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体内、体外产生的小鼠桑葚胚玻璃化冻存后的发育能力

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第一军医大学学报 1999年第6期19卷 513-516页

作者：全松山野修司青野敏博第一军医大学南方医院妇产科广州510515 日本国立德岛大学医学部产妇人科

目的　探讨体内、体外产生的小鼠桑葚胚玻璃化冻存后的发育能力。方法体内、体外产生的小鼠桑葚胚分别被含有乙烯甘醇、Ficoll和蔗糖的玻璃化溶液处理后冻存。结果体内产生的小鼠桑葚胚单纯暴露于玻璃化溶液中 ,而未冻存时其发育到胚泡... 详细信息

目的　探讨体内、体外产生的小鼠桑葚胚玻璃化冻存后的发育能力。方法体内、体外产生的小鼠桑葚胚分别被含有乙烯甘醇、Ficoll和蔗糖的玻璃化溶液处理后冻存。结果体内产生的小鼠桑葚胚单纯暴露于玻璃化溶液中 ,而未冻存时其发育到胚泡期的百分率为 97 3% (一步法 )和 98 4% (二步法 ) ,与对照组 (98 1% )均无显著差异 (P >0 0 5 ) ,体外产生的小鼠桑葚胚单纯被玻璃化溶液处理后发育到胚泡期的百分率分别为 81 8% (一步法 )、82 4% (二步法 )和 83 6 % (对照组 ) ,三者之间无显著差异 (P >0 0 5 )。但是 ,体外产生的小鼠桑葚胚经玻璃化冻存融解后 ,发育到胚泡期的百分率为 70 6 % (一步法 )、81 3%(二步法 )和 83 6 % (对照组 ) ,一步法玻璃化组明显低于二步法玻璃化组和对照组 (P 桑葚胚玻璃化冻存融解后 ,发育到胚泡期的百分率为 93 1% (一步法 )和 95 7% (二步法 ) ,二者之间无显著差异 (P >0 0 5 )。所有玻璃化冻存的小鼠桑葚胚融解后 ,显微镜下观察均未见透明带破裂。结论体内、体外产生小鼠桑葚胚胎经玻璃化冻存融解后 ,可保持较高的存活率和发育能力 ,二步法玻璃化更适合冻存体外产生的小鼠桑葚胚。

关键词：玻璃化桑葚胚发育能力冷冻保存胚胎

在含环磷酰胺活性代谢物的大鼠血清中培养的小鼠桑葚胚和胚泡的发育和SCE

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国外医学(卫生学分册) 1986年第3期 170-171页

作者：董杭英

本实验试图建立一个在体外测定经体内代谢的化学物胚胎毒性的方法。材料与方法:1.小鼠胚胎的体外培养将NMRI小鼠雌雄同笼,以发现阴栓作为妊娠0天,在妊娠第三天,从子宫中冲洗出桑葚胚和胚泡,置于含10％小牛血清的Whitten培养液中培养24... 详细信息

本实验试图建立一个在体外测定经体内代谢的化学物胚胎毒性的方法。材料与方法:1.小鼠胚胎的体外培养将NMRI小鼠雌雄同笼,以发现阴栓作为妊娠0天,在妊娠第三天,从子宫中冲洗出桑葚胚和胚泡,置于含10％小牛血清的Whitten培养液中培养24小时,发育至胚泡后期,然后移

关键词：胚泡 SCE 大鼠活性代谢物桑葚胚体外测定小鼠胚胎体内代谢体外培养胚胎毒性

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冻融胚胎复苏后培养时间对临床妊娠率的影响

第二军医大学学报 2018年第3期39卷 334-337页

作者：冯书改刘苡萱张慧琴颜宏利朱旻杜惠张文静印惠荣松迪刘敏林莎莎胡婷婷王玲洪毅施敏凤海军军医大学(第二军医大学)长海医院生殖医学中心上海200433

目的探讨卵裂期冻融胚胎复苏后体外培养时间对冻融胚胎移植(FET)周期临床妊娠率的影响。方法收集2016年1月至12月在海军军医大学(第二军医大学)长海医院生殖医学中心接受FET助孕的692例患者的临床资料。根据胚胎复苏后至移植前体外培养... 详细信息

目的探讨卵裂期冻融胚胎复苏后体外培养时间对冻融胚胎移植(FET)周期临床妊娠率的影响。方法收集2016年1月至12月在海军军医大学(第二军医大学)长海医院生殖医学中心接受FET助孕的692例患者的临床资料。根据胚胎复苏后至移植前体外培养的天数将患者分为3组:复苏后未培养组、复苏后培养1 d组、复苏后培养2 d组,分析比较3组患者的妊娠结局。结果 3组患者的年龄、体质量指数、不孕年限、基础卵泡刺激激素水平和子宫内膜准备方案差异均无统计学意义(P均>0.05)。复苏后未培养组、复苏后培养1 d组、复苏后培养2 d组胚胎丢失率分别为0.0%(0/706)、13.3%(64/481)、43.0%(114/265),3组间差异有统计学意义(P胚胎移植数和移植日子宫内膜厚度差异均无统计学意义(P均>0.01);复苏后培养2 d组和复苏后培养1 d组优质胚胎移植率均低于复苏后未培养组(P均胚胎复苏后体外培养1~2 d后移植,虽然增加胚胎丢失率,但可筛选具有发育潜能的胚胎,提高临床妊娠率。

关键词：体外培养卵裂桑葚胚囊胚冻融胚胎移植

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瘦素对小鼠着床前胚胎发育影响的体外研究

四川大学学报（医学版） 2004年第6期35卷 806-808页

作者：陈骞李尚为唐海峰张金虎尹海林四川大学华西第二医院妇产科成都610041 四川大学华西基础与法医学院生理学教研室四川大学华西动物实验中心

目的　探讨瘦素在体外对小鼠着床前胚胎发育的影响。方法　 1收集小鼠 2 -细胞胚胎 ,在不同剂量瘦素的 CZB培养液中进行体外培养 ,观察胚胎发育情况 ,并进行胚胎移植 ,观察着床率 ;2收集小鼠 2 -细胞胚胎在空白 CZB培养液中体外培养至... 详细信息

目的　探讨瘦素在体外对小鼠着床前胚胎发育的影响。方法　 1收集小鼠 2 -细胞胚胎 ,在不同剂量瘦素的 CZB培养液中进行体外培养 ,观察胚胎发育情况 ,并进行胚胎移植 ,观察着床率 ;2收集小鼠 2 -细胞胚胎在空白 CZB培养液中体外培养至桑葚胚期 ,再分别置入不同剂量瘦素的 CZB培养液中进行体外培养 ,观察胚胎进一步发育情况。结果　瘦素能提高 2 -细胞胚胎体外发育的质量、发育率和胚胎着床率。当瘦素剂量为 10 ng/ ml时平均胚胎形态学评分 (AES)为 16 .0 8± 0 .37,剂量为 5 0 ng/ ml时 AES为 17.5 7± 0 .4 2 ,两者间差别有统计学意义(P桑葚胚体外进一步发育无显著影响。结论　瘦素参与了小鼠着床前胚胎的发育 ,能提高胚胎发育质量、发育率 ,有利于胚胎的进一步着床。

关键词：瘦素着床前胚胎桑葚胚着床

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兔胚胎时期特异性基因相关新片段的克隆

动物学杂志 2009年第4期44卷 41-46页

作者：齐冰常正尧李效良李永芳陈清轩李文雍泰山医学院生物科学系泰安271016 中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101 阜阳师范学院生命科学学院安徽阜阳236041

阶段特异性基因的表达是早期胚胎发育过程中的重要事件,对植入前胚胎基因表达模式的研究是进一步研究植入前胚胎发育调控机制的前提。本实验利用mRNA差异显示技术来研究兔(Oryctolagus cuniculus domestica)植入前各期胚胎的基因表达差... 详细信息

阶段特异性基因的表达是早期胚胎发育过程中的重要事件,对植入前胚胎基因表达模式的研究是进一步研究植入前胚胎发育调控机制的前提。本实验利用mRNA差异显示技术来研究兔(Oryctolagus cuniculus domestica)植入前各期胚胎的基因表达差异。在获得的42个阳性阶段特异性表达的基因中,有5个在NCBI和EMBL数据库中没有同源序列,登录EMBL,申请了登录号。这些新基因片段都是桑葚期特异表达的基因,而且在以后的囊胚期也有表达。兔由母源型调控向合子型调控的过渡是在8～16细胞期开始的,在桑葚期开始表达的这些基因片段应该是兔胚胎时期特异性基因。这些基因的克隆将为进一步研究兔的植入前胚胎发育模式奠定基础。

关键词：兔 mRNA差异显示技术桑葚胚合子型基因

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醋酸铅对小鼠胚胎体内发育毒性的研究

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2003年第3期31卷 15-18页

作者：马保华王建华史志诚刘金龙王强西北农林科技大学动物科技学院陕西杨陵712100

采用饮水染毒法研究碱式醋酸铅对小鼠早期胚胎体内发育的毒性。将体重 (1 5± 2 ) g的母鼠随机分为高剂量、中剂量、低剂量染毒组和对照组。从试验的第 1天起 ,染毒组小鼠分别于下午 1 7:0 0至次日上午 8:0 0自由饮用 5 .0 ,1 .0和 0 .2... 详细信息

采用饮水染毒法研究碱式醋酸铅对小鼠早期胚胎体内发育的毒性。将体重 (1 5± 2 ) g的母鼠随机分为高剂量、中剂量、低剂量染毒组和对照组。从试验的第 1天起 ,染毒组小鼠分别于下午 1 7:0 0至次日上午 8:0 0自由饮用 5 .0 ,1 .0和 0 .2 g/L醋酸铅溶液 ,次日上午 8:0 0至下午 1 7:0 0更换为自来水 ,如此循环 ,持续 2 1 d;对照组小鼠一直自由饮用自来水。染毒结束后 ,进行正常饲喂、饮水至试验结束。从第 2 6天开始对小鼠进行超排 ,超排小鼠分别在注射 h CG后的 4 8,72和 96 h回收输卵管及 /或子宫胚胎。结果显示 ,在注射 h CG后 4 8h回收胚胎时 ,染毒各组超排小鼠正常 2～ 4 - C胚胎占回收总数的比率与对照组无显著差异 (P>0 .0 5 ) ;72 h回收胚胎时 ,高、低剂量组的桑葚胚比率极显著低于对照组 (P胚胎时 ,高剂量组囊胚比率极显著低于对照组 (P胚比率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 ) ,且此时各染毒组的退化胚比率均极显著高于对照组 (P胚胎从 2 - C期进一步发育为桑葚胚和囊胚 ,并使胚胎发育延迟。

关键词：醋酸铅小鼠胚胎发育胚胎毒性饮水染毒法桑葚胚囊胚剂量毒性机理

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不同培养体系对延边黄牛胚胎体外发育的影响

黑龙江畜牧兽医 2011年第19期 54-55页

作者：刘京子李继鹏鲁京兰刘丰崔成都吉林省延边州畜牧站延边大学梨树县动物疫病预防控制中心

近年来,随着卵母细胞体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)以及细胞核移植技术的发展,胚胎体外培养(IVC)的方法也不断完善,使胚胎体外生产(IVP)成为可能。IVC体系的建立不仅是胚胎工程发展最基本的条件之一,而且有助于研究早期胚胎的发生、合

关键词：卵母细胞体外成熟囊胚发育率延边黄牛桑葚胚早期胚胎培养体系

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小鼠桑葚期和囊胚期胚胎冻存方法的研究

小鼠桑葚期和囊胚期胚胎冻存方法的研究

作者：赵晓徽天津医科大学

学位级别：硕士

目的：研究两种冷冻保护剂乙烯已二醇(Ethylene Glycol,EG)和甘油(Clycero,GC)在不同浓度和暴露时间的条件下对桑葚胚及囊胚的毒性影响;比较桑葚胚、早期囊胚和囊胚经玻璃化法(Vitrification)、EG慢速冷冻和GC慢速冷冻三种方法冻融后胚... 详细信息

目的：研究两种冷冻保护剂乙烯已二醇(Ethylene Glycol,EG)和甘油(Clycero,GC)在不同浓度和暴露时间的条件下对桑葚胚及囊胚的毒性影响;比较桑葚胚、早期囊胚和囊胚经玻璃化法(Vitrification)、EG慢速冷冻和GC慢速冷冻三种方法冻融后胚胎继续发育的潜能;初步确定玻璃化法冷冻种植前晚发育时期胚胎的最佳阶段。方法：1．桑葚胚、早期囊胚和囊胚分别暴露于1.5M EG磷酸盐缓冲液、1.5M GC磷酸盐缓冲液20min，6.0M EG磷酸盐缓冲液5min，以暴露于不含冷冻保护剂的磷酸盐缓冲液为对照，观察在胚胎体外培养系统M16培养液继续发育的情况。2．桑葚胚、早期囊胚和囊胚三个发育阶段的胚胎均用玻璃化法、EG慢速冷冻和GC慢速冷冻法冻存，比较三种方法冻融后胚胎继续发育的情况。3．比较三个阶段胚胎经玻璃化法冻存后冻融胚胎继续发育的情况。结果：1在1.5M EG磷酸盐缓冲液、1.5M GC磷酸盐缓冲液中暴露20min，6.0M EG磷酸盐缓冲液暴露5min后，在体外培养中桑葚胚、早期囊胚和囊胚继续发育与对照组相比没有显著性差异，对胚胎没有明显毒性影响。2桑葚胚经玻璃化法、EG慢速冷冻法和GC慢速冷冻法三种方法冻存后，冻融胚胎囊胚形成率分别为：85.7％、71.1％、48.7％，囊胚孵出率分别为：59.5％、42.2％、23.1％，玻璃化法和EG慢速冷冻法高于GC慢速冷冻法(P＜0.01，P＜O.05)，玻璃化法与EG慢速冷冻法相比没有显著性差异(P＞0.05)。三种方法冻存早天津医科大学硕士学位论文期襄胚融解后扩张襄胚形成率分别为65.钱、26.既、41%，班胚孵出率51.钱、l外、28.既，冻存班胚融解后囊胚重新扩张率为43.既、21 .1%、22.5%，.胚孵出率为29.2%、10.5%、1既。在早期襄胚和澳胚的冻存中，玻璃化法冻融后胚胎继续发育率高于EG慢速冷冻法和GC慢速冷冻法(P0 .05)。结论:***、***溶液及6.0施G在本研究采用的冷冻条件下对胚胎没有毒性影响。对干桑甚胚，玻璃化法和EG慢速冷冻法优于GC慢速冷冻法;早期囊胚和囊胚玻璃化法冷冻效果优于EG和Gc慢速冷冻法。在慢速冷冻中，EG较GC更适于桑套胚。桑甚胚可能是玻璃化法冻存种植前晚发育时期胚胎的最佳阶段。

关键词：小鼠桑葚胚囊胚冷冻保护剂玻璃化冷冻冻存

雌激素受体α抑制剂MPP在小鼠囊胚形成和滋养层干细胞中影响YAP核定位

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中国组织化学与细胞化学杂志 2019年第1期28卷 6-13页

作者：许颂华朱灵华刘玥王晓江钟玉环苏杨许丽旋王世鄂干细胞工程与再生医学福建省高校重点实验室福州350108 福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系福州350108 福建医科大学

目的研究雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)抑制剂甲基-哌啶-吡唑(methyl-piperidino-pyrazole,MPP)在小鼠桑葚胚和滋养层干细胞(trophoblast stem cells,TSCs)中对YAP的影响。方法收集昆明(kunming,KM)小鼠8-细胞胚,置于0μmol/L(对照组)和5μmol/L(实验组)MPP中培养,分别于8h、12h和24h后收集各组桑葚胚,采用免疫荧光技术观察YAP表达,采用Real Time-PCR检测MPP处理24h后Yap mRNA表达变化;将小鼠TSCs置于0μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L和10μmol/L MPP中培养,48h后观察细胞形态改变,分别检测Sox2、YAP、Cdx2 mRNA和蛋白表达水平。结果小鼠8-细胞胚经MPP处理24h后,桑葚胚YAP蛋白核定位水平降低,Yap mRNA水平无显著改变;经MPP处理48h后,5μmol/L组小鼠TSCs细胞出现细胞团块,10μmol/L组细胞增殖明显受抑制;与对照组相比,5μmol/L组细胞Sox2 mRNA表达水平升高,Yap和Cdx2 mRNA水平无显著改变,团块状细胞中的YAP蛋白失去明显的核内定位,SOX2和CDX2阳性细胞的表达更加密集。结论 ERα在小鼠桑葚胚和TSCs中调控YAP核定位,其在TSCs细胞中的作用与CDX2和SOX2的表达有关。

关键词：雌激素受体α 桑葚胚滋养层干细胞 YAP