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卡介苗对支气管哮喘大鼠气道重塑的作用及机制

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中华医学杂志 2014年第8期94卷 617-621页

作者：加慧薄建萍刘晨涛常琴董艳婷田新瑞山西医科大学第二医院呼吸内科太原030001

目的探讨卡介苗对支气管哮喘（简称哮喘）大鼠气道重塑的作用及机制.方法Wistar雄性大鼠40只按随机数字表法分为对照组、哮喘组、卡介苗组、地塞米松组、卡介苗＋地塞米松组各8只.以卵白蛋白建立哮喘气道重塑模型,激发前30 min卡介苗... 详细信息

目的探讨卡介苗对支气管哮喘（简称哮喘）大鼠气道重塑的作用及机制.方法Wistar雄性大鼠40只按随机数字表法分为对照组、哮喘组、卡介苗组、地塞米松组、卡介苗＋地塞米松组各8只.以卵白蛋白建立哮喘气道重塑模型,激发前30 min卡介苗组给予皮下注射卡介苗 0.025 mg,地塞米松组腹腔注射地塞米松0.5 mg/kg,卡介苗＋地塞米松组腹腔注射地塞米松0.25 mg/kg,皮下注射卡介苗 0.025 mg,对照组以生理盐水代替卵白蛋白腹腔注射及雾化吸入.计算机图像分析气道重塑程度,并检测支气管肺泡灌洗液（BALF）及血清中转化生长因子β1（TGF-β1）含量及肺组织中E钙黏蛋白、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤维连接蛋白的表达,并进行统计学对比分析.结果哮喘组大鼠气道壁、平滑肌厚度[（95.01±0.48）、（43.86±0.51）μm]显著厚于对照组[（25.96±0.42）、（15.14±0.18）μm],BALF、血清TGF-β1含量[（10.05±0.26）、（75.67±1.17）μg/L]显著高于对照组[（1.53±0.18）、（22.24±0.35）μg/L],E钙黏蛋白表达（0.26±0.03）显著低于对照组（0.45±0.04）,α-SMA、纤维连接蛋白表达（0.54±0.06、0.56±0.06）显著高于对照组（0.32±0.04、0.35±0.06）（均P〈0.01）.卡介苗组、地塞米松组、卡介苗＋地塞米松组治疗后气道壁和平滑肌厚度分别为（58.46±2.43）、（49.51±1.44）、（49.63±1.42）μm和（25.84±0.54）、（25.44±0.40）、（25.62±1.17）μm,BALF和血清 TGF-β1含量分别为（3.42±0.18）、（3.27±0.34）、（3.39±0.26）μg/L和（37.61±0.22）、（35.65±0.49）、（36.22±0.71）μg/L,均显著低于哮喘组（均P＜0.01）;E钙黏蛋白表达（0.29±0.04、0.32±0.04、0.31±0.03）显著高于哮喘组,α-SMA和纤维连接蛋白表达（0.40±0.06、0.35±0.06、0.40±0.05和0.47±0.03、0.43±0.06、0.47±0.04）均显著低于哮喘组（均P〈0.01）.Western印迹结果与上相似.结论卡介苗通过免疫调节作用减轻TGF-β1所致气道上皮细胞损伤间质转化,可协同地塞米松减轻哮喘气道重塑.

关键词：哮喘卡介苗气道重塑转化生长因子β1 大鼠

姜黄素对哮喘气道重塑大鼠骨桥蛋白及mRNA的影响

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中国药学杂志 2015年第22期50卷 1964-1968页

作者：王小明朱婷婷张维溪梁亚峰李昌崇温州医科大学附属第二医院育英儿童医院呼吸内科浙江温州325027

目的探讨姜黄素对哮喘气道重塑大鼠骨桥蛋白(OPN)及mRNA表达的影响及其在哮喘气道重塑中的作用。方法将24只SD大鼠分为3组,正常对照组(N组)、哮喘组(A组)和姜黄素组(C组),每组8只。卵清蛋白(OVA)致敏和激发制备哮喘气道重塑模型。图像... 详细信息

目的探讨姜黄素对哮喘气道重塑大鼠骨桥蛋白(OPN)及mRNA表达的影响及其在哮喘气道重塑中的作用。方法将24只SD大鼠分为3组,正常对照组(N组)、哮喘组(A组)和姜黄素组(C组),每组8只。卵清蛋白(OVA)致敏和激发制备哮喘气道重塑模型。图像分析技术测量大鼠支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam),免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定大鼠肺组织骨桥蛋白的蛋白及mRNA表达,对支气管壁厚度、平滑肌厚度与骨桥蛋白蛋白和mRNA的表达进行相关性分析。结果哮喘组支气管壁厚度和平滑肌厚度均高于对照组。与哮喘组相比,姜黄素组支气管壁厚度和平滑肌厚度显著下降。免疫组化检测提示,哮喘组骨桥蛋白蛋白表达显著高于正常对照组,姜黄素组相对哮喘组显著下降,差异具有统计学意义(P气道重塑,可能通过下调大鼠骨桥蛋白的表达发挥作用。

关键词：大鼠哮喘气道重塑骨桥蛋白姜黄素

胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸对慢性支气管哮喘小鼠气道重塑的影响

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中华结核和呼吸杂志 2006年第9期29卷 612-616页

作者：揭志军金美玲蔡映云袁正宏胡芸文徐扬任涛杨振华上海第二医科大学附属新华医院呼吸科复旦大学附属中山医院呼吸疾病研究所上海200032 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）寡脱氧核苷酸（CpG-ODN）能否预防或减轻慢性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道重塑的发生。方法 40只雌性清洁级C57BL／6小鼠按随机数字表法分为4组，每组10只。（1）慢性哮喘组（A组）... 详细信息

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）寡脱氧核苷酸（CpG-ODN）能否预防或减轻慢性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道重塑的发生。方法 40只雌性清洁级C57BL／6小鼠按随机数字表法分为4组，每组10只。（1）慢性哮喘组（A组）：分别于第1、14天小鼠腹腔注射1ml致敏液[卵蛋白（OVA，10μg）＋氢氧化铝凝胶（100μg）]；从第21天开始雾化吸入2．5％OVA溶液，每次30min，每周3次，连续8周。（2）CpG—ODN干预组（B组）：在OVA致敏的同时给予浓度为60μg／ml的CpG—ODN腹腔注射1ml共2次，以后每2周腹腔注射1次共4次。（3）GpC—ODN对照组（C组）：将CpG替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶（GpC，剂量及用法同CpG-ODN）作为对照。（4）生理盐水（NS）对照组（D组）：给予NS进行致敏（每次1ml腹腔注射）和激发（用NS雾化吸入）。在末次激发24h后所有小鼠取血测嗜酸粒细胞（EOS）数和血清IgE；收集支气管肺泡灌洗液（BALF）做细胞分类计数，用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测上清液中自细胞介素13（IL-13）和转化生长因子β1（TGF—β1）的浓度。取左肺组织行苏木精-伊红（HE）染色和Masson三色染色，用抗α平滑肌肌动蛋白（α—SMA）抗体和抗TGF—β1抗体行免疫组化染色。结果 A组外周血EOS计数为（89±10）×10^4／ml、血清IgE为（279±53）ng／ml，BALF中EOS计数和分类分别为（6．30±1．30）×10^5／ml、0．181±0．030，A组IL-13浓度为（4015±361）pg／ml、TGF—β1浓度为（356±64）pg／ml，以上数值与D组比较差异有统计学意义（t值分别为24．0、15．7、14．7、18．4、12．0和18．9，P均〈0．01）；A组Masson三色染色、α-SMA、TGF-β1阳性染色面积百分比[分别为（29．7±4．2）％、（45±7）％、（34±4）％]与D组比较差异也有统计学意义（t值分别为18．0、15．6和17．9，P均〈0．01）。应用CpG-ODN干预后（B组）的Masson三色染色、α—SMA、TGF—β1阳性染色面积百分比[分别为（13．8±3．2）％、（25±3）％、（18±4）％]与A组比较差异也有统计学意义（t值分别为9．5、8．9、9．8，P均〈0．05）。结论应用CpG-ODN干预慢性哮喘模型，不仅能抑制Th2细胞反应和EOS肺浸润，还能抑制气道重塑的发生和发展，它可能是通过抑制TGF—β1、IL-13等因子而抑制气道重塑的。

关键词：哮喘气道重塑炎症小鼠 CpG-寡脱氧核苷酸

孟鲁司特对气道重塑及白细胞介素类与转移生长因子β_2 mRNA表达的影响

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中华结核和呼吸杂志 2004年第8期27卷 524-528页

作者：白建文邓伟吾吴华成上海第二医科大学附属瑞金医院肺科上海东方医院急诊创伤中心200025

目的探讨白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13、转移生长因子β:(TGF-β2)与气道重塑的关系及白三烯受体拮抗剂孟鲁司特(MK)对支气管哮喘(简称哮喘)炎症、气道重塑的影响。方法20只BALB/c雌性小鼠,按随机数字表法分为重塑组、MK治疗组,每... 详细信息

目的探讨白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13、转移生长因子β:(TGF-β2)与气道重塑的关系及白三烯受体拮抗剂孟鲁司特(MK)对支气管哮喘(简称哮喘)炎症、气道重塑的影响。方法20只BALB/c雌性小鼠,按随机数字表法分为重塑组、MK治疗组,每组10只,两组均以卵白蛋白(OVA)致敏,仅MK治疗组给予MK(15 mg/kg)灌胃;检测支气管肺泡灌洗液(BAIF)中的细胞计数,用光镜、电镜观察病理、形态学改变;用原位杂交、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中IL-13、TGF-β2、IL-4、IL-5 mRNA的表达。结果重塑组BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞数分别为(5.4±1.1)×105/ml、2.32±0.20,MK治疗组分别为(3.9±1.6)×105/ml、1.64±0.32,两组比较差异有显著性(P均重塑组小鼠具有明显的气道炎症,细胞呈团状聚集,以淋巴细胞、嗜酸粒细胞为主,上皮细胞增生呈指状突起、平滑肌肌层增厚、结缔组织增生,黏液分泌旺盛并伴小气道栓塞,气道周围有大量胶原纤维沉积,杯状细胞分泌黏液增加,MK治疗组小鼠则炎症明显改善,无明显气道痉挛、黏液产生减少,上皮增生、平滑肌层增厚不明显,气道周围胶原纤维及黏液颗粒均减少。原位杂交结果显示,重塑组小鼠肺组织中IL-13 mRNA、TGF-β2 mRNA表达分别为24±7、17±5。

关键词：气道重塑白细胞介素类转移生长因子B2 孟鲁司特支气管哮喘

枇杷叶提取物对卵清蛋白诱导的哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响

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中国现代应用药学 2021年第1期38卷 20-27页

作者：胡蔚李岚中国科学院大学宁波华美医院浙江宁波315010 浙江中医药大学附属第一医院杭州310006

目的探究枇杷叶提取物对哮喘小鼠的治疗效果。方法60只BALB/c小鼠随机分为6组,空白组,模型组,枇杷叶提取物低、中、高剂量组(50,100,150 mg·kg^−1),地塞米松组(0.5 mg·kg^−1,阳性对照)。卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导哮喘小鼠模型,各... 详细信息

目的探究枇杷叶提取物对哮喘小鼠的治疗效果。方法60只BALB/c小鼠随机分为6组,空白组,模型组,枇杷叶提取物低、中、高剂量组(50,100,150 mg·kg^−1),地塞米松组(0.5 mg·kg^−1,阳性对照)。卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导哮喘小鼠模型,各组小鼠分别灌胃给予相应药物。末次OVA造模后24 h吸入乙酰甲胆碱溶液检测小鼠气道高反应性。瑞氏-吉姆萨染色分类计数支气管肺泡灌洗液中炎症细胞数;ELISA检测Eotaxin、IL-4、IL-5、IL-13和OVA特异性IgE(OVA-specific IgE,OVA-sIgE)的水平;HE和AB-PAS染色观察小鼠肺组织的病理学改变;Western blotting检测肺组织中AKT、p-AKT、PI3K、Cyclin D1的蛋白表达。结果枇杷叶提取物(100,150 mg·kg^−1)能有效减少炎性细胞包括嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞的数量;降低Eotaxin、IL-4、IL-5、IL-13和OVA-sIgE的表达水平;抑制哮喘小鼠肺组织炎症细胞的浸润和黏液分泌;抑制哮喘模型中AKT、p-AKT、PI3K、Cyclin D1的蛋白表达。结论枇杷叶提取物对OVA诱导的哮喘气道炎症有良好的抑制效果,可为枇杷叶治疗哮喘的研究提供参考。

关键词：枇杷叶提取物哮喘气道炎症气道重塑 Th2型细胞因子

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气道重塑与儿童哮喘

临床儿科杂志 2000年第2期18卷 67-69页

作者：俞善昌上海第二医科大学附属瑞金医院 200025

重塑(remodelling)在牛津字典中描述为重新塑造(model again)或重建(reconstruct),是指人体器官受到损伤后的一种自然反应,即修复(repair)。哮喘的本质是气道慢性炎症,初始可引起气道的功能性改变(functional change),由于炎症反复不断... 详细信息

重塑(remodelling)在牛津字典中描述为重新塑造(model again)或重建(reconstruct),是指人体器官受到损伤后的一种自然反应,即修复(repair)。哮喘的本质是气道慢性炎症,初始可引起气道的功能性改变(functional change),由于炎症反复不断刺激,日久后演变为气道的结构性改变(structuralchange),表现为气道壁增厚;

关键词：儿童哮喘气道重塑

细胞周期蛋白D_1在支气管哮喘小鼠肺组织中的表达及其与气道重塑的关系

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中华结核和呼吸杂志 2006年第9期29卷 607-611页

作者：葛海燕黄茂姚欣殷凯生杨玉南通大学附属医院呼吸科南京医科大学第一附属医院呼吸科 210029

目的研究细胞周期蛋白 D_1(Cyclin D_1)在支气管哮喘(简称哮喘)小鼠肺组织中的表达,探讨 Cyclin D_1在哮喘及气道重塑中的作用。方法将40只 SPF 级 BALB/c 小鼠按随机数字表法分为正常对照组(A 组)、哮喘雾化2周组(B 组)、哮喘雾化4周组... 详细信息

目的研究细胞周期蛋白 D_1(Cyclin D_1)在支气管哮喘(简称哮喘)小鼠肺组织中的表达,探讨 Cyclin D_1在哮喘及气道重塑中的作用。方法将40只 SPF 级 BALB/c 小鼠按随机数字表法分为正常对照组(A 组)、哮喘雾化2周组(B 组)、哮喘雾化4周组(C 组)、哮喘雾化8周组(D 组)4组,每组10只。用10%鸡卵白蛋白(OVA)致敏和1%OVA 激发小鼠建立哮喘模型。分析支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸粒细胞(EOS)计数及分类;用动物肺功能仪检测各组小鼠肺功能状况;用苏木精-伊红(HE)染色观察气道炎症及细胞浸润情况;用图像分析软件观察气道壁及平滑肌层变化情况;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时定量(Real-time)PCR 测定肺组织中 Cyclin D_1mRNA 水平表达变化;用 Western blot 法观察肺组织中 Cyclin D_1的蛋白表达变化。结果 BALF 分析结果提示,B、C、D 组 EOS 计数分别为(42.6±0.9)×10~4/L、(54.7±1.4)×10~4/L、(44.8±2.4)×10~4/L,与A组[(3.4±0.5)×10~4/L]比较差异有统计学意义(q 值分别为79.75、91.42、84.82,P 均气道反应性呈正相关,Cyclin D_1可能通过细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路参与气道重塑过程。

关键词：细胞周期蛋白D1 哮喘支气管高反应性气道重塑

雷公藤甲素对哮喘小鼠气道重塑及转化生长因子-β_1表达的影响

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中山大学学报（医学科学版） 2009年第5期30卷 537-542页

作者：吕志强陈茗江山平谭艳芳张蔚梁瑞韵李海刚中山大学附属第二医院呼吸内科广东广州510120 中山大学附属第二医院病理科广东广州510120

【目的】探讨雷公藤甲素对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道重塑的影响。【方法】40只雌性SPF级BABL/c小鼠,随机数字表法分为4组,每组10只。A组为生理盐水对照组;B组为卵蛋白(OVA)哮喘组;C组为雷公藤甲素治疗组;D组为地塞米松治疗组。在末... 详细信息

【目的】探讨雷公藤甲素对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道重塑的影响。【方法】40只雌性SPF级BABL/c小鼠,随机数字表法分为4组,每组10只。A组为生理盐水对照组;B组为卵蛋白(OVA)哮喘组;C组为雷公藤甲素治疗组;D组为地塞米松治疗组。在末次激发24h后所有小鼠取左肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,过碘酸-雪夫(PAS)染色,Masson三色染色以及抗转化生长因子β1(TGF-β1)抗体免疫组化染色。测定支气管管壁厚度(WAt/Pbm),支气管平滑肌厚度(WAm/Pbm)。取右肺组织行RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达。【结果】B组小鼠支气管管壁厚度、杯状细胞百分数、气道平滑肌厚度、胶原纤维面积、TGF-β1的转录和表达水平均显著高于A组(P0.05)。肺组织的TGF-β1的蛋白表达水平与支气管的管壁厚度,平滑肌厚度,杯状细胞比,胶原纤维含量成正相关(相关系数分别为0.755、0.815、0.898、0.837;P气道重塑的发生,其机制有可能是通过抑制TGF-β1的表达而实现的。

关键词：哮喘气道重塑小鼠雷公藤甲素

补肺益肾组分方Ⅲ组分配伍对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重塑的干预作用研究

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中国全科医学 2024年第33期27卷 4196-4203页

作者：秦燕勤董浩然杨静帆李海博赵鹏李建生河南中医药大学河南省中医药防治呼吸病重点实验室呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心河南省郑州市450046 河南中医药大学中医药科学院河南省郑州市450046 河南中医药大学第一附属医院呼吸与危重医学科河南省郑州市450003

背景慢性阻塞性肺疾病(COPD)是重大慢性疾病,气道重塑是其重要病理机制。补肺益肾方对COPD疗效较好,其有效成分组成的补肺益肾组分方Ⅲ(ECC-BYFⅢ)与之疗效相当,可显著改善COPD模型大鼠气道重塑,但其组分配伍规律尚待揭示。目的基于COP... 详细信息

背景慢性阻塞性肺疾病(COPD)是重大慢性疾病,气道重塑是其重要病理机制。补肺益肾方对COPD疗效较好,其有效成分组成的补肺益肾组分方Ⅲ(ECC-BYFⅢ)与之疗效相当,可显著改善COPD模型大鼠气道重塑,但其组分配伍规律尚待揭示。目的基于COPD大鼠模型评价ECC-BYFⅢ及其组分配伍对COPD气道重塑的干预作用。方法将ECC-BYFⅢ组分分成补气、补肾、化痰、活血4类,按数学排列组合的方法将其分成不同的组分配伍组。2018年5—9月进行动物实验。将216只SD大鼠随机分为正常、模型、ECC-BYFⅢ、不同组分配伍及氨茶碱组,共18组,每组12只。第1~8周,采用香烟烟雾暴露联合反复细菌感染的方法制备COPD稳定期大鼠模型(正常组除外);第9~16周,给予相应的药物干预。苏木素-伊红(HE)染色技术观察气道壁及气道平滑肌变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中基质金属蛋白酶12(MMP-12)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及支气管肺泡灌洗液(BALF)中胶原蛋白(COL)-1、COL-3、MMP-12等气道重塑相关指标水平。Region(R)值综合评价各组分配伍对COPD大鼠气道重塑的干预作用。结果与模型组比较,ECC-BYFⅢ及其组分配伍、氨茶碱组大鼠气道壁厚度均降低,ECC-BYFⅢ组、补气化痰组、扶正化痰组、扶正活血组、补气祛邪组、氨茶碱组大鼠平均气道平滑肌细胞数减少(P气道壁厚度、气道平滑肌增生情况、血清及BALF中所有气道重塑相关指标进行R值综合评价结果显示,除化痰、祛邪组分配伍外,ECC-BYFⅢ及其余组分配伍和氨茶碱组均可改善COPD大鼠气道重塑(P气道重塑效果较好。结论ECC-BYFⅢ及其组分配伍可不同程度干预COPD大鼠气道重塑,其中以补气祛邪、扶正化痰、补气活血(均含补气类组分:人参皂苷Rh1和黄芪甲苷)组分配伍效果较为显著。

关键词：肺疾病,慢性阻塞性补肺益肾组分方Ⅲ 气道重塑组分配伍大鼠

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