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分子植物育种 2024年

作者：林兆威龙仕达孟秀利唐庆华牛晓庆王晔楠宋薇薇中国热带农业科学院椰子研究所海南省院士团队创新中心

槟榔黄化病(areca palm yellow leaf disease， YLD)是由植原体侵染引起的一种毁灭性病害。为了从亚组水平上明确槟榔黄化植原体的分类地位，本研究采用通用引物和特异性引物对槟榔黄化植原体的tuf、secA及rp基因进行巢氏PCR扩增，并对... 详细信息

槟榔黄化病(areca palm yellow leaf disease， YLD)是由植原体侵染引起的一种毁灭性病害。为了从亚组水平上明确槟榔黄化植原体的分类地位，本研究采用通用引物和特异性引物对槟榔黄化植原体的tuf、secA及rp基因进行巢氏PCR扩增，并对核苷酸序列进行分析。结果显示，克隆获得tuf、secA及rp基因序列片段分别为842、708及1 201 bp，分别编码280、235及415个氨基酸；NCBI blastn同源性检索显示，tuf、secA及rp基因均分别与GenBank数据库中的植原体16SrI组成员相应的基因序列相似性最高；将获得的tuf、secA及rp基因分别与各组或亚组的代表株进行比对，显示与tuf I-B亚组、secA I-B亚组及rp I-B亚组植原体的同源性最高，分别为99.88%、99.63%及99.70%；系统发育树分析显示，槟榔黄化植原体在tuf、secA及rp基因聚类分析上分别与tuf I-B亚组、secA I-B亚组及rp I-B亚组植原体亲缘关系最近。综上表明，槟榔黄化植原体在tuf、secA及rp基因的划分上属于tuf I-B、secA I-B及rp I-B亚组。本研究结果为槟榔黄化病的发生、流行规律及遗传变化的研究提供理论基础。

关键词：槟榔槟榔黄化植原体 tuf基因 secA基因 rp基因

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槟榔黄化植原体16SrI组的实时荧光定量PCR检测方法的建立

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分子植物育种 2024年

作者：林兆威唐庆华龙仕达牛晓庆刘帆宋薇薇中国热带农业科学院椰子研究所海南省院士团队创新中心

由植原体侵染引起的槟榔黄化病(Areca palm yellow leaf disease， YLD)是槟榔生产上一种毁灭性病害。目前，在中国引起槟榔黄化病的植原体主要有16SrI组、16SrII组及16SrXXXII组3个种群。为了对槟榔黄化植原体16SrI组群体进行检测，本... 详细信息

由植原体侵染引起的槟榔黄化病(Areca palm yellow leaf disease， YLD)是槟榔生产上一种毁灭性病害。目前，在中国引起槟榔黄化病的植原体主要有16SrI组、16SrII组及16SrXXXII组3个种群。为了对槟榔黄化植原体16SrI组群体进行检测，本研究基于槟榔黄化病植原体16SrI组secY基因，设计实时荧光定量PCR特异性引物和探针，对该引物探针组合进行准确性、灵敏度、特异性及重复性测试，并对儋州的槟榔黄化样品进行检测应用。结果显示，在准确性方面，引物qSecY-F1/R1和探针qSecY-P1能够准确检测出槟榔黄化植原体16SrI组样品；在灵敏度方面，该引物探针组合能检测到4.81×101copies/μL数量级，标准品的Ct值与质粒拷贝数的对数呈线性关系，标准曲线方程为y=-3.578 8x+43.342，相关系数R2=0.993，扩增效率为90.29%，说明该检测方法适用于低浓度植原体检测和定量分析，扩增效率符合检测技术要求；在特异性方面，该引物探针组合具有较好的特异性，16SrII组和16SrXXXII组的植原体、槟榔相关的病原及内生菌均对本引物探针无影响；在重复性方面，组内和组间重复的变异系数均低于1%，具有较好的重复性；利用该引物探针，儋州地区36份槟榔样品共22份检查为阳性，检出率为61.11%。综上，该实时荧光定量PCR检测方法能满足对槟榔黄化植原体16SrI组的检测需求，可为该群体的流行学研究提供技术参考。

关键词：槟榔槟榔黄化植原体 secY基因实时荧光定量PCR

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中国“槟榔黄化病”研究40年——病原、防控措施新进展

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热带作物学报 2022年第5期43卷 1010-1022页

作者：唐庆华孟秀利于少帅林兆威牛晓庆宋薇薇覃伟权中国热带农业科学院椰子研究所/海南省槟榔产业工程研究中心海南文昌571339

自1981年海南省屯昌县首次发现槟榔黄化病(yellow leaf disease of areca palm,YLD)以来,槟榔黄化问题日趋严重,现已成为制约中国槟榔产业可持续发展的最重要的因素。同时,鉴于生产中除槟榔黄化病外,炭疽病、细菌性叶斑病、椰心叶甲、... 详细信息

自1981年海南省屯昌县首次发现槟榔黄化病(yellow leaf disease of areca palm,YLD)以来,槟榔黄化问题日趋严重,现已成为制约中国槟榔产业可持续发展的最重要的因素。同时,鉴于生产中除槟榔黄化病外,炭疽病、细菌性叶斑病、椰心叶甲、干旱等一些其他因素也可引起槟榔黄化,以及“槟榔黄化病”病原或病因认识上存在混淆的问题,学界暂用“槟榔黄化现象”的表述。近年来,针对上述问题开展了一系列深入研究并取得突破性进展。本文首先简要回顾了中国槟榔黄化病的发生及病原方面的研究进展,介绍了另一种致黄关键新病害——由槟榔隐症病毒1(Areca palm velarivirus 1,APV1)引起的槟榔黄叶病毒病(areca palm leaf yellowing virus disease,ALYVD),以及其他2种新发现的病毒病害——槟榔坏死环斑病毒病和槟榔坏死环斑病毒病的研究进展。对6个示范基地的病原检测结果表明,部分黄化植株被槟榔黄化植原体(areca palm yellow leaf phytoplasma,AYLP)或APV1单独感染,部分植株被AYLP和APV1复合感染。本文还探讨了槟榔黄化病研究中存在的病原分布不均、含量低引起的检测困难和田间诊断易混淆等问题,并对YLD、ALYVD、叶斑类病害、根腐病害、芽腐病、椰心叶甲、干旱、寒害、除草剂药害等9类因子引起的黄化症状特征进行了总结。进而分析了YLD和ALYVD防控中存在的问题以及现阶段面临的紧迫形势,从防控策略和具体措施解读了《槟榔“黄化病“防控明白纸》,并指出了其有待进一步完善之处及防控中亟待解决的问题。最后,展望了YLD和ALYVD2种致黄关键病害综合防控中亟待实施的措施。本文旨在让广大科研工作者和农技人员更好地了解槟榔“黄化病”方面的最新成果。

关键词：槟榔黄化病(YLD) 槟榔黄化植原体槟榔隐症病毒1 槟榔黄叶病毒病(ALYVD) 防控明白纸

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槟榔种苗、幼树AYLP及APV1的分子检测

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分子植物育种 2023年第18期21卷 6065-6071页

作者：唐庆华林兆威孟秀利黄山春余凤玉宋薇薇覃伟权中国热带农业科学院椰子研究所海南省槟榔产业工程研究中心文昌571339

由槟榔黄化植原体(areca palm yellow leaf phytoplasam, AYLP)引起的黄化病和槟榔隐症病毒1(areca palm velarivirus 1, APV1)引起的黄叶病毒病是海南槟榔生产中最重要的2种病害。为了明确2种病害的远距离传播途径,本研究采用Nested PC... 详细信息

由槟榔黄化植原体(areca palm yellow leaf phytoplasam, AYLP)引起的黄化病和槟榔隐症病毒1(areca palm velarivirus 1, APV1)引起的黄叶病毒病是海南槟榔生产中最重要的2种病害。为了明确2种病害的远距离传播途径,本研究采用Nested PCR和reverse transcription PCR (RT-PCR)方法对154份来源于万宁、琼海、屯昌和临高的槟榔种苗及幼树(2~4龄)样品进行了AYLP和APV1的分子检测。检测结果显示,部分种苗以及幼树叶片样品检测到AYLP (幼苗7份,幼树28份)或APV1 (幼苗15份,幼树48份),这表明这部分种苗和幼树已感染槟榔黄化病植原体或槟榔隐症病毒1。部分幼树样品(7份)同时检测到AYLP和APV1,表明该部分幼树被2种病原感染。本研究结果为槟榔黄化病和槟榔黄叶病毒病通过带毒种苗进行传播提供了实验证据。

关键词：槟榔黄化病槟榔黄化植原体槟榔黄叶病毒病槟榔隐症病毒1 种苗检疫

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