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毛头牛蒡子中总木脂素有效部位与药动学研究

毛头牛蒡子中总木脂素有效部位与药动学研究

作者：刘富铭新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究以毛头牛蒡子主要有效成分总木脂素为研究对象,对新疆不同产地毛头牛蒡子进行初步质量分析,考察其最佳提取、富集工艺并制备总木脂素有效部位,并对牛蒡苷和牛蒡苷元在大鼠体内的吸收和分布进行了初步研究,为进一步开发毛头... 详细信息

目的:本研究以毛头牛蒡子主要有效成分总木脂素为研究对象,对新疆不同产地毛头牛蒡子进行初步质量分析,考察其最佳提取、富集工艺并制备总木脂素有效部位,并对牛蒡苷和牛蒡苷元在大鼠体内的吸收和分布进行了初步研究,为进一步开发毛头牛蒡子这一特色民族药物提供理论数据。方法:(1)采用高效薄层色谱法对毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元进行定性定量分析研究;建立了以牛蒡苷为对照品的紫外可见分光光度法对不同产地的毛头牛蒡子中总木脂素含量进行测定并完成方法学考察;采用高效液相色谱法对不同产地的毛头牛蒡子中牛蒡苷的含量进行测定并完成方法学考察。(2)采用单因素试验结合Box-Behnken设计的方法,以总木脂素含量、牛蒡苷含量和浸膏得率的综合评分为评价指标优选毛头牛蒡子总木脂素类成分的提取工艺。(3)以总木脂素含量、牛蒡苷含量的综合评分为评价指标,筛选8种大孔吸附树脂对毛头牛蒡子总木脂素类成分进行吸附和洗脱;考察上样浓度、上样流速、最大上样量、径高比、除杂用水量、洗脱溶剂及其用量、洗脱流速对毛头牛蒡子总木脂素有效部位富集效果的影响。(4)根据最佳提取和富集工艺制备毛头牛蒡子总木脂素有效部位,并采用高效液相色谱法对总木脂素有效部位中的牛蒡苷和牛蒡苷元的含量进行测定并进行方法学考察,采用紫外可见分光光度法对总木脂素有效部位中总木脂素含量进行测定并完成方法学考察。(5)大鼠灌胃给药毛头牛蒡子总木脂素有效部位后,于不同时间点采集血液、组织样品,应用高效液相色谱法检测血液和组织中牛蒡苷、牛蒡苷元含量,采用PKSolver 2.0药动学药效学数据处理软件计算药动学参数,并分析牛蒡苷、牛蒡苷元在体内各组织的分布情况。结果:(1)毛头牛蒡子药材的高效薄层色谱法:采用硅胶G板,氯仿:甲醇(48:5)为展开剂,所得图谱斑点清晰,分离效果良好,其牛蒡苷和牛蒡苷元含量有所差异,6批毛头牛蒡子中牛蒡苷含量在26.15 mg/g2.20 mg/g范围内;牛蒡苷元含量在4.52 mg/g8.89 mg/g范围内。紫外可见分光光度法测定6批毛头牛蒡子中总木脂素含量范围为73.16 mg/g83.97 mg/g。高效液相色谱法测定6批毛头牛蒡子中牛蒡苷含量范围为17.46 mg/g8.34 mg/g。(2)单因素试验确定提取时间范围为400 min,加醇倍量为126倍,乙醇浓度为50%0%,提取次数为2次,结合Box-Behnken响应曲面试验最终确定毛头牛蒡子中总木脂素类成分的最佳提取工艺为:15倍量58%乙醇回流提取2次,每次提取62 min。(3)最佳富集工艺为采用HPD-100树脂,径高比为1:10,上样浓度为0.2 g/mL,以1.5 BV/h的流速上样4 BV,7 BV蒸馏水洗去水溶性杂质,4 BV的70%乙醇以1 BV/h的流速洗脱,验证实验表明采用大孔树脂富集后得到的总木脂素有效部位中总木脂素含量达到90%以上,牛蒡苷含量达到30%以上,结果表明该工艺稳定、可行。(4)测定制备好的总木脂素有效部位中总木脂素含量为95.68%,牛蒡苷含量为55.71%,牛蒡苷元含量为2.99%。(5)大鼠灌胃给药毛头牛蒡子总木脂素有效部位后,牛蒡苷药代动力学参数分别为:T(达峰时间)为8 h;C(达峰浓度)为39.95μg/mL;AUC、AUC(血药浓度-时间曲线下面积)分别为713.12、760.43μg·h/mL;MRT(平均驻留时间)为19.58 h;ke(消除速率常数)为0.06 h;t(半衰期)为11.5 h;CL(清除率)为1.05 L/h;V(表观分布容积)为17.46 L。牛蒡苷元药代动力学参数分别为:T为6 h;C为1.82μg/mL;AUC、AUC分别为39.36、62.15μg·h/mL;MRT为47.48 h;ke为0.02 h;t为31.61 h;CL为12.87 L/h;V为586.89 L。牛蒡苷、牛蒡苷元在大鼠各组织器官中分布较广泛,并且组织中药物浓度大于血液。牛蒡苷在体内药物浓度:小肠>肺>脾>心>肾>肝>血液;牛蒡苷元在体内药物浓度:小肠>脾>肺>肝>心>肾>血液。结论:通过毛头牛蒡子药材质量初步分析,并进行毛头牛蒡子总木脂素类成分的最佳提取工艺优选,再结合大孔树脂富集毛头牛蒡子总木脂素有效部位最佳工艺筛选,得到了纯度较高的毛头牛蒡子总木脂素有效部位,大鼠灌胃给予总木脂素有效部位,血液和组织样品经HPLC定量方法检测,绘制了大鼠血浆中牛蒡苷、牛蒡苷元的血药浓度-时间曲线,牛蒡苷、牛蒡苷元具有良好的药代动力学特征,在组织中的分布较广泛,具有一定的靶向性,牛蒡苷主要分布在肺、小肠等组织中,牛蒡苷元主要分布在脾、小肠等组织中。

关键词：毛头牛蒡子总木脂素有效部位牛蒡苷牛蒡苷元药代动力学

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毛头牛蒡子质量控制及多糖的初步研究

毛头牛蒡子质量控制及多糖的初步研究

作者：骆秀珍新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:对毛头牛蒡子的质量控制方法进行初步研究;筛选出毛头牛蒡子粗多糖抗氧化活性和抑制α-葡萄糖苷酶活性的部位;分离纯化毛头牛蒡子活性多糖,对纯化后多糖的理化性质及单糖组成进行研究。方法:1.采用薄层色谱法对毛头牛蒡子中的氨基... 详细信息

目的:对毛头牛蒡子的质量控制方法进行初步研究;筛选出毛头牛蒡子粗多糖抗氧化活性和抑制α-葡萄糖苷酶活性的部位;分离纯化毛头牛蒡子活性多糖,对纯化后多糖的理化性质及单糖组成进行研究。方法:1.采用薄层色谱法对毛头牛蒡子中的氨基酸类成分进行定性分析,同时对牛蒡苷及苷元进行定性定量分析研究;通过红外光谱法对毛头牛蒡子中的化学成分进行初步研究;采用电感耦合等离子体原子发射光谱法测定毛头牛蒡子的微量元素的含量;2.通过建立清除DPPH自由基,还原能力的测定,清除羟基自由基,清除超氧阴离子和SOD酶活性率这五种体外抗氧化模型,对毛头牛蒡子粗多糖不同洗脱部位的体外抗氧化活性进行研究;采用抑制α-葡萄糖苷酶活性实验研究毛头牛蒡子粗多糖不同洗脱部位的降血糖活性;3.利用DEAE-纤维素柱和Sephadex G-100柱分离纯化毛头牛蒡子粗多糖,测定毛头牛蒡子多糖的理化性质,并通过UV,IR和TLC对纯化后的多糖进行初步研究。结果:1.毛头牛蒡子中含有色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丝氨酸、丙氨酸和精氨酸六种氨基酸。通过优化薄层色谱条件,表明以氯仿:甲醇(10:1)为展开剂展开可以将牛蒡苷及苷元完全分开,且斑点颜色清晰,Rf值适中。薄层扫描法测得毛头牛蒡子中牛蒡苷和苷元的含量分别为9.375%,0.205%。通过分析比较毛头牛蒡子石油醚提取物、水提取物及原药材的红外光谱图,得到了较为全面的化学成分组成。毛头牛蒡子药材中Cr,Cu,Fe,Mg,Mn,Ni,Pb,Sr,Ti,Zn10种元素的含量依次为32.87,20.2,253.53,3563.67,26.34,5.58,2.89,66.06,3.27,41.19μg·g-1。2.抗氧化实验结果:Vc>20%乙醇洗脱部位>水洗脱部位>40%乙醇洗脱部位>60%乙醇洗脱部位。抑制α-葡萄糖苷酶的活性结果,阿卡波糖>20%乙醇洗脱部位>水洗脱部位>40%乙醇洗脱部位,60%乙醇洗脱部位无抑制活性。3.粗多糖经DEAE-纤维素分离得到四个洗脱组分(W1,N1,N2,N3),选择较多的组分W1经Sephadex G-100柱纯化,纯化后的洗脱曲线为单一对称峰。紫外扫描图谱显示纯化后的W1’在260nm和280nm处没有明显的紫外吸收峰,红外光谱结果表明毛头牛蒡子多糖具有多糖的一般特征吸收峰,且含有α-吡喃型糖的吸收峰。单糖组成分析结果显示分离纯化的毛头牛蒡子多糖W1’由葡萄糖,阿拉伯糖,木糖和半乳糖组成。结论:1.为毛头牛蒡子药材提供了初步的质量评价方法;2.筛选出毛头牛蒡子粗多糖20%乙醇洗脱部位具有较好的抗氧化活性和抑制α-葡萄糖苷酶的活性;3.分离纯化的毛头牛蒡子多糖组分W1’是单一多糖组分,不含有核酸和蛋白质,为α-吡喃型糖。通过薄层色谱法初步判断了毛头牛蒡子多糖的单糖组成。本实验为系统研究毛头牛蒡子药材的质量控制和多糖的综合开发利用提供了参考依据。

关键词：毛头牛蒡子质量标准研究抗氧化活性 α-葡萄糖苷酶结构研究

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毛头牛蒡子总木脂素含量测定

新疆师范大学学报（自然科学版） 2013年第4期32卷 25-27页

作者：杜为军刘枫马翠娇周晓英新疆师范大学化学化工学院新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830011

文章测定毛头牛蒡子中总木脂素的含量。利用紫外分光光度计，以牛蒡苷为对照品，在280nm波长下测定总木脂素含量。对照品牛蒡苷在0．0207～0．1101mg／mL（r=0．9992）浓度范围内吸光度与浓度呈良好的线性关系，平均加样回收率98．3％，... 详细信息

文章测定毛头牛蒡子中总木脂素的含量。利用紫外分光光度计，以牛蒡苷为对照品，在280nm波长下测定总木脂素含量。对照品牛蒡苷在0．0207～0．1101mg／mL（r=0．9992）浓度范围内吸光度与浓度呈良好的线性关系，平均加样回收率98．3％，RSD=1．8％（n=5）。总木脂素平均含量为244mg／g，RSD=2．9％（n=5）。紫外分光光度法测定总木脂素含量，简单，稳定可靠，重现性好。

关键词：毛头牛蒡子总木脂素牛蒡苷紫外分光光度法

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毛头牛蒡子总木脂素有效部位的化学成分研究

化学工程师 2024年第1期38卷 20-23页

作者：葛亮刘富铭田树革新疆医科大学中医学院新疆乌鲁木齐830000

研究毛头牛蒡子总木脂素有效部位中的化学成分,采用紫外分光光度法测定其中总木脂素含量,采用高效液相色谱法测定其中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量,结果表明,毛头牛蒡子总木脂素有效部位中总木脂素含量为95.68%,牛蒡苷含量为55.71%,牛蒡苷元... 详细信息

研究毛头牛蒡子总木脂素有效部位中的化学成分,采用紫外分光光度法测定其中总木脂素含量,采用高效液相色谱法测定其中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量,结果表明,毛头牛蒡子总木脂素有效部位中总木脂素含量为95.68%,牛蒡苷含量为55.71%,牛蒡苷元含量为2.99%。通过对毛头牛蒡子总木脂素有效部位中化学成分进行分析,为进一步研究其活性打下相关基础。

关键词：毛头牛蒡子总木脂素有效部位化学成分

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毛头牛蒡子中总黄酮最佳提取工艺研究

亚太传统医药 2010年第8期6卷 34-35页

作者：韩潇赵艳龙新疆维吾尔自治区第一济困医院新疆乌鲁木齐830001

目的:优选提取毛头牛蒡子中总黄酮的最佳条件。方法:采用平行实验优化毛头牛蒡子中总黄酮的提取工艺,以芦丁的含量为评价指标。结果:加75%乙醇50mL超声提取90min,提取效果最好。结论:该工艺可充分提取毛头牛蒡子中的总黄酮类成分,提高... 详细信息

目的:优选提取毛头牛蒡子中总黄酮的最佳条件。方法:采用平行实验优化毛头牛蒡子中总黄酮的提取工艺,以芦丁的含量为评价指标。结果:加75%乙醇50mL超声提取90min,提取效果最好。结论:该工艺可充分提取毛头牛蒡子中的总黄酮类成分,提高了药材利用率,为毛头牛蒡子的进一步开发利用作了铺垫。

关键词：毛头牛蒡子总黄酮芦丁

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毛头牛蒡子的红外光谱分析及薄层色谱鉴别

西北药学杂志 2015年第4期30卷 352-354页

作者：骆秀珍张浩科谭勇周晓英新疆医科大学药学院乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院药学部乌鲁木齐830054

目的对毛头牛蒡子原药材及不同溶剂提取物的红外光谱进行研究,并建立毛头牛蒡子氨基酸成分的薄层色谱(TLC)鉴别方法,为科学评价及规范毛头牛蒡子药材质量提供依据。方法利用红外光谱对毛头牛蒡子原药材、水提物、石油醚提取物进行特征... 详细信息

目的对毛头牛蒡子原药材及不同溶剂提取物的红外光谱进行研究,并建立毛头牛蒡子氨基酸成分的薄层色谱(TLC)鉴别方法,为科学评价及规范毛头牛蒡子药材质量提供依据。方法利用红外光谱对毛头牛蒡子原药材、水提物、石油醚提取物进行特征峰的指认和对比分析,采用薄层色谱法对毛头牛蒡子中的游离氨基酸成分进行分离鉴别。结果对毛头牛蒡子不同提取物的红外光谱进行分析比较,得到其特有的成分组成。由薄层色谱法可知,毛头牛蒡子提取物中含有色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丝氨酸、丙氨酸和精氨酸。结论红外光谱法及薄层色谱法简便快捷、专属性强,可用于毛头牛蒡子的鉴别分析和质量控制。

关键词：毛头牛蒡子薄层色谱红外光谱

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毛头牛蒡子醇提物抗氧化活性研究

西北药学杂志 2010年第5期25卷 346-348页

作者：张浩科葛亮田树革新疆医科大学中医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆名医名方与特色方剂学重点实验室新疆乌鲁木齐830011

目的研究毛头牛蒡子提取物的抗氧化活性。方法将毛头牛蒡子乙醇提取物采用溶剂萃取法,分成极性不同的4个部分,并采用DPPH法和邻苯三酚自氧化法测定各部分的清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基的能力,以测定其抗氧化活性,并与抗坏血酸进... 详细信息

目的研究毛头牛蒡子提取物的抗氧化活性。方法将毛头牛蒡子乙醇提取物采用溶剂萃取法,分成极性不同的4个部分,并采用DPPH法和邻苯三酚自氧化法测定各部分的清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基的能力,以测定其抗氧化活性,并与抗坏血酸进行比较。结果清除DPPH自由基能力大小为:抗坏血酸>醋酸乙酯部分>正丁醇部分>氯仿部分>95%乙醇部分,清除超氧阴离子自由基的能力以醋酸乙酯部分、正丁醇部分为好,其他部分认为尚无清除超氧阴离子自由基的活性。结论毛头牛蒡子醇提物醋酸乙酯部分和正丁醇部分具有一定的抗氧化活性,有进一步研究的价值。

关键词：毛头牛蒡子 DPPH自由基超氧阴离子自由基抗氧化活性

毛头牛蒡子抗氧化和降血糖的有效部位筛选研究

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中国现代中药 2016年第10期18卷 1265-1268页

作者：骆秀珍文娥田树革周晓英新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学中医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学中心实验室新疆乌鲁木齐830011

目的:筛选出毛头牛蒡子中抗氧化和降血糖的有效部位。方法:将毛头牛蒡子粗多糖提取物经AB-8大孔树脂脱色纯化,依次采用水和20%、40%、60%乙醇水进行洗脱,以DPPH自由基清除活性、还原力的测定、羟基自由基清除活性和超氧阴离子清除活性4... 详细信息

目的:筛选出毛头牛蒡子中抗氧化和降血糖的有效部位。方法:将毛头牛蒡子粗多糖提取物经AB-8大孔树脂脱色纯化,依次采用水和20%、40%、60%乙醇水进行洗脱,以DPPH自由基清除活性、还原力的测定、羟基自由基清除活性和超氧阴离子清除活性4项指标研究不同洗脱部位的抗氧化活性,采用体外α-葡萄糖苷酶活性测定毛头牛蒡子提取物不同部位的降血糖活性。结果:毛头牛蒡子20%乙醇水洗脱部位的抗氧化活性和降血糖活性均强于其他部位。结论:毛头牛蒡子抗氧化和降血糖的活性部位应为20%乙醇水洗脱部位。

关键词：毛头牛蒡子抗氧化降血糖

维药毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元提取方法的筛选

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新疆医科大学学报 2017年第1期40卷 79-81页

作者：李振胡月月施洋陈新雅葛亮新疆医科大学中医学院乌鲁木齐830011 新疆医科大学学报编辑部乌鲁木齐830011 新疆医科大学新疆名医名方与特色方剂学重点实验室乌鲁木齐830011

目的确定维药毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的最佳提取方法。方法分别采用索氏提取法、超声波提取法、超声细胞粉碎提取法、微波提取法提取毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元,采用高分离度快速液相色谱仪测定牛蒡苷和牛蒡苷元的含量。结果... 详细信息

目的确定维药毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的最佳提取方法。方法分别采用索氏提取法、超声波提取法、超声细胞粉碎提取法、微波提取法提取毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元,采用高分离度快速液相色谱仪测定牛蒡苷和牛蒡苷元的含量。结果通过不同提取方法的考察,发现超声细胞粉碎提取法提取的牛蒡苷与牛蒡苷元含量分别为65.852 5、5.127 8 mg/g,微波提取法提取的牛蒡苷与牛蒡苷元含量分别为105.977 5、3.835 0 mg/g,索氏提取法提取的牛蒡苷与牛蒡苷元含量分别为54.182 5、2.24 85 mg/g,超声波提取法提取的牛蒡苷与牛蒡苷元含量分别为33.727 5、1.225 1 mg/g,通过对比最终确定采用微波提取法为最佳提取方法。结论微波提取法简单、可靠、准确,可用于毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的提取。

关键词：毛头牛蒡子牛蒡苷牛蒡苷元提取方法