检索结果-南通市图书馆

毛细管电泳在手性化合物分离分析中的研究进展

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色谱 2020年第3期38卷 317-323页

作者：刘明霞李向军白玉刘虎威北京分子科学国家实验室北京大学化学与分子工程学院北京100871 中国科学院大学化学科学学院北京100049

手性化合物的对映异构体往往表现出不同的生理活性,因此建立手性化合物的有效分离分析方法具有重要意义。毛细管电泳(CE)是一种分离效率高、分析速度快、样品用量少、分离模式灵活多样的分离分析方法,在手性化合物的分离和检测领域应用... 详细信息

手性化合物的对映异构体往往表现出不同的生理活性,因此建立手性化合物的有效分离分析方法具有重要意义。毛细管电泳(CE)是一种分离效率高、分析速度快、样品用量少、分离模式灵活多样的分离分析方法,在手性化合物的分离和检测领域应用广泛。该文主要综述了2017~2019年CE在手性分离分析方面的最新进展,并对其未来的发展趋势进行了展望。

关键词：毛细管电泳手性分离综述

毛细管电泳-质谱联用技术及其在蛋白质组学中的应用

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色谱 2020年第10期38卷 1117-1124页

作者：梁玉张丽华张玉奎中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室国家色谱研究分析中心辽宁大连116023

蛋白质组学研究在生物学、精准医学等方面发挥着重要的作用。然而研究面临的巨大挑战来自生物样品的复杂性,因此在质谱(MS)鉴定技术不断革新的同时,发展分离技术以降低样品复杂度尤为重要。毛细管电泳(CE)技术具有上样体积小、分离效率... 详细信息

蛋白质组学研究在生物学、精准医学等方面发挥着重要的作用。然而研究面临的巨大挑战来自生物样品的复杂性,因此在质谱(MS)鉴定技术不断革新的同时,发展分离技术以降低样品复杂度尤为重要。毛细管电泳(CE)技术具有上样体积小、分离效率高、分离速度快等优势,其与质谱的联用在蛋白质组学研究中越来越受到关注。低流速鞘流液和无鞘流液接口的发展及商品化推动了CE-MS技术的发展。目前毛细管区带电泳(CZE)、毛细管等电聚焦(CIEF)、毛细管电色谱(CEC)等分离模式已与质谱联用,其中CZE-MS应用最广泛。目前被广泛采用的蛋白质组学研究策略主要是基于酶解肽段分离鉴定的“自下而上(bottom-up)”策略。首先,CE-MS技术对酶解肽段的检测灵敏度高达1 zmol,已成功应用于单细胞蛋白质组学;其次,毛细管电泳技术与反相液相色谱互补,为疏水性质相近的肽段(尤其是翻译后修饰肽段)的分离鉴定提供了新的途径。基于整体蛋白质分离鉴定的自上而下“top-down”策略可以直接获得更精准、更完整的蛋白质信息。CE技术在蛋白质大分子的分离方面具有分离效率高、回收率高的优势,其与质谱的联用提高了整体蛋白质的鉴定灵敏度和覆盖度。非变性质谱(native MS)是一种在近生理条件下从完整蛋白质复合物水平上进行分析的质谱技术。CE与非变性质谱联用已被尝试用于蛋白质复合体的分离鉴定。该文引用了与CE-MS和蛋白质组学应用相关的93篇文献,综述了以上介绍的CE-MS的研究进展以及在蛋白质组学分析中的应用优势,并总结和展望了其应用前景。

关键词：毛细管电泳质谱蛋白质组学综述

毛细管电泳序列分析技术用于在线酶分析研究进展

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色谱 2020年第10期38卷 1143-1153页

作者：田苗苗杨丽吉林工程技术师范学院化学与工业生物工程交叉学科研究院吉林长春130052 东北师范大学化学学院吉林长春130024

毛细管电泳技术具有操作简单、样品消耗量少、分离效率高和分析速度快等优势,不仅是一种高效的分离分析技术,而且已经发展成为在线酶分析和酶抑制研究的强有力工具。酶反应全程的实时在线监测,可以实现酶反应动力学过程的高时间分辨精... 详细信息

毛细管电泳技术具有操作简单、样品消耗量少、分离效率高和分析速度快等优势,不仅是一种高效的分离分析技术,而且已经发展成为在线酶分析和酶抑制研究的强有力工具。酶反应全程的实时在线监测,可以实现酶反应动力学过程的高时间分辨精确检测,以更准确地获得反应机制和反应速率常数,有助于更好地了解酶反应机制,从而更全面深入地认识酶在生物代谢中的功能。此外,准确、快速的在线酶抑制剂高通量筛选方法的发展,对加快酶抑制类药物的研发以及疾病的临床诊断亦具有重要意义。电泳媒介微分析法(EMMA)和固定化酶微反应器(IMER)是毛细管电泳酶分析技术中常用的在线分析方法。这两种在线酶分析法的进样方式通常为流体动力学进样和电动进样,无法实现酶反应过程中的无干扰序列进样分析。近年来,基于快速序列进样的毛细管电泳序列分析技术已经发展成为在线酶分析的另一种强有力手段,以实现高时间分辨和高通量的酶分析在线检测。该文从快速序列进样的角度,综述了近年来毛细管电泳序列分析技术在线酶分析的研究进展,并着重介绍了各种序列进样方法及其在酶反应和酶抑制反应中的应用,包括光快门进样、流动门进样、毛细管对接的二维扩散进样、流动注射进样、液滴微流控进样等。

关键词：毛细管电泳序列进样时间分辨高通量筛选在线酶分析综述

毛细管电泳法测定天麻素对乙酰胆碱酯酶活性的抑制

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色谱 2020年第9期38卷 1102-1106页

作者：张剑张博贺茂芳韩禄高东羽刘春叶西安医学院药学院陕西西安710021

阿尔茨海默症(AD)是引起中老年人痴呆最常见的疾病。目前治疗AD的药物主要为乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)。建立快速地从天然产物中筛选AChEI的方法,将对临床治疗AD产生积极的作用。该研究建立了一种简单可靠的AChEI筛选新方法。通过海美... 详细信息

阿尔茨海默症(AD)是引起中老年人痴呆最常见的疾病。目前治疗AD的药物主要为乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)。建立快速地从天然产物中筛选AChEI的方法,将对临床治疗AD产生积极的作用。该研究建立了一种简单可靠的AChEI筛选新方法。通过海美溴铵在毛细管内壁形成一段正电荷涂层,再经过离子吸附作用制备1.5 cm长的乙酰胆碱酯酶(AChE)反应器。底物碘化乙酰硫代胆碱在0.015 MPa压力下进样10 s,在微酶反应器中停留1 min后采用毛细管电泳(CE)法对底物和酶解产物进行分离。天麻素是天麻的重要药效成分之一,对AChE具有抑制作用。该研究以天麻素为例,根据加入药物前后酶解产物峰面积的差异,完成天麻素对AChE活性的抑制能力的测定。结果表明,随着天麻素浓度的增加,产物峰面积逐渐减小,对AChE的活性抑制变大。该方法所建微酶反应器产物峰面积的RSD值小于5.3%,可连续使用300次。当天麻素浓度为5.24μmol/L时,对AChE活性抑制率达到64.8%。根据加入不同浓度天麻素时的抑制率,测定出天麻素的IC50值为(2.26±0.14)μmol/L(R^2=0.9983)。与传统紫外分光光度法所得结果(2.09±0.18)μmol/L吻合较好。固定化酶微反应器的活性变差时,可以洗脱掉固定在柱上的AChE,重复酶的固定化步骤即可完成再生。该方法简单、高效,运行成本低,柱上固定的AChE酶反应器稳定性较好,可重复使用,极大地提高了工作效率,未来有望应用于各类AChEI的高通量筛选,对AD药物的研发具有积极作用。

关键词：毛细管电泳乙酰胆碱酯酶乙酰胆碱酯酶抑制剂天麻素

毛细管电泳结合激光诱导荧光检测分析单抗N糖谱的方法学联合验证

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药物分析杂志 2022年第1期42卷 172-178页

作者：王文波武刚于传飞张峰王兰中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京102629

目的:对毛细管电泳结合激光诱导荧光(CE-LIF)检测单抗N糖谱方法进行多家实验室的联合验证。方法:依据国际人用药品注册技术协调会(ICH)Q2;1指导原则和2015年版《中华人民共和国药典》通则9101,开展方法学验证。评价指标包括专属性、线... 详细信息

目的:对毛细管电泳结合激光诱导荧光(CE-LIF)检测单抗N糖谱方法进行多家实验室的联合验证。方法:依据国际人用药品注册技术协调会(ICH)Q2;1指导原则和2015年版《中华人民共和国药典》通则9101,开展方法学验证。评价指标包括专属性、线性、准确度、精密度、定量限、范围和耐用性。结果:验证数据表明,该方法具有良好的特异性、准确性、精密性和耐用性。蛋白量在100~400μg范围内具有良好的线性,R;大于0.97,且回收率在81%~109%范围内。精密性评价结果显示,G0F、Man5、G1F(1,6)、G1F(1,3)和G2F的校正峰面积百分比和迁移时间的RSD值均小于10%。该方法的定量下限为0.016%,可对在0.016%~77.233%范围内的单个色谱峰进行准确定量分析。同时多个条件下的耐用性评价结果表明该方法具有耐用性,峰面积百分比的RSD小于9%,迁移时间的RSD小于0.1%。结论:组织开展了基于CE-LIF的检测单抗N糖谱的方法学联合验证,结果表明方法可行,可用于单抗N糖谱的检测。

关键词：单克隆抗体 N糖谱测定方法学验证毛细管电泳质量控制

毛细管电泳法同时分析水、乳、膏类化妆品中5种有机酸

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色谱 2019年第7期37卷 773-777页

作者：汪慧敏孙淼屈锋北京理工大学生命学院

建立了毛细管电泳同时分析5种有机酸的间接紫外检测法。优化了背景电解质溶液中表面活性剂十四烷基三甲基溴化铵(TTAB)的浓度和溶液pH。优化后的电泳分析条件如下:含0.4 mmol/L TTAB的15 mmol/L 邻苯二甲酸氢钾溶液为背景电解质(pH 5.6)... 详细信息

建立了毛细管电泳同时分析5种有机酸的间接紫外检测法。优化了背景电解质溶液中表面活性剂十四烷基三甲基溴化铵(TTAB)的浓度和溶液pH。优化后的电泳分析条件如下:含0.4 mmol/L TTAB的15 mmol/L 邻苯二甲酸氢钾溶液为背景电解质(pH 5.6);分离电压-15 kV;检测波长254 nm;分离温度25 ℃;进样压力5 kPa;进样时间5 s。在此条件下,可在6 min内完成5种有机酸的同时分离检测,线性范围为甲酸15~600 mg/L 、苹果酸30~800 mg/L 、柠檬酸20~700 mg/L 、乙醇酸40~500 mg/L 和乳酸30~ 5 000 mg/L ,线性相关系数为 0.998 3 ~ 0.999 8;检出限为0.1~2.0 μg/g。该方法可用于检测水状、乳状、膏状3类化妆品中的5种有机酸。在3个加标水平下,有机酸分析的回收率为95.0%~101.6%, RSD在2.0%以内。该方法操作简单,分析快速,安全环保,灵敏度高,重现性好,有望用于化妆品生产和保存过程中有机酸的监测。

关键词：毛细管电泳间接紫外检测有机酸化妆品

毛细管电泳法考察全氟辛酸与人血清白蛋白的相互作用

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色谱 2018年第1期36卷 69-77页

作者：顾奕郭明吕达侯平殷欣欣浙江农林大学林业与生物技术学院浙江杭州311300 浙江农林大学理学院浙江杭州311300

利用毛细管电泳(CE)技术建立了全氟辛酸(PFOA,C_8HF_(15)O_2)与人血清白蛋白(HSA)相互作用的分析方法。在生理条件下构建配体(PFOA)-受体(HSA)相互作用模型,通过淌度移动法、区段-区段动力学(plug-plug kinetic,PPK)法、简化的Hummel-Dr... 详细信息

利用毛细管电泳(CE)技术建立了全氟辛酸(PFOA,C_8HF_(15)O_2)与人血清白蛋白(HSA)相互作用的分析方法。在生理条件下构建配体(PFOA)-受体(HSA)相互作用模型,通过淌度移动法、区段-区段动力学(plug-plug kinetic,PPK)法、简化的Hummel-Dreyer(HD)法研究其与HSA的相互作用。简化的HD法运用非线性方程、Scatchard方程和Klotz方程获得PFOA-HSA体系的相互作用参数,进而分析了模型适用度。结果表明,淌度移动法、PPK法、简化的HD法均适用于PFOA-HSA体系相互作用的分析,其中简化的HD法最优。模型适用度分析得出非线性回归方程为最适理论模型。相互作用参数测试表明PFOA-HSA相互作用体系之间发生的结合反应只有单一类型的结合位点且结合稳定。相关工作阐明了人血清白蛋白与PFOA的相互作用机制,可为PFOA毒理机制的深入研究提供有益参考。

关键词：毛细管电泳全氟辛酸人血清白蛋白结合参数

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毛细管电泳法同时分离分析对苯二酚与对苯醌

分析试验室 2023年

作者：龙科石爽张东享关瑾沈阳化工大学化学工程学院

采用毛细管电泳法同时分离分析对苯二酚和对苯醌。在15 mmol/L Na2CO3缓冲溶液(pH 10.5)和15 kV运行电压的电泳条件下，可在10 min 内完成对苯二酚与对苯醌的分析。对苯二酚和对苯醌质量浓度在40 ～ 250 μg/mL内与峰面积呈良好的线性... 详细信息

采用毛细管电泳法同时分离分析对苯二酚和对苯醌。在15 mmol/L Na2CO3缓冲溶液(pH 10.5)和15 kV运行电压的电泳条件下，可在10 min 内完成对苯二酚与对苯醌的分析。对苯二酚和对苯醌质量浓度在40 ～ 250 μg/mL内与峰面积呈良好的线性关系，线性相关系数(r2)≥0.9989，加样回收率为99.4% ～ 103.2%，相对标准偏差为1.9% ～ 3.0%。该方法应用于实际样品分析结果满意。

关键词：对苯二酚对苯醌毛细管电泳光敏剂

毛细管电泳技术在单克隆抗体药物分析中的应用

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色谱 2018年第3期36卷 195-208页

作者：陈泓序屈锋北京理工大学生命学院北京100081

单克隆抗体药物在生物制药行业占有重要地位,是生物医药领域发展的主要方向。因此,单克隆抗体药物的质量控制已成为全球生物制药企业及法规机构关注的热点,对单克隆抗体药物精确表征的需求日益增加。毛细管电泳技术具有分离效率高、分... 详细信息

单克隆抗体药物在生物制药行业占有重要地位,是生物医药领域发展的主要方向。因此,单克隆抗体药物的质量控制已成为全球生物制药企业及法规机构关注的热点,对单克隆抗体药物精确表征的需求日益增加。毛细管电泳技术具有分离效率高、分析速度快、分离模式多、样品用量少等特点,已成为单克隆抗体药物分析和质量控制的重要手段。该文对毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦、毛细管区带电泳等模式在单克隆抗体药物的纯度分析、等电点测定、电荷异质性分析和N-寡糖分析的应用进行综述,以期为国内单克隆抗体研究开发和生产的企事业单位提供技术参考。

关键词：毛细管电泳毛细管凝胶电泳毛细管区带电泳毛细管等电聚焦单克隆抗体药物纯度电荷异质性 N-寡糖综述