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CT感染大鼠子宫内膜植入窗期基质金属蛋白酶的表达

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中国组织化学与细胞化学杂志 2008年第6期17卷 534-539页

作者：戈娇孟运莲吴慧芬蔡丽华武汉大学基础医学院组织学与胚胎学教研室湖北武汉430071

目的通过大鼠生殖道沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)感染模型研究CT初次感染后妊娠大鼠在子宫内膜植入窗期基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)的表达对胚胎着床的影响。方法选择成年雌性SD大鼠30只,随机均... 详细信息

目的通过大鼠生殖道沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)感染模型研究CT初次感染后妊娠大鼠在子宫内膜植入窗期基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)的表达对胚胎着床的影响。方法选择成年雌性SD大鼠30只,随机均分为对照组和感染组,感染组通过阴道接种CTD型株,而后在妊娠大鼠的植入窗期(即妊娠第5、6、7天)分别处死大鼠,采用链菌生物素蛋白-过氧化酶连接法和免疫组化测定两组子宫内膜种植窗期MMP-9及TIMP-1。采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文小报告管理系统测定感染组和对照组中MMP-9\TIMP-1在单位面积中各项免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度值,并通过SPSS软件对数据差异显著性进行分析。结果在两组大鼠的子宫内膜中MMP-9均呈阳性表达。腺上皮细胞、腔上皮细胞和基质细胞胞浆内均可见棕黄色颗粒沉着,上皮细胞染色强度大于基质;感染组的表达较对照组弱,差异有显著性(P植入窗期MMP-9及TIMP-1的低表达,可能是影响胚胎着床、导致不孕的重要因素。

关键词：沙眼衣原体基质金属蛋白酶类金属蛋白酶组织抑制物子宫内膜植入窗期大鼠

PCOS不孕症患者植入窗期子宫内膜雌孕激素受体的表达变化及意义

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山东医药 2010年第26期50卷 12-13页

作者：冀立娟王蔼明张雷商微李敏魏丽坤北京市海淀区妇幼保健院北京100080 中国人民解放军海军总医院河北医科大学天津医科大学总医院

目的观察多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者植入窗期子宫内膜中雌激素受体(ER)α、ERβ和孕激素受体(PR)的表达变化,并探讨其意义。方法 15例确诊为PCOS的不孕症患者作为病例组,15例月经周期正常的妇女为对照组。排卵后第7天(植入窗期)活... 详细信息

目的观察多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者植入窗期子宫内膜中雌激素受体(ER)α、ERβ和孕激素受体(PR)的表达变化,并探讨其意义。方法 15例确诊为PCOS的不孕症患者作为病例组,15例月经周期正常的妇女为对照组。排卵后第7天(植入窗期)活检采集子宫内膜,免疫组化法测定子宫内膜中的ERα、ERβ、PR。结果 ERα、ERβ、PR主要表达于子宫内膜上皮细胞胞核中,细胞质中有少量表达,病例组ERα、ERβ、PR的OD值分别为0.187±0.033、0.100±0.026、0.276±0.042,对照组分别为0.311±0.046、0.224±0.044、0.165±0.018,两组相比,P均植入窗期子宫内膜ERα、ERβ表达下调,PR表达上调,可能与子宫内膜容受性降低有关。

关键词：多囊卵巢综合征子宫内膜容受性植入窗期雌激素受体孕激素受体

低剂量米非司酮对人植入窗期子宫内膜自然杀伤细胞杀伤活性的影响

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低剂量米非司酮对人植入窗期子宫内膜自然杀伤细胞杀伤活性的影响

作者：周峰浙江大学

学位级别：硕士

研究背景:正常妊娠时,子宫内膜对胚泡植入的接受存在一个短暂的植入窗口期——黄体生成激素(LH)峰后的7～11d,只有在此期才能顺利完成胚胎着床,同时人娠是一种成功的同种半异体移植,着床中免疫问题十分重要。母胎之间的免疫联系是一种... 详细信息

研究背景:正常妊娠时,子宫内膜对胚泡植入的接受存在一个短暂的植入窗口期——黄体生成激素(LH)峰后的7～11d,只有在此期才能顺利完成胚胎着床,同时人娠是一种成功的同种半异体移植,着床中免疫问题十分重要。母胎之间的免疫联系是一种双向交流模式,受两方面的决定:胎儿抗原的暴露;母体系统对抗原的识别和应答。因此,成功的植入有赖于子宫内膜和胚胎的相互识别、耐受,甚至一个微小的紊乱或失调都会阻止植入的发生。母体免疫系统尤其是子宫内膜局部的免疫细胞能否识别并耐受胚胎抗原,直接影响妊娠的建立与维持,母体免疫系统对胚胎的免疫识别受T、B、自然杀伤(NK)细胞等一系列免疫细胞及细胞因子的调节。NK细胞是先天性免疫系统的重要组成部分,尤其是在抗病毒、寄生虫和微生物感染的早期免疫反应过程中发挥着重要的作用。子宫内膜NK(uNK)细胞是子宫内膜最重要的淋巴细胞,具有杀伤活性、分泌植入相关因子、控制滋养细胞侵入、改造螺旋动脉以及维持母胎界面免疫平衡等作用。大量研究表明植入窗期子宫内膜NK细胞数量及活性的异常可能会导致植入失败和习惯性流产。米非司酮(mifepristone,RU486)是人类合成的一种19-去甲类固醇,主要在受体水平上发挥作用。米非司酮是第一个用于临床的孕激素受体拮抗剂,目前已广泛应用于抗早孕。20世纪90年代,国内外均有报道米非司酮广泛用于临床紧急避孕,且用药剂量在逐步减少。近年来,研究发现每日给予低剂量米非司酮,能阻止内膜发育而起避孕作用,即所谓的“内膜避孕”,对月经周期影响少,无明显副作用。本文利用体外培养系统,运用免疫组化和四甲基偶氮唑盐(MTT)技术,研究低剂量米非司酮(分别为65 nmol/L、200 nmol/L)对人植入窗期子宫内膜自然杀伤细胞杀伤活性的影响,以探讨低剂量米非司酮作为抗着床避孕药的免疫学机制。材料与方法:收集12例因输卵管切除或丈夫不育,行IVF-ET妇女的子宫内膜。入选妇女月经史、生殖系统解剖、内分泌等指标均正常,近3个月内无激素类药物使用史,于月经周期第20至24天取内膜。每例内膜分成三等份,给予不同处理(分别为对照组、65 nmol/L组、200nmol/L组),组织培养24小时。采用MTT实验法,检测低剂量米非司酮对人植入窗期uNK细胞杀伤活性的影响;上下两张切片两两配对EnVision二步法染色,检测低剂量米非司酮对植入窗期uNK细胞表达PFP的影响。结果:1.子宫内膜组织块体外培养前后形态学观察:培养前后子宫内膜均处于分泌中期,腺体、血管结构均完整,间质水肿无明显改变。2.子宫内膜NK细胞杀伤活性的变化三组子宫内膜NK细胞杀伤活性(%)分别为:对照组13.52±3.12,65nmol/L组22.33±4.53,200nmol/L组30.55±6.09。三组uNK细胞杀伤活性有显著差异(P=0.01);两实验组分别与对照组相比,显著增高(P＜0.05);两实验组之间有显著差异(P＜0.05)3.子宫内膜NK细胞表达PFP的变化PFP阳性细胞着色为棕黄色,定位于胞浆;CD56阳性为棕黄色,定位于胞膜。阳性细胞主要分布在腺体和血管周围的间质(见图2)。三组内膜PFPCD56阳性细胞平均数分别为:对照组60±7,65nmol/L组80±6,200nmol/L组92±7。三组PFPCD56阳性细胞数有显著差异(P=0.01);两实验组分别与对照组相比,显著增高(P＜0.05);两实验组之间有显著差异(P＜0.05)结论:1.低剂量米非司酮能增加植入窗期uNK细胞杀伤活性,提示低剂量米非司酮可能以此破坏了人植入窗期子宫内膜局部免疫微环境的平衡。2.低剂量米非司酮能增加植入窗期PFP+CD56+阳性细胞的数量,提示低剂量米非司酮增加植入窗期uNK细胞杀伤活性可能通过uNK细胞表达PFP水平的变化来实现。

关键词：米非司酮植入窗期子宫内膜免疫耐受子宫内膜NK细胞

低剂量米非司酮对人植入窗期子宫内膜自然杀伤细胞数量及其亚型的影响

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低剂量米非司酮对人植入窗期子宫内膜自然杀伤细胞数量及其亚型的...

作者：祝红霞浙江大学

学位级别：硕士

研究背景：随着近代生命科学的发展，药物避孕技术不断推陈出新。米非司酮(mifepristone，RU486)是第一个用于临床的孕激素受体拮抗剂，目前已广泛应用于抗早孕。20世纪90年代，国内外均有报道米非司酮广泛用于临床紧急避孕，且用药剂... 详细信息

研究背景：随着近代生命科学的发展，药物避孕技术不断推陈出新。米非司酮(mifepristone，RU486)是第一个用于临床的孕激素受体拮抗剂，目前已广泛应用于抗早孕。20世纪90年代，国内外均有报道米非司酮广泛用于临床紧急避孕，且用药剂量在逐步减少。近年来，研究发现每日给予低剂量米非司酮，能阻止内膜发育而起避孕作用，即所谓的“内膜避孕”，对月经周期影响少，无明显副作用。在妊娠生理中，子宫内膜对胚胎的容受性是妊娠建立的关键因素之一。在每个有排卵的月经周期中子宫内膜仅在极短的时期内(即正常月经周期的20—24天)才允许胚泡植入，称为“着床窗”和“植入窗”(implantation window)，此时子宫内膜表现为特定细胞和分子事件的顺序发生，且受许多因素调控。子宫自然杀伤细胞(uNK细胞)是妊娠子宫最主要的免疫职能细胞，在胚胎植入和胎盘形成中起重要作用，参与了植入相关因子的分泌、控制滋养细胞侵入、螺旋动脉改造以及母胎界面免疫平衡的维持。大量研究表明植入窗期子宫内膜NK细胞数量及活性的异常可能是成功实行IVF-ET后植入失败和习惯性流产的原因之一。本文利用体外培养系统，运用免疫组化和流式细胞技术，研究低剂量米非司酮对人植入窗期子宫内膜自然杀伤细胞数量及其亚型的影响，以探讨低剂量米非司酮作为抗着床避孕药的免疫学机制。材料与方法：收集14例因输卵管切除或丈夫不育，行IVF-ET妇女的子宫内膜。入选妇女月经史、生殖系统解剖、内分泌等指标均正常，近3个月内无激素类药物使用史，于月经周期第20至24天取内膜。每例内膜分成三等份，给予不同处理(分别为对照组、65 nmol／L组、200nmol／L组)，组织培养24小时。采用免疫组化EnVision二步法染色，测定子宫内膜CD56+细胞在不同处理组中的表达。采用流式细胞仪检测不同处理组内膜淋巴细胞中CD3-CD56+CD16-细胞亚型百分比和CD3-CD56+CD16+细胞亚型百分比;NK细胞(CD3-CD56+细胞)百分比=CD3-CD56+CD16-细胞亚型百分比+CD3-CD56+CD16+细胞亚型百分比。结果：1．子宫内膜组织块体外培养前后形态学观察：培养前后子宫内膜均处于分泌中期，腺体、血管结构均完整，间质水肿无明显改变。2．子宫内膜CD56+细胞数量的变化：CD56阳性着色为棕黄色，定位于细胞膜，阳性细胞主要分布在腺体和血管周围的间质。三组内膜CD56阳性细胞平均数分别为：对照组112.67±7.75，65nmol／L组145.50±9.43，200nmol／L组149.33±4.47。三组CD56阳性细胞数有显著差异(P=0.01);两处理组分别与对照组相比，显著增高(P＜0.05);两处理组之间比较无明显差异(P＞0.05)。3．子宫内膜NK细胞亚型的变化：CD3-CD56+细胞亚型百分比分别为：对照组(37.79±6.32)％，65nmol／L(47.50±7.71)％和200nmol／L组(51.41±7.61)％。两处理组分别与对照组相比，显著增高(P＜0.05);两处理组之间比较无明显差异(P＞0.05)。CD3-CD56+CD16-细胞亚型百分比分别为：对照组(35.19±6.23)％，65nmol／L组(45.16±7.33)％和200nmol／L组(48.18±7.25)％。两处理组分别与对照组相比，显著增高(P＜0.05);两处理组之间比较无明显差异(P＞0.05)。CD3-CD56+CD16+细胞亚型百分比分别为：对照组(2.60±0.76)％，65nmol／L组(2.34±0.67)％和200nmol／L组(3.24±0.84)％。三组比较无明显差异(P=0.39)。结论：1．低剂量米非司酮能增加植入窗期子宫内膜CD56+NK细胞数量，提示低剂量米非司酮可能通过促进子宫内膜NK细胞的过度增殖，破坏植入窗期子宫内膜局部免疫微环境的平衡。2．低剂量米非司酮能增加植入窗期子宫内膜CD3-CD56+细胞及CD3-CD56+CD16-细胞亚型百分含量，但对CD3-CD56+CD16+细胞亚型百分含量无影响，提示低剂量米非司酮通过促进CD3-CD56+CD16-uNK细胞亚型的过度增殖，破坏植入窗期子宫内膜局部免疫微环境的平衡，从而可能导致胚胎植入的失败。

关键词：米非司酮植入窗期子宫内膜子宫NK细胞免疫耐受 CD3-CD56+CD16-NK细胞

核仁管状系统、GPR30、ERα、Erβ和PR在多囊卵巢综合征患者植入窗期子宫内膜的表达与分析

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核仁管状系统、GPR30、ERα、Erβ和PR在多囊卵巢综合征患者植入...

作者：冀立娟河北医科大学

学位级别：硕士

多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome, PCOS)是育龄期妇女最常见的一种妇科内分泌疾病,是引起不孕的主要原因之一。PCOS患者常常表现为排卵障碍,有自主排卵的PCOS患者妊娠率也较正常妇女低下,在促排卵助孕治疗时出现了高排卵率与... 详细信息

多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome, PCOS)是育龄期妇女最常见的一种妇科内分泌疾病,是引起不孕的主要原因之一。PCOS患者常常表现为排卵障碍,有自主排卵的PCOS患者妊娠率也较正常妇女低下,在促排卵助孕治疗时出现了高排卵率与低妊娠率并存的现象,可能是由于子宫内膜容受性下降所致。PCOS不孕症患者,多次促排卵治疗失败后,最终往往借助于体外受精一胚胎移植(In vitro fertilization-embryo transfer, IVF)解决生育问题。此时,子宫内膜容受性直接决定了良好的胚胎到达宫腔后是否能够成功种植,因此子宫内膜容受性已经引起众多学者的关注。传统的雌孕激素受体对着床期子宫内膜的影响一直是研究的热点。近年来,核仁管状系统( nucleolar channel system,NCS)作为评价子宫内膜容受性的形态学指标已经引起学者们的注意。G蛋白偶联受体(G protein-Coupled Receptor 30,GPR30)是一种新型雌激素受体,其在子宫内膜方面的研究刚刚起步,与子宫内膜容受性关系的研究尚未开展。本文以PCOS患者植入窗期的子宫内膜为研究对象,从形态学、超声学、分子生物学和内分泌学四个方面对子宫内膜容受性进行论述,探索PCOS患者妊娠率较正常育龄期妇女低下的原因,为PCOS不孕症患者的助孕治疗提供理论依据。本研究分两部分对PCOS患者植入窗期子宫内膜容受性进行探讨。第一部分为:核仁管状系统在多囊卵巢综合征患者植入窗期子宫内膜的表达与分析;第二部分:GPR30、ERα、ERβ和PR在多囊卵巢综合征患者植入窗期子宫内膜的表达与分析。第一部分核仁管状系统在多囊卵巢综合征患者植入窗期子宫内膜的表达与分析目的透射电子显微镜下观察有自主排卵的PCOS患者植入窗期子宫内膜NCS的超微结构、表达和分布情况,分析其影响因素。方法采用病例-对照研究的方法,选取15名典型PCOS患者为病例组,15名因男性因素或输卵管因素就诊的妇女为对照组。应用阴道B超于月经第8～10d开始动态监测卵泡发育,于排卵后第7d(黄体中期,植入窗期)行子宫内膜活检。HE染色后观察子宫内膜的一般组织学形态;透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)下观察子宫内膜上皮细胞内NCS的形态和表达分布情况;阴道超声监测排卵当日的子宫内膜分型和厚度;化学免疫发光法检测内膜活检当天的血清孕酮(Progesterone, P)浓度。探讨NCS表达情况与孕激素、子宫内膜厚度和分型之间的关系,分析PCOS患者子宫内膜容受性的形态学和超声学指标的变化。结果 1病例组和对照组一般情况比较病例组15例和对照组15例妇女,两组间年龄(29.93±2.99 vs 30.47±3.66)和体重指数(body mass index, BMI)( 23.33±1.49 vs 22.99±0.93)比较,差异无统计学意义(P> 0.05);病例组LH/FSH ( Luteinizing hormone/Follicle stimulating hormone ,促黄体生成素/促卵泡生成素) (2.56±0.77 vs 0.78±0.23)和雄激素(Testrone,T)(96.28±40.10 vs 51.26±12.44)比较,差异有统计学意义(前者P期,有11例(73.33%)处于分泌中期,分泌早期3例和增殖期1例(后两者共26.67%)。病例组与对照组相比,腺体小,腺腔狭窄,腺腔中无或少量均质状嗜酸性分泌物。病例组15例中,分泌中期5例(占33.33%),分泌早期7例和增生期3例(后两者共占66.67%),较对照组差异有统计学意义(P 期长且常有分枝现象,微绒毛顶端胞质突起——胞饮突(pinopode,PP)普遍存在,细胞核呈卵圆形或长形,一般位于细胞底部,核内核仁管状系统较多见,形态典型,且常见于胞饮突丰富表达的腺上皮细胞核内。NCS可位于核仁旁、核仁内、核膜内侧或游离于常染色质中,或顶着核膜突向胞质,不同切面上可呈各种形状,如球状,螺旋状,戒指状,平等弧形管状或整齐网格状等,在合适的切面上可见NCS的小管腔与核周

关键词：多囊卵巢综合征核仁管状系统子宫内膜容受性雌激素受体 GPR30 孕激素受体植入窗期

类肝素结合性表皮生长因子在人子宫内膜植入窗期的表达和意义

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生殖医学杂志 2000年第6期9卷 334-338页

作者：姜群英陈士岭邢福祺兰州军区乌鲁木齐总医院妇产科乌鲁木齐830000 第一军医大学南方医院妇产科广州510515

探讨类肝素结合性表皮生长因子 (HB-EGF)在人正常子宫内膜中的表达特点 ,评估其在子宫内膜的生长、分化及在植入窗期介导胚泡着床中的作用。采用免疫组织化学方法检测 5 6例正常子宫内膜 (1 6例增殖期 ,1 3例分泌早期 ,1 5例分泌晚期 ,... 详细信息

探讨类肝素结合性表皮生长因子 (HB-EGF)在人正常子宫内膜中的表达特点 ,评估其在子宫内膜的生长、分化及在植入窗期介导胚泡着床中的作用。采用免疫组织化学方法检测 5 6例正常子宫内膜 (1 6例增殖期 ,1 3例分泌早期 ,1 5例分泌晚期 ,1 2例植入窗期 )中 HB-EGF的表达及定位。结果 :HB-EGF在人各期子宫内膜均有表达 ,在植入窗期或分泌中期子宫内膜上皮细胞和间质细胞表达最强 ,并定位于腺上皮和腔上皮细胞表面 ,呈顶浆分泌状。结论 :HB-EGF存在于人各期子宫内膜 ,在植入窗期明显高表达可能参与介导胚泡着床 ,并与间质细胞的生长、分化有关 ,利于子宫内膜蜕膜化 ,为胚泡着床做准备。

关键词：类肝素结合性表皮生长因子子宫内膜植入窗期

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关于多囊卵巢综合征植入窗期子宫内膜的研究

中国妇幼保健 2015年第24期30卷 4247-4251页

作者：李慕白张红阳侯丽辉黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属一院妇产科

人类的子宫内膜在每个月经周期都要经历一系列复杂的增生和分泌的改变,而只有在特定的时期对胚胎才具有接受能力。子宫内膜对胚胎的接受能力为子宫内膜的容受性。人类子宫内膜在月经周期的第21～23天具备对胚胎的容受性,这个时期称为子... 详细信息

人类的子宫内膜在每个月经周期都要经历一系列复杂的增生和分泌的改变,而只有在特定的时期对胚胎才具有接受能力。子宫内膜对胚胎的接受能力为子宫内膜的容受性。人类子宫内膜在月经周期的第21～23天具备对胚胎的容受性,这个时期称为子宫内膜的植入窗期。只有在这个时期,胚泡可成功植入到子宫内膜,才能够完成妊娠。因此,研究这时期的子宫内膜是非常重要的。

关键词：子宫内膜植入窗期多囊卵巢综合征月经周期接受能力容受性胚胎人类

子宫内膜容受性的调控及其特征标记的研究进展

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国际妇产科学杂志 2003年第1期30卷 20-23页

作者：王丽复旦大学附属妇产科医院 200011

胚泡着床是一复杂的生理过程。着床只发生在具有接受性的子宫内膜,子宫对胚泡的接受性叫容受性。子宫内膜容受性的调控机制尚不清楚,涉及卵巢甾体激素,细胞因子和黏附分子等的自分泌及旁分泌机制。综述子宫内膜容受性的调节机制及特征... 详细信息

胚泡着床是一复杂的生理过程。着床只发生在具有接受性的子宫内膜,子宫对胚泡的接受性叫容受性。子宫内膜容受性的调控机制尚不清楚,涉及卵巢甾体激素,细胞因子和黏附分子等的自分泌及旁分泌机制。综述子宫内膜容受性的调节机制及特征性标记。

关键词：胚泡着床子宫内膜容受性植入窗期