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刚果红对棉铃虫中肠围食膜的影响及其病毒增效作用

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昆虫学报 2006年第1期49卷 45-49页

作者：张小霞梁振普彭辉银张忠信汤显春李罡赵淑玲肖宇宙张万菊中国科学院武汉病毒研究所河南农业大学生命科学院郑州450002

通过观察棉铃虫幼虫正常围食膜(peritrophicmembrane,PM)的形态、结构和组成,研究了刚果红对棉铃虫幼虫围食膜的破坏作用及其对棉铃虫核多角体病毒(HaNPV)的增效作用。结果表明,棉铃虫的围食膜分布于整个中肠,包裹着食物呈液囊状,类似... 详细信息

通过观察棉铃虫幼虫正常围食膜(peritrophicmembrane,PM)的形态、结构和组成,研究了刚果红对棉铃虫幼虫围食膜的破坏作用及其对棉铃虫核多角体病毒(HaNPV)的增效作用。结果表明,棉铃虫的围食膜分布于整个中肠,包裹着食物呈液囊状,类似于Ⅰ型围食膜;健康的围食膜呈无色、透明网状结构,并具有一定韧性,经刚果红染色后呈现桔红色。使用不同浓度梯度的刚果红喂食5龄幼虫,结果显示摄取含1.5%和2.0%刚果红的饲料2.5h后,宿主不能形成完整的围食膜,而是形成易脆无弹性的围食膜碎片。经过恢复实验后发现,刚果红对围食膜的破坏作用是瞬时的,可以在较短时间内得到修复。用1.0%刚果红喂食初孵幼虫,发现1.0%刚果红对棉铃虫的幼虫生长不能产生明显的影响。1.0%刚果红能加强棉铃虫幼虫对HaNPV的敏感性,缩短病毒杀虫时间,能使5龄幼虫的病毒感染致死率达到63%,对HaNPV具有非常显著的增效作用。

关键词：棉铃虫刚果红棉铃虫核多角体病毒病毒增效作用中肠围食膜

含生物型增效剂棉铃虫病毒悬浮剂的应用效果研究

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中国病毒学 2003年第6期18卷 571-575页

作者：张忠信张海元牛国栋袁克静段智勇张秋红中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071 湖北荆门稳健生物农药公司湖北荆门448000 新疆建设兵团农八师148团新疆石河子832048

本文报道含生物型增效剂棉铃虫核多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HaNPV)悬浮剂对害虫的防治效果及其对天敌数量的影响。作者筛选灭幼脲类似物作为棉铃虫核多角体病毒的生物型增效剂,HaNPV+4.2ppm氟啶脲(chlorflu... 详细信息

本文报道含生物型增效剂棉铃虫核多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HaNPV)悬浮剂对害虫的防治效果及其对天敌数量的影响。作者筛选灭幼脲类似物作为棉铃虫核多角体病毒的生物型增效剂,HaNPV+4.2ppm氟啶脲(chlorfluazuron)感染3龄初棉铃虫幼虫,感染幼虫的半致死时间(LT_(50))为2.24d,比单用HaNPV感染幼虫的LT_(50)缩短2.66d。含生物型增效剂的棉铃虫核多角体病毒悬浮剂在田间应用,施药后5d,对2代和4代棉铃虫的防治效果分别为81.4％～85.2％和70.7％～82.6％,施药后7d,对2代和4代的防治效果分别为85.2％～86.3％和69.6％～82.9％。棉铃虫病毒悬浮剂中的生物型增效剂对天敌数量仅有轻微影响。含生物型增效剂棉铃虫核多角体病毒悬浮剂不仅能有效控制害虫,而且对天敌有很好的保护作用。

关键词：棉铃虫核多角体病毒悬浮剂氟啶脲生物型增效剂

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重组棉铃虫病毒的外源基因向其他生物的转移

中国病毒学 2005年第4期20卷 420-423页

作者：孙新城成国英周明哲胡志红孙修炼中国科学院武汉病毒研究所分子病毒学重点实验室华中农业大学植物科学技术学院病原细菌研究室湖北武汉430070

本文报道了基因工程棉铃虫核多角体病毒(HaSNPV-AaIT)的外源蝎子毒素基因(AaIT)是否会向环境中的植物病原微生物或捕食性天敌转移的实验结果。首先,于实验室内将重组病毒HaSNPV-AaIT与棉花黄萎病病菌(VerticilliumdahliaeLleb.)进行了长... 详细信息

本文报道了基因工程棉铃虫核多角体病毒(HaSNPV-AaIT)的外源蝎子毒素基因(AaIT)是否会向环境中的植物病原微生物或捕食性天敌转移的实验结果。首先,于实验室内将重组病毒HaSNPV-AaIT与棉花黄萎病病菌(VerticilliumdahliaeLleb.)进行了长达90d的混合培养,在混合培养30d,60d和90d后分别提取棉花黄萎病病菌的基因组DNA,用AaIT基因作探针进行点杂交,结果显示无阳性信号。另外,从多次施用过重组病毒的棉花田中采集了120只龟纹瓢虫和七星瓢虫,利用健康蚜虫饲养3-4d,用碱解液处理瓢虫体表后,从处理液中可以检测到病毒DNA;但瓢虫体表经碱解液和Dnase处理后,从瓢虫体内提取的基因组DNA,用PCR和斑点杂交的方法,都没有检测到AaIT的序列存在。本研究的实验结果说明,基因工程病毒的外源基因向其它生物转移的可能性极低。

关键词：棉铃虫核多角体病毒基因工程蝎毒基因(AaIT) 基因漂移

利用生态宝(棉铃虫NPV病毒)承包防治二代棉铃虫大田药效报告

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利用生态宝(棉铃虫NPV病毒)承包防治二代棉铃虫大田药效报告

AcMNPV P35抑制HaSNPV诱导的Tn-Hi5细胞凋亡

1995年全国生物防治学术讨论会

作者：刘素兰河南信阳生物制药厂

信阳生物制药厂利用本厂生产的生态宝(棉铃虫NPV病毒),于1995年6月13日～19日对我省息县白店乡35000亩棉花进行了承包防治棉铃虫,现将防治结果报告如下

关键词：棉铃虫核多角体病毒防治棉铃虫

来源： cnki会议评论

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中国病毒学 2005年第2期20卷 173-178页

作者：南方宋建华王瑞青梁昌镛陈新文中国科学院武汉病毒研究所分子病毒学重点实验室湖北武汉430071

苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multicapsid nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)能够抑制棉铃虫核多角体病毒(Helicoverpa armigera Nucleopoly hedrovirus,HaSNPV)诱导的Tn Hi5 细胞凋亡,并能辅助HaSNPV在Tn Hi5细胞中复制,产生具有感染能力的子代病毒。瞬时表达实验证明,在Tn Hi5细胞中,p35具有明显抑制凋亡的能力,但是不能辅助HaSNPV在Tn Hi5细胞中的复制;进一步构建超表达p35 的重组病毒:vHap35,发现vHap35能够抑制Tn Hi5细胞凋亡,但是不能产生具有感染力的病毒粒子。电镜观察发现感染重组病毒的部分细胞中存在单粒包埋的病毒粒子(ODV)。

关键词：细胞凋亡苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒棉铃虫核多角体病毒 Ac-p35,Tn—Hi5

感染HaSNPV棉铃虫幼虫的组织病理和免疫组化研究

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中国病毒学 2003年第6期18卷 603-606,T003,T004页

作者：欧阳志荃孙修炼邓菲袁丽胡志红中国科学院武汉病毒研究所分子病毒学重点实验室湖北武汉430071 中国科学院武汉病毒研究所无脊椎动物病毒学联合开放实验室湖北武汉430071

本文报道了棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(Helicoverpa armigera single nucleocapsid nucleopolyhedrovirus,HaSNPV)感染棉铃虫幼虫的病理时相及HaSNPV多角体蛋白在幼虫组织中表达的免疫组化研究.以5×103PFU的HaSNPV出芽病毒粒子(BV)注射4龄初的棉铃虫幼虫,石蜡切片的H.E染色表明,在感染后24h,病理变化不明显;48h后脂肪体、气管组织的细胞核开始肿大,细胞开始变形;72h后脂肪体、气管、真皮细胞核肿大十分明显,组织结构松散;但中肠和肌肉组织未见明显病变;96h后,脂肪体、气管、真皮组织结构完全被破坏,肌肉组织变疏松.免疫组化结果表明,感染后24h,未能检测到多角体蛋白在幼虫组织中的表达;感染后48h,多角体蛋白可在部分脂肪体、气管组织、血细胞和真皮组织的细胞核中表达;72h后,被感染的脂肪体、气管组织、和真皮组织的细胞数比48h多; 96h后,多角体蛋白可以在脂肪体、气管、真皮组织中大量表达,48h到96h间,被感染的血细胞数目基本不变,中肠组织和肌肉都未检测到多角体蛋白的表达;幼虫死亡后,可在中肠上皮细胞的基底膜间隙中检测到多角体蛋白的表达,肌肉组织中未见表达信号,其它组织全部被感染并且组织结构被破坏, H.E的结果与免疫组化的结果基本相符.

关键词：棉铃虫核多角体病毒病理时相多角体蛋白免疫组化