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木尔坦棉花曲叶病毒及其伴随的β卫星分子复合侵染引起广东棉花曲叶病

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中国农业科学 2015年第16期48卷 3166-3175页

作者：汤亚飞何自福杜振国佘小漫蓝国兵广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室

【目的】明确引起广东棉花曲叶病的病原,为该病害的防控提供理论依据。【方法】应用PCR、滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)、基因克隆及测序等技术获得病毒分离物GD01基因组及卫星分子的序列,并对序列进行分析;通过构建GD01... 详细信息

【目的】明确引起广东棉花曲叶病的病原,为该病害的防控提供理论依据。【方法】应用PCR、滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)、基因克隆及测序等技术获得病毒分离物GD01基因组及卫星分子的序列,并对序列进行分析;通过构建GD01及其β卫星分子的侵染性克隆p GreenⅡ049-1.6A、p GreenⅡ049-2.0β和利用农杆菌介导的注射接种方法,测定GD01及其β卫星分子对棉花的致病性;进一步通过Southern blot检测对接种植株进行分析与验证。【结果】侵染广东棉花的病毒分离物GD01基因组仅含A组分(DNA-A),其全长为2 737nt,且与在中国发现的木尔坦棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl Multan virus,CLCu Mu V)第一个分离物朱槿分离物G6序列相似性为100%。该病毒分离物也伴随有β卫星分子,其全长为1 345 nt,与G6伴随的β卫星分子(Cotton leaf curl Multan betasatellite isolate G6,CLCu Mu B-[G6])序列相似性为99.9%。构建了GD01 DNA-A及其β卫星分子侵染性克隆p GreenⅡ049-1.6A、p GreenⅡ049-2.0β,农杆菌注射接种本氏烟,接种后15 d,二者混合接种的本氏烟植株新出的叶片表现明显的皱缩、卷曲等症状;随着时间的推移,本氏烟的症状越来越明显。农杆菌注射接种棉花,接种后30 d,二者混合接种的棉花植株新出叶片开始出现叶脉变深绿色,叶片卷曲等症状;接种后90 d,二者混合接种的植株大部分叶片表现为叶片向上卷曲、叶脉深绿色、叶脉肿大等典型棉花曲叶症状,且与田间自然病株症状相同,而二者各自单独接种的棉花植株没有产生明显的症状。Southern blot检测结果显示,表现典型曲叶症状的接种棉花植株均含有GD01 DNA-A及其β卫星分子,进一步支持这些症状是由GD01 DNA-A及其β卫星分子的共同侵染引起。【结论】病毒分离物GD01 DNA-A及其伴随的β卫星分子与入侵中国的CLCu Mu V第一个分离物朱槿分离物G6相同,CLCu Mu V-[GD01]及其伴随的CLCu Mu B-[GD01]复合侵染引起广东棉花曲叶病,利用农杆菌介导的侵染性克隆接种法,完成了CLCu Mu V及其CLCu Mu B复合侵染引起棉花曲叶病的柯赫氏法则(Koch’s Postulates)。

关键词：棉花曲叶病木尔坦棉花曲叶病毒 β卫星分子侵染性克隆致病性

基于Maxent模型的棉花曲叶病在中国的适生性分析

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棉花学报 2016年第5期28卷 443-451页

作者：齐国君陈婷何自福吕利华广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

棉花曲叶病是棉花上一种毁灭性的病害,其主要病原木尔坦棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl Multan virus,CLCu Mu V)已入侵我国广东、广西、海南、福建、云南和江苏等地,明确其可能的适生区域对该病毒病的科学监测和综合防控意义重大。本... 详细信息

棉花曲叶病是棉花上一种毁灭性的病害,其主要病原木尔坦棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl Multan virus,CLCu Mu V)已入侵我国广东、广西、海南、福建、云南和江苏等地,明确其可能的适生区域对该病毒病的科学监测和综合防控意义重大。本研究以棉花曲叶病的分布数据为基础,综合考虑其传播介体烟粉虱、中间寄主朱槿、寄主棉花的分布区域,利用Maxent模型对棉花曲叶病在中国的潜在适生区进行预测。结果表明,长江流域棉区、黄河流域棉区的大部分区域都属于棉花曲叶病的适生区,而西北内陆棉区的适生程度较低,大部分为低度适生区;其中,高度适生区主要集中在长江流域棉区的湖南、江西、浙江、安徽、江苏、湖北,此区域也适宜朱槿的种植。因此,华南地区已流行危害的木尔坦棉花曲叶病毒向北入侵到我国棉花主产区的风险极高,其中长江流域棉区将是该病害发生及防控的重点区域。

关键词：棉花曲叶病木尔坦棉花曲叶病毒烟粉虱朱槿适生区

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木尔坦棉花曲叶病毒已对我国棉花生产构成严重威胁

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植物保护 2010年第2期36卷 147-149页

作者：何自福董迪李世访佘小漫罗方芳广东省农业科学院植物保护研究所广州510640 中国农业科学院植物保护研究所北京100193

木尔坦棉花曲叶病毒是引起巴基斯坦和印度棉花曲叶病流行的主要病原之一,是由烟粉虱以持久方式传播。近年来,在广东和广西分别发现了严重侵染朱槿和黄秋葵的木尔坦棉花曲叶病毒。虽然广东和广西不种植棉花,但该病毒传播介体烟粉虱在广... 详细信息

木尔坦棉花曲叶病毒是引起巴基斯坦和印度棉花曲叶病流行的主要病原之一,是由烟粉虱以持久方式传播。近年来,在广东和广西分别发现了严重侵染朱槿和黄秋葵的木尔坦棉花曲叶病毒。虽然广东和广西不种植棉花,但该病毒传播介体烟粉虱在广东、广西及我国棉花产区都有分布。因此该病毒的入侵,对我国棉花生产构成严重威胁。

关键词：木尔坦棉花曲叶病毒棉花曲叶病威胁

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烟粉虱隐种和棉花品种对木尔坦棉花曲叶病毒传播的影响

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烟粉虱隐种和棉花品种对木尔坦棉花曲叶病毒传播的影响

作者：崔西云浙江大学

学位级别：硕士

烟粉虱是一个包含35个以上隐种的物种复合体,能特异性传播双生病毒,危害棉花、蔬菜和园林花卉等植物,给农业生产造成巨大损失。棉花曲叶病是由至少8类经烟粉虱传播的双生病毒侵染引发,主要在非洲和南亚严重危害。然而,在2006年我国首次... 详细信息

烟粉虱是一个包含35个以上隐种的物种复合体,能特异性传播双生病毒,危害棉花、蔬菜和园林花卉等植物,给农业生产造成巨大损失。棉花曲叶病是由至少8类经烟粉虱传播的双生病毒侵染引发,主要在非洲和南亚严重危害。然而,在2006年我国首次发现木尔坦棉花曲叶病毒(CLCuMV),其中一类棉花曲叶病毒。经过近十年的传播,CLCuMV已经在我国南方多个省份发现,并严重危害朱槿、黄秋葵、垂花悬铃花等植物,甚至还可以危害棉花。病害的严重程度与棉花品种、粉虱的隐种有关,目前关于烟粉虱对CLCuMV获取、存留、传播的报导还很少,也没有在不同棉花品种上用不同烟粉虱隐种传播CLCuMV的比较研究,因此非常有必要比较在不同棉花品种上不同烟粉虱隐种传播CLCu MV的能力,从而为预防CLCuMV入侵我国棉区提供信息。为了评估该病毒的扩散对我国棉花产业构成的威胁,我们比较了MEAM1、MED、Asia Ⅱ1 和 Asia Ⅰ共4个烟粉虱隐种对CLCuMV获取、传播的能力,同时比较了Asia Ⅱ1在6个棉花品种上的传毒效率。研究结果如下：(1)4个烟粉虱隐种传播木尔坦棉花曲叶病毒(CLCuMV)的能力试验选取了4个可能传播棉花曲叶病毒的烟粉虱隐种,比较其在普通烟(NC89)及棉花(中植棉2、广西棉112-2)上的传毒效率。结果显示,无论是在烟草还是棉花上,Asia Ⅱ 1传播CLCuMV的效率显著高于MEAM1、MED和Asia Ⅰ,同时棉花品种对传毒效率也有影响。(2)棉花品种对烟粉虱传播木尔坦棉花曲叶病毒效率的影响试验选取6个棉花品种,广西棉112-2、中棉所72、中植棉2号、新陆中45、新陆中46、鲁棉研28,比较Asia Ⅱ 1在这6个棉花品种上的传毒效率。结果显示,当虫口密度为10头时,烟粉虱只能将病毒传给2个棉花品种,广西棉112-2和鲁棉研28,效率分别为52.2%、3.4%。(3)4个烟粉虱隐种的获毒能力比较了4个烟粉虱隐种在1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天后获取CLCuMV的量,并分析了48小时4个烟粉虱隐种雌雄虫获毒能力的差异。结果显示,所有烟粉虱均具有获取CLCuMV的能力,其中Asia Ⅱ1获毒量显著高于其他隐种而且随取食时间的延长呈整体增加趋势,而其他三个隐种的体内病毒量维持在低水平。同时表明,取食48小时,所有烟粉虱隐种雌雄虫之间获毒量没有显著差异。总之,我们的研究表明,Asia Ⅱ1是4个隐种中传播CLCuMV最有效媒介,烟粉虱隐种获取CLCuMV的能力与其传毒效率正相关,广西棉112-2为6个棉花品种中最易感病品种。

关键词：烟粉虱木尔坦棉花曲叶病毒棉花曲叶病烟粉虱-双生病毒互作

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入侵广东的木尔坦棉花曲叶病毒侵染克隆构建

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