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氢醌诱导小鼠年龄相关性黄斑变性模型的建立

眼科新进展 2016年第7期36卷 605-608页

作者：安娜陈强梁丽娜庄曾渊中国中医科学院眼科医院北京市100040

目的观察氢醌诱导小鼠年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)动物模型的病理特征及超微结构改变,为AMD发病机制及防治研究提供模型选择和依据。方法 6~7个月龄C57BL/6小鼠16只随机分为模型组和正常组,每组8只。模... 详细信息

目的观察氢醌诱导小鼠年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)动物模型的病理特征及超微结构改变,为AMD发病机制及防治研究提供模型选择和依据。方法 6~7个月龄C57BL/6小鼠16只随机分为模型组和正常组,每组8只。模型组小鼠被喂以基于基础纯净合成的含8 g·L^(-1)氢醌的饮食,正常组小鼠被喂以不含氢醌的同配方饮食,饲养5个月。采用组织病理学、TUNEL方法和8-OHd G免疫荧光法观察两组小鼠视网膜的结构改变、视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的凋亡和DNA损伤情况,透射电镜观察超微结构的改变。结果正常组RPE细胞数目为(7.05±1.54)个,模型组RPE细胞数目为(3.90±1.21)个,模型组RPE细胞数量较正常组显著减少(P氢醌饲料喂养的小鼠具有早、中期AMD的病变特征,可为进一步防治早、中期AMD研究提供可靠的动物模型。

关键词：年龄相关性黄斑变性氢醌动物模型

脲酶抑制剂氢醌对绵羊营养物质消化率和氮代谢的影响

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东北农业大学学报 2002年第3期33卷 241-246页

作者：张永根单安山包军东北农业大学动物科学学院哈尔滨150030

选择特克塞尔与东北半细毛羊杂种公羊 16只 ,平均体重 4 0± 1.2 0 kg,采用 2× 2析因试验设计。豆饼日粮主要以豆饼为氮源 ,在此基础上加 (S1)与不加 30 mg· kg-1脲酶抑制剂 (S0 )共两个水平 ,尿素日粮主要以尿素为氮源 ,在此基础上添... 详细信息

选择特克塞尔与东北半细毛羊杂种公羊 16只 ,平均体重 4 0± 1.2 0 kg,采用 2× 2析因试验设计。豆饼日粮主要以豆饼为氮源 ,在此基础上加 (S1)与不加 30 mg· kg-1脲酶抑制剂 (S0 )共两个水平 ,尿素日粮主要以尿素为氮源 ,在此基础上添加 30 mg· kg-1脲酶抑制剂 (U1)和不添加 (U0 )共 2个水平。在消化试验和代谢试验中不同组动物分别饲喂这 4种日粮 ,以研究在不同氮源日粮中添加氢醌对营养物质的消化率和氮平衡的影响。结果表明 ,日粮中粗蛋白质、有机物、干物质和中性洗涤纤维不受氮源的影响也不受氢醌添加与否的影响。然而 ,在日糖中添加氢醌能使酸性洗涤纤维的消化率提高 18% (P 氢醌添加与否对氮平衡没有产生影响。在整个试验中氮源与氢醌之间的互作效应不显著 (P >0 .0 5 )。在豆饼日粮中添加氢醌具有减少尿中尿素氮排出量的趋势 ,这说明氢醌很可能具有改善内源尿素氮利用率的作用。上述结果表明 ,在全混合日粮中添加氢醌能够提高酸性洗涤纤维的消化率 ,但对其它养分的消化率和氮代谢没有产生不良影响 (P >0 .0 5 )

关键词：脲酶抑制剂氢醌绵羊营养物质消化率氮代谢

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气质联用法测定祛斑类化妆品中氢醌

分析测试学报 2001年第Z1期20卷 238-239页

作者：张伟亚李英杨左军深圳出入境检验检疫局工业品检测技术中心广东深圳518045 深圳出入境检验检疫局工业品检测技术中心广东深圳518045 深圳出入境检验检疫局工业品检测技术中心广东深圳518045

氢醌(对苯二酚)有祛斑增白作用,但是有一定的毒性,对皮肤刺激性大,人体接触过多易引起白血病和心脏病[1].1999年12月1日以前,氢醌在祛斑类化妆品中被国家禁用,现在可作为局部皮肤亮白剂使用,其浓度不允许超过2%,为了保护人们的容貌和健... 详细信息

氢醌(对苯二酚)有祛斑增白作用,但是有一定的毒性,对皮肤刺激性大,人体接触过多易引起白血病和心脏病[1].1999年12月1日以前,氢醌在祛斑类化妆品中被国家禁用,现在可作为局部皮肤亮白剂使用,其浓度不允许超过2%,为了保护人们的容貌和健康,需建立准确可靠的方法测定祛斑类化妆品中氢醌含量.……

关键词：气质联用法测定祛斑类化妆品氢醌皮肤刺激性可靠的方法增白作用对苯二酚心脏病白血病容貌人体浓度局部健康含量国家毒性保护

氢醌对HepG2细胞的遗传毒性及氧化性DNA损伤

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氢醌对HepG2细胞的遗传毒性及氧化性DNA损伤

作者：罗力涵大连医科大学

学位级别：硕士

目的:氢醌(1,4-dihydroxybenzene, HQ)被广泛应用于各种工业领域,也被用于非处方药(OTC)中,还可作为皮肤美白剂的成分;它又是一种天然成分,存在于许多植物源性产品中。HQ可通过环境、职业、饮食和香烟烟雾等方式暴露于人体,也可来源于... 详细信息

目的:氢醌(1,4-dihydroxybenzene, HQ)被广泛应用于各种工业领域,也被用于非处方药(OTC)中,还可作为皮肤美白剂的成分;它又是一种天然成分,存在于许多植物源性产品中。HQ可通过环境、职业、饮食和香烟烟雾等方式暴露于人体,也可来源于苯的暴露。2001年,欧盟国家禁止将HQ用于化妆品的美白配方中,而HQ的类似物熊果苷和植物源性的HQ仍可继续使用。早在1999年,国际癌症研究机构(International Agency for Research on Cancer, IARC)就将HQ归为第三类致癌物,即现有证据尚不能就其对人类致癌性进行分类。体外实验表明,HQ可引起染色体突变。HQ通过多种途径代谢,肝脏是HQ代谢的最初部位,其代谢过程中可产生活性氧(ROS)。因此,我们试探论HQ的遗传毒性,是否与ROS引起的氧化性DNA损伤有关。本研究选用一种代谢完全的人类来源的肝肿瘤细胞株HepG2细胞,它不仅保持了人正常肝实质细胞的许多功能,还保留了一系列生物转化过程中的I相和II相酶,是检测外来化合物遗传毒性的理想细胞系。本研究选用HepG2细胞,研究HQ的遗传毒性及氧化性DNA损伤的机制,为评估HQ对人类的危害提供实验室资料。方法:以HepG2细胞作为试验系统。通过标准的以及改良的蛋白酶K单细胞凝胶电泳(SCGE)试验检测细胞DNA链损伤,微核试验(MNT)检测细胞染色体损伤情况。为探讨遗传毒性的可能机制,以2',7'—二氢二氯荧光素(DCFH)法和苯二醛(OPT)分别测定细胞内ROS以及谷胱甘肽(GSH)水平,还通过免疫组化方法测定8-羟脱氧鸟苷(8-OHdG)在细胞内的表达水平。结果:6.25、12.5、25、50μM的HQ作用HepG2细胞1h后,DNA链断裂细胞形成彗星样拖尾,尾长、尾DNA含量及尾距增大,与未用HQ处理的细胞比较,其差异有统计学意义(P<0.01)。低浓度HQ(6.25～25μM)处理的细胞,DNA的迁移距离明显增加,且呈剂量依赖关系,而当较高浓度HQ(50μM)处理的细胞,DNA的迁移距离与HQ在25μM时的最大迁移量相比明显缩短。接受较高浓度HQ(50μM)作用的细胞,经蛋白酶K处理后与未经蛋白酶K处理的细胞相比,DNA的迁移距离明显增加。这些结果提示,HQ在较低浓度引起细胞DNA链断裂,而在较高浓度导致DNA-蛋白质交联(DPC)的形成。HepG2细胞与12.5～50μM?的HQ接触24h后,细胞微核率明显高于未用HQ处理细胞(P<0.01)。HQ作用于HepG2细胞1h,其浓度为25～50μM和6.25～50μM,可分别引起细胞内ROS表达水平的明显增加以及细胞内GSH的耗竭。12.5～50μM?的HQ作用于HepG2细胞3h后,细胞内8-OHdG水平的表达增强,与对照组比较,其差别具有统计学意义。结论:HQ可引起HepG2细胞DNA链断裂和染色体损伤,表明HQ对HepG2细胞具有遗传毒性。HQ对HepG2细胞的遗传毒效应,可能与ROS的增高,细胞内GSH的耗竭及8-OHdG形成的增加而造成的氧化性DNA损伤和DPC有关。

关键词：氢醌 HepG2细胞系遗传毒性氧化性DNA损伤

氢醌处理人支气管上皮细胞(16HBE)对其miR-221及抑癌基因PTEN mRNA表达的影响

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毒理学杂志 2019年第3期33卷 226-229页

作者：叶伟国黄浩宇姜燃连圳炜朱志良袁建辉胡大林深圳市宝安区石岩预防保健所广东深圳518100 南方医科大学公共卫生学院广东广州510515 深圳市宝安区疾病预防控制中心广东深圳518100 深圳市南山区疾病预防控制中心广东深圳518054

目的探讨苯的活性代谢物氢醌(HQ)对16HBE细胞的毒性作用,对其miR-221及抑癌基因PTEN mRNA表达的影响。方法运用常规细胞传代培养方法培养16HBE细胞至第25代,每代细胞均以20μmol/L的HQ进行染毒;光学显微镜下观察每代细胞的细胞形态学特... 详细信息

目的探讨苯的活性代谢物氢醌(HQ)对16HBE细胞的毒性作用,对其miR-221及抑癌基因PTEN mRNA表达的影响。方法运用常规细胞传代培养方法培养16HBE细胞至第25代,每代细胞均以20μmol/L的HQ进行染毒;光学显微镜下观察每代细胞的细胞形态学特征,CCK-8法绘制细胞生长曲线;qRT-PCR法分析每代细胞miR-221及其靶分子PTEN mRNA的表达。结果 HQ处理对各代活细胞的形态学影响无明显差异,可见部分活细胞发生皱缩,死亡细胞悬浮于培养基中;各代细胞的生长曲线无明显差异;miR-221表达在第25代时明显增强;PTEN mRNA在第5代表达增强,随后逐代降低。结论 HQ可诱导miR-221表达增强,抑癌基因PTEN mRNA表达先增强后抑制。

关键词：苯氢醌毒性作用 miR-221 PTEN mRNA

氢醌转化后的16HBE细胞外泌体miR-221对受体细胞增殖的影响

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氢醌转化后的16HBE细胞外泌体miR-221对受体细胞增殖的影响

作者：姜燃南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景表观遗传(epigenetics)是基因核苷酸序列不发生变化,而表型改变的遗传学现象。表观遗传学是当今生命科学领域研究的前沿和热点,是后基因组时代迅速成长起来的新兴学科。表观遗传信息不仅对机体正常生长发育和疾病现象起着重要... 详细信息

研究背景表观遗传(epigenetics)是基因核苷酸序列不发生变化,而表型改变的遗传学现象。表观遗传学是当今生命科学领域研究的前沿和热点,是后基因组时代迅速成长起来的新兴学科。表观遗传信息不仅对机体正常生长发育和疾病现象起着重要的调控作用,同时在环境污染物的健康效应中也起着重要的调控作用。miRNAs调控在表观遗传学各种调控方式中占据重要的地位。miRNAs(microRNA)是一类长度为19-25 nt的短链RNA分子,属于高度保守的非编码RNA(non-coding RNA)。通过与目的基因的互补结合,在转录后水平调控基因的表达。miRNAs可以通过促使特定基因的mRNAs裂解或降解来特异、高效地阻断体内特定基因的表达。癌症的发生已被证实与miRNAs的异常表达有关,如环境外源化学性致癌物的毒性作用,常伴随miRNAs的异常表达。外泌体(exosomes)是一种直径为30-100nm的具有典型的双层膜结构的囊泡小体,广泛存在于外周血、尿液、唾液等多种体液当中,参与细胞间的物质交换和信息交流,在多种生理和病理过程中发挥重要作用。外泌体富含细胞来源的复杂RNA分子和蛋白质等生物活性分子,是一种细胞间信息传递载体。尤其在多种疾病的发生、发展过程当中,疾病相关的信号分子可以通过外泌体进入受体细胞,发挥其生物学效应,涉及疾病的发生、发展、对药物的敏感性及疾病的结局等。苯(Benzene)是一种重要的工业原料,广泛应用于工业生产的多个领域。国际癌症研究中心(International Agency for Research on Cancer,IARC)已将苯列入了人类确认的致癌物质名单,但其具体的致癌作用机制仍有待于进一步研究。已有的研究表明,苯的毒性作用主要取决于其活性代谢物如氢醌(hydroquinone,HQ)等。最近的研究发现,苯可以诱导C57BL/6小鼠造血祖细胞miRNAs表达谱的改变;在多种临床类型的白血病样本当中,原癌基因miR-221高表达,并与患者的不良预后相关。我们最近的研究发现,与正常人群相比,职业性苯暴露人群的外周血淋巴细胞含有较高的miRNA-221表达量,但其作用及机制未明。因此,表观遗传学的改变在苯的毒性作用过程中起着重要的作用。在环境污染物的健康效应研究中,关于外泌体miRNA的作用研究刚刚起步,特别是外泌体miRNA在环境致癌性污染物引起恶性肿瘤发生、发展和扩散过程中的作用及机制,是环境与健康研究中的崭新领域。本项目初步探讨了苯转化的恶性细胞外泌体miRNA-221向正常受体细胞传递细胞增殖信号的可能性。研究目的本课题旨在阐明苯转化的人支气管上皮细胞(16HBE-T)外泌体miR-221在细胞增殖性状传递中的作用。研究方法用25μM HQ处理16HBE细胞至恶性细胞模型(16HBE-T),建立HQ转化的16HBE-T细胞,用细胞增殖及软琼脂糖集落形成实验验证其恶性程度。利用超速离心法提取外泌体,并使用透射电镜法进行表征。以CCK-8法分析转化前后细胞增殖能力的改变,qRT-PCR检测分析转化前后细胞及其外泌体中miRNA-221 表达水平。分别转染 miRNA-221 mimic 和 inhibitor 建立 miRNA-221高表达及低表达的16HBE-T细胞,并提取外泌体与正常细胞组共孵育,分析其外泌体对正常细胞miRNA-221表达水平与增殖能力的影响。研究结果1、HQ慢性处理16HBE细胞所诱导的恶性细胞模型(16HBE-T)中miRNA-221表达明显高于对照组细胞;2、HQ慢性处理16HBE细胞所诱导的恶性细胞模型(16HBE-T)外泌体中miRNA-221表达明显高于对照组细胞;3、HQ慢性处理16HBE细胞所诱导的恶性细胞模型(16HBE-T)外泌体与正常细胞共孵育后,导致正常细胞miRNA-221表达明显高于对照组细胞;4、HQ慢性处理16HBE细胞所诱导的恶性细胞模型(16HBE-T)外泌体与正常细胞共孵育后,外泌体中的miRNA-221可以传递给正常细胞,并导致正常细胞增殖加快。研究结论1、HQ转化后的恶性16HBE-T细胞miRNA-221高表达;2、HQ转化后的恶性16HBE-T细胞外泌体中miRNA-221高表达;3、HQ转化后的恶性16HBE-T细胞外泌体miRNA-221能传递至正常16HBE细胞;4、HQ转化后的恶性16HBE-T细胞外泌体miRNA-221信号传递促进正常受体16HBE细胞增殖。

关键词：氢醌细胞增殖外泌体 miR-221 毒性机制细胞间通讯

沙苑子黄酮与维生素C对氢醌致V79细胞DNA损伤拮抗效应的研究

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工业卫生与职业病 2009年第3期35卷 159-162页

作者：王强黄文琪薛莲周建华江苏省常州市疾病预防控制中心江苏常州213003 苏州大学放射医学与公共卫生学院江苏苏州215123

目的了解沙苑子黄酮与维生素C对氢醌(HQ)致DNA损伤的拮抗作用,探讨HQ遗传毒作用的机制。方法分别用不同浓度沙苑子黄酮、维生素C与HQ共同作用于V79细胞后,用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测DNA损伤的变化情况。结果SCGE结果显示,20、200 m... 详细信息

目的了解沙苑子黄酮与维生素C对氢醌(HQ)致DNA损伤的拮抗作用,探讨HQ遗传毒作用的机制。方法分别用不同浓度沙苑子黄酮、维生素C与HQ共同作用于V79细胞后,用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测DNA损伤的变化情况。结果SCGE结果显示,20、200 mmol/L维生素C和100 mg/L沙苑子黄酮对0.135、0.405 mmol/L浓度的HQ均有保护作用,表现为彗星细胞拖尾率、尾长、Olive尾矩降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。而2000 mmol/L维生素C则加重了HQ的DNA损伤。结论在体外培养条件下,中、低浓度维生素C和中浓度沙苑子黄酮能拮抗HQ引起的DNA损伤。

关键词：氢醌沙苑子黄酮维生素C 拮抗作用单细胞凝胶电泳

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氢醌在玉米上应用效果的研究

玉米科学 2002年第2期10卷 90-92页

作者：王玉峰黑龙江省农业科学院土肥所哈尔滨150086

在相同施氮情况下 ,施用适量的氢醌 ,可减少氮的损失量 ,从而增加玉米植株对氮、磷、钾的吸收量 ,分别为 5 6 .79kg/hm2 、11.84kg/hm2 和 38.36kg/hm2 ,并可提高玉米产量 9.3%。

关键词：氢醌玉米应用效果尿素肥料利用率氮肥增效剂

氢醌对人骨髓间充质干细胞蛋白质表达谱的影响

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氢醌对人骨髓间充质干细胞蛋白质表达谱的影响

作者：高向景浙江大学

学位级别：硕士

氢醌(hydroquinone，HQ)又名对苯二酚(CHO)，是苯的主要代谢物之一，在苯的毒性效应中也发挥重要作用。此外，氢醌还是工业生产中广泛应用的生产原料和有机溶剂。氢醌可经消化道、呼吸道和皮肤吸收，主要在肝内代谢，大部分与葡萄糖醛... 详细信息

氢醌(hydroquinone，HQ)又名对苯二酚(CHO)，是苯的主要代谢物之一，在苯的毒性效应中也发挥重要作用。此外，氢醌还是工业生产中广泛应用的生产原料和有机溶剂。氢醌可经消化道、呼吸道和皮肤吸收，主要在肝内代谢，大部分与葡萄糖醛或硫酸盐形成结合物，经尿排出体外。但仍有一部分富集于体内，对肝、肾等器官及造血系统、免疫系统、中枢系统等造成损害，对人类尤其是职业接触者的健康造成极大的危害，从而引起了人们越来越多的关注。目前已有许多研究者从细胞、蛋白质和基因等分子水平对HQ毒性作用进行了研究，结果表明，氢醌可诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖、导致染色体畸变、DNA损伤、蛋白表达变化等。但这些研究仅局限于几个指标的分析，未能系统的诠释氢醌的毒性作用机制。近年来，高通量扫描技术(包括基因组学、转录组学和蛋白质组学)迅猛发展，为作用机制的研究提供了新思路，也是筛选特异蛋白质标志物的一种有效手段，并已广泛应用于预防医学领域。因此，本学位论文计划以人的骨髓间充质干细胞为对象，采用蛋白质双向凝胶电泳结合质谱分析的方法探讨氢醌的骨髓毒性机制，以期发现对氢醌毒作用敏感的蛋白质，并可能阐明氢醌骨髓毒性的作用机制，为接触氢醌引发的疾病诊断和防治及完善氢醌职业卫生标准提供基础资料。鉴于以上目的，我们采集在浙江大学医学院附属第一医院抽取的正常骨髓样本，通过浓度梯度离心分离骨髓间充质干细胞(MSC)并进行纯化和体外传代培养，待传到第三代时，将细胞分为处理组(浓度为5×10mol/L的氢醌染毒24小时)和对照组(不做处理)两组，然后同时提取总蛋白，采用17cm长的ph5-8的IPG胶条进行一向等电聚焦，12．5％的十二烷基磺酸钠．聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)进行二向电泳分离，凝胶用硝酸银染色，并用GS800扫描仪扫描，经PDQuest 8．0软件采集数据和图像分析，建立化学毒物氢醌处理组和对照组细胞蛋白质组差异表达图谱。实验独立进行3次，每次实验组和对照组分别设3块胶作为组内重复。结果显示，试验组与对照组的组内匹配率达80％，3次实验各发现33、29、32个差异2倍以上的蛋白质点，其中11个差异点在3次实验中均出现(4个上调，7个下调)。用刀片手工对11个重复性好的差异蛋白质点进行采集，用特异性胰酶胶内消化蛋白质点，酶解后的肽段采用色谱和飞行时间串联质谱(LQ-Qq-TOF)进行质谱分析，综合所得到的原始数据，通过proteinpilot 2．0软件搜索NCBI人类蛋白质数据库，初步鉴定5个蛋白点分别为膜联蛋白-AⅡ(Annexin-AⅡ)、甲酰-谷胱苷肽水解酶、尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶、尿苷二磷酸6-葡萄糖脱氢酶、醛缩酶A。为了验证双向凝胶电泳和质谱鉴定结果的准确性，我们选取蛋白Annexin-AⅡ，利用Western Blot检测氢醌处理后其表达情况的变化，结果表明氢醌处理后骨髓间充质干细胞内Annexin-AⅡ蛋白表达降为原来的0．125倍，与双向凝胶电泳结果相符。本研究得出以下结论： 1．5×10mol／L的氢醌可诱导人骨髓间充质干细胞蛋白质表达谱发生改变，并筛选到11个差异表达蛋白，其中7个表达下调，4个表达上调;2．通过LC-Qq-TOF质谱鉴定出膜联蛋白-AⅡ、尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶、尿苷二磷酸6-葡萄糖脱氢酶和醛缩酶A表达下调，甲酰-谷胱苷肽水解酶表达上调;3．蛋白Annexin-AⅡ的表达下调得到了Western Blot的验证。

关键词：氢醌骨髓间充质干细胞双向凝胶电泳蛋白质组学质谱膜联蛋白-AⅡ Western Blot