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利托那韦对大脑毛细血管内皮细胞摄入沙奎那韦的影响

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国外医药(抗生素分册) 2000年第4期21卷 193-193页

前列腺毛细血管内皮及腺上皮细胞的屏障功能研究

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前列腺毛细血管内皮及腺上皮细胞的屏障功能研究

作者：崔栋第三军医大学

学位级别：硕士

一、背景慢性前列腺炎是泌尿外科的常见病,多发病,有研究显示350岁的男性一生中某个时候都会受到前列腺综合征的影响。但是目前临床上,药物治疗前列腺炎的效果很差,并且慢性前列腺炎的症状易反复出现,对患者的心理生理造成巨大的损害。... 详细信息

一、背景慢性前列腺炎是泌尿外科的常见病,多发病,有研究显示350岁的男性一生中某个时候都会受到前列腺综合征的影响。但是目前临床上,药物治疗前列腺炎的效果很差,并且慢性前列腺炎的症状易反复出现,对患者的心理生理造成巨大的损害。目前慢性前列腺炎的发病机理及确切病因还未完全阐明。但是在临床上前列腺液中一些抗菌药物的浓度低于血浆,并且对于某些类型的慢性前列腺炎患者来讲,其前列腺间质存在明显的炎症而前列腺液中不出现白细胞的情况。因此一些学者通过研究后提出,在人体前列腺组织与血液循环之间可能存在一种特殊的屏障机制。目前的研究也认为,药物在前列腺组织的浓度低于血浆的原因,可能是因为血前列腺屏障的存在。因此对于血前列腺屏障的研究对前列腺疾病的治疗及其发病机制的研究具有非常重要的意义。对于机体已经证实的血脑屏障来讲,血脑屏障的选择通透特性主要由毛细血管内皮细胞维持。中枢神经系统在形成的过程中,毛细血管内皮细胞通过通过自身的成熟并与周围组织形成特殊的结构从而形成血脑屏障,毛细血管内皮细胞的生物化学特性决定血脑屏障的渗透特性,并且这种渗透性也会随着这些血管直径的增加而增加。同样对于血眼屏障与血迷路屏障有研究指出毛细血管内皮细胞不存在窗孔,为连续性内皮,同时被紧密连接蛋白联合,是这些屏障结构的主要组成。关于前列腺毛细血管内皮细胞在血前列腺屏障中的作用,有研究发现前列腺微血管内皮细胞也为连续性内皮,同时跨细胞途径的吞饮囊泡较少,在结构功能方面与血脑屏障,血睾屏障及血附睾屏障相似,提示前列腺毛细血管内皮细胞可能参与了血前列腺屏障的组成。对于前列腺腺上皮细胞,有研究发现,屏障抗原EBA,作为血脑屏障的标志,在雄性动物的生殖系统,存在于血睾屏障、血附睾屏障内。而且经研究发现EBA在前列腺上皮细胞同样表达活跃,同样马文强等的研究也显示前列腺上皮也连续性表达屏障抗原EBA。生物体的基因是有限的,前列腺腺上皮细胞胞浆连续性表达EBA抗原,从分子水平提示前列腺腺上皮细胞可能在血前列腺屏障的选择通透性方面发挥重要的作用。二、目的采用细胞生长特性选择法分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,体外培养大鼠前列腺腺上皮细胞株,体外研究大鼠前列腺毛细血管内皮细胞及腺上皮细胞的屏障功能,并建立大鼠前列腺毛细血管内皮细胞及腺上皮细胞的共培养模型,建立血前列腺屏障的体外模型,为以后血前列腺屏障的研究及前列腺疾病的治疗提供方法。三、方法1.采用细胞生长特性选择法分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,采用光镜电镜进行形态学鉴定,并用第Ⅷ因子相关抗原抗体对分离培养的前列腺毛细血管内皮细胞进行免疫学鉴定。2.体外培养大鼠前列腺上皮细胞株,并建立前列腺毛细血管内皮细胞及腺上皮细胞的共培养模型。免疫组化观察毛细血管内皮细胞及腺上皮细胞之间紧密连接蛋白claudin-1的表达,并采用光镜电镜观察毛细血管内皮细胞及腺上皮细胞的结构。3.采用跨膜电阻测量仪检测毛细血管内皮细胞,腺上皮细胞及共培养模型的跨膜电阻,用酚红渗漏实验检测三种模型的通透性,并以大鼠脑毛细血管内皮细胞及肺毛细血管内皮细胞做为阳性及阴性对照。四、结果1.成功分离了大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,前列腺毛细血管内皮细胞在体外培养可以形成紧密的单层细胞结构,呈铺路石样生长。免疫荧光结果显示,第Ⅷ因子相关抗原表达于分离培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞胞浆,提示分离的细胞为毛细血管内皮细胞;2.免疫组化结果显示,相邻的毛细血管内皮细胞及腺上皮细胞之间表达紧密连接蛋白claudin-1;电镜结果显示紧密连接存在于相邻的毛细血管内皮细胞及腺上皮细胞之间。3.成功建立了大鼠前列腺毛细血管内皮细胞及腺上皮细胞的共培养模型,体外培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,腺上皮细胞,共培养模型,脑毛细血管内皮细胞及肺毛细血管内皮细胞的跨膜电阻峰值可以达到142.2±3.1?/cm2,201.3±3.5?/cm2,223±2.3?/cm2,248.20±6.2?/cm2,43.3±3.5?/cm2左右,酚红渗漏实验显示,前列腺毛细血管,腺上皮,共培养模型,脑毛细血管内皮细胞随着细胞单层跨膜电阻的增加,基底侧的酚红浓度减低,而大鼠肺毛细血管内皮细胞基底侧酚红浓度随跨膜电阻的变化趋势不明显。五、结论1.根据细胞的生长特性选择法可以成功分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,该方法具有操作简单,无机械性及化学性损伤等优点。2.大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,腺上皮细胞具有与脑毛细血管内皮细胞等屏障内皮相似的结构功能。体外培养的大鼠前列腺毛细血管内皮及腺上皮细胞具有一定程度的屏障特性,提示前列腺毛细血管内皮及腺上皮细胞可能参与了血前列腺屏障的组成。3.共培养模型更接近生理状态,通透性较低可以做为血前列腺屏障研究的体外模型。

关键词：毛细血管内皮细胞腺上皮细胞血前列腺屏障跨膜电阻

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熏烟对肺组织AQP1表达与定位的影响

新疆医科大学学报 2024年第6期47卷 785-790页

作者：文诸缦加沙尔·阿拜李云鹏阿不都许库尔·阿不力米提新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室乌鲁木齐830017

目的探讨水通道蛋白1(Aquaporin1,AQP1)在慢性阻塞性肺病(Chronic obstruc-tive pulmonary disease,COPD)和熏烟诱导的COPD小鼠模型中的表达变化。方法选取SPF级昆明小鼠30只,4周龄,采用随机数字表法分为空白对照组、熏烟3个月组和熏烟... 详细信息

目的探讨水通道蛋白1(Aquaporin1,AQP1)在慢性阻塞性肺病(Chronic obstruc-tive pulmonary disease,COPD)和熏烟诱导的COPD小鼠模型中的表达变化。方法选取SPF级昆明小鼠30只,4周龄,采用随机数字表法分为空白对照组、熏烟3个月组和熏烟6个月组,各10只。熏烟组小鼠构建熏烟诱导的COPD小鼠模型,空白对照组小鼠不进行任何处理。免疫组织化学法和蛋白印迹法分别测定各组小鼠肺组织中的AQP1蛋白表达量。体外使用尼古丁刺激人非小细胞肺癌细胞系A549,分为对照组(PBS)、3μmol/L尼古丁组(3μmol/L)和5μmol/L尼古丁组(5μmol/L),测定各组A549细胞中的AQP1蛋白表达量。用“limma”函数对COPD数据进行差异表达基因分析;对AQP1表达量与差异表达基因进行Pearson相关性分析;用GeneMANIA平台对相关性强的基因进行富集分析。结果免疫组织化学结果显示,对照组小鼠肺组织中AQP1主要分布于肺组织毛细血管内皮细胞和红细胞内,在Ⅱ型肺泡上皮细胞的顶膜也有少量分布。HE染色结果显示,对照组小鼠肺泡及肺间质无炎症细胞浸润,呼吸道通畅;熏烟3个月组小鼠肺组织可见肺大泡形成,小气道及血管周围可见炎性细胞浸润,并伴有黏性分泌物堆积;熏烟6个月组小鼠肺组织可见大量肺大泡,血管周围有大量炎性细胞聚集。蛋白印迹法检测结果显示,熏烟3个月组和6个月组小鼠肺组织中AQP1蛋白表达量较对照组分别减少约40%和60%(P0.5;富集分析结果显示,EREG、白介素-6(IL-6)、AREG参与上皮细胞增殖过程,细胞色素P450家族1亚家族B成员1(CYP1B1)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、PTGS2参与血管内皮生长因子的产生。结论COPD患者与熏烟诱导COPD小鼠模型的肺组织AQP1蛋白表达降低,这可能与尼古丁刺激肺泡上皮细胞导致AQP1增高无关。

关键词：水通道蛋白1 熏烟毛细血管内皮细胞尼古丁

苯磷硫胺对高糖培养的牛视网膜微血管内皮细胞的作用

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眼科研究 2007年第2期25卷 124-127页

作者：李斌刘恒明曹敏程铮华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科武汉430030

目的研究苯磷硫胺对体外高糖环境中培养的牛视网膜毛细血管内皮细胞的生长及细胞凋亡的影响。方法采用MTT法观察不同浓度的苯磷硫胺对高糖培养的牛视网膜毛细血管内皮细胞增生的影响,采用流式细胞分析技术观察选定浓度的苯磷硫胺对高糖... 详细信息

目的研究苯磷硫胺对体外高糖环境中培养的牛视网膜毛细血管内皮细胞的生长及细胞凋亡的影响。方法采用MTT法观察不同浓度的苯磷硫胺对高糖培养的牛视网膜毛细血管内皮细胞增生的影响,采用流式细胞分析技术观察选定浓度的苯磷硫胺对高糖环境中培养的牛视网膜毛细血管内皮细胞的凋亡的影响。结果MTT法显示,一定浓度的苯磷硫胺可以降低高糖对牛视网膜毛细血管内皮细胞生长的抑制作用,且呈浓度相关性。在浓度为75μmol/L时OD值差异有统计学意义(P细胞分析技术显示,75μmol/L的苯磷硫胺可明显减少牛视网膜毛细血管内皮细胞的凋亡。结论一定浓度的苯磷硫胺对体外高糖环境中培养的牛视网膜毛细血管内皮细胞具有明显的保护作用,其机制可能在于苯磷硫胺能减少细胞凋亡。

关键词：苯磷硫胺视网膜毛细血管内皮细胞凋亡糖

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人体微血管内皮细胞的培养:新的炎症模型

International Journal of Dermatology And Venereology 1988年第2期14卷 117-118页

作者：梁国钧

白细胞和皮肤微血管的相互作用是炎症反应初期的重要过程之一.由于内皮细胞对于循环淋巴细胞是一个有持续抗原刺激作用的潜在因素,所以它们在移植和自身免疫性疾病中显得尤为重要.以前由于微血管内皮细胞不能够分离出并通过培养得到足... 详细信息

白细胞和皮肤微血管的相互作用是炎症反应初期的重要过程之一.由于内皮细胞对于循环淋巴细胞是一个有持续抗原刺激作用的潜在因素,所以它们在移植和自身免疫性疾病中显得尤为重要.以前由于微血管内皮细胞不能够分离出并通过培养得到足够的数量和纯度,所以在体外进行皮肤炎症的研究是困难的.目前细胞培养技术的进步已能够长期地培养从全身皮肤的微血管中分离出来的内皮细胞.应用正常心肤微血管内皮细胞和淋巴细胞两种

关键词：微血管内皮细胞毛细血管内皮细胞靶细胞

非接触式共培养体外血脑屏障模型的跨膜电阻及通透性

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中国药理学与毒理学杂志 2012年第6期26卷 882-887页

作者：张水华季龙凤马璟福建医科大学福建省新药安全性评价中心福建福州350108 国家上海新药安全性评价研究中心上海201203

目的建立大鼠脑毛细血管内皮细胞(BCEC)与星形胶质细胞共培养血脑屏障模型并评价其功能。方法采用SD大鼠原代分离培养获得BCEC和星形胶质细胞。经细胞形态学观察、免疫组化检测相关抗原后建立非接触式共培养血脑屏障模型,测定共培养模... 详细信息

目的建立大鼠脑毛细血管内皮细胞(BCEC)与星形胶质细胞共培养血脑屏障模型并评价其功能。方法采用SD大鼠原代分离培养获得BCEC和星形胶质细胞。经细胞形态学观察、免疫组化检测相关抗原后建立非接触式共培养血脑屏障模型,测定共培养模型所形成的跨细胞电阻及荧光素钠的通透性。采用LC-MS检测6个化合物透过血脑屏障模型的通透性,并与文献报道的体内数据进行比较。结果培养的BCEC多数为短梭形外观,免疫组化检测可见细胞高表达因子Ⅷ;星形胶质细胞呈现具有细胞突起的典型形态,免疫组化检测可见细胞高表达胶质纤维酸性蛋白。共培养的体外血脑屏障模型跨BCEC单层的电阻值为(373±41)Ω·cm2,荧光素钠跨BCEC单层的通透性为(0.34±0.14)×10-3cm·min-1,符合体外血脑屏障模型要求。对所选6个化合物体内外透过BBB模型渗透系数的比较,表明具有一定的相关性(R2=0.7679,P内皮电阻和通透性方面具备了在体BBB的基本特性,可以用于模拟体内环境,进行药物早期筛选方面的研究。

关键词：毛细血管内皮细胞脑星形胶质细胞血脑屏障

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急性呼吸窘迫综合征的药物及生物治疗问题

中华医学杂志 2018年第34期98卷 2712-2714页

作者：罗红丁水姿张秀瑞中南大学湘雅二医院呼吸与危重症医学科长沙410013 中南大学湘雅医学院

急性呼吸窘迫综合征（ARDS）是由肺内外多种因素（如肺炎、脓毒症、严重创伤、吸入）引起的一种复杂的临床疾病。在这些损伤因素的作用下，肺部和全身炎症反应失控，导致肺泡毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞发生改变、毛细血管通透性增... 详细信息

急性呼吸窘迫综合征（ARDS）是由肺内外多种因素（如肺炎、脓毒症、严重创伤、吸入）引起的一种复杂的临床疾病。在这些损伤因素的作用下，肺部和全身炎症反应失控，导致肺泡毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞发生改变、毛细血管通透性增加，从而使大量液体渗出至肺泡和肺泡间质内发生肺水肿。在临床上，ARDS主要表现为进行性呼吸窘迫和顽固性低氧血症。在成人中，ARDS的发病率约为每年（17．6—64．0）／10万，在重症监护室的发病率更高达10％。

关键词：急性呼吸窘迫综合征生物治疗毛细血管内皮细胞肺泡上皮药物全身炎症反应临床疾病 ARDS

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中药及其有效成分防治足细胞损伤研究进展

中国中西医结合杂志 2010年第9期30卷 999-1002页

作者：李杰郭兆安兖矿集团总医院山东兖州273500 山东中医药大学附属医院

足细胞（podocyte）是肾小球囊内层细胞,附着在肾小球基底膜（glomerular basement membrance,GBM）上,它与GBM、肾小球内皮细胞共同构成了肾小球滤过屏障,是具有孔径大小和电荷选择性的分子筛,与肾小球系膜细胞、毛细血管内皮细胞一起... 详细信息

足细胞（podocyte）是肾小球囊内层细胞,附着在肾小球基底膜（glomerular basement membrance,GBM）上,它与GBM、肾小球内皮细胞共同构成了肾小球滤过屏障,是具有孔径大小和电荷选择性的分子筛,与肾小球系膜细胞、毛细血管内皮细胞一起维持着肾小球袢的复杂结构。目前认为足细胞损伤与肾小球微小病变（glomerular minimal changes,MC）、膜性肾病（membranous nephropathy,MN）、局灶节段性肾小球硬化症（focal segmental glomerulosclerosis,FSGS）、糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）、

关键词：足细胞损伤有效成分局灶节段性肾小球硬化症肾小球基底膜毛细血管内皮细胞肾小球滤过屏障肾小球内皮细胞肾小球系膜细胞

电磁辐射对血脑屏障通透性的影响及其机制研究进展

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中华劳动卫生职业病杂志 2009年第9期27卷 562-565页

作者：丁桂荣郭国祯第四军医大学预防医学系放射医学西安710032

血脑屏障（blood—brain—barrier，BBB）是存在于血液与脑组织之间的屏障结构，由脑微血管内皮细胞、基膜和星形胶质细胞足突组成。脑的毛细血管属连续型，毛细血管内皮细胞之间以紧密连接（tight junction，W）封闭，内皮外有基膜、... 详细信息

血脑屏障（blood—brain—barrier，BBB）是存在于血液与脑组织之间的屏障结构，由脑微血管内皮细胞、基膜和星形胶质细胞足突组成。脑的毛细血管属连续型，毛细血管内皮细胞之间以紧密连接（tight junction，W）封闭，内皮外有基膜、周细胞以及星形胶质细胞突起的足突围绕。与机体其他部位的微血管相比，BBB的通透性极低，

关键词：血脑屏障通透性电磁辐射脑微血管内皮细胞毛细血管内皮细胞星形胶质细胞 brain 屏障结构紧密连接