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不同强度噪声刺激后灰鼠耳蜗外毛细胞死亡方式观察

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解放军医学杂志 2005年第6期30卷 524-525页

作者：杨卫平胡博华 Donald Henderson 解放军总医院耳鼻咽喉研究所北京100853 美国纽约州立布法罗大学听力及聋病研究中心

目的　观察在不同强度噪声刺激后灰鼠耳蜗凋亡和坏死的外毛细胞数量。方法　将灰鼠暴露于104dB或108dB SPL的4kHz窄带噪声1h,分别于噪声刺激后1、4、30天解剖取耳蜗,应用细胞核DNA染料碘化丙锭(PI)标记鉴别细胞死亡模式,原位末端标记法(... 详细信息

目的　观察在不同强度噪声刺激后灰鼠耳蜗凋亡和坏死的外毛细胞数量。方法　将灰鼠暴露于104dB或108dB SPL的4kHz窄带噪声1h,分别于噪声刺激后1、4、30天解剖取耳蜗,应用细胞核DNA染料碘化丙锭(PI)标记鉴别细胞死亡模式,原位末端标记法(TUNEL)和Caspase 3染色进一步确认凋亡和坏死的毛细胞,荧光显微镜下观察计数。结果　104dB噪声刺激后1天,108dB噪声刺激后1、4天,凋亡的外毛细胞数量明显多于坏死(P外毛细胞数量虽多于坏死,但差异无统计学意义(P>0 05)。噪声刺激30天后,依然存在凋亡和坏死的毛细胞。结论　外毛细胞凋亡为强噪声刺激后灰鼠耳蜗基底膜损伤早期细胞死亡的主要方式,噪声性毛细胞死亡过程至少延续至噪声刺激后30天。

关键词：耳蜗毛细胞,外噪声细胞凋亡坏死

氯胺酮对氯化钾诱发豚鼠耳蜗外毛细胞钙离子内流的影响

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中华麻醉学杂志 2008年第2期28卷 121-123页

作者：李元涛吴波曾凡龙王君龚坚姚尚龙郧阳医学院附属太和医院麻醉科湖北省十堰市442000 郧阳医学院基础医学研究所北京大学深圳医院麻醉科华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科

目的评价氯胺酮对氯化钾诱发豚鼠耳蜗外毛细胞钙离子内流的影响，探讨其对听觉外周感受器（耳蜗）的作用。方法成年豚鼠12只，雌雄不拘，迅速断头处死，暴露耳蜗，取出双侧昕泡，采用酶孵育后，机械分离法分离外毛细胞。选择30个活力较... 详细信息

目的评价氯胺酮对氯化钾诱发豚鼠耳蜗外毛细胞钙离子内流的影响，探讨其对听觉外周感受器（耳蜗）的作用。方法成年豚鼠12只，雌雄不拘，迅速断头处死，暴露耳蜗，取出双侧昕泡，采用酶孵育后，机械分离法分离外毛细胞。选择30个活力较高的外毛细胞，随机分为3组（n=10）：对照组（C组）、100μmol／L氯胺酮组（K1组）和200μmol／L氯胺酮组（K2组）。用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色后，K1组和K2组分别给予100、200μmol／L氯胺酮处理5min，然后加入40mmol／L氯化钾，采用激光共聚焦显微镜测定细胞内荧光强度，反映细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）。结果与基础值比较，各组加入氯胺酮后[Ca^2＋]i差异无统计学意义（P〉0．05），加入氯化钾后[Ca^2＋]i升高（P〈0．01）；K1组和K2组加入氯化钾后[Ca^2＋]i低于C组，且K1组低于K2组（P〈0．05或0．01）。结论氯胺酮可抑制豚鼠耳蜗外毛细胞Ca^2＋跨膜内流，从而降低[Ca^2＋]i。

关键词：氯胺酮钙毛细胞,外耳蜗氯化钾

脉冲噪声暴露后早期大鼠耳蜗外毛细胞死亡时程观察

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解放军医学杂志 2006年第6期31卷 543-544页

作者：杨卫平于黎明胡吟燕郭维陈洪文解放军总医院耳鼻咽喉研究所北京100853

目的观察强脉冲噪声暴露后早期大鼠耳蜗毛细胞损伤发展的规律。方法将大鼠暴露于平均压力峰值级为154dBSPL的脉冲噪声100发,分别于噪声暴露后10min、30min、3h、6h解剖取耳蜗,应用碘化丙锭(PI)标记耳蜗基底膜,荧光显微镜下观察脉冲噪声... 详细信息

目的观察强脉冲噪声暴露后早期大鼠耳蜗毛细胞损伤发展的规律。方法将大鼠暴露于平均压力峰值级为154dBSPL的脉冲噪声100发,分别于噪声暴露后10min、30min、3h、6h解剖取耳蜗,应用碘化丙锭(PI)标记耳蜗基底膜,荧光显微镜下观察脉冲噪声暴露后耳蜗毛细胞凋亡和坏死的时程特点。结果强脉冲噪声暴露后10min出现外毛细胞核染色质移位及凋亡小体,30min可见到少量肿胀的外毛细胞核,3h观察到少量外毛细胞核的缺失。6h耳蜗基底膜损伤区出现大片外毛细胞核缺失和部分微小球形固缩的外毛细胞核。结论耳蜗外毛细胞死亡发生于强脉冲噪声暴露后即刻,外毛细胞凋亡先于坏死。细胞凋亡过程迅速,强脉冲噪声暴露后6h耳蜗基底膜损伤区大部分死亡细胞已被清除。

关键词：耳蜗毛细胞,外噪声凋亡坏死大鼠

七氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞Ca2+跨膜内流和内质网钙释放功能的影响

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中华麻醉学杂志 2008年第5期28卷 427-429页

作者：李元涛杨京利周龙王燕罗向红刘菊英郧阳医学院附属太和医院麻醉科

目的观察七氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞Ca跨膜内流和内质网钙释放功能的影响,探讨其对听觉外周感受器(耳蜗)作用的可能机制。方法第一部分成年豚鼠,雌雄不拘,迅速断头,取耳蜗,酶孵育后,机械分离法分离外毛细胞,30个活力良好的外毛细胞随机分... 详细信息

目的观察七氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞Ca跨膜内流和内质网钙释放功能的影响,探讨其对听觉外周感受器(耳蜗)作用的可能机制。方法第一部分成年豚鼠,雌雄不拘,迅速断头,取耳蜗,酶孵育后,机械分离法分离外毛细胞,30个活力良好的外毛细胞随机分为3组(n=10):对照组(C组)、低浓度七氟醚组(S组)和高浓度七氟醚组(S组),用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色后,分别给予纯氧、1.7%七氟醚、3.4%七氟醚处理20 min,然后加入40 mmol/L氯化钾,测定细胞内游离钙离子浓度([Ca])。第二部分以20 mmol/L咖啡因代替氯化钾,其余处理及分组同第一部分。结果第一部分与基础值比较,各组给予七氟醚后[Ca]差异无统计学意义(P>0.05),加入氯化钾后[Ca]升高(P0.05),加入咖啡因后[Ca]升高(P0.05)。结论七氟醚可浓度依赖性地抑制豚鼠耳蜗外毛细胞电压依赖型Ca通道开放,而对内质网Ryanodine敏感性钙释放功能无影响。

关键词：钙通道内质网毛细胞,外耳蜗七氟醚

七氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞Ca^2＋跨膜内流和内质网钙释放功能的影响

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中华麻醉学杂志 2008年第5期28卷 427-429页

作者：李元涛杨京利周龙王燕罗向红刘菊英郧阳医学院附属太和医院麻醉科湖北省十堰市442000

目的观察七氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞Ca^2＋跨膜内流和内质网钙释放功能的影响，探讨其对听觉外周感受器（耳蜗）作用的可能机制。方法第一部分成年豚鼠，雌雄不拘，迅速断头，取耳蜗，酶孵育后，机械分离法分离外毛细胞，30个活力良好的... 详细信息

目的观察七氟醚对豚鼠耳蜗外毛细胞Ca^2＋跨膜内流和内质网钙释放功能的影响，探讨其对听觉外周感受器（耳蜗）作用的可能机制。方法第一部分成年豚鼠，雌雄不拘，迅速断头，取耳蜗，酶孵育后，机械分离法分离外毛细胞，30个活力良好的外毛细胞随机分为3组（n=10）：对照组（C组）、低浓度七氟醚组（S1组）和高浓度七氟醚组（S1组），用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色后，分别给予纯氧、1．7％七氟醚、3．4％七氟醚处理20min，然后加入40mmol／L氯化钾，测定细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）。第二部分以20mmol／L咖啡因代替氯化钾，其余处理及分组同第一部分。结果第一部分与基础值比较，各组给予七氟醚后[Ca^2＋]．差异无统计学意义（P〉0．05），加入氯化钾后[Ca^2＋]．升高（P〈0．01）；S1组和S2组加入氯化钾后[Ca^2＋]．低于C组，且S2组低于S1组（P〈0．05）。第二部分与基础值比较，各组给予七氟醚后[Ca^2＋]．差异无统计学意义（P〉0．05），加入咖啡因后[Ca^2＋]．升高（P〈0．0）；加入咖啡因后各组[Ca^2＋]．差异无统计学意义（P〉0．05）。结论七氟醚可浓度依赖性地抑制豚鼠耳蜗外毛细胞电压依赖型Ca^2＋通道开放，而对内质网Ryanodine敏感性钙释放功能无影响。

关键词：钙通道内质网毛细胞,外耳蜗七氟醚