQ作用下抑制ATM的活性可以上调p62蛋白的表达,下调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白和Beclin 1蛋白的表达;免疫荧光实验结果显示,HQ作用下抑制ATM的活性可以增强p62蛋白的荧光强度,降低LC3蛋白和Beclin1蛋白的荧光强度;增多p62蛋白在细胞质内的分布,减少LC3蛋白和Beclin 1蛋白在细胞质内的分布。流式细胞术检测MDC阳性细胞率结果显示,与对照组相比,HQ组的MDC阳性细胞率明显升高(P<0.05),DMSO组、KU组和HQ+KU组的MDC阳性细胞率无明显

关键词： ATM 自噬氢醌肝细胞

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氢醌刺激后人肝细胞蛋白质谱表达的变化

中华劳动卫生职业病杂志 2006年第11期24卷 658-661页

作者：鞠莉张淑芝赵苒姚耿东浙江大学环境研究所杭州310031 杭州市疾病预防控制中心

目的研究氧醌(HQ)刺激后L-02型人肝细胞蛋白质谱的表达变化。方法传代培养的L-02型肝细胞分为空白对照组和染毒处理组。处理组经HQ(1×10-4mol／L)染毒培养24 h,对照组不做处理。提取蛋白同时进行双向凝胶电泳,图谱经PDQuest软件分析寻... 详细信息

目的研究氧醌(HQ)刺激后L-02型人肝细胞蛋白质谱的表达变化。方法传代培养的L-02型肝细胞分为空白对照组和染毒处理组。处理组经HQ(1×10-4mol／L)染毒培养24 h,对照组不做处理。提取蛋白同时进行双向凝胶电泳,图谱经PDQuest软件分析寻找差异点。实验独立进行3次,每次处理组和对照组各设3块胶作为组内重复,切取重复性较好的差异点做MALDI-TOF质谱鉴定,得到PMF通过Mascot在美国国家生物信息检索中心(NCBI)人类蛋白质数据库搜索。结果每块胶检测到约1 000个蛋白点,对照组和处理组凝胶匹配率组内达90％以上,组间80％以上,3次实验各发现17、18、24个蛋白点表达改变,变化倍数≥2。重复性较好的4个蛋白点经MALDI-TOF质谱鉴定为Rho GDP解离抑制蛋白、6-磷酸葡萄糖内酯酶、erbB3结合蛋白EBP1和核纤层蛋白,其功能与信号转导、细胞骨架及能量代谢有关。结论1×10-4mol／L的HQ处理24 h可引起L-02型人肝细胞蛋白质谱表达改变。

关键词：氢醌肝细胞双向凝胶电泳质谱蛋白质组

氢醌对人L-02肝细胞泛素结合酶Rad6B表达的影响

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卫生研究 2009年第3期38卷 352-354页

作者：胡恭华庄志雄杨建平黄海燕杨淋清赣南医学院预防医学系赣州341000 深圳市宝安区疾病预防控制中心职业病防治所深圳市疾病预防控制中心毒理研究室

目的研究氢醌(HQ)对人L-02肝细胞中泛素结合酶Rad6B表达的影响。方法将L-02肝细胞用不同浓度(0、5、10、20、40、80和160μmol/L)的HQ处理24h之后,采用实时荧光定量PCR技术检测Rad6B在mRNA水平上的表达;采用Western blot方法检测Rad6B... 详细信息

目的研究氢醌(HQ)对人L-02肝细胞中泛素结合酶Rad6B表达的影响。方法将L-02肝细胞用不同浓度(0、5、10、20、40、80和160μmol/L)的HQ处理24h之后,采用实时荧光定量PCR技术检测Rad6B在mRNA水平上的表达;采用Western blot方法检测Rad6B在蛋白质水平上的表达。结果在0～160μmol/L的范围内,HQ可诱导Rad6B在mRNA和蛋白质水平上表达的增加,具有随着剂量的增加而升高的趋势;并且各染毒剂量组(5、10、20、40、80和160μmol/L组)肝细胞Rad6B在mRNA和蛋白质水平上的表达均明显地高于对照组(0μmol/L组)(P<0.01);当HQ的作用浓度达到160μmol/L时,Rad6B的表达水平达到最大值,其mRNA和蛋白质表达的相对定量值分别为4.35和0.85。结论HQ可使L-02肝细胞的Rad6B表达增加。

关键词：氢醌 L-02肝细胞 Rad6B 实时荧光定量PCR 泛素结合酶

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介孔碳微球的氢醌改性及电容性能研究

无机材料学报 2018年第1期33卷 48-52页

作者：高秀丽王丹丹李硕邢伟阎子峰中国石油大学(华东)理学院青岛266580 中国石油大学(华东)化学工程学院国家重质油重点实验室青岛266580

由于纯碳材料单一的双电层储能机理,其比电容较低,而赝电容材料可利用法拉第反应进行能量存储,可以获得较高的比电容。作者利用软模板法制备出具有三维有序结构的介孔碳微球,然后采用水热法制备氢醌改性的介孔碳微球。循环伏安和恒流充... 详细信息

由于纯碳材料单一的双电层储能机理,其比电容较低,而赝电容材料可利用法拉第反应进行能量存储,可以获得较高的比电容。作者利用软模板法制备出具有三维有序结构的介孔碳微球,然后采用水热法制备氢醌改性的介孔碳微球。循环伏安和恒流充放电测试表明,氢醌改性使得介孔碳微球不仅具有双电层电容,而且具有赝电容。负载10wt%氢醌的介孔碳微球具有最大的比电容值,当电流密度为0.5 A/g时,其比电容值高达285 F/g;当电流密度增大到10 A/g时,其比电容值仍高达212 F/g,表现出优异的倍率特性。这主要归因于氢醌以π-π堆叠方式负载在碳质介孔表面,不仅提供了额外的赝电容,而且提高了碳材料在水系电解液中的倍率特性。

关键词：介孔碳氢醌赝电容超级电容器

氢醌作用下肝细胞DNA-PK的表达特征及其在自噬中的作用

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右江民族医学院学报 2022年第5期44卷 617-622页

作者：陶怡杨嘉辉黄晖刘家仁胡恭华赣南医学院基础医学院江西赣州341000 赣南医学院公共卫生与健康管理学院江西赣州341000 赣南医学院心脑血管疾病防治教育部重点实验室江西赣州341000

目的探讨氢醌(HQ)对L02肝细胞DNA-PK表达的影响,明确DNA-PK在HQ所致肝细胞自噬中作用,为深入探讨DNA损伤应答与自噬的关系提供科学依据。方法将实验分为未处理对照组、DMSO溶剂对照组、DNA-PK抑制剂(NU7026)组、HQ组、NU7026+HQ组,处... 详细信息

目的探讨氢醌(HQ)对L02肝细胞DNA-PK表达的影响,明确DNA-PK在HQ所致肝细胞自噬中作用,为深入探讨DNA损伤应答与自噬的关系提供科学依据。方法将实验分为未处理对照组、DMSO溶剂对照组、DNA-PK抑制剂(NU7026)组、HQ组、NU7026+HQ组,处理时间为24h;采用CCK-8法检测L02肝细胞存活率;采用倒置显微镜观察细胞的形态变化;采用Westernblot方法检测L02肝细胞中DNA-PK、p62、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ在蛋白水平上的表达情况;采用免疫荧光法检测DNA-PK蛋白的亚细胞定位特征。结果 CCK-8法检测结果显示,与对照组相比,HQ组和HQ+NU7026组细胞存活率有明显降低(P<0.01)。Westernblot结果显示,在浓度为0~40μM的HQ作用下,DNA-PK蛋白的相对表达量有随着HQ作用浓度的增加而升高的趋势;当HQ作用剂量达到40μM和80μM时,DNA-PK的相对表达量高于对照组(P<0.01);与对照组相比,NU7026组和NU7026+HQ组提高了p62的表达水平;与HQ组相比,NU7026+HQ组对LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1和p62的表达无显著影响。免疫荧光实验结果显示,与对照组相比,实验组DNA-PK蛋白的荧光强度明显增强,各组DNA-PK蛋白均只在细胞核中表达。结论 HQ可诱导L02肝细胞DNA-PK和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平的增加,而对Beclin-1和p62蛋白的表达无影响;抑制DNA-PK活性会增加L02细胞p62蛋白的表达水平,而对Beclin-1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白的表达无影响;DNA-PK可能会通过影响p62蛋白的表达而在肝细胞自噬过程中发挥作用。

关键词：氢醌 L02肝细胞 DNA-PK 自噬

应用^(32)P-后标记技术对苯醌和氢醌处理人血淋巴细胞形成DNA加合物的研究

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中国环境科学 1997年第3期17卷 272-275页

作者：孟紫强山西大学生命科学系

应用核酸酶Ｐ１促进的３２Ｐ－后标记技术对苯醌和氢醌处理人血淋巴细胞后形成的ＤＮＡ加合物进行了研究。结果表明，人血淋巴细胞被苯醌和氢醌处理２４ｈ之后，均形成了同一种ＤＮＡ加合物。两种化合物在不同浓度下处理人血淋巴细胞每... 详细信息

应用核酸酶Ｐ１促进的３２Ｐ－后标记技术对苯醌和氢醌处理人血淋巴细胞后形成的ＤＮＡ加合物进行了研究。结果表明，人血淋巴细胞被苯醌和氢醌处理２４ｈ之后，均形成了同一种ＤＮＡ加合物。两种化合物在不同浓度下处理人血淋巴细胞每１０７核苷酸中有０．０１～１０个核苷酸形成加合物。为了达到同等ＤＮＡ加合物水平，氢醌比苯醌需要更高的浓度。小牛胸腺ＤＮＡ与苯醌、氢醌反应可生成５种ＤＮＡ加合物。用苯醌或氢醌处理淋巴细胞所形成的加合物种类与上述纯ＤＮＡ与苯醌，氢醌形成的５种加合物在双向薄层层折图谱上完全不相符合。这些结果意味着苯醌、氢醌与ＤＮＡ的加合作用在细胞内存在着修饰机制。

关键词：苯醌氢醌 DNA加合物人血淋巴细胞毒理学