检索结果-南通市图书馆

作者：张国华北京化工大学

学位级别：硕士

本论文以采自新疆天山的雪莲(Saussureae Involucratae *** Maxim.)根部冻土为实验材料,采用不同的培养方法从冻土样品中分离微生物,对雪莲根部冻土环境微生物的多样性进行初步调查,并对其产酶情况作出了初步研究。结果表明,在雪莲根部... 详细信息

本论文以采自新疆天山的雪莲(Saussureae Involucratae *** Maxim.)根部冻土为实验材料,采用不同的培养方法从冻土样品中分离微生物,对雪莲根部冻土环境微生物的多样性进行初步调查,并对其产酶情况作出了初步研究。结果表明,在雪莲根部冻土低温环境中,假单孢菌属(Pseudeomonas)、黄杆菌属(Flavobacterium)、节杆菌属(Arthrobacter)等为优势菌群。分离的微生物中,大多数微生物都可以分泌产生淀粉酶,并存在大量产生纤维素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶等的微生物。低温环境中蕴含大量新颖的未开发的微生物,为新型酶制剂的开发提供了宝贵的材料,具有深入研究的意义。淀粉酶在饲料工业等领域有较高的应用价值和研究意义。本论文根据a-淀粉水解酶家族共有的保守区序列设计一对简并引物(Amy-F/Amy-R),采用降落PCR(touch-down PCR)反应,从分离的雪莲根部冻土微生物基因组DNA中克隆到14条淀粉水解酶基因片段,这些片段之间的同源性比较低,表明雪莲根部冻土微生物中蕴含着丰富新颖的淀粉水解酶基因。利用TAIL-PCR技术,进一步从三株淀粉水解能力较强的细菌中克隆得到与淀粉的降解有关基因全长序列,包括Flavobacterium sp.M-2来源的a-淀粉酶基因(amyA),Proteobacterium ***-18菌株来源的去分支酶基因(glgD)和Arthrobacter sp.G-7来源的去分支酶基因(glgE),以及两个糖苷水解酶基因ghB和abfC来源于Flavobacteriumsp.M-2。这5个基因与已报道的相关基因序列相似性较低,表明这5个基因具有新颖性。选取2个低温菌来源的淀粉水解酶基因amyA和glgD在大肠杆菌中进行了诱导表达研究。结果表明,在18-20℃,诱导剂浓度为0.2-0.4 mM,诱导24-48小时,amyA和glgD基因在大肠杆菌中均得到了表达,而在37℃下诱导均不能表达。其中,amyA基因在大肠杆菌细胞内表达,其表达活性为1.12 U·mL,SDS-PAGE电泳分析表明其表达蛋白质分子量约为100 kD,与理论分子量相近,非变性蛋白电泳结果表明该蛋白具有淀粉酶活性;glgD表达的重组蛋白分子量大小约为80 kD,其淀粉酶活性为0.9 U·mL。结果表明低温蛋白基因在大肠杆菌中诱导表达条件的不同,也表明本研究利用简并引物扩增结合TAIL-PCR技术克隆基因的有效性。重组表达的低温淀粉水解酶有望应用于工业领域。

关键词：雪莲根部冻土产酶微生物低温微生物低温淀粉酶基因克隆基因表达

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

新疆天山雪莲根部冻土产酶微生物的初步研究

引用

中国农业科技导报 2008年第2期10卷 82-87页

作者：张国华罗会颖陈劲春姚斌北京化工大学生命科学与技术学院北京100029 中国农业科学院饲料研究所北京100081

利用不同培养基对新疆天山雪莲根部冻土微生物进行了分离与培养,通过16S或18S rDNA序列扩增初步鉴定了分离所得微生物,并构建系统发育树。结合选择性培养基进行了产蛋白酶、产甘露聚糖酶、产木聚糖酶、产纤维素酶和产淀粉酶等微生物的... 详细信息

利用不同培养基对新疆天山雪莲根部冻土微生物进行了分离与培养,通过16S或18S rDNA序列扩增初步鉴定了分离所得微生物,并构建系统发育树。结合选择性培养基进行了产蛋白酶、产甘露聚糖酶、产木聚糖酶、产纤维素酶和产淀粉酶等微生物的筛选。结果表明,新疆天山雪莲根部冻土中蕴含着丰富的产酶微生物,分离得到的34株细菌中大部分都能产酶,其中以产淀粉酶为主,部分产纤维素酶、甘露聚糖酶和木聚糖酶。产淀粉酶细菌主要属于Pseudeom onas,Flavobacterium和Arthrobacter等属,产纤维素酶细菌主要属于Pseudeom onas和Arthrobacter等属。分离得到的5株真菌,以产淀粉酶和木聚糖酶为主。

关键词：雪莲根部冻土产酶微生物

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：