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地榆丛芽高效诱导及植株再生

植物生理学报 2023年第2期59卷 404-412页

作者：陈炙宋丹黄振丁婷李佳蔓曹昆彬左燕平四川省林业科学研究院森林和湿地生态恢复与保育四川省重点实验室成都610081

为建立地榆(Sanguisorba officinalis)高效再生技术体系,以地榆当年生带芽茎段为外植体,探讨不同植物生长调节剂组合对腋芽诱导、芽丛增殖、芽苗生长、芽苗生根的影响。结果表明:外植体在MS+1.5mg·L^(-1)6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.5 mg·L^... 详细信息

为建立地榆(Sanguisorba officinalis)高效再生技术体系,以地榆当年生带芽茎段为外植体,探讨不同植物生长调节剂组合对腋芽诱导、芽丛增殖、芽苗生长、芽苗生根的影响。结果表明:外植体在MS+1.5mg·L^(-1)6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.5 mg·L^(-1)萘乙酸(NAA)+30 g·L^(-1)蔗糖+7 g·L^(-1)卡拉胶中诱导培养30 d,腋芽部位膨大为棕色硬质愈伤组织,其表面分化出丛芽,平均每个腋芽诱导出7.6个芽,诱导率100%;带芽愈伤块转入MS+3.0 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)NAA+30 g·L^(-1)蔗糖+7 g·L^(-1)卡拉胶中增殖培养30 d,芽苗平均产量10.1个·芽丛^(-1),芽丛平均增殖倍数为3.26;芽丛分小后可继续在培养基上培养4代,每代增殖倍数2.4~2.6,平均每代芽丛生产10.1个芽苗;芽苗在1/2MS+0.05~0.1 mg·L^(-1)NAA+0.1 mg·L^(-1)吲哚乙酸(IBA)+15 g·L^(-1)蔗糖+0.5 g·L^(-1)活性炭+7.0 g·L^(-1)卡拉胶中培养30 d生根率达100%,芽苗基部诱导出7条以上不定根,平均根长12cm以上,苗高可达6 cm以上。本研究建立了地榆无性快繁技术体系,能为地榆种苗规模化生产提供基础。

关键词：地榆组织培养分化增殖植株再生

黑暗处理对五味子体细胞胚再生及其生理特性的影响

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植物生理学报 2022年第5期58卷 864-872页

作者：张苏苏孙丹艾军王振兴石广丽郭建辉赵西琳李雨泽吉林农业大学园艺学院长春130118

以五味子越冬芽为外植体诱导形成的胚性愈伤组织和体细胞胚为试验材料,研究了黑暗条件对五味子体细胞再生及其过程中几种抗氧化酶活性和内源激素含量变化的影响。结果表明,黑暗培养28 d时,显著促进了五味子体细胞胚的生根及萌发,生根率... 详细信息

以五味子越冬芽为外植体诱导形成的胚性愈伤组织和体细胞胚为试验材料,研究了黑暗条件对五味子体细胞再生及其过程中几种抗氧化酶活性和内源激素含量变化的影响。结果表明,黑暗培养28 d时,显著促进了五味子体细胞胚的生根及萌发,生根率及萌发率分别达到95.56%和36.67%,光培养条件下分别为4.11%和15.56%;黑暗处理下过氧化氢酶(CAT)活性于球形胚(第7天)-心形胚(第14天)时期高于光照处理,超氧化物歧化酶(SOD)活性于心形胚(第14天)-子叶形胚(第21天)时期低于光照处理;愈伤组织(0 d)-心形胚(第14天)时期为五味子体细胞胚不定根诱导和根原基启动时期,此段时期黑暗处理内源生长素(IAA)及脱落酸(ABA)含量显著低于光照处理,赤霉素(GA3)及玉米素核苷(ZR)含量则呈相反趋势,在体细胞发育所有时期,光培养和暗培养下GA3及ZR均具有相同的趋势。说明体细胞胚发育前期相对较低浓度的内源IAA及ABA含量有利于胚根的产生,而较高浓度的GA3及ZR对体细胞胚根的生长有促进作用。结果表明,黑暗处理可能通过影响内源激素含量及抗氧化酶活性从而调控五味子体细胞胚途径进行再生植株的过程。本研究首次将五味子体细胞胚置于黑暗环境下处理,提高了五味子的生根率及萌发率。

关键词：五味子体细胞胚植株再生抗氧化酶内源激素

番木瓜均质胚性细胞悬浮系的建立和高效植株再生

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果树学报 2023年第2期40卷 376-385页

作者：魏岳荣周陈平邝瑞彬杨护黄炳雄杨敏广东省农业科学院果树研究所·农业农村部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室·广东省热带亚热带果树研究重点实验室广州510640

【目的】提高番木瓜体细胞胚发生的同步性及其植株再生率,为番木瓜大量快繁、细胞工程和分子育种技术研发提供技术基础。【方法】以紫晖110~120 d果实的未成熟合子胚为外植体,经胚性愈伤组织诱导、液体悬浮培养和体细胞胚发生过程,建立... 详细信息

【目的】提高番木瓜体细胞胚发生的同步性及其植株再生率,为番木瓜大量快繁、细胞工程和分子育种技术研发提供技术基础。【方法】以紫晖110~120 d果实的未成熟合子胚为外植体,经胚性愈伤组织诱导、液体悬浮培养和体细胞胚发生过程,建立均质胚性细胞悬浮系和高效植株再生技术体系,重点比较了不同质量浓度2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)对胚性愈伤组织诱导、不同质量浓度6-苄基氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine,6-BA)+萘乙酸(1-naphthlcetic acid,NAA)组合和活性炭(activated carbon,AC)对子叶期体细胞胚萌发与生根的影响。【结果】4 mg·L^(-1)2,4-D可诱导62.86%未成熟合子胚形成胚性愈伤组织。经5个继代周期的筛选培养,可建立由单细胞和小细胞团组成的均质胚性细胞悬浮系。采用液体培养方式能诱导大量球形胚的形成,被转移至含5 g·L^(-1)AC的半固定培养基成熟培养30 d后,可获得大量子叶期体细胞胚。在含0.4 mg·L^(-1)6-BA+0.02 mg·L^(-1)NAA的萌发培养基中体细胞胚萌发率为97.58%,胚根端愈伤化比率为95.48%,补充5 g·L^(-1)AC后可获得92.62%体细胞胚同步萌发和生根,并显著降低愈伤化比率至33.10%;在不添加任何植物生长调节剂、仅含5 g·L^(-1)AC的成熟培养基中,体细胞胚同步萌发和生根率为88.33%,愈伤化比率降低至11.67%。正常萌发生根的体细胞胚在含0.1 mg·L^(-1)6-BA+2 mg·L^(-1)吲哚丁酸(3-Indolebutyric acid,IBA)+10 g·L^(-1)AC的再生培养基中可获得81.36%的植株再生率。【结论】以紫晖110~120 d未成熟合子胚为外植体,最佳的胚性愈伤组织诱导培养基为1/2 MS培养基+4 mg·L^(-1)2,4-D+400 mg·L^(-1)谷氨酰胺+60 g·L^(-1)蔗糖。最优体细胞胚发生方案为胚性细胞悬浮系(embryogenic cell system,ECS)经液体培养方式诱导球形胚形成,在含1/2 MS盐+MS维生素+50 mg·L^(-1)肌醇+400 mg·L^(-1)谷氨酰胺+30 g·L^(-1)蔗糖+5 g·L^(-1)AC的培养基中促进体细胞胚的成熟及后续的同步萌发和生根,可有效缓解胚根端愈伤化现象。

关键词：番木瓜未成熟合子胚胚性细胞悬浮系体细胞胚发生植株再生

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大花银莲花愈伤组织诱导及再生体系的建立

植物学报 2022年第2期57卷 217-226页

作者：逯锦春曹丽娜佟冠杰王鑫颖张利英喻锌李荟芳李彦慧河北农业大学园林与旅游学院保定071000 河北农业大学经济管理学院保定071000

为建立野生大花银莲花(Anemone silvestris)组培再生体系,分别以无菌苗上、下胚轴、叶片和叶柄为外植体,探讨不同浓度植物生长调节剂对不同外植体的愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖与生根的影响。结果表明,4种外植体均可诱导出不定芽,... 详细信息

为建立野生大花银莲花(Anemone silvestris)组培再生体系,分别以无菌苗上、下胚轴、叶片和叶柄为外植体,探讨不同浓度植物生长调节剂对不同外植体的愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖与生根的影响。结果表明,4种外植体均可诱导出不定芽,其中上胚轴诱导效果最佳,其在1/2MS+2.0mg·L^(–1)6-BA+0.1mg·L^(–1) NAA培养基中诱导率最高,为86.67%;最适增殖培养基为1/2MS+1.0mg·L^(–1)6-BA+0.05mg·L^(–1) NAA,增殖系数为3.67;最佳生根培养基为1/2MS+0.3mg·L^(–1) IBA,生根率为100%;在草炭:蛭石=2:1(v/v)的栽培基质中,组培苗的移栽成活率最高,为98.33%。该研究有效解决了野生大花银莲花在园林及药用生产上的种质资源紧缺难题,为工厂化育苗提供了技术支撑。

关键词：大花银莲花愈伤组织植株再生组织培养

适合全周期间作的橡胶树品种热垦628花药再生体系研究

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热带作物学报 2023年第9期44卷 1794-1800页

作者：成镜黄天带戴雪梅徐正伟中国热带农业科学院橡胶研究所/农业农村部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室/热带林木种子种苗工程中心/海口市热带植物种苗创新重点实验室海南海口571101

在橡胶树体胚发生再生体系研究中,如何快速获得胚性愈伤组织是能否成功建立再生体系的关键。本研究基于课题组前期的研究基础,以橡胶树花药为外植体,通过正交试验设计方案研究了毒莠定、KT、6-BA、IAA四种激素的不同浓度组合对橡胶树花... 详细信息

在橡胶树体胚发生再生体系研究中,如何快速获得胚性愈伤组织是能否成功建立再生体系的关键。本研究基于课题组前期的研究基础,以橡胶树花药为外植体,通过正交试验设计方案研究了毒莠定、KT、6-BA、IAA四种激素的不同浓度组合对橡胶树花药胚性愈伤组织诱导的影响,结果表明:橡胶树花药愈伤组织诱导的最优组合培养基为MS基础培养基,硫胺素0.4 mg/L、天冬酰胺300 mg/L、水解酪蛋白100 mg/L、脯氨酸100 mg/L、精氨酸100 mg/L、谷氨酰胺100 mg/L、L-半胱氨酸-盐酸盐50 mg/L、蔗糖70 g/L、椰子水50 mL/L、植物凝胶2.2 g/L,并添加毒莠定浓度20 mg/L、KT浓度2 mg/L、6-BA浓度1 mg/L、IAA浓度0 mg/L,愈伤组织诱导率达73.3%~100%。所有处理在诱导愈伤组织25~28 d左右,愈伤组织达到快速增殖时期,对胚性愈伤组织的诱导起主要作用的是毒莠定浓度,其浓度在20~30 mg/L之间时,对胚性愈伤组织的诱导有促进作用。低浓度的毒莠定虽然也能诱导愈伤组织产生,但是这些愈伤组织几乎为无胚胎发生能力的非胚性愈伤组织。同时用获得的11个体胚进行植株再生,其中出苗2株,7个只长根不抽芽,2个既不抽芽也不长根,植株再生率达18%。因此,在此研究的基础上,对愈伤组织诱导培养基配方进行进一步优化,使其能够更快地从花药中诱导出胚性愈伤组织,缩短胚性愈伤组织的诱导时间,降低变异几率,可为RITA生物反应器提供更好条件的愈伤组织起始原料。

关键词：橡胶树花药胚性愈伤组织植株再生

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扭果花旗杆组织培养与再生体系的建立

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2024年第6期52卷 73-82页

作者：胡尔西旦·吐尔逊刘欣欣谷玉风陈永坤葛风伟新疆师范大学生命科学学院新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室/干旱区植物逆境生物学实验室新疆乌鲁木齐830054

【目的】以扭果花旗杆(Dontostemon elegans)根和下胚轴为外植体,建立扭果花旗杆组织培养体系,为后续遗传转化体系的建立提供技术基础。【方法】以MS培养基为基础培养基,利用萘乙酸(NAA)探究根和下胚轴直接诱导不定芽情况,利用2,4-二氯... 详细信息

【目的】以扭果花旗杆(Dontostemon elegans)根和下胚轴为外植体,建立扭果花旗杆组织培养体系,为后续遗传转化体系的建立提供技术基础。【方法】以MS培养基为基础培养基,利用萘乙酸(NAA)探究根和下胚轴直接诱导不定芽情况,利用2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、NAA、苯基噻二唑基脲(TDZ)、吲哚丁酸(IBA)进行愈伤组织诱导及分化和不定芽生根试验,统计愈伤组织诱导及分化和不定芽生根情况,确定扭果花旗杆组培体系最佳培养基类型。【结果】(1)由根和下胚轴直接诱导不定芽的最适培养基分别为MS+0.3 mg/L NAA和MS+0.6 mg/L NAA,直接诱导不定芽的最佳外植体为根。(2)扭果花旗杆根和下胚轴都能诱导愈伤组织,其中根系诱导愈伤组织速度最快且状态最佳,其次为下胚轴。根系愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率可达100.00%;下胚轴愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.3 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA,诱导率可达100.00%。(3)根系和下胚轴的最佳愈伤组织分化培养基均为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,分化率分别为100.00%和86.66%。(4)最佳生根培养基为MS+0.5 mg/L IBA,生根率可达50%以上。(5)将组培苗移至土壤后,在光照培养室培养15 d,其存活率可达83.33%。【结论】建立的扭果花旗杆组培体系可获得与实生苗形态一致的组培苗,为扭果花旗杆遗传转化体系的建立奠定了技术基础。

关键词：扭果花旗杆组织培养愈伤组织植株再生

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秋石斛胚性愈伤组织诱导及再生体系的建立

热带作物学报 2024年

作者：李志晴李亚梅李崇晖尹俊梅中国热带农业科学院三亚研究院海南省热带观赏植物种质创新利用工程技术研究中心海南大学热带农林学院中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室海南省热带作物资源遗传改良与创新重点实验室

秋石斛（Phalaenopsis-hybrid Dendrobium）花姿优美、花色丰富，是热区重要观赏植物，具有极高的产业价值。本研究以秋石斛杂交种‘迷你’（Den. Yaya Victoria）、‘水蜜桃’（Den. Swirl）、‘三亚阳光’（Den. Sonia Hiasakul）原... 详细信息

秋石斛（Phalaenopsis-hybrid Dendrobium）花姿优美、花色丰富，是热区重要观赏植物，具有极高的产业价值。本研究以秋石斛杂交种‘迷你’（Den. Yaya Victoria）、‘水蜜桃’（Den. Swirl）、‘三亚阳光’（Den. Sonia Hiasakul）原球茎和无菌苗幼嫩茎段为外植体，探讨不同植物生长调节剂组合对不同品种秋石斛胚性愈伤诱导、不定芽分化及植株再生的影响。结果表明：在胚性愈伤组织诱导阶段，原球茎和生长2个月的幼苗茎段作为外植体诱导效果最佳，暗培养30天即可获得胚性愈伤。三个品种的愈伤组织诱导最佳培养基是以MSD（MS +30 g/L葡萄糖+1 g/L花宝1号+ 8 g/L琼脂）为基本培养基，添加0.5 mg/L KT和0.2-0.5 mg/L 2，4-D。‘迷你’、‘水蜜桃’、‘三亚阳光’的胚性愈伤诱导率最高分别为31.11%、22.78%和50%，其中‘迷你’品种仅需15天即可获得胚性愈伤。最佳胚性愈伤增殖培养基为MSD +0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L KT，胚性愈伤状态保持良好且不发生分化，增殖倍数0.9。最佳分化培养基为1/2MS+ 0.5 mg/L IBA + 0.15 mg/L KT，在光照条件下，接种后的胚性愈伤组织能够快速诱导形成芽点，30天内分化形成2-3片叶的幼苗，相同培养基中保持60天能够自行生根获得完整再生苗。最佳生根培养基为1/2MS+30 g/L 蔗糖 + 0.5 mg/L NAA +8g/L琼脂，生根率为100%，平均生根数5条，根长约1.3 cm。本研究所使用的胚性愈伤组织诱导、增殖和分化培养基具有一定的广谱性，可为后续秋石斛胚再生途径及分子育种研究奠定基础。

关键词：秋石斛茎段胚性愈伤植株再生

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黑鹅绒海芋体细胞胚发生和植株再生

植物学报 2023年第5期58卷 750-759页

作者：刘小飞孙映波黄丽丽杨钰钗朱根发于波广东省农业科学院环境园艺研究所农业农村部华南都市农业重点实验室广东省园林花卉种质创新综合利用重点实验室广州510640

该研究建立了黑鹅绒海芋(Alocasia reginula)体细胞胚胎发生途径的植株再生体系。通过叶柄诱导获得胚性愈伤组织,以此建立胚性细胞悬浮培养系,并实现了高频率的植株再生。叶柄外植体在添加2.0 mg·L^(-1)2,4-D和1.0 mg·L^(-1)TDZ的MS... 详细信息

该研究建立了黑鹅绒海芋(Alocasia reginula)体细胞胚胎发生途径的植株再生体系。通过叶柄诱导获得胚性愈伤组织,以此建立胚性细胞悬浮培养系,并实现了高频率的植株再生。叶柄外植体在添加2.0 mg·L^(-1)2,4-D和1.0 mg·L^(-1)TDZ的MS培养基上诱导胚性愈伤组织的效率最高(达81.3%)。将胚性愈伤组织破碎成细胞团,转移至添加2.0 mg·L^(-1)2,4-D和1.0 mg·L^(-1)TDZ的MS液体培养基中进行悬浮培养,2周继代1次,悬浮培养12周后获得大量细胞团。将悬浮培养28周的细胞团转移至不含植物生长调节剂的1/2MS固体培养基上进行分化培养,平均每个细胞团可再生2.3–2.5棵植株。利用光学显微镜和扫描电镜观察体细胞胚的萌发和形成。再生苗移栽至温室4个月后,成活率为95.3%。通过流式细胞术对随机选取的50株成活植株进行检测,未发现染色体倍性变异,核DNA含量为10.94 pg·(2C)^(-1),基因组大小为5 290.12 Mb·C^(-1)。植株移栽到温室直至自然开花,表型无明显变异。研究结果可为黑鹅绒海芋种苗商业化生产和生物技术育种提供良好的技术支持。

关键词：海芋胚性愈伤组织胚性细胞悬浮植株再生

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大花虎刺梅的组织培养和植株再生

北方园艺 2023年第8期 56-62页

作者：官锦燕谭嘉娜陈双艳许玉婵罗剑飘罗青文广东省科学院南繁种业研究所湛江研究中心广东湛江524000

以大花虎刺梅花朵为试材,采用组培快繁的方法,研究了取材部位、花朵的成熟程度、激素配比及浓度等因素对植株再生的影响,以期建立大花虎刺梅高效、适合工厂化生产的离体再生体系,为品种快繁和推广提供参考依据。结果表明:大花虎刺梅花... 详细信息

以大花虎刺梅花朵为试材,采用组培快繁的方法,研究了取材部位、花朵的成熟程度、激素配比及浓度等因素对植株再生的影响,以期建立大花虎刺梅高效、适合工厂化生产的离体再生体系,为品种快繁和推广提供参考依据。结果表明:大花虎刺梅花序总苞上花芽经过生殖生长发育成二歧聚伞复状花序,组培培养使其经过营养生长诱导出再生植株。大花虎刺梅花朵的成熟度对出芽率影响比较明显,苞片半张开时的花序总苞是组培快繁的最佳取材部位。芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^(-1)+NAA 0.1 mg·L^(-1),出芽系数150.45%,芽体健壮,长势良好;丛芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L^(-1)+NAA 0.2 mg·L^(-1),增殖系数4.03±0.43,植株健壮,叶片舒展墨绿,长势很好;生根培养的最佳培养基为MS+NAA 0.2 mg·L^(-1)+IBA 0.4 mg·L^(-1),30 d后生根率达85%以上。移栽至消毒的珍珠岩∶泥炭土∶沙(1∶1∶1)的基质中定植,成活率85%。

关键词：大花虎刺梅花序总苞组织培养植株再生