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食品科学 2022年第12期43卷 179-186页

作者：王艳王悦张帅赵宁辛嘉英孙立瑞关桦楠哈尔滨商业大学食品科学与工程重点实验室黑龙江哈尔滨150076

以纳米金(gold nanoparticles,AuNPs)为主体,甲烷氧化菌素(methanobactin,Mb)和黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide,FAD)为配体构建FAD核酸适配体传感器。利用AuNPs颗粒较强的吸附能力,将Mb包裹于纳米颗粒上,形成稳定的Mb-AuNPs结构体。采用滴涂法将Mb-AuNPs结构体修饰于裸金电极表面,借助Mb结构中的—COOH与FAD牢固结合,将FAD引入Mb-AuNPs结构体上,提高对葡萄糖的识别能力,从而构建具备葡萄糖氧化酶活性的新型核酸适配体生物传感器。通过循环伏安法及时间-电流曲线法探讨其应用于葡萄糖检测的可行性。在温度25℃、pH 7.2时,葡萄糖浓度为10~200μmol/L,与该生物传感器的响应电流存在良好的线性关系,R^(2)为0.99791,检出限为4.22×10^(-8) mol/L(R_(SN)=3)。该核酸适配体传感器具有制备简单、价格低廉、易于操作、可快速检测等优点。

关键词：核酸适配体生物传感器葡萄糖氧化酶模拟酶甲烷氧化菌素黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖检测

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玉米赤霉烯酮新型生物传感器检测技术研究进展

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食品与发酵工业 2019年第2期45卷 240-246页

作者：谭红霞马良郭婷陈露刘微谢盛莉西南大学食品科学学院重庆400715

玉米赤霉烯酮是由镰刀菌产生的一种类雌激素样真菌毒素,具有流产和雌激素作用、致畸、致癌性以及神经毒性等,其污染严重影响动物源和植物源性食品及原料的安全。高灵敏、强特异性的基于生物传感器的玉米赤霉烯酮检测方法是近年来新兴的... 详细信息

玉米赤霉烯酮是由镰刀菌产生的一种类雌激素样真菌毒素,具有流产和雌激素作用、致畸、致癌性以及神经毒性等,其污染严重影响动物源和植物源性食品及原料的安全。高灵敏、强特异性的基于生物传感器的玉米赤霉烯酮检测方法是近年来新兴的有效检测手段。结合近4年来国内外相关研究进展,对检测玉米赤霉烯酮类真菌毒素的电化学生物传感器、荧光生物传感器、核酸适配体生物传感器、细胞传感器等各种生物传感器检测技术进行综述,分析其检测的灵敏度、特异性等特性,并对存在的问题和发展方向进行了讨论与展望。

关键词：玉米赤霉烯酮电化学生物传感器荧光生物传感器核酸适配体生物传感器细胞传感器

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基于核酸探针构型转换的生物传感放大技术研究

基于核酸探针构型转换的生物传感放大技术研究

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作者：阳怡锋湖南大学

学位级别：硕士

核酸适体是从人工构建的随机寡核酸文库里筛选出来与配体高效、专一结合的DNA或RNA片段，这种筛选技术称为“指数富集的配体系统进化”(SELEX)。适体能与靶物质进行高度特异性的结合。核酸适体的成功问世，纠正了很久以来关于核酸只是... 详细信息

核酸适体是从人工构建的随机寡核酸文库里筛选出来与配体高效、专一结合的DNA或RNA片段，这种筛选技术称为“指数富集的配体系统进化”(SELEX)。适体能与靶物质进行高度特异性的结合。核酸适体的成功问世，纠正了很久以来关于核酸只是遗传信息存储和转运载体的看法。核酸适体能特异性地结合蛋白质、多肽、有机物、金属离子等多种靶物质。相对于抗体，适体还有特异性高、亲和力好、制备运输简便、目标广泛等优点。正因为适体这些独特的优点，适体作为特异性的分子识别元件被广泛应用于生物传感体系中。核酸适体生物传感器(aptamer sensor)是一种能够连续和可逆地进行分子识别的装置。基本原理为待测物质通过具有分子识别功能的接受器时，固定在接受器上的亲合配基与待测生物分子相互作用的瞬间发生能量转移，经过换能器，以电或光等方式输出，经过电子系统的放大处理和显示，可以对待测物质进行定性定量检测。这些传感体系灵敏、快速、选择性好，但是单纯利用适配体结合靶分子前后引起信号改变的检测方法，在提高灵敏度方面十分有限。为了实现对低浓度的目标物进行高灵敏度检测，我们对传感体系进行了信号放大处理，本论文前两部分内容就是对适体检测体系信号放大方法展开研究，后一部分研究核酸探针HCR放大技术。第二章设计了一种基于KF聚合酶反应的电化学适配体传感器，联合二茂铁功能化寡聚核苷酸，成功地检测了可卡因小分子。可卡因存在时，识别探针改变它的发卡构象，形成三叉复合物。适配体-可卡因复合物3‘端单链部分与捕获探针互补杂交。在聚合酶作用下，以识别探针为模板，以捕获探针为引物进行聚合延长反应。二茂铁标记的dUTP聚合在新合成的互补探针中，达到信号放大的目的。第三章设计了一种无标记，自锁式双功能寡聚核苷酸探针，用于不同的疾病标记物的平行检测。两种基于等温循环链置换聚合反应(CNDP)和循环非核酸目标置换聚合反应(CCDP)的信号放大技术分别用于检测p53基因和PDGF-BB。在目标物存在的情况下，双功能探针与目标物形成一个三叉复合物，解开其中一个茎干的自-互补部分，释放出与引物互补的片段，引发等温聚合取代反应。产生大量的聚合产物，通过双链插入剂SYBR Green I插入双链DNAs，当有单色光源的激发时，能发出放大的荧光，达到信号放大的目的。实验结果证明基于等温聚合取代反应的双功能探针检测体系的有效性，且不需要化学标记，具有设计弹性大、便捷性、简单性和成本低的特点。第四章提出了一种基于HCR放大反应检测DNA单碱基突变的电化学传感器。实验中设计的目标链不仅与捕获探针杂交，而且它的延长部分与引发链互补，引发链能引发HCR放大反应的发生，放大产物上的生物素与标记碱性磷酸酶的链霉亲和素反应，通过测量1-萘基磷酸盐底物酶催化反应后的电化学信号变化，实现对目标DNA的定量检测。实验结果表明该传感器对p53突变基因的检测具有高度的灵敏性，并能够在实际样本中特异性区分错配序列。

关键词：核酸适配体链置换放大检测聚合酶延伸核酸适配体生物传感器荧光光谱分析 HCR放大检测电化学传感器基因突变点分析

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