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HPLC法测定金丹附延颗粒中肉桂酸和桂皮醛的含量

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中国药物评价 2024年第2期41卷 97-100页

作者：朱艳艳刘德鸿吴倩颖朱良辉陈伟康江西中医药大学江西南昌330004 江西省药品检验检测研究院国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室江西省药品医疗器械质量工程研究中心江西南昌330029

目的:建立金丹附延颗粒中肉桂酸和桂皮醛的HPLC含量测定方法。方法:采用C 18色谱柱,流动相为乙腈和0.1%磷酸溶液,检测器检测波长设置为290 nm,输液泵流速1.0 mL·min^(-1),色谱柱柱温设置为25℃。结果:肉桂酸、桂皮醛分别在0.2079~10.3... 详细信息

目的:建立金丹附延颗粒中肉桂酸和桂皮醛的HPLC含量测定方法。方法:采用C 18色谱柱,流动相为乙腈和0.1%磷酸溶液,检测器检测波长设置为290 nm,输液泵流速1.0 mL·min^(-1),色谱柱柱温设置为25℃。结果:肉桂酸、桂皮醛分别在0.2079~10.3938μg·mL^(-1)、0.2025~10.1270μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=1.0000),回收率分别为100.3%、102.6%,回收率RSD分别为1.57%、1.82%。结论:该方法简单、稳定,可用于金丹附延颗粒中肉桂酸和桂皮醛的含量测定。

关键词：金丹附延颗粒含量测定肉桂酸桂皮醛高效液相色谱

桂皮醛对禽致病性大肠杆菌生物被膜形成影响的研究

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中国预防兽医学报 2023年第1期45卷 88-94页

作者：旷年玲左丽郝柳杭高庆羽石玉祥钟翠红张永英河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056000 河北省禽病技术创新中心河北邯郸056021

为探究桂皮醛对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物被膜(BF)的形成及其相关基因转录水平的影响,本研究利用牛津杯法分别检测桂皮醛对3株BF强阳性(E-39、E-40、E-41)和3株中等阳性(E-27、E-30、E-42)APEC的抑菌圈,分析桂皮醛对APEC的抑菌活性;... 详细信息

为探究桂皮醛对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物被膜(BF)的形成及其相关基因转录水平的影响,本研究利用牛津杯法分别检测桂皮醛对3株BF强阳性(E-39、E-40、E-41)和3株中等阳性(E-27、E-30、E-42)APEC的抑菌圈,分析桂皮醛对APEC的抑菌活性;采用二倍稀释法测定桂皮醛对上述6株APEC的最小抑菌浓度(MIC);根据该结果,进一步采用96孔板结晶紫染色法测定MIC、1/2 MIC和1/4 MIC桂皮醛对6株APEC BF形成能力的抑制作用;采用qPCR法分别检测1/2 MIC和1/4 MIC桂皮醛对6株APEC BF形成相关基因转录水平的影响。结果显示:桂皮醛对6株APEC的抑菌圈直径为16.12±0.13 mm~23.80±0.23 mm;桂皮醛对BF强阳性和中等阳性APEC菌株的MIC均为256μg/mL;BF形成能力的检测结果显示,与未用桂皮醛处理的APEC相比,MIC、1/2 MIC和1/4 MIC的桂皮醛均极显著抑制上述6株APEC BF的形成(P桂皮醛的浓度呈正相关;经1/2 MIC和1/4 MIC桂皮醛处理3 d后,与未经桂皮醛处理的APEC阳性对照组相比,3株BF强阳性菌株组氨酸激基因qseC、鞭毛主调节器基因flhC和外膜外排蛋白基因tolC的转录水平均显著降低(P桂皮醛在体外对APEC有较强的抑菌活性,并且可通过影响APEC qseB、qseC、flhD、flhC、tolC和bdcR基因的转录水平进而抑制其BF的形成。本研究为临床防治大肠杆菌病及清除其BF提供了参考依据。

关键词：桂皮醛禽致病性大肠杆菌生物被膜基因转录

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桂皮醛对口腔链球菌多菌种生物膜的抑制作用

现代预防医学 2023年第7期50卷 1304-1309+1332页

作者：张一博张仲董千雨蔡锦林周慧灵王学润李雨庆王国庆四川大学华西口腔医学院口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西药学院四川大学华西公共卫生学院/华西第四医院

目的通过多种体外实验手段评价桂皮醛对三种常见口腔链球菌（变异链球菌、血链球菌和戈登链球菌）形成的多菌种生物膜的影响。方法通过检测生长抑制作用确定桂皮醛对单菌种浮游细菌的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,... 详细信息

目的通过多种体外实验手段评价桂皮醛对三种常见口腔链球菌（变异链球菌、血链球菌和戈登链球菌）形成的多菌种生物膜的影响。方法通过检测生长抑制作用确定桂皮醛对单菌种浮游细菌的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）；桂皮醛处理组设置MIC、1/2 MIC和1/4 MIC三个质量浓度组；将BHIS液体培养基稀释的细菌培养液和桂皮醛溶液同时加入96孔板孔内，并放入恒温厌氧罐37℃培养24 h后，从每个孔中吸出混合液，并用PBS清洗平板，获得生物膜。通过结晶紫染色、活菌计数评估桂皮醛对单菌种和多菌种链球菌生物膜形成的影响；并通过实时荧光定量PCR测量多菌种生物膜形成相关毒力基因的表达。结果桂皮醛对三种口腔链球菌的生长、生物膜形成以及多菌种生物膜形成均有明显抑制作用；实时荧光定量PCR结果显示桂皮醛能够抑制多菌种生物膜中gtfB、gt鄄fC和gtfD的表达。桂皮醛还可以降低多菌种生物膜的产酸和耐酸能力。结论一定浓度的桂皮醛对变异链球菌、血链球菌和戈登链球菌生长及生物膜形成均具有抑制作用且对多菌种生物膜形成及其毒力也有抑制作用。

关键词：桂皮醛龋病变异链球菌戈登链球菌血链球菌

桂皮醛诱导人宫颈癌Siha细胞凋亡并下调HPV E6/E7蛋白表达

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天然产物研究与开发 2022年第9期34卷 1565-1572,1617页

作者：紫若·塔里哈提曙丽盼·木拉提张伟怡周文婷新疆医科大学药学院新疆天然药物活性组分与释药技术重点实验室乌鲁木齐830011

桂皮醛作为一种天然的小分子化合物具有抗炎、镇痛及抗肿瘤的活性,为了探究其对人宫颈癌Siha细胞凋亡及HPV E6/E7蛋白表达的影响,该文采用CCK-8法、流式细胞术、JC-1荧光探针以及Western blot等多种手段进行检测。结果显示,桂皮醛具有... 详细信息

桂皮醛作为一种天然的小分子化合物具有抗炎、镇痛及抗肿瘤的活性,为了探究其对人宫颈癌Siha细胞凋亡及HPV E6/E7蛋白表达的影响,该文采用CCK-8法、流式细胞术、JC-1荧光探针以及Western blot等多种手段进行检测。结果显示,桂皮醛具有明显的抗肿瘤生长作用,可导致G2/M期阻滞、线粒体膜电位降低并通过蛋白酶体途径抑制E6/E7蛋白的表达;进一步验证桂皮醛与化疗药物紫杉醇、顺铂及5-氟尿嘧啶分别联合给药后的效果,证实其具有协同抗宫颈癌作用。

关键词：桂皮醛宫颈癌凋亡 E6/E7蛋白

桂皮醛对百草枯中毒小鼠急性肝损伤的保护作用

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中国急救医学 2022年第9期42卷 779-784页

作者：郭治华刘振宁李子英蒲羿韩思盈中国医科大学附属盛京医院急诊科辽宁沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院实验研究中心辽宁沈阳110004

目的探讨桂皮醛对百草枯中毒小鼠急性肝损伤的保护作用机制。方法将C57BL/6N小鼠共计24只随机平均分成4组,每组6只。百草枯中毒组:按照30 mg/kg剂量百草枯腹腔注射;低剂量和高剂量桂皮醛干预组:按照50 mg/(kg·d)或100 mg/(kg·d)两种... 详细信息

目的探讨桂皮醛对百草枯中毒小鼠急性肝损伤的保护作用机制。方法将C57BL/6N小鼠共计24只随机平均分成4组,每组6只。百草枯中毒组:按照30 mg/kg剂量百草枯腹腔注射;低剂量和高剂量桂皮醛干预组:按照50 mg/(kg·d)或100 mg/(kg·d)两种不同剂量桂皮醛进行小鼠灌胃7 d,然后给予百草枯30 mg/kg腹腔注射;对照组:0.3 mL生理盐水灌胃。在腹腔注射百草枯后24 h时,收集小鼠血液和肝组织标本。采用ELISA方法检测小鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)含量,采用生化法检测肝组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,肝组织HE染色观察形态学变化,利用免疫组化或Western blot方法检测肝组织中沉默调节蛋白1(SIRT1),过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α),NACHT、LRR和PYD结构域蛋白3(NLRP3)和半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白表达水平。结果与对照组比较,百草枯中毒小鼠肝组织结构破坏,炎性细胞浸润,组织学评分增加(分:0.33±0.21 vs.5.83±0.31,P桂皮醛干预组肝组织学评分改善(分:5.83±0.31 vs.4.33±0.21 vs.3.50±0.43,P桂皮醛上调肝组织中SIRT1和PGC-1α表达,降低NLRP3和Caspase-1蛋白表达(P桂皮醛可能通过促进SIRT1/PGC-1α表达和抑制NLRP3/Caspase-1表达发挥抗氧化和抗炎作用,对百草枯中毒小鼠急性肝损伤产生保护作用。

关键词：百草枯中毒急性肝损伤桂皮醛过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α) 沉默调节蛋白1(SIRT1) NACHT、LRR和PYD结构域蛋白3(NLRP3)

经典名方桃核承气汤的UPLC指纹图谱及多指标成分含量测定研究

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中草药 2024年第11期55卷 3689-3704页

作者：刘艳梅黄小丹彭致铖朱德全李振雨陈向东孙冬梅广东一方制药有限公司广东省中药配方颗粒企业重点实验室

目的通过建立UPLC指纹图谱及多指标成分含量测定方法，构建经典名方桃核承气汤（Taohe Chengqi Decoction,TCD）的质量体系，研究TCD基准样品量值传递规律。方法遵照古籍记载并结合工艺考察，制备不同产地的15批次TCD基准样品，采用U... 详细信息

目的通过建立UPLC指纹图谱及多指标成分含量测定方法，构建经典名方桃核承气汤（Taohe Chengqi Decoction,TCD）的质量体系，研究TCD基准样品量值传递规律。方法遵照古籍记载并结合工艺考察，制备不同产地的15批次TCD基准样品，采用UPLC法建立基准样品指纹图谱，使用中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012版）进行相似度评价，结合UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术全面分析基准样品化学成分，同时测定样品中指标成分（苦杏仁苷、桂皮醛、肉桂酸、甘草酸、游离型蒽醌、总蒽醌、结合蒽醌）的含量。结果建立了15批TCD基准样品的UPLC指纹图谱，与对照指纹图谱比较相似度≥0.90，通过对照品确认、高分辨质谱数据分析及文献比对，共鉴定出80个化学成分，共归属26个指纹峰，鉴定了17个色谱峰。15批TCD基准样品中苦杏仁苷、桂皮醛、肉桂酸、甘草酸、游离型蒽醌、总蒽醌、结合蒽醌的质量分数分别为0.29%～0.58%、0.011%～0.032%、0.05%～0.13%、0.48%～1.04%、0.20%～0.30%、0.42%～0.66%、0.19%～0.37%，饮片到基准样品的转移率分别为31.49%～60.78%、0.43%～2.67%、51.61%～76.99%、26.79%～49.88%、16.01%～32.65%、9.66%～19.07%、6.97%～19.48%；出膏率为19.55%～22.92%，传递率为80.98%～99.34%。结论所建立的UPLC指纹图谱及多指标成分含量测定分析方法快速简便，结合基准样品的量值传递过程分析，可为后续制剂的开发和质量控制提供理论依据。

关键词：桃核承气汤经典名方指纹图谱量值传递 UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS 苦杏仁苷桂皮醛肉桂酸甘草酸蒽醌

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不同产地肉桂质量及炮制过程成分变化研究

天然产物研究与开发 2024年第3期36卷 377-387,399页

作者：梅菊吴涛李强刘洋殷涛廖香莲孙代华胡力飞湖北省中药配方颗粒工程技术研究中心黄石435100 湖北师范大学生命科学学院黄石435002 湖北工业大学教育部工业发酵省部共建协同创新中心武汉430068

建立了肉桂指纹图谱和5种有效成分的含量测定方法,对不同产地28批肉桂药材差异及炮制前后的成分变化进行了研究。采用超高效液相色谱法建立了肉桂指纹图谱并对共有峰进行了指认,采用OriginPro 2023软件对28批样品指纹图谱进行了聚类分... 详细信息

建立了肉桂指纹图谱和5种有效成分的含量测定方法,对不同产地28批肉桂药材差异及炮制前后的成分变化进行了研究。采用超高效液相色谱法建立了肉桂指纹图谱并对共有峰进行了指认,采用OriginPro 2023软件对28批样品指纹图谱进行了聚类分析和主成分分析,聚类分析的样本和共有峰分类情况与主成分分析情况相近,其中阳春市、肇庆市高要区、防城港市和贵港市样本分类较为集中,采用SIMCA14.1软件进行了正交偏最小二乘判别分析,可实现对广东、广西两省/自治区肉桂的有效区分。通过香豆素、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛、2-甲氧基桂皮醛及挥发油的含量测定对炮制前后的肉桂样本进行对比分析,结果表明,药材与饮片5个成分和挥发油含量均值较为相近,肉桂炮制过程的成分差异较小;且各批次间桂皮醛、肉桂酸和肉桂醇的整体变化趋势相近,2-甲氧基桂皮醛和香豆素的变化趋势相近,与化学计量学分析结果一致。本研究可为肉桂产地选择、质量研究提供参考。

关键词：肉桂炮制桂皮醛化学计量学含量测定

基于生物信息学探讨桂皮醛对宫颈癌细胞的凋亡和蛋白表达的研究

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基于生物信息学探讨桂皮醛对宫颈癌细胞的凋亡和蛋白表达的研究

作者：紫若·塔里哈提新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:(1)用多种生物信息学工具分析鉴定宫颈癌患者样本中的生物标志物。(2)探究桂皮醛(CA)对宫颈癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响,并分析其分子机制。方法:(1)利用基因表达综合数据库(GEO)获得关于宫颈癌的3个数据集,通过R语言分析得到差... 详细信息

目的:(1)用多种生物信息学工具分析鉴定宫颈癌患者样本中的生物标志物。(2)探究桂皮醛(CA)对宫颈癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响,并分析其分子机制。方法:(1)利用基因表达综合数据库(GEO)获得关于宫颈癌的3个数据集,通过R语言分析得到差异表达基因(DEGs),并进行富集分析。利用STRING数据库建立蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并在Cytoscape中进行可视化分析鉴定出中心基因。使用UALCAN、c Bio Portal和人类蛋白质图谱(HPA)数据库进一步分析研究。(2)采用CCK-8法测定CA对宫颈癌细胞的IC值及与Tax、Pt和5-FU联合给药后的协同指数;划痕实验检测CA对宫颈癌细胞迁移的作用;流式细胞术检测CA对宫颈癌细胞周期的影响;Hoechst 33342荧光染色和Western blot检测CA对宫颈癌细胞凋亡的影响;JC-1荧光探针检测宫颈癌细胞中线粒体膜电位变化情况;Western blot检测CA通过蛋白酶体途径对宫颈癌细胞的作用及相关蛋白表达的影响。结果:(1)通过R语言分析得到257个DEGs,KEGG和GO富集分析结果显示主要富集在细胞周期、细胞凋亡、DNA复制过程等。基于MCODE、cyto Hubba插件分析得到了4个中心基因(AURKB、CDK1、KIF11和KIF2C),通过使用UALCAN、c Bio Portal、HPA数据库分析表明,这四个基因均在宫颈癌组织中高表达。(2)CA抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移;阻滞在G2/M期;破坏线粒体膜电位;通过蛋白酶体途径抑制E6和E7蛋白的表达并诱导凋亡。进一步验证桂皮醛与化疗药物Tax、Pt和5-FU具有协同抗宫颈癌作用。结论:(1)宫颈癌致癌及进展的潜在中心基因可能是宫颈癌诊断和治疗的新型生物标志物。(2)CA通过线粒体途径诱导Siha细胞凋亡,并通过蛋白酶体途径下调HPV E6和E7蛋白的表达;同时与多种宫颈癌常用化疗药物均能在细胞水平上呈现协同效果。

关键词：宫颈癌生物信息学桂皮醛 E6 E7 泛素蛋白酶体途径化疗药物

桂皮醛通过mTOR和STAT3调控记忆性T细胞促进心脏移植物长期存活的作用及机制研究

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湖南中医药大学学报 2023年第3期43卷 413-420页

作者：李师亮方明周彦华中科技大学同济医学院附属同济医院心脏大血管外科湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉头颈外科湖北武汉430022

目的探索桂皮醛诱导记忆性心脏移植耐受的作用及潜在分子机制。方法将60只小鼠随机分为正常对照组(假手术,n=10)、手术组(心脏移植,n=10)、模型组(注射T细胞+心脏移植,n=10)、桂皮醛低浓度组(注射T细胞+心脏移植+10 mg/kg桂皮醛,n=10)... 详细信息

目的探索桂皮醛诱导记忆性心脏移植耐受的作用及潜在分子机制。方法将60只小鼠随机分为正常对照组(假手术,n=10)、手术组(心脏移植,n=10)、模型组(注射T细胞+心脏移植,n=10)、桂皮醛低浓度组(注射T细胞+心脏移植+10 mg/kg桂皮醛,n=10)、桂皮醛中浓度组(注射T细胞+心脏移植+20 mg/kg桂皮醛,n=10)和桂皮醛高浓度组(注射T细胞+心脏移植+40 mg/kg桂皮醛,n=10)。观察各组移植物平均存活时间、移植物排斥程度,检测脾细胞增殖情况、移植物中相关基因白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的相对表达量,以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)与信号转导及转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription3,STAT3)蛋白磷酸化的表达情况。结果(1)与正常对照组相比,手术组存活时间明显缩短(P桂皮醛高浓度组的平均存活时间显著延长(P桂皮醛治疗组的移植物排斥程度显著降低,且具有剂量依赖性。(3)与正常对照组相比,手术组及模型组脾细胞OD值升高(P桂皮醛低浓度组相比,桂皮醛中、高浓度组脾细胞OD值降低(P桂皮醛中、高浓度组移植物中IL-2、IFN-γmRNA表达明显下调(P桂皮醛中、高浓度组IL-10、TGF-βmRNA表达明显上调(P桂皮醛中、高浓度组移植物中p-mTOR、p-STAT3蛋白表达明显下调(P桂皮醛可以获得移植物长期耐受,其机制可能是通过抑制mTOR和STAT3的表达,降低移植物记忆性T细胞的免疫应答水平。

关键词：桂皮醛记忆性T细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号转导及转录激活因子3 心脏移植