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单纯疱疹病毒糖蛋白模拟位的研究

免疫学杂志 2002年第2期18卷 146-148,152页

作者：杨乔欣马文煜余颖第四军医大学微生物学教研室陕西西安710032

目的为了充分认识单纯疱疹病毒(HSV)糖蛋白的抗原表位，寻找HSV多组分疫苗和新型基因工程疫苗更有效的小片段短肽作为该病毒疫苗的备选免疫原。方法利用有动物保护活性的抗HSV糖蛋白C（gC）单克隆抗体（McAb）1A12淘筛噬菌体随机12肽库... 详细信息

目的为了充分认识单纯疱疹病毒(HSV)糖蛋白的抗原表位，寻找HSV多组分疫苗和新型基因工程疫苗更有效的小片段短肽作为该病毒疫苗的备选免疫原。方法利用有动物保护活性的抗HSV糖蛋白C（gC）单克隆抗体（McAb）1A12淘筛噬菌体随机12肽库，经4轮筛选后进行ELISA检测，随机挑取14个阳性克隆进行序列测定,序列比较后得到保守序列，做ELISA阻断实验进一步鉴定筛选结果并与相关天然蛋白HSV gC进行序列比较。结果获得保守序列-SG(L)RHII-和其侧翼辅助序列-AK-、-VW-，其与天然相关蛋白HSV gC 114～116位氨基酸十分相似。携有此短肽的噬菌体可以与McAb特异结合，并可部分阻断抗体与HSV囊膜抗原的反应。结论所筛选到的保守序列可模拟McAb针对的抗原表位，可能是HSV的替代抗原。这一研究方法有望使短肽替代庞大的糖蛋白全长氨基酸序列，为研制更有效及更广谱的基因工程疫苗提供依据，也使研制基于抗原表位水平的特异诊断试剂成为可能。

关键词：单纯疱疹病毒糖蛋白噬菌体随机肽库模拟位抗原表位 ELISA 疫苗

HIV-1gp41核心结构模拟位的筛选与鉴定

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中国免疫学杂志 2003年第7期19卷 461-463,472页

作者：刘北一罗海波朱平姜世勃富宁第一军医大学基础部免疫教研室广州510515 纽约血液中心LFK研究所纽约美国10021

目的 :筛选并鉴定HIV 1gp4 1核心表位。方法 :用识别HIV 1gp4 1的构象特异性单克隆抗体NC 1筛选噬菌体12肽库 ,通过夹心ELISA、NC 1特异性阻断实验、竞争抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆 ,DNA序列分析阳性克隆。结果 :经 3轮筛选 ,随机挑取 ... 详细信息

目的 :筛选并鉴定HIV 1gp4 1核心表位。方法 :用识别HIV 1gp4 1的构象特异性单克隆抗体NC 1筛选噬菌体12肽库 ,通过夹心ELISA、NC 1特异性阻断实验、竞争抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆 ,DNA序列分析阳性克隆。结果 :经 3轮筛选 ,随机挑取 2 4个噬菌体克隆 ,ELISA鉴定表明有 10个克隆可与NC 1结合 ,DNA序列分析并推导氨基酸序列 ,共 5种序列 :HDVHHRWVYLLS、ITVNEWLYTSEQ、HGRSHGMFKPKR、MGPIARPHWHLN、DMYRSPRPKPDT。其中gp4 1N肽和C肽所形成的复合物可特异性阻断表达HDVHHRWVYLLS ,VNEWLYTSEQ和MGPIARPHWHLN的克隆与NC 1的结合。结论 :所得序列HDVHHR WVYLLS ,VNEWLYTSEQ及MGPIARPHWHLN模拟HIV 1gp4 1六螺旋束核心表位。

关键词： HIV-1gp41 核心结构模拟位筛选鉴定

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晚期氧化蛋白产物模拟表位的初步研究

中国实验诊断学 2011年第5期15卷 765-768页

作者：侯晓睿刘北一田建伟陈益国富宁南方医科大学免疫学教研室广东广州510515 南方医科大学南方医院肾内科广东广州510515

目的利用噬菌体展示肽库筛选技术获得模拟人晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP)表位的序列,探索该表位的分布与表达。方法以抗晚期氧化蛋白产物多克隆抗体为靶,对噬菌体随机12肽库进行免疫亲和筛选,ELISA鉴定... 详细信息

目的利用噬菌体展示肽库筛选技术获得模拟人晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP)表位的序列,探索该表位的分布与表达。方法以抗晚期氧化蛋白产物多克隆抗体为靶,对噬菌体随机12肽库进行免疫亲和筛选,ELISA鉴定阳性噬菌体克隆特异性;对阳性克隆进行DNA测序并推导其氨基酸序列,利用生物信息学技术检索其分布与相似性。结果经3轮亲和筛选获得18株与靶分子特异结合的阳性噬菌体克隆,阳性率为62.07%。竞争ELISA结果表明,AOPP可有效抑制阳性噬菌体克隆与抗体结合,其中对No.6克隆的IC50达到0.2ug/ml,提示其能模拟AOPP表位。经DNA测序并推导氨基酸序列,得到LXDMLXD保守序列(X为任意氨基酸);发现该序列不存在于正常人与哺乳动物的蛋白分子,但与某些真菌及寄生虫蛋白分子有同源性。结论通过噬菌体肽库筛选技术获得模拟AOPP表位并具良好抗原性的短肽序列;证实该结构不存在于正常人与哺乳动物蛋白分子,正如AOPP并非正常组织蛋白。

关键词：噬菌体展示肽库晚期氧化蛋白产物表位模拟位

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应用噬菌体展示技术研究过敏原表位的新进展

现代免疫学 2004年第4期24卷 343-345页

作者：黄峙杨红宇向军俭暨南大学生命科学技术学院广州510632

过敏原表位的确认和定位是开展过敏症免疫干预治疗的基础 ,噬菌体展示技术已广泛应用于过敏原的研究及模拟表位肽筛选。近年来 ,利用这一技术已确认多种主要过敏原模拟表位 ,包括桦树花粉过敏原Betv1的模拟位、尘螨过敏原Derp1的IgE构... 详细信息

过敏原表位的确认和定位是开展过敏症免疫干预治疗的基础 ,噬菌体展示技术已广泛应用于过敏原的研究及模拟表位肽筛选。近年来 ,利用这一技术已确认多种主要过敏原模拟表位 ,包括桦树花粉过敏原Betv1的模拟位、尘螨过敏原Derp1的IgE构象模拟位、牛奶过敏原 β 乳球蛋白 (BLG )的线性表位及一种泛过敏原肌动抑制蛋白 (profilin )的环 9肽模拟位等。噬菌体展示模拟位的结构与功能分析显示一定的应用前景 ,将为过敏症诊断和免疫治疗提供新途径。

关键词：噬菌体展示过敏原表位模拟位过敏症