检索结果-南通市图书馆

气单胞菌在不同食物接触表面的存活与交叉污染

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业机械学报 2015年第3期46卷 228-234页

作者：董庆利王海梅 Pradeep K Malakar 陆冉冉上海理工大学医疗器械与食品学院上海200093 食品研究所肠道健康与食品安全组

为探讨气单胞菌在不同食物接触表面的存活状况,采用擦拭取样法测定气单胞菌于案板、刀具表面的恢复率,并将气单胞菌分别接种于洁净和被污染的案板、刀具表面,评定气单胞菌在不同介质表面、不同时间下的存活状况。根据恢复率和介质表面... 详细信息

为探讨气单胞菌在不同食物接触表面的存活状况,采用擦拭取样法测定气单胞菌于案板、刀具表面的恢复率,并将气单胞菌分别接种于洁净和被污染的案板、刀具表面,评定气单胞菌在不同介质表面、不同时间下的存活状况。根据恢复率和介质表面上气单胞菌存活实测值,采用@Risk软件对介质表面实时带菌量的期望值进行计算,并运用一级线性模型对气单胞菌存活特征曲线进行拟合。同时,以案板为交叉污染途径,对气单胞菌在介质表面的存活行为对交叉污染的影响进行了探讨。结果表明:采用擦拭取样法测得的气单胞菌从案板、刀具表面的恢复率的最佳分布拟合结果分别是Normal(0.66,0.15)和Normal(0.72,0.18);气单胞菌在被污染的介质表面存活的时间(7 h)长于其在洁净介质表面的存活时间(3 h或2.5 h),且一级线性模型可以较好地对气单胞菌存活曲线进行拟合(R2>0.88);蒙特卡罗模拟结果表明,忽略气单胞菌在食物接触表面的存活行为会高估其在厨房内的交叉污染水平。

关键词：气单胞菌擦拭取样法恢复率存活模型交叉污染

气单胞菌aerA和hlyA两基因在溺死诊断中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

刑事技术 2021年第2期46卷 111-118页

作者：肖成朱晓琳徐曲毅韩雅莉李越余仲昊李欢彭帆刘向东刘超广州市刑事科学技术研究所公安部法医病理学重点实验室广州510442 南方医科大学法医学院广州510515 广东工业大学轻工化工学院广州510006 重庆医科大学基础医学院重庆400016

目的建立溺死尸体脏器气单胞菌气溶素(aerA)和溶血素(hlyA)两基因的PCR-CE检测方法,验证该方法的特异性和灵敏度,并探讨其在溺死诊断中的应用价值。方法设计气单胞菌(Aeromonas)特异性引物aer-A1和hlyA-1,构建PCR-CE方法;扩增52种标准株... 详细信息

目的建立溺死尸体脏器气单胞菌气溶素(aerA)和溶血素(hlyA)两基因的PCR-CE检测方法,验证该方法的特异性和灵敏度,并探讨其在溺死诊断中的应用价值。方法设计气单胞菌(Aeromonas)特异性引物aer-A1和hlyA-1,构建PCR-CE方法;扩增52种标准株DNA;确定最低DNA检测浓度;检测16只实验猪和40例真实案件尸体组织样本,分别计算两对引物总阳性率。结果引物aerA-1可特异性扩增杀鲑气单胞菌和温和气单胞菌,产物片段为180bp,灵敏度分别为0.034、0.92ng;引物hlyA-1可特异性扩增杀鲑气单胞菌和嗜水气单胞菌,产物片段为150bp,灵敏度分别为0.94、0.034ng。利用aerA-1检测溺死实验猪和真实案件尸体组织样本,溺死阳性率分别为70.00%、78.38%;利用hlyA-1检测溺死实验猪和真实案件尸体组织样本,溺死阳性率分别为80.00%、83.78%。结论基于气单胞菌aerA基因和hlyA基因建立的PCR-CE检测方法进行溺死诊断,快速灵敏,特异性好,有良好的应用前景。

关键词：法医学溺死诊断聚合酶链式反应-毛细管电泳气单胞菌 aerA基因 hlyA基因

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

鳗鲡源气单胞菌毒力基因及其耐药性分析

大连海洋大学学报 2024年

作者：王巧煌福建省水产技术推广总站

为了解鳗鲡源气单胞菌潜在致病性及其耐药状况，选取近年来从患病鳗鲡肝、肾、脾及病灶等处分离的41株气单胞菌为研究对象，采用16s rRNA以及保守基因gyrB、rpoD的序列测序分析进行病原菌的鉴定，利用微量肉汤稀释法检测病原菌对9种抗... 详细信息

为了解鳗鲡源气单胞菌潜在致病性及其耐药状况，选取近年来从患病鳗鲡肝、肾、脾及病灶等处分离的41株气单胞菌为研究对象，采用16s rRNA以及保守基因gyrB、rpoD的序列测序分析进行病原菌的鉴定，利用微量肉汤稀释法检测病原菌对9种抗菌药物的敏感特性；同时，通过PCR和SYBR Green qPCR方法分别检测其7种毒力基因及15种耐药基因的携带情况。结果表明：41株气单胞菌中有维氏气单胞菌27株、嗜水气单胞菌6株、达卡气单胞菌5株、双壳气单胞菌2株、豚鼠气单胞菌1株；毒力基因分析显示，alt的阳性检出率最高达75.6%，其余毒力基因显示不同的携带率，且56.1%的气单胞菌至少携带3种及以上的毒力基因；耐药性分析显示，其对甲砜霉素、氟苯尼考完全耐药（100%），3重及以上耐药的菌株占100%，最多同时耐受8种抗菌药物；耐药基因分析显示，酰胺醇类floR、cmlA、磺胺类sul1和氨基糖苷类aac（6’）-Ib为主要耐药基因，检出率均为100%；100%的菌株携带6重及以上耐药基因，最高的携带8重耐药基因（7.14%）。研究表明，鳗鲡源气单胞菌对酰胺醇类药物完全耐药，多重耐药情况较为严重，且大部分菌株同时携带多种毒力基因和耐药基因，耐药基因与耐药表型的检测结果不完全一致。本研究结果可为鳗鲡源气单胞菌病的有效防治提供参考依据。

关键词：鳗鲡气单胞菌毒力基因耐药性耐药基因

基于16S rRNA和gyrB基因串联DNA特征序列的气单胞菌鉴定方法

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

南方农业学报 2023年第6期54卷 1858-1867页

作者：陈天楠胡鲲水产科学国家级实验教学示范中心(上海海洋大学) 上海201306 国家水生动物病原库(上海海洋大学) 上海201306 农业农村部淡水水产种质资源重点实验室(上海海洋大学) 上海201306

【目的】建立基于16S rRNA序列和gyrB基因串联DNA特征序列的属内菌种鉴定方法,为气单胞菌的种间区分提供技术支持。【方法】以2020—2021年在我国福建、江苏等地分离获得的水产源气单胞菌和NCBI已公布且完成全基因组测序的10种气单胞菌... 详细信息

【目的】建立基于16S rRNA序列和gyrB基因串联DNA特征序列的属内菌种鉴定方法,为气单胞菌的种间区分提供技术支持。【方法】以2020—2021年在我国福建、江苏等地分离获得的水产源气单胞菌和NCBI已公布且完成全基因组测序的10种气单胞菌为研究对象,分别以16S rRNA序列、gyrB基因及2个基因序列串联后得到的新DNA特征序列作为构建系统发育进化树的依据,比较不同系统发育进化树的鉴定结果,并以运动性试验、溶血性试验、糖发酵试验进行辅助鉴定。【结果】在基于16S rRNA序列构建的系统发育进化树中,中间气单胞菌、嗜水气单胞菌、达卡气单胞菌、肠源气单胞菌等聚类在不同分支上,未能形成独立的种属进化分支;在基于gyrB基因构建的系统发育进化树中,达卡气单胞菌、豚鼠气单胞菌和嗜水气单胞菌聚类在同一分支上,而异嗜糖气单胞菌和维氏气单胞菌聚类在另一分支上。将16S rRNA序列和gyrB基因串联组成新DNA特征序列再构建系统发育进化树建树,能完全有效分离气单胞菌属的不同菌株,将不同种的气单胞菌独立聚为一支,较好地实现种间区分。【结论】将16S rRNA序列和gyrB基因串联组成新DNA特征序列再构建系统发育进化树,较基于16S rRNA序列或gyrB基因单独构建系统发育进化树具有更高的分辨力,是一种理想的保守序列相似性高的属内菌种鉴定方法。因此,在16S rRNA测序鉴定为气单胞菌的情况下可再次以gyrB基因为测序对象,获得序列信息后与16S rRNA序列串联构建系统发育进化树,能更加精确地将气单胞菌鉴定到种水平。

关键词：气单胞菌 16S rRNA序列 gyrB基因串联DNA序列系统发育进化树

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

气单胞菌群体感应及其抑制剂研究进展

食品科学 2023年第3期44卷 350-358页

作者：涂明霞刘蕾高亮张颖桂萌饶瑜西华大学食品与生物工程学院四川成都610039 北京市农林科学院北京市水产科学研究所北京100097

细菌群体感应(quorum sensing,QS)是细菌通过信号分子的产生、释放、积累和感应进行化学交流的过程,这种信号分子又称之为自诱导物(autoinducers,AI)。气单胞菌(Aeromonas)是水产品中常见腐败菌,也是动物和人类的环境条件致病菌。近年... 详细信息

细菌群体感应(quorum sensing,QS)是细菌通过信号分子的产生、释放、积累和感应进行化学交流的过程,这种信号分子又称之为自诱导物(autoinducers,AI)。气单胞菌(Aeromonas)是水产品中常见腐败菌,也是动物和人类的环境条件致病菌。近年来研究报道气单胞菌的致病性和腐败行为可能与QS有关,提示可以通过抑制气单胞菌QS对其进行防控。气单胞菌QS系统按照信号分子种类的不同可以分3类:以N-酰基高丝氨酸内酯类化合物(N-acyl homoserine lactone,AHLs)作为信号分子的AI-1系统、以4,5-二羟基-2,3-戊二酮(4,5-dihydroxy2,3-pentanedione,DPD)衍生物为信号分子的AI-2系统和QseBC双组分调控的AI-3系统。本文介绍这3类QS系统及其调控机制,概述植物来源、微生物和动物来源、化学合成类气单胞菌QS抑制剂(quorum sensing inhibitors,QSI)的研究进展,探讨气单胞菌QSI在水产品腐败和水产病害预防中的应用和前景,以期为气单胞菌QSI在水产品安全方面的应用提供参考。

关键词：气单胞菌群体感应群体感应抑制剂水产腐败水产养殖病害

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

一株好氧反硝化细菌的筛选鉴定及其脱氮特性

生物学杂志 2022年第4期39卷 38-43页

作者：朱红旭杨本芹高媛翟红阳赵艳卿昆明理工大学环境科学与工程学院昆明650500

从滇池湿地植物根系中分离得到一株好氧反硝化细菌(Aeromonas),编号为RC-15。通过聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)对该菌株的关键反硝化酶基因进行鉴定,且对该菌株在不同环境因子(碳源、温度、初始pH值、碳氮比)条件下... 详细信息

从滇池湿地植物根系中分离得到一株好氧反硝化细菌(Aeromonas),编号为RC-15。通过聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)对该菌株的关键反硝化酶基因进行鉴定,且对该菌株在不同环境因子(碳源、温度、初始pH值、碳氮比)条件下的反硝化能力进行探究。结果显示,该菌株成功扩增出反硝化酶基因nap A和nir K,说明该菌株在有氧分子存在的条件下具有好氧反硝化能力。通过单因素试验得到在碳源为乙酸钠、温度为30℃、初始pH值为8.0、碳氮比为7的培养条件下该菌株反硝化能力最强,24 h时硝氮的去除率达到95.57%,对应的硝氮去除速率达到14.62 mg/(L·h)。研究筛选的菌株RC-15为后续投加高效反硝化菌株强化实际废水脱氮提供了新型菌源。

关键词：好氧反硝化气单胞菌功能基因环境因子脱氮特性

乌梅-全蝎双药方对气单胞菌混合感染大口黑鲈的治疗效果分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧兽医 2023年第3期50卷 1259-1270页

作者：侯天牧项维王玲玲郭忠宝吴利军张付贤长江大学动物科学学院荆州434024 广西水产科学研究院南宁530021 武汉市农业科学院武汉430065

【目的】了解和掌握嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria,As)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,Av)混合感染大口黑鲈的致病性并筛选出防治气单胞菌感染的有效中药,为气单胞菌混合感染的防治提供理... 详细信息

【目的】了解和掌握嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria,As)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,Av)混合感染大口黑鲈的致病性并筛选出防治气单胞菌感染的有效中药,为气单胞菌混合感染的防治提供理论依据。【方法】将Ah、As和Av通过腹腔注射健康大口黑鲈,构建3种气单胞菌单独感染和混合感染大口黑鲈的动物模型,通过脏器系数、组织病理切片和死亡率等分析气单胞菌混合感染的致病性;通过体外抑菌试验从37味中药中筛选对气单胞菌具有抑制效果的敏感中药,利用网络药理学解析乌梅-全蝎双药方在体内发挥抗菌作用的关键活性成分和作用靶点,并通过药浴试验分析其对气单胞菌混合感染大口黑鲈的治疗效果。【结果】3种气单胞菌混合感染对大口黑鲈的致病性高于单独感染,Ah能造成最严重的脏器损伤、炎症和最高的死亡率,As次之,Av最弱。中药乌梅和全蝎对Ah、As和Av在体外均具有显著抑制效果,二者联用时抑菌效果增强。网络药理学分析发现,乌梅-全蝎双药方的活性成分和细菌感染的交集作用靶点共180个,其中肿瘤蛋白53(tumor protein 53,TP53)、AKT丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT serine/threonine kinase 1,AKT1)等11个靶点是乌梅-全蝎双药方治疗细菌感染潜在的关键靶点;乌梅-全蝎双药方能显著减轻气单胞菌混合感染产生的临床症状、肝脏与肠道的炎症及细胞的坏死,使气单胞菌混合感染的大口黑鲈的死亡率下降了66.7%,具有良好的治疗效果。【结论】Ah、As和Av混合感染大口黑鲈较单独感染具有更强的致病性,乌梅-全蝎双药方能显著提高气单胞菌混合感染大口黑鲈的成活率。本试验结果可为气单胞菌混合感染的致病机制及精准防控研究提供理论依据。

关键词：乌梅全蝎大口黑鲈气单胞菌网络药理学

肠道气单胞菌（Aeromonas sp.）介导L-STAT3调控雷氏七鳃鳗适应性免疫的作用探究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肠道气单胞菌（Aeromonas sp.）介导L-STAT3调控雷氏七鳃鳗适应性...

作者：王楠辽宁师范大学

学位级别：硕士

肠道微生物群对宿主免疫系统的发育十分重要,对无菌动物的研究表明,肠道特定菌群的缺失会导致严重的免疫系统缺陷。作为现存最古老的脊椎动物之一,七鳃鳗在进化上具有极为特殊的地位。七鳃鳗的生命周期十分复杂,在不同发育阶段的进食习... 详细信息

肠道微生物群对宿主免疫系统的发育十分重要,对无菌动物的研究表明,肠道特定菌群的缺失会导致严重的免疫系统缺陷。作为现存最古老的脊椎动物之一,七鳃鳗在进化上具有极为特殊的地位。七鳃鳗的生命周期十分复杂,在不同发育阶段的进食习惯也不相同,为了适应环境的变化,其肠道微生物的结构和组成也随之发生改变。因此以七鳃鳗不同发育时期肠道微生物的比较研究作为切入点,对于探讨七鳃鳗适应性免疫发育和调控具有重要的意义。基于此,本研究的主要内容如下:1、雷氏七鳃鳗成体和幼体肠道细菌组成比较分析通过对雷氏七鳃鳗成体和幼体肠道16S r DNA基因的V3-V4区进行测序分析。测序结果显示,在“属”水平上,雷氏七鳃鳗幼体和成体之间优势细菌的组成和丰度不同。Simplicispira、地杆菌是成体雷氏七鳃鳗肠道中的两类优势细菌,分别占肠道细菌总数的27.21%和13.66%。气单胞菌是幼体雷氏七鳃鳗肠道中的优势成员,但在成体雷氏七鳃鳗肠道中仅占细菌总数的0.05%。成体雷氏七鳃鳗和幼体雷氏七鳃鳗之间“属”水平上差异显著的微生物分别是Simplicispira和气单胞菌。利用LPS刺激后,气单胞菌数量在成体雷氏七鳃鳗的肠道中显著增加。使用体外分离的气单胞菌作为抗原刺激成年雷氏七鳃鳗时,VLRA、VLRB、VLRC的表达上调。因此,肠道气单胞菌可能参与了成体雷氏七鳃鳗的适应性免疫反应。2、STAT3参与了雷氏七鳃鳗的适应性免疫调控先前的研究发现,使用肠道气单胞菌免疫日本七鳃鳗后,STAT3的表达显著上调。但雷氏七鳃鳗里是否存在这种趋势,以及STAT3是否参与了雷氏七鳃鳗的适应性免疫调控还未有研究。在已获得七鳃鳗L-STAT3序列的基础上,进行了L-STAT3的多克隆抗体制备,检测了抗体效价及特异性,分析了LPS免疫雷氏七鳃鳗后L-STAT3的表达变化。Western blot结果表明,LPS刺激使得L-STAT3在幼体雷氏七鳃鳗的不同组织中呈现差异性表达。由此推测,L-STAT3参与了雷氏七鳃鳗的适应性免疫系统调控过程。但这一过程是如何调控的将是下一步研究的重点。3、L-STAT3的功能初探虽然L-STAT3参与了雷氏七鳃鳗的适应性免疫调控,但对于L-STAT3的功能还未有研究。对L-STAT3基因进行真核表达载体的构建,并转染MCF-7细胞。CCK-8统计分析与流式细胞术结果显示L-STAT3过表达能够促进MCF-7细胞增殖,且转入L-STAT3基因后的MCF-7细胞凋亡凋亡率降低,说明L-STAT3基因能够抑制MCF-7细胞的凋亡,为后续L-STAT3基因功能的深入研究奠定基础。因此,本研究在确定雷氏七鳃鳗成体与幼体肠道微生物组成的基础上,以雷氏七鳃鳗不同发育时期肠道微生物的研究作为切入点,获得了调控雷氏七鳃鳗适应性免疫的重要肠道共生菌气单胞菌。证明了L-STAT3基因参与了雷氏七鳃鳗的适应性免疫调控,并对L-STAT3基因的功能进行了初步探究。综上,本论文为七鳃鳗肠道微生物调控七鳃鳗适应性免疫的机制提供了理论基础。

关键词：雷氏七鳃鳗肠道菌群气单胞菌 STAT3

气单胞菌属DNA条形码的筛选及锦鲤抗菌免疫应答分析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

气单胞菌属DNA条形码的筛选及锦鲤抗菌免疫应答分析

作者：许承佳广东药科大学

学位级别：硕士

气单胞菌是一种广泛存在于水生环境中的人-畜-水生动物共患致病菌,DNA条形码可实现对气单胞菌的高效准确鉴定,为合理选择抗感染治疗用药提供科学准确的依据。频繁爆发的气单胞菌感染性病害严重危害人类健康,同时限制了养殖行业的发展。... 详细信息

气单胞菌是一种广泛存在于水生环境中的人-畜-水生动物共患致病菌,DNA条形码可实现对气单胞菌的高效准确鉴定,为合理选择抗感染治疗用药提供科学准确的依据。频繁爆发的气单胞菌感染性病害严重危害人类健康,同时限制了养殖行业的发展。了解宿主免疫应答过程中发挥重要功能的基因和通路,探究免疫应答关键基因的序列结构信息可为药物靶点的发现与抗菌药物的研发提供研究基础,为致病菌的综合防治提供新思路。实验以33株气单胞菌为材料,利用设计的通用引物PCR扩增不同菌株的ppsA、recA和cpn60基因,获得序列的测序信息并分析。以PCR扩增成功率和测序成功率、遗传距离、DNA barcoding gap和系统发育树为评价标准,筛选通用性好、准确度高的条形码基因。我们发现cpn60基因的变异位点碱基占总碱基数比例最高,为27.68%,可提供更多的物种分辨信息;cpn60基因中97.9%序列的种内遗传距离小于0.04,而98.1%的序列种间遗传距离要大于0.04,且cpn60的种间遗传距离为13.3%,显著大于其种内遗传距离1.7%,条形码间隔比较明显,能有效地区分同属内的不同菌种。而recA基因的平均种间遗传距离为0.049,虽然也大于其平均种内遗传距离0.023,但recA基因出现了较大程度的遗传距离的重叠,没有出现非常明显的条形码间隙。而ppsA基因扩增测序成功率过低,通用性差,无法用于气单胞菌的鉴定。综上,cpn60基因可作为气单胞菌属的DNA条形码鉴定不同菌种。为探究宿主对病原刺激的免疫反应,我们对人工感染维氏气单胞菌24 h后的锦鲤脾脏进行了转录组测序。共筛选到373个差异表达基因（DEGs）,其中240个基因表达上调,133个基因表达下调。与炎症小体密切相关的NLRP3、CD11b、CD11c和IL-1β的表达水平显著上调。进一步的注释和富集分析表明,DEGs主要富集于吞噬体、细胞粘附分子、IL-17信号通路和抗原的加工和呈递。上述分子和信号通路可能在清除外来入侵病原体中发挥重要作用。为了验证RNA-seq数据的准确性,选取10个与免疫相关的基因进行RT-qPCR实验,结果表明它们的表达与RNAseq数据高度一致。此外,RT-qPCR也证实了与NLRP3炎性小体组装与激活相关的基因caspase-1、caspase-3、caspase-9、CARD以及ASC基因均表达上调,表明维氏气单胞菌的感染显著诱导宿主脾脏组织NLRP3炎性小体的组装和成熟。TLR4（Toll-like receptor 4）是脂多糖的主要受体,被刺激后可导致一系列炎症因子的释放,激活免疫应答。我们克隆得到锦鲤TLR4基因序列,其c DNA序列全长为1237 bp,开放阅读框为432 bp,编码143个氨基酸。生物信息学软件预测锦鲤TLR4氨基酸序列的分子量为16114.2,理论等电点为5.87。在与其他物种的比对中,锦鲤TLR4和鲤鱼TLR4的氨基酸序列相似性最高,为98.43%,表明锦鲤与同属的鲤鱼亲缘关系最近。组织表达分析显示,TLR4基因在免疫器官脾脏和肠中的表达量分别是肌肉组织的789倍和466倍。

关键词：气单胞菌 DNA条形码 NLRP3炎性小体 TLR4 锦鲤