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根虫瘟霉原始菌株及转寄主菌株在不同培养条件下胞外蛋白酶的诱导表达特性

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昆虫学报 2006年第6期49卷 924-929页

作者：邓米霞徐均焕浙江大学微生物研究所杭州310058

通过比较根虫瘟霉Zoophthora radicans3个菌株(原始菌株R0、转寄主菌株R1和R5)在不同培养条件下诱导胞外蛋白酶的差异,发现在含昆虫表皮和明胶的培养基中,均能诱导表达高水平的胞外蛋白酶,而在营养缺乏的MS培养基和营养丰富的萨氏培养... 详细信息

通过比较根虫瘟霉Zoophthora radicans3个菌株(原始菌株R0、转寄主菌株R1和R5)在不同培养条件下诱导胞外蛋白酶的差异,发现在含昆虫表皮和明胶的培养基中,均能诱导表达高水平的胞外蛋白酶,而在营养缺乏的MS培养基和营养丰富的萨氏培养基中则胞外蛋白酶的表达水平均很低。37kD的丝氨酸蛋白酶在任何条件下都能被诱导表达,是各菌株中的保守序列所编码的胞外蛋白酶。46kD的金属蛋白酶仅能在含明胶的培养基中被诱导表达,而葡萄糖可抑制其表达。在萨氏培养基中,67kD的蛋白酶条带在转寄主过程中消失了,而46kD的金属蛋白酶条带和117kD的条带随着转寄主传代数增加而明显,表明菌株在转染过程中选择表达了对新寄主具有较高基质特异性的胞外蛋白酶。

关键词：根虫瘟霉转寄主传代胞外蛋白酶基质特异性诱导表达

根虫瘟霉不同菌株对小菜蛾幼虫血淋巴酚氧化酶原的激活作用

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昆虫学报 2004年第4期47卷 434-438页

作者：刘青娥徐均焕冯明光浙江大学微生物研究所

在对小菜蛾Plutellaxylostella幼虫血淋巴酚氧化酶原的存在部位及免疫激活作用特点研究的基础上 ,比较了根虫瘟霉Zoophthoraradicans不同菌株对酚氧化酶原激活系统的免疫激化及防御作用的差异。研究发现 ,酚氧化酶原主要位于小菜蛾幼虫... 详细信息

在对小菜蛾Plutellaxylostella幼虫血淋巴酚氧化酶原的存在部位及免疫激活作用特点研究的基础上 ,比较了根虫瘟霉Zoophthoraradicans不同菌株对酚氧化酶原激活系统的免疫激化及防御作用的差异。研究发现 ,酚氧化酶原主要位于小菜蛾幼虫血细胞膜及血细胞裂解液中 ,极少存在于血浆中。在免疫激活剂昆布多糖存在下 ,分别测得小菜蛾幼虫血细胞碎片、血细胞裂解液和血浆的酚氧化酶活性为 2 6 .80U ,16 .6 8U和 2 .5 3U。酚氧化酶原显著地受血浆和昆布多糖同时存在的激活 ,但两者单独存在时对酚氧化酶原的激活作用较弱。根虫瘟霉菌丝裂解液对酚氧化酶原有不同程度的激活作用 ,其激活作用在有血浆存在时显著增强 ,其酚氧化酶活性可提高 2 .9～ 3.4倍。各菌株间对酚氧化酶原的激活作用则以ARSEF1342菌株最强 ,ARSEF2 6 99和F9910 1菌株次之 ,ARSEF110 0菌株最弱。被激活的酚氧化酶可粘附于根虫瘟霉菌丝上并能产生黑化反应 ,各菌株间酚氧化酶粘附于ARSEF1342菌株的能力最强 ,粘附于ARSEF2 6 99和F9910 1菌株的次之 ,粘附于ARSEF110 0菌株的最弱。但酚氧化酶粘附于昆布多糖的能力显著强于各虫霉菌株 ,表明各菌株在一定程度上能逃避寄主的免疫识别 ;各菌株激活酚氧化酶原及酚氧化酶粘附于菌株强弱 ,与对小菜蛾毒力?

关键词：根虫瘟霉小菜蛾酚氧化酶原酚氧化酶昆虫免疫

根虫瘟霉寄主范围、生物学特性及其应用研究进展

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河南农业科学 2017年第3期46卷 13-19页

作者：胡红岩任相亮姜伟丽马小艳马亚杰马艳中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室河南安阳455000

根虫瘟霉是一种重要的昆虫病原真菌,自然界分布广泛,在农林害虫生物防治中具有广阔的应用前景。系统总结了根虫瘟霉的地理分布和寄主范围,对其生物学特性、田间流行及其影响因子进行了详细阐述,并对根虫瘟霉的应用研究现状及制剂研究最... 详细信息

根虫瘟霉是一种重要的昆虫病原真菌,自然界分布广泛,在农林害虫生物防治中具有广阔的应用前景。系统总结了根虫瘟霉的地理分布和寄主范围,对其生物学特性、田间流行及其影响因子进行了详细阐述,并对根虫瘟霉的应用研究现状及制剂研究最新进展进行综述,探讨了根虫瘟霉制剂研究中存在的问题,为虫霉资源的开发和生物防治应用策略的制定提供理论依据。

关键词：根虫瘟霉生物学特性田间流行种群动态生物防治

根虫瘟霉的生物学特性和对桃蚜致病机理的研究

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根虫瘟霉的生物学特性和对桃蚜致病机理的研究

作者：张海英甘肃农业大学

学位级别：硕士

本文通过对甘肃省部分地区的虫霉菌资源的调查,筛选出了一种对桃蚜侵染力较高的根虫瘟霉菌株(Zryzh),并对其生物学特性、寄主侵染力及侵染机理、与化学农药的相容性等方面进行了研究。获得如下结果: 1. 通过对甘肃省天水,兰州,榆中,天祝... 详细信息

本文通过对甘肃省部分地区的虫霉菌资源的调查,筛选出了一种对桃蚜侵染力较高的根虫瘟霉菌株(Zryzh),并对其生物学特性、寄主侵染力及侵染机理、与化学农药的相容性等方面进行了研究。获得如下结果: 1. 通过对甘肃省天水,兰州,榆中,天祝,永靖等7 个地区虫霉资源的调查研究,共整理出8 种虫霉目真菌,分别隶属于3 科5 属,其中2 种对蚜虫侵染力强,3 种侵染二点叶螨,对它们的鉴别特征、寄主、产地及分离培养的情况进行了详细的描述。2.通过利用8 种虫霉目真菌对蚜虫生物测定的研究,获得了对桃蚜毒力较强的根虫瘟霉菌株Zryzh(在孢子剂量为80.06×103 个孢子/mm2 下蚜虫的死亡率是40.32%),并对其生物学特性进行了系统研究。根虫瘟霉分生孢子萌发的最适温湿度组合为温度20℃、湿度100%,最适生长和产孢的温度为20℃。酸碱度对该菌株有一定的影响,分生孢子萌发的pH 值范围是7.0～10.0,较适应碱性环境,菌落生长和产孢的适宜酸碱度范围为7.0～9.0,紫外线对孢子有很强的杀伤作用。此外,该菌株对光照也有一定要求,明暗交替有利于其生长和产孢。3.本试验采用石蜡切片技术,对根虫瘟霉侵染桃蚜过程的组织病理学进行了研究。通过接种,根虫瘟霉分生孢子首先附着于桃蚜体表,并且在适宜的温湿度条件下,20-24h 后分生孢子萌发侵入寄主体内,大约在36h 内基本完成。在寄主体内菌体以原生质体的形式进行繁殖,之后形成菌丝段并产生菌丝穿透体壁,再次产生孢子,重新侵染其它寄主昆虫。4.采用“孢子浴”方法测定了根虫瘟霉菌株Zryzh 对1～2 龄若蚜的毒力(20℃,12L/12D)。桃蚜在第3d 至第5d 达到死亡高峰,最终累计死亡率为16.19%～82.69%,因剂量而异。经时间-剂量-死亡率模型的模拟分析,测得根虫瘟霉对桃蚜的毒力第3 日到第6 日的LD50分别为263.03、128.82、91.20、75.86 个孢子/mm2,结果表明该根虫瘟霉株具有良好的杀蚜特性。5.研究了根虫瘟霉与化学农药的相容性,为在虫霉菌流行期间合理施用化学农药提供了一定的参考,采用测量菌落直径法和培养皿计数法,研究了23 种农药对根虫瘟霉菌落生长和产孢的影响。结果表明:杀菌剂对根虫瘟霉的生长和产孢影响较大,杀虫剂和除草剂对根虫瘟霉生长和产孢的影响因不同的品种而有差异。10 种杀虫剂中,有5 种杀虫剂的抑菌率达到60%以上,其中溴氰菊酯和啶虫脒2 种药剂的抑菌率较低;敌敌畏对该菌产孢量的影响最大,啶虫脒影响最小。6 种杀菌剂中,除普力克外,其余5 种杀菌剂对该菌均有强烈的抑制性。7 种除草剂中盖草能对菌落生长的抑菌率最高为79.84%,抑菌率最低的是巨星为14.25%;通过产孢量的测定,巨星处理的平板菌落,产孢量最大为14.27×103 个孢子/mm2,而其它药剂处理的平板产孢量都较低。

关键词：虫霉目根虫瘟霉生物学致病机制生物测定化学农药相容性

根虫瘟霉胞外蛋白酶系的诱导表达特性及蛋白酶类型分析

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根虫瘟霉胞外蛋白酶系的诱导表达特性及蛋白酶类型分析

作者：邓米霞浙江大学

学位级别：硕士

胞外蛋白酶是昆虫病原真菌入侵寄主过程中的一个重要毒力因子,在降解昆虫体壁,感染并致死寄主过程中发挥着关键的作用。而胞外蛋白酶具有高度的基质特异性,且极易受底物的诱导调控。本研究将通过对根虫瘟霉(Zoophthora radicans)原始菌... 详细信息

胞外蛋白酶是昆虫病原真菌入侵寄主过程中的一个重要毒力因子,在降解昆虫体壁,感染并致死寄主过程中发挥着关键的作用。而胞外蛋白酶具有高度的基质特异性,且极易受底物的诱导调控。本研究将通过对根虫瘟霉(Zoophthora radicans)原始菌株以及转寄主菌株在不同培养条件下胞外蛋白酶活和电泳酶谱的变化分析,结合采用不同蛋白酶抑制剂对相关胞外蛋白酶类型的鉴定,证实了根虫瘟霉菌株拥有丰富的胞外蛋白酶类型,并能根据外界不同底物对蛋白酶系采取选择性表达。表明菌株在转寄主过程中特异性胞外蛋白酶的消失或诱导表达有可能是针对不同寄主的毒力相关因子。菌株在不同培养条件下表达的胞外蛋白酶活的差异通过对根虫瘟霉原始菌株R、转寄主菌株R和R在不同培养条件下诱导胞外蛋白酶活差异的比较,发现在含昆虫表皮和明胶的培养基中,均能诱导表达高水平的胞外蛋白酶,说明胞外蛋白酶易受外源蛋白的诱导产生;而在营养极度缺乏的MS培养基中,胞外蛋白酶的表达水平均很低。有趣的是,在营养丰富的萨氏培养基中,培养5-15天时根虫瘟霉表达的胞外蛋白酶活水平也很低,而培养30天有所上升,特别是转寄主菌株R表现更为明显,至30天酶活达到最高峰。该现象表明当环境中易用物过于富余时,菌株不会浪费能量去合成暂不需要的酶类。因此,胞外蛋白酶的诱导产生还跟外界营养物的缺乏有关。菌株在不同培养条件下诱导表达的胞外蛋白酶条带分析 37KD的蛋白酶条带在任何条件下都能被诱导表达,是各菌株中的保守序列所编码的胞外蛋白酶。46KD的蛋白酶条带仅能在含明胶的培养基中被诱导表达,而葡萄糖可抑制其表达。在萨氏培养基中,67KD的蛋白酶条带在转寄主过程中消失了,而46KD和117KD的蛋白酶条带随着转寄主传代数增加而明显,表明菌株在转染过程中选择表达了对新寄主具有较高基质特异性的胞外蛋白酶。从转寄主前后胞外蛋白酶诱导表达的差异比较,可以推测67KD的胞外蛋白酶可能是针对原始寄主大菜粉蝶的毒力相关因子,而46KD和117KD的蛋白酶条带则有可能是针对新寄主小菜蛾的毒力相关因子。

关键词：根虫瘟霉胞外蛋白酶丝氨酸蛋白酶金属蛋白酶基质特异性诱导表达转寄主传代

稻纵卷叶螟根虫瘟霉的分离鉴定及其流行病研究

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菌物学报 2012年第3期31卷 322-330页

作者：贾春生洪波韶关学院英东生物工程学院广东韶关512005 韶关学院外事处广东韶关512005

在广东省发现一种新的侵染稻纵卷叶螟幼虫的昆虫病原真菌,经鉴定该病原真菌为根虫瘟霉Zoophthora radicans,这是中国首次报道该菌侵染稻纵卷叶螟。在室内进行的温度和光周期对该菌生长的影响实验表明,该菌在15-25℃均可生长,最适生长温... 详细信息

在广东省发现一种新的侵染稻纵卷叶螟幼虫的昆虫病原真菌,经鉴定该病原真菌为根虫瘟霉Zoophthora radicans,这是中国首次报道该菌侵染稻纵卷叶螟。在室内进行的温度和光周期对该菌生长的影响实验表明,该菌在15-25℃均可生长,最适生长温度为25℃;光周期对菌落生长影响不显著。根虫瘟霉主要侵染稻纵卷叶螟3-5龄幼虫,对3-5龄幼虫的侵染率分别为2.71%、24.32%和72.97%。在10-11月,根虫瘟霉可持续引发稻纵卷叶螟幼虫高强度流行病,侵染率高达95%。该菌以休眠孢子越冬,成为次年稻纵卷叶螟幼虫流行病的初侵染源。因此,根虫瘟霉是稻纵卷叶螟幼虫一种有效的自然控制因子。

关键词：根虫瘟霉温度光周期虫霉目稻纵卷叶螟

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广东省发现小菜蛾根虫瘟霉

植物保护 2010年第3期36卷 113-116页

作者：贾春生韶关学院英东生物工程学院韶关512005

小菜蛾的重要病原真菌根虫瘟霉(Zoophthora radicans)在中国广东省首次被发现,该菌可引起西洋菜田中的小菜蛾种群流行病,寄生率达30%。描述了小菜蛾感染根虫瘟霉的症状及该菌的形态特征。

关键词：小菜蛾根虫瘟霉寄生率初生分生孢子次生分生孢子

十字花科蔬菜蚜虫中根虫瘟霉的发生及其致病性测定

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十字花科蔬菜蚜虫中根虫瘟霉的发生及其致病性测定

大菜粉蝶根虫瘟霉菌株转染小菜蛾后侵染力变化及其与寄主血淋巴酚氧化酶活性的关系

中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会

作者：伍开亮黄志宏华侨大学生物工程与技术系

福建省为低纬丘陵地带,属中南亚热带海洋性季风气候,湿度较大,气温较高,蚜虫寄主植物周年生长,我们针对福建省十字花科蔬菜蚜虫种群中根虫瘟霉(Zoophthoraradicans)的发生进行了调查,发现该虫霉除夏季外,周年均有发生,同时在秋季经常可... 详细信息

福建省为低纬丘陵地带,属中南亚热带海洋性季风气候,湿度较大,气温较高,蚜虫寄主植物周年生长,我们针对福建省十字花科蔬菜蚜虫种群中根虫瘟霉(Zoophthoraradicans)的发生进行了调查,发现该虫霉除夏季外,周年均有发生,同时在秋季经常可在蚜虫种群中导致流行病的发生。2012年12月在福建省邵武市郊区菜地(N:27。20′14.6″;E:117。28′31.2″)中采集到感病桃蚜,分离出一株根虫瘟霉菌株,该菌初生分生孢子无色透明,长椭圆形,有明显的孢颈,大小26.9±2.0μm×9.3±1.0μm,L/D=2.9±0.3。在保湿的条件下,初生分生孢子或可二次弹孢产生同形次生分生孢子,或产生毛管孢子,也可直接萌发。菌丝段棒状、分枝或不规则,直径8.0±0.5μm。分生孢子梗直径7.65±0.7μm,紧密排列成栅栏状。假囊状体细窄,菌丝状,稀少,假根多,密集,从蚜虫腹部体表伸出,末端有典型的盘状固着器。休眠孢子无色透明,直径27.0±1.6μm,壁厚3.1±0.3μm。该菌对桃蚜具有较强的毒力,当接种剂量从0.48个孢子/mm增加到4.4个孢子/mm时,桃蚜的累计死亡率由5.42%增加到89.3%,LD=2.51个孢子/mm。

关键词：根虫瘟霉蚜虫毒力福建

来源： cnki会议评论

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昆虫学报 2004年第5期47卷 567-572页

作者：李娟徐均焕冯明光浙江大学微生物研究所杭州310029

源于大菜粉蝶Pierisbrassicae的根虫瘟霉Zoophthoraradicans菌株R0 通过反复转染小菜蛾Plutellaxylostella而分别获得转染菌株R1 、R3和R5。用这些菌株对小菜蛾 2龄幼虫进行生物测定 ,发现菌株对寄主的侵染力有随转染次数增加而增强的... 详细信息

源于大菜粉蝶Pierisbrassicae的根虫瘟霉Zoophthoraradicans菌株R0 通过反复转染小菜蛾Plutellaxylostella而分别获得转染菌株R1 、R3和R5。用这些菌株对小菜蛾 2龄幼虫进行生物测定 ,发现菌株对寄主的侵染力有随转染次数增加而增强的趋势。接种后第 1～ 6天 ,R0 的LC2 0 (孢子数 mm2 )分别为 14 7、14 5、9 0、7 1、6 0和 5 5 ;R1 的LC2 0 分别为 9 6、5 0、4 2、3 6、3 1和 3 0 ;R3的LC2 0 分别为 4 6、2 9、2 8、2 5、2 4和 2 2 ;R5的LC2 0 分别为 5 2、3 7、3 2、2 8、2 6和 2 6 ,接种后同一天菌株R3的LC2 0 值最小即侵染力最强。各菌株感染小菜蛾幼虫后可显著激活寄主血淋巴中的酚氧化酶活性 ,但R1 、R3和R5对酚氧化酶的激活程度显著低于原始菌株R0 。各菌株对小菜蛾的侵染力强弱指标log1 0 (LC2 0 )与其侵染后寄主血淋巴酚氧化酶活性呈明显正相关 (0 85

关键词：根虫瘟霉小菜蛾寄主转染酚氧化酶活性侵染力