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在线二维正相色谱×反相色谱液相系统的构建与应用及蟾皮化学成分的研究

在线二维正相色谱×反相色谱液相系统的构建与应用及蟾皮化学成分...

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作者：李加福厦门大学

学位级别：硕士

本文旨在构建一个正相色谱(NPLC)与反相色谱(RPLC)联用的在线二维分析与制备液相色谱系统。首先,通过设计一个新型的高温蒸发辅助吸附(TEAA)接口,解决了流动相不兼容问题,实现了正相色谱与反相色谱的在线联用。该接口可以使正相溶剂在... 详细信息

本文旨在构建一个正相色谱(NPLC)与反相色谱(RPLC)联用的在线二维分析与制备液相色谱系统。首先,通过设计一个新型的高温蒸发辅助吸附(TEAA)接口,解决了流动相不兼容问题,实现了正相色谱与反相色谱的在线联用。该接口可以使正相溶剂在高温下迅速蒸发,将样品富集在正相富集柱上,继而利用洗脱液洗脱富集的样品,稀释后富集在反相富集柱上,进一步在反相色谱中得到分离。进而,以蟾皮醇提物为样品溶液,对TEAA接口的一系列参数进行了优化,包括正相富集的温度、真空度,正相富集柱的洗脱时间和重生时间。其次,通过优化的接口构建了在线NPLC × RPLC系统,对蟾皮样品溶液进行了在线二维分析,系统调制时间为190秒,表现出良好的分离度。并将蟾皮的NPLC×RPLC分离效果与 RPLC(C18)× RPLC 和 RPLC(CN)× RPLC 对比,发现NPLC × RPLC系统拥有更好的正交性(75.2%)。然后,将分析型二维色谱扩展至制备应用,针对制备色谱的特点,设计了新型的真空蒸发辅助吸附接口(VEAA),构建了制备型NPLC × RPLC二维液相色谱系统,一次二维制备从蟾酥中得到19个化合物。最后,在在线NPLC×RPLC的指导下,对蟾皮的化学成分进行分离,得到17个化合物。本文首次实现了在线全二维NPLC × RPLC系统在中等极性样品分离分析中的应用。得益于NPLC和RPLC之间天然的正交性,该二维系统对复杂样品表现出了高效的分离能力,可以为复杂天然产物的常规分离分析提供一种可靠的技术手段。

关键词：正相色谱×反相色谱蟾皮蟾酥高温蒸发辅助吸附接接口真空蒸发辅助吸附接口

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