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橘红素对人胃癌AGS细胞自噬的作用及其机制研究

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中国药理学通报 2019年第12期35卷 1671-1676页

作者：陈圣敏龚永昌隋璐楚敏董杨上海中医药大学教学实验中心

目的探讨橘红素(Tangeretin,Tan)对人胃癌AGS细胞自噬的作用及其机制。方法Western blot检测Tan对LC3II、p62及p-Akt蛋白表达的影响,以及自噬抑制剂CQ和促进剂Rapa干预后,LC3II和p62蛋白表达的变化。Annexin V/PI双染,流式细胞术检测CQ... 详细信息

目的探讨橘红素(Tangeretin,Tan)对人胃癌AGS细胞自噬的作用及其机制。方法Western blot检测Tan对LC3II、p62及p-Akt蛋白表达的影响,以及自噬抑制剂CQ和促进剂Rapa干预后,LC3II和p62蛋白表达的变化。Annexin V/PI双染,流式细胞术检测CQ对Tan诱导细胞凋亡作用的影响。结果作用24 h,Tan可呈剂量依赖地增强LC3II蛋白(P橘红素可以抑制人胃癌AGS细胞的自噬流,造成自噬体的堆积,促进AGS细胞凋亡,Akt蛋白的磷酸化可能参与其中。

关键词：橘红素胃癌自噬自噬流凋亡 Akt

橘红素2种脂质纳米粒的制备、表征和口服吸收生物利用度评价

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中草药 2023年第24期54卷 8031-8042页

作者：李伟宏高娟王风云郑岩河南应用技术职业学院河南郑州450042 上海医药工业研究院上海201203

目的制备橘红素纳米结构脂质载体(tangeretin nanostructured lipid carriers,Tan-NLCs)和橘红素固体脂质纳米粒(tangeretin solid lipid nanoparticles,Tan-SLNs),考察相对口服吸收生物利用度。方法采用包封率、载药量和粒径为指标,单因素结合Box-Behnken设计-效应面法(Box-Behnken design-response surface methodology,BBD-RSM)优化Tan-NLCs处方,并制备Tan-SLNs。透射电子显微镜观察Tan-NLCs和Tan-SLNs外貌形态,考察在pH 2.0和pH 6.8磷酸盐缓冲液(PBS)中的释药情况。X射线粉末衍射(X-ray powder diffraction,XRPD)法和示差量热扫描(differential scanning calorimetry,DSC)法对晶型进行分析,并考察Tan-NLCs和Tan-SLNs冻干粉的稳定性。以橘红素原料药为参考,比较Tan-NLCs和Tan-SLNs口服药动学行为。结果 Tan-NLCs和Tan-SLNs平均包封率分别为(85.13±1.01)%和(73.07±1.38)%,载药量分别为(5.43±0.19)%和(4.11±0.22)%,粒径分别为(184.77±8.63)nm和(226.09±10.25)nm。Tan-NLCs和Tan-SLNs呈椭圆形或球形,橘红素在Tan-NLCs和Tan-SLNs冻干粉中可能以无定型形式存在,其释药速率和累积释放率明显提高。Tan-NLCs冻干粉稳定性高于Tan-SLNs冻干粉。口服药动学结果显示,Tan-SLNs冻干粉C_(max)和相对口服吸收生物利用度分别提高至2.01倍和3.10倍;Tan-NLCs冻干粉C_(max)和相对口服吸收生物利用度分别提高至2.83倍和4.59倍。结论 Tan-NLCs和Tan-SLNs均可促进橘红素口服吸收,但Tan-NLCs冻干粉稳定性更高,促吸收作用更大。

关键词：橘红素纳米结构脂质载体固体脂质纳米粒 Box-Behnken设计-效应面法药物释放药动学口服生物利用度

橘红素上调Cyclin B1和抑制ERK磷酸化诱导人胃癌AGS细胞周期阻滞

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中国药理学通报 2012年第6期28卷 823-827页

作者：董杨季光施建蓉曹爱丽谢建群吴大正上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中医药大学上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学教学实验中心上海201203 上海中医药大学脾胃病研究所上海201203

目的探讨橘红素对人胃癌AGS细胞增殖和周期的作用及其机制。方法采用MTT法观察橘红素对人AGS胃癌细胞增殖的作用;流式细胞仪检测橘红素对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素对Cyclin B1、Cyclin D1、Cyclin E1和ERK、p-ERK蛋白表达... 详细信息

目的探讨橘红素对人胃癌AGS细胞增殖和周期的作用及其机制。方法采用MTT法观察橘红素对人AGS胃癌细胞增殖的作用;流式细胞仪检测橘红素对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素对Cyclin B1、Cyclin D1、Cyclin E1和ERK、p-ERK蛋白表达的影响。结果橘红素可明显抑制AGS胃癌细胞的增殖(P橘红素作用于AGS细胞24 h,S期细胞百分比明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P橘红素可上调Cyclin B1蛋白的表达(P橘红素可明显抑制人AGS胃癌细胞的增殖,使细胞阻滞于S期和G2/M期,主要机制可能是通过抑制ERK磷酸化和上调CyclinB1蛋白表达。

关键词：橘红素胃癌细胞周期 Cyclin B1 ERK 磷酸化

橘红素增强5-氟尿嘧啶抑制人胃癌AGS细胞增殖的作用及其机制研究

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中国药理学通报 2011年第6期27卷 760-763页

作者：鲁岚董杨施建蓉吴大正上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中医药大学上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学教学实验中心上海201203

目的探讨橘红素联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人胃癌AGS细胞增殖的作用及其机制。方法采用MTT法观察5-Fu和橘红素联合5-Fu对AGS胃癌细胞增殖作用;流式细胞仪检测橘红素联合5-Fu对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素联合5-Fu对p53和p21蛋... 详细信息

目的探讨橘红素联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人胃癌AGS细胞增殖的作用及其机制。方法采用MTT法观察5-Fu和橘红素联合5-Fu对AGS胃癌细胞增殖作用;流式细胞仪检测橘红素联合5-Fu对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素联合5-Fu对p53和p21蛋白表达的影响。结果 5-Fu可呈剂量依赖地抑制人AGS胃癌细胞的增殖(P橘红素联合5-Fu可明显增强5-Fu对AGS胃癌细胞增殖的抑制作用,与5-Fu组比较差异有统计学意义(P橘红素联合5-Fu作用于AGS细胞,S期细胞百分比明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P橘红素联合5-Fu可上调p53和p21蛋白的表达,与5-Fu组比较差异有统计学意义(P橘红素联合5-Fu可增强5-Fu抑制人AGS胃癌细胞的增殖作用,主要机制可能是通过上调p53和p21蛋白,使细胞阻滞于S期。

关键词：橘红素 5-氟尿嘧啶胃癌增殖细胞周期 p53 p21

橘红素对去卵巢大鼠子宫及血清激素、骨代谢和炎症因子的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第4期37卷 249-255页

作者：田欣陈珺黄慧灵由天辉广东药科大学护理学院广东广州510006 广东药科大学生命科学与生物制药学院广东广州510006 广东药科大学生物资源与创新药物研究中心广东广州510006

目的观察橘红素(TG)对去卵巢(OVX)大鼠子宫形态的影响及对血清激素、骨代谢和炎症因子的调节作用。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、模型+雌二醇0.05 mg·kg^(-1)组、模型+TG 50和100 mg·kg^(-1)组,每组8只。除假手术组外,其余... 详细信息

目的观察橘红素(TG)对去卵巢(OVX)大鼠子宫形态的影响及对血清激素、骨代谢和炎症因子的调节作用。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、模型+雌二醇0.05 mg·kg^(-1)组、模型+TG 50和100 mg·kg^(-1)组,每组8只。除假手术组外,其余各组大鼠行双侧卵巢切除术,术后各给药组大鼠连续12周每周4次ig给予不同药物,假手术组和模型组给予等量0.5%羧甲纤维素钠。经麻醉处死大鼠,称量体重和子宫重量,计算子宫指数;HE染色观察子宫内膜厚度和子宫面积;ELISA检测大鼠血清雌激素(E)、睾酮(T)、甲状旁腺素(PTH)、1,25双羟维生素D3[1,25(OH)_(2)D_(3)]、骨碱性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型前胶原氨基末端肽(PINP)、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(CTX)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、白细胞介素1(IL-1)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。比色法检测大鼠血清钙(Ca)和磷(P)水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠体重明显增加(P<0.01),子宫的重量、指数、内膜厚度和面积均明显减少(P<0.01),血清E水平显著下降(P<0.01),血清T,Ca,P,PTH,1,25(OH)_(2)D_(3),BALP,PINP,CTX,IL-1,IL-6和TNF-α水平均显著上升(P<0.01),血清TRACP-5b水平无明显改变。与模型组相比,模型+雌二醇0.05 mg·kg^(-1)组大鼠体重明显减轻(P<0.01),子宫的重量、指数、内膜厚度和面积明显增加(P<0.01);模型+TG 50和100 mg·kg^(-1)组大鼠体重、子宫的重量、指数、内膜厚度和面积均无明显变化;模型+雌二醇0.05 mg·kg^(-1)组血清E水平均显著升高(P<0.01),血清T,Ca,P,PTH,1,25(OH)_(2)D_(3),BALP,PINP,CTX,TRACP-5b,IL-1,IL-6和TNF-α水平均显著降低(P<0.01),模型+TG 50和100 mg·kg^(-1)组血清E水平均显著升高(P<0.01),血清T,Ca,P,PTH,1,25(OH)_(2)D_(3),BALP,PINP,CTX,IL-1,IL-6和TNF-α水平均显著降低(P<0.01),血清TRACP-5b水平无显著改变。结论TG干预在提高OVX大鼠血清E水平的同时不刺激子宫内膜增生,并能降低骨代谢和血清炎症因子水平。

关键词：橘红素骨质疏松卵巢切除术骨代谢炎症因子大鼠

橘红素预处理对过氧化氢诱导成骨细胞损伤的保护作用及机制

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中国药理学与毒理学杂志 2022年第4期36卷 267-273页

作者：李汁涵陈艳莉田欣路鸿瑜殷航邬钰黄宏靓陈珺广东药科大学生命科学与生物制药学院广东广州510006 生物资源与创新药物研究中心广东广州510006

目的研究橘红素预处理对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的成骨细胞氧化损伤的保护作用和机制。方法①酶消化法分离培养大鼠颅骨来源的原代成骨细胞,分别培养7和21 d后,采用碱性磷酸酶(AKP)染色和茜素红染色鉴定细胞。②橘红素5~40μmol·L^(... 详细信息

目的研究橘红素预处理对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的成骨细胞氧化损伤的保护作用和机制。方法①酶消化法分离培养大鼠颅骨来源的原代成骨细胞,分别培养7和21 d后,采用碱性磷酸酶(AKP)染色和茜素红染色鉴定细胞。②橘红素5~40μmol·L^(-1)孵育成骨细胞48 h后,加H_(2)O_(2)300μmol·L^(-1)1 h,采用CCK-8法测定细胞存活率,AKP试剂盒测定AKP活性。③培养的成骨细胞分为细胞对照组、模型组(H_(2)O_(2)300μmol·L^(-1),孵育1 h)、模型+橘红素组(橘红素10μmol·L^(-1)预处理48 h后加H_(2)O_(2)300μmol·L^(-1),1 h)。茜素红染色检测钙化结节数量,流式细胞术检测成骨细胞内活性氧(ROS)水平,超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒检测SOD活性,Western印迹法检测成骨细胞转录因子(OSX)和骨保护素(OPG)蛋白表达水平。结果①AKP染色成骨细胞细胞胞质呈蓝色,茜素红染色可见钙化结节,结节呈深红色。②与模型组相比,橘红素(10~30μmol·L^(-1))预处理组成骨细胞存活率显著升高(P橘红素(10~20μmol·L^(-1))预处理组成骨细胞AKP活性显著增加(P橘红素10μmol·L^(-1)预处理组矿化结节数量明显增加(P橘红素可通过激活SOD、减少ROS累积而降低氧化应激,对H_(2)O_(2)诱导的成骨细胞氧化损伤具有保护作用。

关键词：橘红素氧化损伤成骨细胞成骨功能过氧化氢

橘红素对大鼠成骨细胞增殖、分化和成骨功能的影响

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中国老年学杂志 2023年第11期43卷 2715-2720页

作者：黄慧灵陈珺田欣陈艳莉由天辉广东药科大学护理学院广东广州510006 广东药科大学生命科学与生物制药学院广东广州510006 广东药科大学生物资源与创新药物研究中心广东广州510006

目的研究橘红素(TG)对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化和成骨功能指标基因蛋白表达的影响。方法选取出生24 h内的SD大鼠乳鼠颅骨,通过酶消化法培养原代成骨细胞,倒置显微镜下观察细胞形态和状态,并以碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红(... 详细信息

目的研究橘红素(TG)对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化和成骨功能指标基因蛋白表达的影响。方法选取出生24 h内的SD大鼠乳鼠颅骨,通过酶消化法培养原代成骨细胞,倒置显微镜下观察细胞形态和状态,并以碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红(ARS)染色法进行细胞鉴定;分别采用噻唑蓝(MTT)法、ALP染色法、ARS染色法检测TG对原代成骨细胞的存活率、评价成骨细胞分化能力和矿化能力的影响;采用Western印迹检测TG对原代成骨细胞成骨相关转录因子(OSX)、ALP、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和骨桥蛋白(OPN)等成骨功能指标基因的蛋白表达。结果与Control组相比,TG作用浓度为5、10、15、20μmol/L时可明显促进成骨细胞的增殖(P<0.01);TG共培养7 d后,与Control组比较,TG作用浓度为5、10、15、20μmol/L时ALP染色明显增加,说明TG能明显促进成骨细胞分化(P<0.05);TG共培养21 d后,与Control组比较,TG浓度为5、10、15、20μmol/L时ARS染色明显增加,说明TG能明显促进成骨细胞的矿化功能(P<0.05)。Western印迹检测结果表明,TG可提高成骨功能指标基因CollagenⅠ、ALP和OPN蛋白表达,其中以10μmol/L TG时最显著(均P<0.05)。结论TG能显著提高原代培养的大鼠成骨细胞的增殖、分化和矿化能力,并显著提高成骨功能指标基因的蛋白表达。

关键词：橘红素成骨细胞成骨功能增殖分化矿化

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橘红素自微乳给药系统的制备及体内吸收研究

中国医院药学杂志 2019年第8期39卷 833-837页

作者：张怡成雨竹区展纶区杰彬叶艳芳林双秀中山大学孙逸仙纪念医院广东广州510120 广州中医药大学中药学院广东广州510006

目的:设计和优化橘红素自微乳给药系统,改善药物的溶解及吸收,提高橘红素的口服生物利用度。方法:通过考察自微乳的粒径与粒径分布、乳化速度、Zeta电位、外观等指标,筛选并优化橘红素自微乳给药系统的处方,利用MDCK模型测定自微乳给药... 详细信息

目的:设计和优化橘红素自微乳给药系统,改善药物的溶解及吸收,提高橘红素的口服生物利用度。方法:通过考察自微乳的粒径与粒径分布、乳化速度、Zeta电位、外观等指标,筛选并优化橘红素自微乳给药系统的处方,利用MDCK模型测定自微乳给药系统的体外吸收转运行为,并评价该给药系统在大鼠体内的药动学特性。结果:MDCK实验证实橘红素自微乳给药系统能够提高橘红素的吸收和转运,在SD大鼠体内的药动学结果表明橘红素的AUC_((0-∞))由(3 491.77±404.06)μg·L^(-1)·h提高至(9 435.18±1 633.81)μg·L^(-1)·h(P橘红素自乳化给药系统,体外溶出速度显著提高,从而有效提高橘红素的生物利用度。

关键词：橘红素自微乳化给药系统 MDCK细胞药动学

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橘红素药理作用研究进展

中成药 2018年第9期40卷 2030-2033页

作者：熊娅方仪德韩亚鹏董杨上海中医药大学教学实验中心上海201203

橘红素,也称橘皮素,是从柑橘属果皮中提取的一种天然多甲氧基黄酮成分,具有多种药理活性,近年来得到广泛的关注。本文对近3年橘红素抗肿瘤、抗炎、抗哮喘、神经保护等方面的药理作用研究进展进行综述,为橘红素的进一步研究提供依据。

关键词：橘红素肿瘤阿尔茨海默病帕金森病糖尿病哮喘