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中国化学会第30届学术年会-第二十三分会：复杂样品分离分析

作者：郭璇胡小刚华南师范大学化学与环境学院

本研究采用经典溶胶凝胶法制备硅胶基质杂化毛细管整体柱,应用链霉亲和素与生物素之间高亲和力在整体柱内固载核酸适配体,制备基于核酸适配体的有机/无机杂化毛细管整体柱,解决核酸适配体稳定性差、固载量低等问题。如图1所示,该整体柱... 详细信息

本研究采用经典溶胶凝胶法制备硅胶基质杂化毛细管整体柱,应用链霉亲和素与生物素之间高亲和力在整体柱内固载核酸适配体,制备基于核酸适配体的有机/无机杂化毛细管整体柱,解决核酸适配体稳定性差、固载量低等问题。如图1所示,该整体柱具有孔隙度均匀、机械强度高的结构,适配体固载量达到700 pmol/cm,赭曲霉毒素A萃取容量高达459 ng/mL,对赭曲霉毒素A具有高特异性识别能力,萃取量为其类似物的14.0-24.0倍,如图2所示。核酸适配体修饰有机/无机杂化毛细管整体柱具有较高稳定性,使用20次之后,其萃取能力未出现显著变化。在对赭曲霉毒素A萃取条件进行优化后,建立了核酸适配体有机/无机杂化毛细管整体柱微萃取-HPLC联用方法,可应用于花生和玉米中痕量赭曲霉毒素A测定,检出限为9.7 ng/L,回收率为92.9-109%。

关键词：核酸适配体毛细管整体柱高效液相色谱赭曲霉毒素A

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聚合物基质弱阳离子交换整体柱的制备及其色谱性能研究

聚合物基质弱阳离子交换整体柱的制备及其色谱性能研究

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第11届全国离子色谱学术报告会

作者：丁明玉彭虹郑睿清华大学化学系

在0．32mm的弹性石英毛细管内,制备了聚合物基质的毛细管整体柱。优化了试剂配比、反应时间等合成条件,制备出了大孔径且孔径均一的甲基丙烯酸缩水甘油酯整体柱。用亚胺基乙二酸对整体柱进行改性,得到了弱酸型阳离子交换整体柱。考察了... 详细信息

在0．32mm的弹性石英毛细管内,制备了聚合物基质的毛细管整体柱。优化了试剂配比、反应时间等合成条件,制备出了大孔径且孔径均一的甲基丙烯酸缩水甘油酯整体柱。用亚胺基乙二酸对整体柱进行改性,得到了弱酸型阳离子交换整体柱。考察了改性时间、改性温度和pH值与离子容量的关系,并将该整体柱用于蛋白质的分离。

关键词：离子色谱毛细管整体柱甲基丙烯酸弱阳离子交换

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质谱探针在DNA甲基化衍生物的高灵敏定量分析中的应用

质谱探针在DNA甲基化衍生物的高灵敏定量分析中的应用

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中国化学会首届全国质谱分析学术研讨会

作者：唐阳冯钰锜袁必锋生物医学分析化学教育部重点实验室武汉大学化学与分子科学学院

细胞内DNA甲基化（5-mC）是随着细胞的生长、增殖不断变化着的,DNA甲基化的动态调控对细胞的正常生理功能起着重要作用。2009年研究者首次在哺乳动物神经细胞和胚胎干细胞中发现5-羟甲基胞嘧啶核苷（5-hmC）,证实TET蛋白可以氧化5-mC为5... 详细信息

细胞内DNA甲基化（5-mC）是随着细胞的生长、增殖不断变化着的,DNA甲基化的动态调控对细胞的正常生理功能起着重要作用。2009年研究者首次在哺乳动物神经细胞和胚胎干细胞中发现5-羟甲基胞嘧啶核苷（5-hmC）,证实TET蛋白可以氧化5-mC为5-hmC[1,2]。随后的深入研究进一步发现TET蛋白还可进一步催化5-hmC产生5-甲酰胞嘧啶（5-foC）和5-羧基胞嘧啶（5-caC）,这些研究结果显示DNA去甲基化是通过TET催化的5-mC氧化和随后的脱羧作用而发生[3,4]。由此,脊椎动物DNA中的5-hmC、5-foC、5-caC引起了人们极大地关注,被称为是DNA中除A、T、C、G、5-mC之后的第六个碱基、第七个碱基和第八个碱基[5]。新发现的这三种甲基胞嘧啶衍生物（5-hmC、5-foC、5-caC）除了作为DNA去甲基化过程的中间产物,它们还可能为细胞分化和癌症研究提供重要信息。但是基因组中这些修饰核苷的含量很低,其中5-mC含量为正常胞苷的2-6%,而5-hmC的含量只有5-mC的1/]0到1/100,5-foC和5-caC的含量只有5-hmC含量的1/40到1/1000。此外,DNA中大量未修饰的核苷会干扰修饰碱基的检测。因此对它们的检测分析有一定的难度。在前期的研究工作中我们建立了online trapping-cHI LIC-ESI-MS/MS全基因组DNA甲基化分析的高灵敏定量分析方法,对5-mC和5-hmC的检测限（LOD）分别达到0.06 fmol与0.19 fmol。通过对148个肝癌组织以及癌旁组织的分析,发现5-hmC在肝癌组织中有4-5倍的降低,并和癌症的不同分期有显著相关性[6];通过利用糖基化标记法并结合质谱分析,建立了SPE-HPLC-MS/MS方法用来检测哺乳动物和酵母细胞全基因组5-hmC,相比直接将DNA酶解液进HPLC-MS/M分析,灵敏度有50倍提高。利用该方法在酵母中发现5-mC和5-hmC,并且5-mC和细胞的不同生长状态密切相关[7,8];建立了基于超高交联整体柱的全基因组5-mC的nanoLC分析方法,其检测限（LOD）-比常规的HPLC-UV方法要低500倍[9]。由于5-foC和5-caC的含量比5-mC和5-hmC低得多,因此检测分析难度也更大。最近我们通过发展质谱探针,衍生5-foC和5-caC之后再进行质谱分析。由于质谱探针引入易电离基团,可以显著提高LC-MS对修饰碱基的检测灵敏度,实现对丰度极低的5-foC和5-caC的定量分析。我们的研究发现,在使用质谱探针衍生化之后,5-foC和5-caC的质谱响应分别提高了72倍和530倍。利用该方法,在多种物种中都发现了5-foC和5-caC的修饰存在。

关键词： DNA甲基化 DNA甲基化衍生化物质谱分析质谱探针毛细管整体柱

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分析化学 2013年第8期 1295-1295页

中科院长春应用化学研究所王宏达研究员研究组与Technical University of Denmark的池其金副教授、张敬东副教授、Jens Ulstrup教授研究组,以及瑞典的Chalmers University of Technology合作,应用AFM力谱在单分子水平研究了过渡金属配... 详细信息

中科院长春应用化学研究所王宏达研究员研究组与Technical University of Denmark的池其金副教授、张敬东副教授、Jens Ulstrup教授研究组,以及瑞典的Chalmers University of Technology合作,应用AFM力谱在单分子水平研究了过渡金属配位化合物中金属原子与配位分子(Osmiumterpyridine)之间的相互作用。

关键词：过渡金属配合物 DNA 甲基化烷基化络合物化学配位化学络合物配位化合物毛细管整体柱有机分析质谱分析肝癌组织 NEWS 单分子

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《分析化学》2010年第38卷总目录(第1～12期)

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分析化学 2010年第12期 1841-1853页

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