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血管内皮细胞生长因子受体在子宫内膜异位症中表达的研究

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中华医学杂志 2005年第22期85卷 1555-1559页

作者：王含必郎景和冷金花朱兰刘珠凤孙大为中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科 100730

目的探索血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体(Flt1,KDR)在子宫内膜异位症(简称内异症)患者的异位及在位子宫内膜组织中的定位及表达情况。方法分别采用免疫组化、Western印迹法和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测内异症患者37份在位子宫内膜... 详细信息

目的探索血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体(Flt1,KDR)在子宫内膜异位症(简称内异症)患者的异位及在位子宫内膜组织中的定位及表达情况。方法分别采用免疫组化、Western印迹法和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测内异症患者37份在位子宫内膜组织、34份卵巢子宫内膜异位囊肿组织、15份腹膜红色病变组织、4份腹壁子宫内膜异位灶组织,以33例非内异症患者的在位子宫内膜组织作为对照,比较不同组织中Flt1、KDRmRNA及蛋白的阳性表达率和表达强度的差异。结果Flt1、KDR蛋白质除在血管内皮细胞中表达外,还在子宫内膜的腺细胞和间质细胞中表达。Flt1、KDR在内异症患者子宫内膜的阳性表达率分别为94.3%,91.4%,高于卵巢巧克力囊肿(分别为74.3%,77.1%)两者比较P0.05)的表达率相仿。Flt1、KDR在内异症患者在位子宫内膜组织的核酸水平[吸光度(A)比值]分别为2.4±1.2,3.0±1.4;蛋白质水平灰度值分别为31±17,36±24;同期卵巢巧克力囊肿组织中的核酸水平(A)比值分别为1.5±0.9,1.8±1.0;蛋白质水平灰度值分别为17±6,20±11(P核酸水平(A)比值分别为1.9±0.8,2.3±1.3;蛋白水平灰度值为24±18,25±16(P>0.05)。结论VEGF可能通过子宫内膜细胞上的相应受体而发挥一定的生物学作用。内异症患者的异位子宫内膜中Flt1、KDR的表达可能与血管形成相关。

关键词：子宫内膜异位症血管内皮细胞生长因子受体血管内皮细胞生长因子(VEGF) 表达的研究子宫内膜组织 Western印迹法卵巢子宫内膜异位囊肿卵巢巧克力囊肿逆转录聚合酶链反应 Flt-1 阳性表达率蛋白质水平核酸水平子宫内膜细胞

内质网分子伴侣GRP94在人肺癌组织中的表达及其意义(英文)

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Chinese Medical Journal 2002年第11期115卷 1615-1619,145页

作者：王琪安利佳陈誉华岳世昌大连理工大学生物工程系大连116012

目的　探讨内质网分子伴侣GRP94在核酸和蛋白水平的表达与人肺癌的关系。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、免疫组化方法和 /或Western杂交 ,检测 5 4例肺癌患者癌组织及癌旁正常肺组织GRP94在核酸和蛋白水平的表达。结果　在肺... 详细信息

目的　探讨内质网分子伴侣GRP94在核酸和蛋白水平的表达与人肺癌的关系。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、免疫组化方法和 /或Western杂交 ,检测 5 4例肺癌患者癌组织及癌旁正常肺组织GRP94在核酸和蛋白水平的表达。结果　在肺癌组织及癌旁正常肺组织中均可检测到GRP94的表达 ,但肺癌组织GRP94在核酸和蛋白水平的表达均明显高于癌旁正常肺组织 ,肺癌组织GRP94mRNA相对水平为 3 4 8± 2 0 6 ,GRP94蛋白水平免疫组化染色为 ++ + + + ,Western杂交为 2 5 6 7± 80 6 ;而癌旁正常肺组织GRP94mRNA相对水平为 2 0 1± 1 83,GRP94蛋白水平为 + + +和 10 8 1± 4 2 3,二者存在显著差异 (P 水平高低与肺癌分化程度及临床分期呈明显相关性 ,低分化组明显高于中高分化组 (P <0 0 5 ) ,临床Ⅲ期明显高于临床Ⅰ、Ⅱ期 (P <0 0 5 )。但GRP94的表达与病理类型间未见明显相关性。结论　GRP94的表达与肺癌的发生及发展密切相关。GRP94可能作为一种新的生物标记物以协助判断肺癌的分化程度和临床分期。

关键词：内质网分子伴侣 CRP94 肺癌核酸水平蛋白水平

伤寒沙门菌耐药质粒pR_(ST98) spv毒力基因的研究

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中华检验医学杂志 2005年第5期28卷 519-521页

作者：黄瑞焦旸祁小飞张学光苏州大学医学院微生物学教研室 215007 苏州大学生命科学院

目的　研究多重耐药伤寒沙门菌耐药质粒pRST98是否具有沙门菌属中其他致病菌毒力质粒上的高度保守基因——spv,并对扩增的spv基因进行克隆及核酸序列测定。方法　对已确定能增强细菌毒力表型的耐药质粒pRST98,用spv基因特异引物进行PCR... 详细信息

目的　研究多重耐药伤寒沙门菌耐药质粒pRST98是否具有沙门菌属中其他致病菌毒力质粒上的高度保守基因——spv,并对扩增的spv基因进行克隆及核酸序列测定。方法　对已确定能增强细菌毒力表型的耐药质粒pRST98,用spv基因特异引物进行PCR扩增和SPV探针的Southerblot分析,并将扩增到的spv基因片段装入克隆载体pGEM TEASY进行测序。结果　PCR和Southernblot结果显示,伤寒沙门菌耐药质粒pRST98上亦存在spv基因的同源序列spvR和spvB,其ORF分别为894bp和1 776bp,与鼠伤寒沙门菌毒力质粒上spv基因的同源性超过99%。结论　本研究从核酸水平首次证实伤寒沙门菌耐药质粒pRST98具有多效性,是既编码细菌抗药性又编码细菌毒力的“嵌合型”质粒。

关键词：质粒pRST98 毒力基因 Southern spv基因 pGEM-T 鼠伤寒沙门菌毒力质粒 blot PCR扩增细菌抗药性保守基因沙门菌属多重耐药序列测定毒力表型特异引物克隆载体基因片段同源序列核酸水平细菌毒力致病菌 SPV 同源性

大鼠系膜细胞中碱性调宁蛋白h1和转化生长因子β1的表达及其相互关系

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中华肾脏病杂志 2005年第4期21卷 213-217页

作者：李慧蒋涛杨静车琪赵仲华张秀荣张农复旦大学上海医学院病理学系上海200032

目的探讨大鼠系膜细胞(MsC)中碱性调宁蛋白(calponin)h1与TGF-β1的表达及其相互关系。方法制备大鼠抗thy-1系膜增生性肾炎模型(ATG)。应用免疫组织化学ABC 法、Western印迹、RT-PCR等方法分别从蛋白和核酸水平检测calponin h1和TGF-... 详细信息

目的探讨大鼠系膜细胞(MsC)中碱性调宁蛋白(calponin)h1与TGF-β1的表达及其相互关系。方法制备大鼠抗thy-1系膜增生性肾炎模型(ATG)。应用免疫组织化学ABC 法、Western印迹、RT-PCR等方法分别从蛋白和核酸水平检测calponin h1和TGF-β1在肾炎模型第1、3、5、7、14、21、28天组织中的表达:采用细胞免疫化学和细胞免疫荧光法检测培养大鼠 MsC中calponin h1的表达;应用Western印迹和RT-PCR的方法观察精氨酸和乙醇分别孵育后大鼠MsC中calponin h1和TGF-β1的表达变化。结果与少量表达calponin h1和不表达TGF-β1 的正常组比,肾炎3 d组至14 d组calponin h1表达明显增强,7 d组至28 d组TGF-β1表达显著增强(P<0.05)。calponin h1表达定位于大鼠MsC胞浆内。精氨酸作用后大鼠MsC TGF-β1表达增强,calponin h1表达减弱;乙醇作用后大鼠MsC表达calponin h1升高,表达TGF-β1降低。结论 ATG大鼠MsC中calponin h1表达在肾小球病变早期增强.后期减弱;而TGF-β1表达则在肾小球病变中晚期显著增强。calponin h1可能具有负反馈调节TGF-β1表达的作用。

关键词：转化生长因子β1 相互关系调宁蛋白系膜细胞表达及 h1 大鼠 calponin Western印迹 TGF-β1表达碱性免疫组织化学ABC法 RT-PCR 肾小球病变细胞免疫化学肾炎模型 MsC 系膜增生性 thy-1 免疫荧光法负反馈调节核酸水平

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分子生物学治疗方法及其在颅脑创伤中的应用

人民军医 2000年第11期43卷 642-644页

作者：杨新宇天津医科大学总医院