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外源性糖皮质激素对电化学发光免疫分析法皮质醇检测的干扰

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外源性糖皮质激素对电化学发光免疫分析法皮质醇检测的干扰

作者：葛昀郑州大学

学位级别：硕士

背景与目的糖皮质激素既是一种机体合成和分泌的重要内分泌激素,又是一种应用广泛的临床药物。内源性糖皮质激素是一种类固醇激素,由肾上腺皮质合成及分泌。皮质醇又名氢化可的松,是人体最主要的糖皮质激素。皮质醇对机体的心血管... 详细信息

背景与目的糖皮质激素既是一种机体合成和分泌的重要内分泌激素,又是一种应用广泛的临床药物。内源性糖皮质激素是一种类固醇激素,由肾上腺皮质合成及分泌。皮质醇又名氢化可的松,是人体最主要的糖皮质激素。皮质醇对机体的心血管、代谢及免疫系统等均有支持及调节作用,糖皮质激素参与免疫活化的反馈调节,可抑制过度炎症反应。因此在临床上常用来治疗由免疫系统过度活跃所造成的疾病。此外,也常用于应激状态的改善以及激素缺乏时的补充或替代治疗。下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴为机体皮质醇合成和分泌的调节系统。体内皮质醇水平检测对于下丘脑—垂体—肾上腺轴功能的评价有重要意义,因此,检测方法是否能真实地反映机体内源性皮质醇水平。临床上所用的糖皮质激素主要为人工合成糖皮质激素,即外源性糖皮质激素。各种人工合成的皮质激素的结构和功能与皮质醇极为相似,因此外源性糖皮质激素可能对电化学发光免疫分析法皮质醇检测造成干扰。目前,电化学发光免疫分析法作为较先进的检测方法己被广泛应用于皮质醇水平检测,但是,并没有文献介绍这种方法在皮质醇水平检测方面的抗干扰能力。本课题用可的松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼松龙、地塞米松和倍他米松等六种临床常用的外源性糖皮质激素作为内源性皮质醇的干扰物,检测干扰物影响下的血清皮质醇水平,对六种外源性糖皮质激素进行干扰筛查以鉴别何种外源糖皮质激素可作为干扰物对电化学发光免疫分析法皮质醇检测产生干扰,及干扰剂量相关性分析以研究干扰物的剂量与效应关系,为将来临床皮质醇检测数据的判断提供参考。方法 1干扰物溶液配制以无水乙醇为溶剂,分别将可的松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼松龙、地塞米松及倍他米松等6种标准品配制成浓度为500mg/L的6种干扰物溶液。 2干扰筛查取方法1中配制好的六种干扰物溶液各10μL,分别加入500μL的血清中,配制成六种终浓度为10mg/L（1000μg/dL）的干扰物的溶液,作为实验组;取同等体积（10gL）的无水乙醇,加入500μL血清中,作为对照组。用全自动电化学发光免疫分析仪进行皮质醇浓度检测,记录检测结果。 3剂量相关性分析将未用的剩余血清均匀混合,形成混合血清。将方法1中配制的六种干扰物溶液用无水乙醇稀释成不同浓度等级,加入混合血清中,分别配制成浓度为0、0.05（5）、0.1（10）、0.2（20）、0.5（50）、1.0（100）、2.0（200）、5.0（500）mg/L（μg/dL）的六种含有干扰物的血清,重复检测皮质醇浓度,记录检测结果。 4统计分析采用SPSS17.0软件进行方差分析、配对t检验、简单回归等方法分析,以α=0.05为检验水准。结果 1干扰筛查经电化学发光免疫法进行皮质醇检测,可的松,泼尼松,泼尼松龙及甲泼尼松龙四个实验组皮质醇检测结果均高于检测上限即大于60gg／dL,明显高于对照组结果。地塞米松及倍他米松两实验组皮质醇检测值均高于对照组,且经配对T检验,差异有统计学意义（地塞米松组：P=0.001,倍他米松组：P=0.006）。 2剂量相关性分析检测结果通过简单回归分析得出六种干扰物剂量与干扰程度关系：六种干扰物均可对皮质醇检测产生干扰效应,且随干扰物剂量增加,皮质醇检测值增加;而加入小剂量的干扰物（泼尼松：c≦20μg/dL,甲泼尼松龙：c≦10}μg/dL,地塞米松：c≦200μg/dL,倍他米松：c≦50μg/dL）可对皮质醇产生负性干扰,而使皮质醇检测值小于真实值。可的松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼松龙、地塞米松及倍他米松六种干扰物的剂量与皮质醇检测值的回归关系表达式分别为：y=21.416+0.098x. y=17.056+0.018x、y=19.731+0.425x、y=19.086+0.52x、 y=16.978+0.08x、y=17.104+0.551nx。结论可的松、泼尼松龙、泼尼松、甲泼尼松龙、地塞米松及倍他米松六种临床常用的外源性糖皮质激素均可对电化学发光免疫法皮质醇检测造成干扰,且不同外源性糖皮质激素的检测干扰程度不同。小剂量的干扰物可对皮质醇检测产生负性干扰效应,随干扰物剂量增加,负性干扰效应减低,正性干扰效应增加。

关键词：糖皮质激素电化学发光免疫分析法检测干扰

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异嗜性抗体对甲状腺功能检测的干扰

检验医学 2019年第12期34卷 1147-1149页

作者：李冬梅慈溪市妇幼保健院检验科

在免疫学检测中,有很多物质会造成干扰,这些物质主要是与被测物化学结构存在差异但活性类似的物质,如异嗜性抗体(heterophile antibody,HAb)、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、人抗动物抗体(human anti-animal antibody,HAAb)、自身... 详细信息

在免疫学检测中,有很多物质会造成干扰,这些物质主要是与被测物化学结构存在差异但活性类似的物质,如异嗜性抗体(heterophile antibody,HAb)、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、人抗动物抗体(human anti-animal antibody,HAAb)、自身抗体与其他蛋白等[1]。

关键词：异嗜性抗体甲状腺功能检测干扰

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免疫检测干扰因素的分析、识别和对策

中华检验医学杂志 2009年第7期32卷 725-729页

作者：唐古生吴豫沈茜第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

免疫检测法中能够改变被检测物浓度或改变被检物与相应检测抗体结合能力的物质，均可能对检测结果造成干扰。内源性干扰因素包括自身抗体、异嗜性抗体、人抗动物抗体及其他一些结合蛋白等。脂血、交叉反应、一些分析前变异、基质效应，... 详细信息

免疫检测法中能够改变被检测物浓度或改变被检物与相应检测抗体结合能力的物质，均可能对检测结果造成干扰。内源性干扰因素包括自身抗体、异嗜性抗体、人抗动物抗体及其他一些结合蛋白等。脂血、交叉反应、一些分析前变异、基质效应，甚至检测的设备不同，也可对免疫检测造成干扰。这些干扰可引起许多检测结果的假性升高或降低，包括激素、肿瘤标志、药物、肌钙蛋白和病原微生物的血清学检测等，进而影响临床对疾病的诊断和治疗评估。检验人员与临床医师都应充分认识免疫检测中的干扰因素，并在出现实验室检测结果与临床征象不符时进行充分沟通，查找是否存在干扰因素，并采取适当方案重新检测，以得出正确结果。

关键词：策略实验性免疫检测检测干扰干扰识别

3种不同除脂方法在消除脂血对丙氨酸转氨酶检测干扰的比较研究

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心理月刊 2020年第7期 169-169页

作者：郝俊峰王丹朱海宁山东省淄博市疾病预防控制中心

目的探究不同除脂方法临床应用对丙氨酸转氨酶检测干扰的影响价值比对。方法笔者收集实验室接受常规检查的血液标本90份;将其依据随机标签模式均分3组,进行模拟脂血配置患者,分别予以超速离心法、聚乙二醇沉淀法(PEG)及乙醚萃取法等3种... 详细信息

目的探究不同除脂方法临床应用对丙氨酸转氨酶检测干扰的影响价值比对。方法笔者收集实验室接受常规检查的血液标本90份;将其依据随机标签模式均分3组,进行模拟脂血配置患者,分别予以超速离心法、聚乙二醇沉淀法(PEG)及乙醚萃取法等3种不同脂血清除方式。结果以正常生化指标中丙氨酸转氨酶数值,超速离心法与PEG法对丙氨酸转氨酶清除情况具有一致性(P>0.05),乙醚萃取法比对其他两组模拟脂血中丙氨酸转氨酶指标存在差异(P<0.05)。结论超速离心法与PEG法于脂血中对丙氨酸转氨酶的清除均具有良好导向,考虑临床流程及性价比,PEG法临床应用价值更高。

关键词：同除脂方法消除脂血丙氨酸转氨酶检测干扰

网织红细胞通道光学法红细胞参数在冷凝集素干扰识别及纠正中的应用价值

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中华检验医学杂志 2023年第10期46卷 1020-1025页

作者：唐文佳杨烁朱捷李和晞顾梅秀王蓓丽潘柏申郭玮复旦大学附属中山医院检验科上海200032

目的评估全自动血细胞分析仪网织红细胞(RET)通道中Delta-RBC参数对冷凝集素(CA)干扰的识别作用,并探讨RET通道光学法红细胞参数在纠正CA干扰中的应用价值。方法回顾性研究。收集复旦大学附属中山医院门诊2022年1月至2023年1月间,经镜... 详细信息

目的评估全自动血细胞分析仪网织红细胞(RET)通道中Delta-RBC参数对冷凝集素(CA)干扰的识别作用,并探讨RET通道光学法红细胞参数在纠正CA干扰中的应用价值。方法回顾性研究。收集复旦大学附属中山医院门诊2022年1月至2023年1月间,经镜检确认存在红细胞冷凝集的标本68份,无冷凝集对照组标本45份,室温下使用全血细胞计数(CBC)+RET通道检测冷凝集组及对照组所有标本,记录并计算阻抗法检测参数:红细胞(RBC-I)、血红蛋白(HGB)、血红蛋白红细胞比容(HCT-I)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH-I)、红细胞平均体积(MCV-I)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC-I)及光学法检测参数:RBC-O、HCT-O、MCH-O、R-MFV、MCHC-O、Delta-RBC。对冷凝集组标本进行37℃2 h温育,温育后使用CBC通道检测,记录阻抗法参数:RBC-I37℃2 h、HGB37℃2 h、HCT-I37℃2 h、MCH-I37℃2 h、MCV-I37℃2 h、MCHC-I37℃2 h。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Delta-RBC对CA干扰的识别效能,使用Bland-Altman法分析冷凝集组室温下光学法RBC参数检测结果与温育后阻抗法检测结果间一致性情况,使用Pearson及Spearman相关性分析对冷凝集组标本温育前后血细胞检测结果进行相关性分析。结果若使用Delta-RBC作为诊断指标对CA干扰进行识别,最佳截断值为1.065,曲线下面积为0.998。冷凝集组标本RBC-O、HCT-O、R-MFV、MCH-O、MCHC-O与RBC-I37℃2 h、HCT-I37℃2 h、MCV-I37℃2 h、MCH-I37℃2 h、MCHC-I37℃2 h结果间相关系数分别为0.985、0.981、0.729、0.870、0.649;结果差异百分比在一致性界限内的比例分比为95.6%、92.6%、95.6%、94.1%、95.6%。结论全自动血细胞分析仪RET通道光学法检出的RBC参数Delta-RBC可作为判断指标有效辅助临床判断是否存在CA干扰。使用RET通道的光学法RBC参数进行结果报告可以在无须标本预处理的情况下纠正CA干扰,得到更为正确的全血细胞计数结果。

关键词：凝集素类全血细胞计数全自动血细胞分析仪检测干扰

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骨髓增殖性肿瘤所致假性低血糖1例报道

复旦学报（医学版） 2023年第3期50卷 467-470,474页

作者：邵文琦朱丽娜王蓓丽潘柏申郭玮复旦大学附属中山医院检验科上海200032 复旦大学附属中山医院厦门医院检验科厦门361015

复旦大学附属中山医院曾收治1例反复异常低血糖患者,男性,69岁,因上腹部胀痛就诊于我院急诊,诊断为消化道穿孔,行十二指肠修补术,转入普外科,术后禁食予深静脉补充营养液(含葡萄糖500 mL)。患者反复空腹低血糖,血清/血浆葡萄糖结果波动... 详细信息

复旦大学附属中山医院曾收治1例反复异常低血糖患者,男性,69岁,因上腹部胀痛就诊于我院急诊,诊断为消化道穿孔,行十二指肠修补术,转入普外科,术后禁食予深静脉补充营养液(含葡萄糖500 mL)。患者反复空腹低血糖,血清/血浆葡萄糖结果波动于0.5~1.7 mmol/L,以“无症状持续低血糖10余天”转诊至内分泌科继续治疗。临床医师反馈患者无任何低血糖相关症状和反应,通过数据整理、原因分析和文献回顾,最终以骨髓增殖性肿瘤致假性低血糖处理,患者转诊至血液科。

关键词：假性低血糖骨髓增殖性肿瘤检测干扰糖酵解

残留还原剂对修复后铬污染土壤六价铬浸出浓度测定的干扰及消除

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环境工程 2023年第S02期41卷 719-723,733页

作者：李东曾尹吴君如重庆大学环境与生态学院重庆400044 重庆大学煤矿灾害动力学与控制国家重点实验室重庆40004

为了评估和消除修复后铬污染土壤中残留还原剂对Cr(Ⅵ)浸出浓度测定的干扰,针对经硫酸亚铁和硫化钠修复后的铬污染土壤,提出了消除干扰的预处理方法和碱溶液浸出法,通过与没有预处理的浸出试验结果对比,评估残留还原剂干扰的程度。结果... 详细信息

为了评估和消除修复后铬污染土壤中残留还原剂对Cr(Ⅵ)浸出浓度测定的干扰,针对经硫酸亚铁和硫化钠修复后的铬污染土壤,提出了消除干扰的预处理方法和碱溶液浸出法,通过与没有预处理的浸出试验结果对比,评估残留还原剂干扰的程度。结果表明:HJ/T 299测定的Cr(Ⅵ)浸出浓度满足GB 3838—2002《地表水环境质量标准》和GB14848—2017《地下水质量标准》Ⅳ类水域标准限值要求,但测定结果的Cr(Ⅵ)加标回收率干扰后,Cr(Ⅵ)浸出浓度上升至原来的81~94倍,超出GB 3838—2002和GB 14848—2017的Ⅳ类水域标准限值。当采用干扰相对较小的碱溶液浸出方法时,Cr(Ⅵ)浸出浓度又进一步上升了27%~375%。未经修复的铬污染土壤样品浸出浓度的加标回收率≥70%。HJ/T 300的浸出试验结果与HJ/T299类似。与碱溶液浸出法的试验结果对比显示,HJ/T 299和HJ/T 300浸出试验采用的酸性环境会促进浸出液中Cr(Ⅵ)与还原剂之间的反应,导致检测负偏差,需要在浸出操作前降低残留还原剂的量。

关键词：检测干扰硫化钠硫酸亚铁加标回收率 HJ/T 299 HJ/T 300 碱溶液浸出

修复药剂对碱消解-火焰原子吸收分光光度法测定土壤Cr（Ⅵ）的干扰

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修复药剂对碱消解-火焰原子吸收分光光度法测定土壤Cr（Ⅵ）的干扰

作者：滕慧重庆大学

学位级别：硕士

近年来,随着对生态环境保护的重视程度日益增加,我国在推进生态环境法规与标准体系建设等方面取得了显著进展。2019年12月,我国生态环境部发布了HJ 1082-2019《土壤和沉积物六价铬的测定碱溶液提取-火焰原子吸收分光光度法》(本文简称为... 详细信息

近年来,随着对生态环境保护的重视程度日益增加,我国在推进生态环境法规与标准体系建设等方面取得了显著进展。2019年12月,我国生态环境部发布了HJ 1082-2019《土壤和沉积物六价铬的测定碱溶液提取-火焰原子吸收分光光度法》(本文简称为AD-FAAS法),该标准是目前国内唯一的法定土壤和沉积物Cr(Ⅵ)测定方法。然而,一些研究和修复工程项目中发现修复后的Cr(Ⅵ)污染土壤测定结果存在假阳性或负偏差等问题。因此,为准确评估土壤修复效果,研究修复药剂对AD-FAAS法检测结果的影响具有重要意义。本文选用NaSO、Fe SO、NaS、Ca S四种常见还原剂及柠檬酸(CA)淋洗剂,探究其在铬污染土壤修复环节对Cr(Ⅲ)沉淀情况的影响,和AD-FAAS法测定土壤残留Cr(Ⅵ)时溶解态Cr(Ⅲ)导致的正偏差及影响因素,以及该正偏差对残余还原剂导致的负偏差的抵消程度。本文主要结论如下:(1)修复药剂对Cr(Ⅲ)沉淀影响实验结果表明:在修复环节溶解态Cr(Ⅲ)沉淀受p H、还原剂及产物和淋洗剂等共存物质的配位作用等因素影响。p H较低时,由四种还原剂还原Cr(Ⅵ)生成的Cr(Ⅲ)沉淀速率均较慢。经NaSO还原的溶液中还存在Cr(Ⅲ)-SO/SO络合现象阻碍Cr(Ⅲ)的沉淀;NaS、Ca S及其反应产物也可能与Cr(Ⅲ)发生配位现象阻碍Cr(Ⅲ)的沉淀;相反,经Fe SO还原的溶液中产生的Fe(OH)/Fe通过吸附/共沉淀作用促进了Cr(Ⅲ)的沉淀。如果体系中存在CA,由于Cr(Ⅲ)-CA的络合作用,即便在Cr(Ⅲ)热力学平衡浓度极低的p H条件下(≈8),Cr(Ⅲ)也能够在较长时间内稳定存在于溶液相中。(2)AD-FAAS法测定土壤Cr(Ⅵ)的误差实验结果表明:(1)Cr(Ⅲ)在还原修复环节和Cr(Ⅵ)测定环节都始终处于过饱和状态,短时间内难以达到沉淀-溶解平衡,导致采用AD-FAAS法测定Cr(Ⅵ)时会产生一定的正偏差;而土壤介质的吸附作用能显著降低该偏差,本实验中该偏差被降低至FAAS法测定下限以内。故用AD-FAAS法测定土壤残留Cr(Ⅵ)时,Cr(Ⅲ)导致的正偏差不一定总会导致假阳性的结论。(2)若还原修复前采用CA作为淋洗剂对土壤进行淋洗处理,则需要尽可能提高土壤的脱水效果或再用清水淋洗土壤,以减少CA在土壤中的滞留量,否则CA可以显著提高Cr(Ⅲ)的溶解度,从而导致AD-FAAS法测定土壤中Cr(Ⅵ)时产生较大正偏差,且正偏差程度随CA浓度升高而呈上升趋势,使得测定结果出现假阳性。(3)当Cr(Ⅵ)未被彻底还原且有大量还原剂残留时,Cr(Ⅵ)会在碱消解提取阶段或p H调节阶段被还原,导致显著负偏差,且该负偏差不能被Cr(Ⅲ)导致的正偏差抵消。综上所述,AD-FAAS法测定修复后土壤残留Cr(Ⅵ)时,检测误差主要来源于两个方面,一是Cr(Ⅲ)沉淀不完全导致的正偏差,二是残余还原剂导致的负偏差。在使用该法时,需要注意土壤中是否存在不利于Cr(Ⅲ)沉淀的物质和可能还原Cr(Ⅵ)的物质,以免对修复效果作出错误判断。

关键词： HJ1082 铬污染土壤修复柠檬酸检测干扰

看懂甲状腺功能化验单:甲状腺功能指标异常的临床解析

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中华内分泌代谢杂志 2020年第5期36卷 448-452页

作者：李洋滕卫平滕晓春中国医科大学附属第一医院内分泌科内分泌研究所沈阳110001

甲状腺疾病是内分泌科的常见病,甲状腺功能测定已经成为评估甲状腺疾病患者最常用的检测指标,本文总结了临床上可能会遇到的甲状腺功能指标的异常情况,并进行病因分析,以期为临床医生的诊断提供思路。

关键词：促甲状腺激素甲状腺素三碘甲腺原氨酸检测干扰罕见甲状腺疾病