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中华儿科杂志 2017年第3期55卷 231-234页

作者：李春珍张东风河北省儿童医院肾脏免疫科石家庄050031

内皮细胞以单层细胞的形式分布在各级血管并呈树状结构分布构成内皮系统。在这一过程中，内皮细胞不仅起到分隔血液与外周组织的作用，其内分泌、抗凝及损伤后启动一些病理变化等作用也备受关注。

关键词：毛细血管内皮细胞增生性肾小球肾炎免疫复合物儿童介导内皮系统树状结构单层细胞

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前列腺毛细血管内皮细胞屏障功能研究

第三军医大学学报 2016年第4期38卷 385-389页

作者：崔栋尚永刚韩广玮刘城城李龙坤易善红第三军医大学新桥医院泌尿外科重庆400037 解放军第169医院泌尿外科湖南衡阳421002 重庆市第四人民医院泌尿外科重庆400014

目的分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,体外研究大鼠前列腺毛细血管内皮细胞的屏障功能。方法采用细胞生长特性选择法分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,用第Ⅷ因子相关抗原抗体对分离培养的前列腺毛细血管内皮细胞进行免疫学鉴... 详细信息

目的分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,体外研究大鼠前列腺毛细血管内皮细胞的屏障功能。方法采用细胞生长特性选择法分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,用第Ⅷ因子相关抗原抗体对分离培养的前列腺毛细血管内皮细胞进行免疫学鉴定。免疫组化观察毛细血管内皮细胞之间紧密连接蛋白claudin-1的表达,采用跨膜电阻测量仪检测毛细血管内皮细胞的跨膜电阻,用酚红渗漏实验检测其通透性,以大鼠肺毛细血管内皮细胞、脑毛细血管内皮细胞作为阴性与阳性对照。结果成功分离大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,体外培养可以形成紧密的单层细胞结构,呈铺路石样生长。第Ⅷ因子相关抗原抗体的免疫荧光结果显示：分离培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞胞浆表达绿色荧光,提示分离的细胞为毛细血管内皮细胞;免疫组化结果显示紧密连接蛋白claudin-1在相邻的毛细血管内皮细胞之间表达;体外培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,阴性对照组肺毛细血管内皮细胞,阳性对照组脑毛细血管内皮细胞的跨膜电阻峰值分别可以达到（142.2±3.1）、（43.3±3.5）、（248.2±6.2）Ω/cm2,并稳定保持2-3 d,三者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。酚红渗漏实验结果显示前列腺毛细血管内皮细胞、阳性对照组脑毛细血管内皮细胞随着细胞单层跨膜电阻的增加,基底侧的酚红浓度减低,阴性对照组肺毛细血管内皮细胞酚红渗透量随跨膜电阻的改变变化趋势不明显。结论大鼠前列腺毛细血管内皮细胞与脑毛细血管内皮细胞等屏障内皮相比拥有相似的结构功能,体外培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞具有屏障特性,可以作为血前列腺屏障研究的体外模型。

关键词：前列腺毛细血管内皮细胞血前列腺屏障跨膜电阻

博莱霉素及肺炎双球菌性肺损伤毛细血管内皮细胞间紧密连接的变化及其意义

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实用放射学杂志 2008年第2期24卷 261-263页

作者：殷茜黄晓峰崔光彬魏经国第四军医大学唐都医院放射科第四军医大学唐都医院电镜中心第四军医大学唐都医院放射科陕西西安710038

目的探讨血管内皮细胞间紧密连接的改变在肺纤维化发生发展过程中的作用。方法选用SD大鼠72只,随机分为博莱霉素(BLM)组、肺炎组及正常对照组。分别采用BLM、肺炎双球菌及生理盐水气管内1次灌注的方法制作大鼠肺损伤模型及正常对照模型... 详细信息

目的探讨血管内皮细胞间紧密连接的改变在肺纤维化发生发展过程中的作用。方法选用SD大鼠72只,随机分为博莱霉素(BLM)组、肺炎组及正常对照组。分别采用BLM、肺炎双球菌及生理盐水气管内1次灌注的方法制作大鼠肺损伤模型及正常对照模型,分别于第3、7、14、28天取动物肺组织制作成电镜标本,观察肺毛细血管内皮细胞间紧密连接的变化,并运用免疫组织化学方法观察单核巨噬细胞在肺间质中的浸润情况。结果光镜:肺炎第3天组大鼠肺泡壁水肿,肺组织内大量中性粒细胞浸润;第3天及第7天组大鼠局部肺实变,肺组织内巨噬细胞浸润增加,其阳性面积比与正常对照组比较差异有统计学意义(P细胞浸润;第28天组肺泡壁结构完整,未见明显炎细胞浸润,巨噬细胞阳性面积比与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。BLM第3天及第7天组大鼠肺组织实变、出血,其中炎细胞浸润情况与同期肺炎组类似;第14天及第28天组大鼠肺间质内持续存在单核巨噬细胞浸润,其阳性面积比与正常对照组比较差异有统计学意义(P毛细血管内皮细胞间紧密连接在第3天及第7天组时完全开放,镧颗粒通过细胞连接并沉积在基膜上,第28天组大部分细胞间连接紧密,与正常对照组比较无明显差异。BLM组第3、7、14天及28天组,大部分内皮细胞紧密连接处于开放状态。结论博莱霉素鼠肺毛细血管内皮细胞间紧密连接持续开放,与巨噬细胞在组织间浸润密切相关,并可能是博莱霉素致肺纤维化发生的重要因素。

关键词：肺肺纤维化肺炎肺炎双球菌毛细血管内皮细胞

博莱霉素肺损伤毛细血管内皮细胞间紧密连接与紧密连接蛋白-1的变化及意义

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博莱霉素肺损伤毛细血管内皮细胞间紧密连接与紧密连接蛋白-1的变...

作者：殷茜第四军医大学

学位级别：硕士

目的：肺纤维化被认为是机体对肺组织损伤的过度修复和重塑的病理结果。在此过程中，众多的细胞因子通过自分泌和旁分泌效应直接或间接地刺激成纤维细胞分裂增殖，促进了肺纤维化的形成。大部分细胞因子与浸润在肺组织的单核巨噬... 详细信息

目的：肺纤维化被认为是机体对肺组织损伤的过度修复和重塑的病理结果。在此过程中，众多的细胞因子通过自分泌和旁分泌效应直接或间接地刺激成纤维细胞分裂增殖，促进了肺纤维化的形成。大部分细胞因子与浸润在肺组织的单核巨噬细胞及有核粒细胞关系密切。然而，巨噬细胞及有核粒细胞向组织间游走的过程不仅与组织间趋化因子的作用有关，还与病变区域的血管通透性密切相关。肺组织中广泛分布的连续型毛细血管是维护肺功能完整的重要屏障结构，毛细血管内皮细胞间的紧密连接结构是肺毛细血管内皮细胞间的主要连接方式，也是调节微血管内液体及大分子物质外渗的重要结构。内皮细胞间紧密连接主要由紧密连接蛋白复合体调控。本实验通过高分辨率CT、光镜、电镜、免疫组织化学染色、激光共聚焦扫描等方法，动态观察肺炎及肺纤维化大鼠肺组织所经历的病理过程，比较两组间肺毛细血管内皮细胞紧密连接的超微结构及其调节蛋白的变化差异，以期揭示肺炎与肺纤维化早期肺组织的特征性影像学表现及其病理学基础，为肺纤维化的早期发现、早期诊断、早期治疗提供新的思路，并为寻找肺纤维化的可逆转环节提供理论依据。

关键词：肺纤维化肺炎球菌性肺炎毛细血管内皮细胞紧密连接紧密连接蛋白-1 计算机断层扫描免疫组织化学染色激光共聚焦扫描

胶质瘤细胞对毛细血管内皮细胞FasL表达的影响

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胶质瘤细胞对毛细血管内皮细胞FasL表达的影响

作者：李岩峰中国医科大学

学位级别：硕士

目的 Fas是近年发现的细胞凋亡信号受体，当与其特异性配体（FasL）结合后，可以传导凋亡信号，诱导Fas所在细胞的凋亡。肿瘤细胞对Fas／FasL系统介导凋亡的敏感程度是由许多因素决定的，涉及到许多调控机制。细胞表面表... 详细信息

目的 Fas是近年发现的细胞凋亡信号受体，当与其特异性配体（FasL）结合后，可以传导凋亡信号，诱导Fas所在细胞的凋亡。肿瘤细胞对Fas／FasL系统介导凋亡的敏感程度是由许多因素决定的，涉及到许多调控机制。细胞表面表达有功能的Fas分子并达到一定水平是经由Fas／FasL系统途径进行凋亡作用的重要因素。多数肿瘤细胞高表达FasL，可以与Fas阳性的活化T淋巴细胞结合，引起T淋巴细胞的凋亡，这可能是肿瘤免疫逃逸的机制之一。胶质瘤是颅内最常见的肿瘤，表达高水平的FasL。我们的前期研究应用双重免疫组化证明：胶质瘤内高表达的FasL位于肿瘤内的毛细血管内皮细胞上，而不是在肿瘤细胞上。我们通过将人脑毛细血管内皮细胞与胶质瘤细胞分别培养及共同培养，对培养前后人脑毛细血管内皮细胞与胶质瘤细胞FasL表达水平的分析，来探讨胶质瘤细胞的生长对人脑毛细血管内皮细胞FasL表达的影响。方法将人脑毛细血管内皮细胞与胶质瘤细胞U87、U107细胞进行细胞培育，传代后将人脑毛细血管内皮细胞与胶质瘤细胞分别培养及共同培养。最后用Western Blot法检测分别及共同培养前后人脑毛细血管内皮细胞与胶质瘤细胞FasL的表达水平。Western Blot结果用Chemi Imager 5500 V2.03软件进行扫描，用Fluor Chen 2.0软件进行定量分析。采用SPSS11.0统计分析处理软件对实验数据进行统计分析，分析结果用平均值±标准差表示。统计分析方法采用独立样本t检验，p＜0.05有统计学意义。结果 Westem Blot法测定FasL的表达:共同培养前后人脑毛细血管内皮细胞与胶质瘤细胞FasL表达水平存在差异。FasL表达水平IDV值两两相比，单独培育的内皮细胞（19381.76土4366.27）与共同培育（和U87细胞）的内皮细胞（盯256.15土5387.28）（p＜0.05），单独培育的内皮细胞（19381.76土4366.27）与共同培育（和U107细胞）的内皮细胞（52152.36士 7927 .53）（p＜0.05），单独培育的U87细胞（20764.34士4857.96）与共同培育的U87细胞（26358.25士6168.77）（p＞0.05），单独培育的U107细胞（23957 .83士4932.16）与共同培育的U107细胞（27365.13士6392.76）（p＞ 0.05），说明共同培养前后人脑毛细血管内皮细胞FasL的表达水平差别有统计学意义。结论 Husaln等分析22例人胶质瘤Fas和FaSL的表达，通过West二Blot方法证实有13例Fas和FasL阳性，通过免疫组化方法证实有巧例Fas和 FasL阳性。同样的方法证实7个胶质瘤细胞系有4个同时表达Fas和 FasL。他们对人直肠癌及其肝脏转移灶FasL的表达情况进行了研究，结果原发灶7例中2例FasL阳性，而所有的4例已转移到肝脏的病人，其转移灶的FasL表达全部阳性。提示FasL阳性的肿瘤细胞更易发生转移或转移后更易生长，原因可能在于FasL阴性的肿瘤细胞转移后可能容易受到已致敏的T淋巴细胞的攻击，而FasL表达阳性的肿瘤细胞则可借此逃避淋巴细胞的攻击，并同时诱导局部的细胞（有Fas表达）凋亡以利于形成种植病例灶。因此可以推测，FasL的表达是肿瘤细胞生长、转移过程中逃避免疫反应的重要机制之一。我们通过实验发现将胶质瘤细胞与人脑毛细血管内皮细胞共同培养后，毛细血管内皮细胞FasL水平明显增高，这说明胶质瘤细胞生长的同时，能促进了瘤内的毛细血管内皮细胞表达高水平的FasL，从而抑制了活化的淋巴细胞向肿瘤组织的移行，造成了肿瘤的免疫逃逸。

关键词：胶质瘤毛细血管内皮细胞 FasL

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肾上腺毛细血管内皮细胞的克隆培养及应用

沈阳医学 2003年第1期23卷 13-16页

作者：朱荔清崔娴维刘江秋李忠义梅旭沈阳军区医学捡验中心 110003 沈阳军区军事医学研究所辽宁沈阳110031

目的建立系统的毛细血管内皮细胞长期克隆培养体系。方法通过分离牛肾上皮质，培养毛细血管内皮细胞井对其进行克隆鉴定。并对其在内皮细胞抑制素活性检测的应用方面进行研究。结果成功分离井克隆培养了毛细血管内皮细胞，应用研究... 详细信息

目的建立系统的毛细血管内皮细胞长期克隆培养体系。方法通过分离牛肾上皮质，培养毛细血管内皮细胞井对其进行克隆鉴定。并对其在内皮细胞抑制素活性检测的应用方面进行研究。结果成功分离井克隆培养了毛细血管内皮细胞，应用研究显示内皮细胞抑素能明显抑制毛细血管内皮细胞的生长，并且在一定范围浓度内呈剂量依赖性，到达一定浓度后，这种抑制作用则不再随浓度的升高而增强。VI-Ⅱ因子相关抗原的免疫组化检测为阳性反应，核周胞质出现黄绿色的明亮荧光环。结论通过对内皮细胞的培养方法进行研究的基础上，改进毛细血管内皮细胞的培养方法，建立系统的克隆培养体系，对进一步研究毛细血管内皮细胞提供了有力的支持。

关键词：肾上腺毛细血管内皮细胞克隆培养应用

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肾上腺毛细血管内皮细胞的克隆纯化及鉴定

沈阳部队医药 2004年第4期17卷 255-257页

作者：朱荔清崔娴维刘江秋李忠义第202医院 110003 沈阳军区联勤部军事医学研究所

为建立一种在体外能够繁殖、传代、生物特性稳定的毛细血管内皮细胞(MEC)的克隆培养方法,利用新生小牛肾上腺对MEC进行体外分离,克隆培养;采用过氧化物酶标记的链霉亲和素(SP)法,对已克隆纯化的MEC进行Ⅷ因子相关抗原的免疫组化鉴定。... 详细信息

为建立一种在体外能够繁殖、传代、生物特性稳定的毛细血管内皮细胞(MEC)的克隆培养方法,利用新生小牛肾上腺对MEC进行体外分离,克隆培养;采用过氧化物酶标记的链霉亲和素(SP)法,对已克隆纯化的MEC进行Ⅷ因子相关抗原的免疫组化鉴定。结果表明,体外分离培养的牛肾上腺MEC呈长梭形或多角形,胞核清晰,呈卵圆形,细胞大小均匀,形态基本一致;细胞在体外连续传24代后细胞生长缓慢,形态改变;Ⅷ因子相关抗原的免疫组化染色后呈阳性反应。结论:本研究的成果可为肿瘤及其相关治疗的研究提供支持。

关键词：肾上腺毛细血管内皮细胞克隆纯化鉴定内皮抑素生物学特性

17β-雌二醇对牛视网膜毛细血管内皮细胞eNOS mRNA及NO调控的实验研究

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山东医药 2012年第13期52卷 41-43页

作者：马晓华季鹏毕宏生解孝锋吴建峰山东中医药大学眼科医院济南施尔明眼科医院济南250002

目的探讨17β-雌二醇(E2)在不同氧(O2)环境下对牛视网膜毛细血管内皮细胞(BRECs)一氧化氮合酶(eNOS)mRNA及NO的影响。方法在正常O2及缺O2环境下,采用不同生理浓度(10-12、10-10、10-8mol/L)的17β-E2及雌激素受体拮抗剂他莫昔芬处理培养... 详细信息

目的探讨17β-雌二醇(E2)在不同氧(O2)环境下对牛视网膜毛细血管内皮细胞(BRECs)一氧化氮合酶(eNOS)mRNA及NO的影响。方法在正常O2及缺O2环境下,采用不同生理浓度(10-12、10-10、10-8mol/L)的17β-E2及雌激素受体拮抗剂他莫昔芬处理培养的BRECs。采用RT-PCR检测eNOS mRNA,硝酸还原酶法测定NO。结果①低O2条件下BRECs的eNOS mRNA、NO表达较正常O2条件下明显增多(P<0.05)。②正常O2及低O2条件下,不同生理浓度17β-E2作用24 h后,17β-E2均呈浓度依赖性促进BRECs的eNOS mRNA、NO表达(P<0.05);10-8mol/L 17β-E2作用8、24 h,eNOS mRNA表达量呈时间依赖性增多(P<0.05)。结论生理浓度的17β-E2使BRECs的eNOS mRNA、NO表达呈浓度、时间依赖性增加。

关键词：雌二醇视网膜病早产儿毛细血管内皮细胞一氧化氮合酶一氧化氮

脉络膜毛细血管内皮细胞表面的电荷屏障及其意义

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国际眼科纵览 1990年第4期14卷 214-216页

作者：上野聪树·他杨培增

作者描述了一种新的屏障,即脉络膜毛细血管内皮细胞表面电荷屏障。这种机能性屏障对物质有选择性通透作用,带正电荷的物质易于通过,带负电荷者則不易通过。视网膜下新生血管可能由于缺乏这种屏障,因而一些带负电荷的物质大量逸出,并由... 详细信息

作者描述了一种新的屏障,即脉络膜毛细血管内皮细胞表面电荷屏障。这种机能性屏障对物质有选择性通透作用,带正电荷的物质易于通过,带负电荷者則不易通过。视网膜下新生血管可能由于缺乏这种屏障,因而一些带负电荷的物质大量逸出,并由此导致周围组织和细胞的破坏。

关键词：脉络膜葡萄膜电荷屏障毛细血管内皮细胞视网膜下液荧光渗漏视网膜下新生血管

定量观察大鼠冲击伤时肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞紧密连接冷冻蚀刻形态学变化

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电子显微学报 1988年第3期 14-14页

作者：朱国标王正国王声文唐承功张清华刘大维尹友国马孝华第三军医大学野战外科研究所

本实验应用形态测量技术观察了大鼠冲击伤时肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞紧密连接冷冻蚀刻形态学变化。实验分四组进行。Ⅰ组为未致伤的正常对照组,ⅡⅢⅣ组分别于伤后4—6小时,24小时和72小时活杀。以模拟激波管致伤。致伤组动物总... 详细信息

本实验应用形态测量技术观察了大鼠冲击伤时肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞紧密连接冷冻蚀刻形态学变化。实验分四组进行。Ⅰ组为未致伤的正常对照组,ⅡⅢⅣ组分别于伤后4—6小时,24小时和72小时活杀。以模拟激波管致伤。致伤组动物总体为中等度以上损伤。以听器及肺损伤最明显。肺损伤主要表现为肺出血。Ⅱ组Ⅲ组动物有肺水肿,Ⅳ组动物肺水肿已吸收。一、冷冻蚀刻一般观察本实验共观察了38只大鼠的冷冻蚀刻电镜。共观察到可用于统计的肺泡上皮细胞TJ235个,血管内皮细胞TJ207个。另观察到5个肺泡上皮细胞TJ“残迹”和一个毛细血管内皮细胞TJ

关键词：肺泡上皮紧密连接毛细血管内皮细胞冲击伤创伤大鼠形态学变化