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氢过氧化物酶(HPO)阳性Phi小体形态特点、超微细胞化学观察及其临床意义

吉林医学院学报 1995年第2期15卷 13-16页

作者：沙滨夏薇孙敏崔新宇宁嗣宗李永华吉林医学院血液检验教研室吉林中西医结合医院

本文对４１例成人白血病及４例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）病人的骨髓标本进行氢过氧化物酶（ＨＰＯ）染色，观察ＨＰＯ阳性Ｐｈｉ小体在光镜下的形态特点及电镜下细胞化学超微结构，并初步探讨了ＨＰＯ染色技术及Ｐｈｉ小体检测的临... 详细信息

本文对４１例成人白血病及４例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）病人的骨髓标本进行氢过氧化物酶（ＨＰＯ）染色，观察ＨＰＯ阳性Ｐｈｉ小体在光镜下的形态特点及电镜下细胞化学超微结构，并初步探讨了ＨＰＯ染色技术及Ｐｈｉ小体检测的临床意义。作者认为：该染色法特异性强，重复性好，操作简便，对于活动性ＡＭＬ的诊断几无假阳性，并可用于指导治疗，值得推广应用。

关键词：氢过氧化物酶形态学 Phi小体白血病诊断

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氢过氧化物酶染色方法的改良及其临床意义

氢过氧化物酶染色方法的改良及其临床意义

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2007年浙江省血液病学术年会

作者：龚旭波卢兴国朱蕾徐根波张晓红赵小英浙江大学医学院附属第二医院血液科

目的:建立改良氢过氧化物酶染色方法,进一步探讨 phi 小体在急性髓细胞白血病的形态特征与检出率。方法:对53例白血病和4例骨髓增生异常综合症行改良的氢过氧化物酶染色,分析 phi 小体和普通的阳性颗粒在不同疾病组的检出情况,并采用同... 详细信息

目的:建立改良氢过氧化物酶染色方法,进一步探讨 phi 小体在急性髓细胞白血病的形态特征与检出率。方法:对53例白血病和4例骨髓增生异常综合症行改良的氢过氧化物酶染色,分析 phi 小体和普通的阳性颗粒在不同疾病组的检出情况,并采用同一底物对改良的 HPO 染色与 POX 染色进行阳性率比较。结果:在 AML 中有较高的 phi 小体检出率,在 M3中可见独有的柴捆状 phi 小体,一例慢性粒细胞白血病急变期标本中检出 phi 小体,具有深远意义。除棒状 phi 小体外,还发现糯米团样 phi 小体,具有特征形态学和相同的评估意义。结论:改良 HPO 髓过氧化酶(MPO)阳性率高于传统的 POX 法,是鉴别诊断 AML 与 ALL 的重要方法,它既可以检查原始细胞的过氧化物酶, 又可以观察 phi 小体,具有双重意义,我们推荐将它作为白血病的一个常规检查项目在临床上开展。

关键词：氢过氧化物酶 Phi 小体糯米团样小块 AML

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白藜芦醇抗乳腺癌作用机制的研究进展

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上海医学 2010年第4期33卷 387-389页

作者：时翠林孙永宁沈赞上海交通大学附属第六人民医院中医科 200233

白藜芦醇(resveratrol, res)对女性体内雌激素水平有双向调节作用, 可预防和减少乳腺癌的发生. 近10年的研究证实, res对乳腺癌发生的起始、增殖、发展3个主要阶段均有抑制作用. res抑制初始阶段, 可能与其具有明显的抗炎作用, 抑制细... 详细信息

白藜芦醇(resveratrol, res)对女性体内雌激素水平有双向调节作用, 可预防和减少乳腺癌的发生. 近10年的研究证实, res对乳腺癌发生的起始、增殖、发展3个主要阶段均有抑制作用. res抑制初始阶段, 可能与其具有明显的抗炎作用, 抑制细胞色素酶P450的活性, 调节雌激素水平有关; res抑制促进阶段, 可能与其抗炎、抑制环氧合酶(COX)和氢过氧化物酶机制相关; res抑制发展阶段, 可能与其能干扰磷酸肌醇-3-OH激酶 (P13K)信号通路, 诱导肿瘤细胞分化和凋亡, 抑制肿瘤细胞增殖机制相关. res抗乳腺癌的其他机制包括抑制肿瘤血管生成、抑制survivin基因、抑制乳腺癌耐药蛋白(BCRP)活性等

关键词：抗乳腺癌白藜芦醇细胞色素酶P450 双向调节作用雌激素水平氢过氧化物酶抗炎作用 res

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肺炎支原体Ohr样蛋白的结构及功能的初步研究

肺炎支原体Ohr样蛋白的结构及功能的初步研究

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作者：陈列松南华大学

学位级别：硕士

目的:研究肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)重组MPN668蛋白是否具有降解有机氢过氧化物(Organic Hydroperoxide,OHP)的能力,并通过分子模拟解析rMPN668的结构,初步分析其结构与酶活性的关系,以进一步了解Mp的致病机制。方法:以Mp... 详细信息

目的:研究肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)重组MPN668蛋白是否具有降解有机氢过氧化物(Organic Hydroperoxide,OHP)的能力,并通过分子模拟解析rMPN668的结构,初步分析其结构与酶活性的关系,以进一步了解Mp的致病机制。方法:以Mp129株基因组DNA为模板,PCR法扩增目的基因mpn668,将其亚克隆至pGEX-6P-1载体中。经鉴定后将其转化至表达菌*** BL21中进行诱导表达。采用SDS-PAGE和Western blotting等方法对表达产物进行分析鉴定并纯化GST融合蛋白;切除重组蛋白GST标签后,采用氧化铁二甲酚橙(Ferrous Oxidation-Xylenol Orange ,FOX)实验检测其氢过氧化物酶活性。固体培养Mp,随后将其置于氧化应激条件下培养3d,RT-PCR检测mpn668 mRNA的表达水平。利用同源建模和分子动力学等方法,通过软件Expasy与Visual Molecular Dynamics(VMD)模拟rMPN668的分子结构,并对其已预测出的酶活性位点的氨基酸进行定点突变,通过诱导表达获得△rMPN668突变蛋白, FOX实验测定其氢过氧化物酶活性。结果:成功扩增出总长度为423bp的mpn668基因,所构建的原核重组质粒经PCR、双酶切以及测序鉴定与预期目的基因相符。SDS-PAGE显示,IPTG可诱导一分子量约为41KD的可溶性GST融合蛋白,经GST?Bind? Purification Kit纯化后,纯度可达95%以上。FOX实验显示,经Prescission protease切除GST标签的rMPN668能降解有机氢过氧化物叔丁基过氧化氢( tert-butyl hydroperoxide,t-BHP)以及无机H2O2,其降解能力与rMPN668浓度呈正相关;催化t-BHP时,20ng/μL rMPN668在2min内降解约500μM t-BHP,而催化H2O2反应时,催化效率远低于此水平,200ng/μL rMPN668降解500μM H2O2需要35min以上。RT-PCR分析表明,Mp在不同浓度的t-BHP(0.05M.00M)和氢过氧化枯烯(cumene hydroperoxide,CHP)(0.05M.00M)条件下,mpn668基因表达水平随着t-BHP和CHP浓度增大而升高;模拟的分子模型显示,rMPN668的二级结构序列为β1-β2-β3-α1-β4-β5-α2-α3-β6,Cys55可能位于其活性中心内。Cys55错义突变后,表达产物的酶活性几乎丧失。结论: (1) rMPN668具有氢过氧化物酶活性,能降解有机及无机氢过氧化物,但降解有机氢过氧化物的效率高于无机过氧化氢。 (2)氧化应激条件下能上调Mp中mpn668基因的表达。 (3) Cys55可能位于rMPN668的活性中心,在酶促反应中可能发挥关键作用。

关键词： rMPN668 有机氢过氧化物抗性蛋白分子模型氢过氧化物酶

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褪黑激素对老年大鼠肾MDA含量和GSH-px、CAT、Ca^(2+)-ATPase活性的影响

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四川解剖学杂志 1999年第3期7卷 162-164页

作者：狄荣科马瑞周志强刘益仁严丽荣镇江医学院人体解剖学教研室镇江医学院附属医院老年病科镇江212001

为探讨褪黑激素在抗肾老化的作用及机理，观察了褪黑激素对老年大鼠肾过氧化脂质产物的含量及对氧自由基与细胞内钙离子清除能力的影响。本实验连续３０天给初老大鼠补充褪黑激素，采用生化比色法测定了肾组织内丙二醛（ＭＤＡ）含量... 详细信息

为探讨褪黑激素在抗肾老化的作用及机理，观察了褪黑激素对老年大鼠肾过氧化脂质产物的含量及对氧自由基与细胞内钙离子清除能力的影响。本实验连续３０天给初老大鼠补充褪黑激素，采用生化比色法测定了肾组织内丙二醛（ＭＤＡ）含量和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨｐｘ）、氢过氧化物酶（ＣＡＴ）与钙离子三磷酸腺苷酶（Ｃａ２＋ ＡＴＰａｓｅ）活性。与对照组比较，实验组大鼠肾组织ＭＤＡ含量下降了１２７％，而ＧＳＨｐｘ、ＣＡＴ和Ｃａ２＋ ＡＴＰａｓｅ活性则分别提高了２７５％、２９５％和３９８％。提示　褪黑激素能增强肾抗氧化能力和清除游离钙离子的能力。

关键词：肾丙二醛谷胱甘肽过氧化物酶氢过氧化物酶钙离子三磷酸腺苷酶褪黑激素

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Phi小体染色方法的改良及其临床应用价值

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中国实验血液学杂志 2009年第1期17卷 222-225页

作者：龚旭波卢兴国严丽娟肖希斌吴东徐根波张晓红赵小英浙江大学医学院附属第二医院血液科浙江杭州310009

本研究应用改良氢过氧化物酶(hydroperoxidase,HPO)染色法,分析探讨Phi小体形态学特征及该法的临床应用价值。对128例髓系或淋巴系肿瘤标本行改良HPO染色,观察比较各疾病组Phi小体检出率;随机双盲法选取AML69例,均以2-氨基联苯氨为底物... 详细信息

本研究应用改良氢过氧化物酶(hydroperoxidase,HPO)染色法,分析探讨Phi小体形态学特征及该法的临床应用价值。对128例髓系或淋巴系肿瘤标本行改良HPO染色,观察比较各疾病组Phi小体检出率;随机双盲法选取AML69例,均以2-氨基联苯氨为底物行HPO与过氧化物酶(POX)染色,观察比较颗粒阳性率与Phi小体检出数。结果表明:Phi小体以棒状和团块状两种形态为主,棒状Phi小体粗细、长短不一,团块状Phi小体多呈椭圆形,周边光滑。在AML-M3中检出柴捆状Phi小体;棒状Phi小体在AML-M1-M5组的检出率依次为42.9%(6/14)、83.3%(15/18)、92.0%(23/25)、52.3%(11/21)、33.3%(5/15),团块状Phi小体检出率依次为28.6%(4/14)、66.7%(12/18)、11.1%(3/25)、33.3%(7/21)、20.0%(3/15)。AML-M3组棒状Phi小体检出率与(M1+M2)或(M4+M5)组比较,(M1+M2)组团块状Phi小体检出率与M3组比较,差异均具有统计学意义(p<0.05)。结论:改良后HPO染色方法简便,Phi小体检出率高,颗粒阳性显著,对AML与ALL的鉴别、AML的分型及疗效观察均具有重要参考作用。

关键词： Phi小体氢过氧化物酶 AML ALL

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