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巨噬细胞移动抑制因子在大鼠坐骨神经损伤后表达的变化

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复旦学报（医学版） 2003年第1期30卷 34-37页

作者：陈云苏陈峥嵘阎作勤蒋淳复旦大学附属中山医院骨科上海200032

目的　研究巨噬细胞移动抑制因子 (MIF)在大鼠周围神经损伤后的表达变化 ,探讨MIF在周围神经损伤后再生中的作用。方法　通过核酸印迹杂交的方法了解MIF在神经损伤后表达的变化 ,并对损伤后 4d的神经进行免疫组化分析 ,观察其表达部位... 详细信息

目的　研究巨噬细胞移动抑制因子 (MIF)在大鼠周围神经损伤后的表达变化 ,探讨MIF在周围神经损伤后再生中的作用。方法　通过核酸印迹杂交的方法了解MIF在神经损伤后表达的变化 ,并对损伤后 4d的神经进行免疫组化分析 ,观察其表达部位的改变。结果　①MIF在神经损伤后出现空间和时间上的动态变化。在神经损伤后 4d ,其MIF表达的部位与正常坐骨神经表达的部位不同。在神经损伤的远端 ,MIF存在于吞饮髓鞘碎片的雪旺细胞中。而在损伤神经的近端 ,MIF不仅存在于雪旺细胞中 ,同时在轴突内也有较高水平。②对神经损伤后MIFmRNA的杂交定量分析显示 ,在损伤后的 12h内 ,MIF的mRNA水平维持在较低水平 ,2 4h后骤然上升至高水平并在 1周内维持较高水平 ,之后回落至正常水平。结论　MIF在周围神经损伤

关键词：巨噬细胞移动抑制因子大鼠免疫组化核酸印迹杂交周围神经损伤神经再生

中国脑膜炎奈瑟菌中插入序列1301的分布与分子流行病学研究

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中华流行病学杂志 2009年第5期30卷 475-480页

作者：庞杏林侯配斌高源徐丽任红宇朱兵清周海健邵祝军广州市疾病预防控制中心 510080 山东省疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室

目的研究中国脑膜炎奈瑟菌（Nm）中插入序列IS1301的分布与分子流行病学特征。方法设计IS1301引物，应用PCR方法检测2007年1月至2008年10月收集全国16个省、市、自治区219株Nm菌株的IS1301，对IS1301扩增产物进行DNA测序和序列比对，PC... 详细信息

目的研究中国脑膜炎奈瑟菌（Nm）中插入序列IS1301的分布与分子流行病学特征。方法设计IS1301引物，应用PCR方法检测2007年1月至2008年10月收集全国16个省、市、自治区219株Nm菌株的IS1301，对IS1301扩增产物进行DNA测序和序列比对，PCR扩增IS1301阳性菌株进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析及核酸印迹杂交，研究不同Nm菌株中IS1301的分布特征。结果219株Nm菌株中，34株携带IS1301（15．53％），A、B、C群和不可分群的Nm菌株IS1301阳性率分别为11．11％、20．75％、6．17％和28．57％；IS1301扩增产物测序结果与GenBank登记编号Z49092．1的Nm菌株序列相似度为94％～100％，进化树分析可分为两簇；C群Nm菌株与其他血清群菌株IS1301序列存在较大差别；研究的Nm菌株基因组中至少存在6～17个IS1301拷贝，相同PFGE带型Nm菌株所携带的IS1301拷贝数具有多态性特征。结论IS1301在中国Nm菌株中的分布具有遗传多态性。

关键词：脑膜炎奈瑟菌插入序列IS1301 脉冲场凝胶电泳核酸印迹杂交

蛋白酶体-C2亚基基因在烫伤脓毒症大鼠心肌内的表达及意义

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中国危重病急救医学 2005年第4期17卷 200-202页

作者：申传安柴家科姚咏明盛志勇蒋金珩解放军总医院第三○四临床部烧伤研究所北京100037 浙江省金华市中心医院 321000

目的　探讨烧伤脓毒症时动物心肌内蛋白酶体核心亚基C2亚基m RNA表达及蛋白降解的变化及意义。方法　雄性Wistar大鼠4 5只,随机分为烫伤组、脓毒症组及对照组。烫伤组大鼠使用沸水致背部30 %总体表面积度烫伤;脓毒症组大鼠用同样方法... 详细信息

目的　探讨烧伤脓毒症时动物心肌内蛋白酶体核心亚基C2亚基m RNA表达及蛋白降解的变化及意义。方法　雄性Wistar大鼠4 5只,随机分为烫伤组、脓毒症组及对照组。烫伤组大鼠使用沸水致背部30 %总体表面积度烫伤;脓毒症组大鼠用同样方法烫伤后,立即腹腔注射内毒素(6 m g/ kg)制成烫伤脓毒症大鼠模型。通过高效液相荧光法检测心肌内三甲基组氨酸(3MH)的含量,用核糖核酸印迹杂交(Northern杂交)检测心肌内蛋白酶体C2亚基m RNA表达的变化。结果　脓毒症大鼠烫伤后2 h和6 h,单位心肌内3MH含量较对照组和烫伤组均显著升高(P均0 .0 5 ) ,而伤后6 h较对照组显著升高(P<0 .0 1)。脓毒症大鼠伤后2 h和6 h心肌内蛋白酶体C2亚基m RNA表达较对照组和烫伤组均显著升高(P均<0 .0 1) ,烫伤组大鼠伤后2 h和6 h较对照组也均显著升高(P均<0 .0 1)。结论　严重烫伤特别是合并内毒素攻击后,早期动物心肌细胞内泛素蛋白酶体途径活性呈持续增强现象,蛋白降解率显著增加。这可能是烧伤脓毒症时心功能异常的蛋白代谢机制。

关键词：蛋白酶体心肌内表达及亚基基因 Northern杂交 Wistar大鼠高效液相-荧光法 mRNA表达烧伤脓毒症三甲基组氨酸核酸印迹杂交对照组内毒素攻击心肌细胞内蛋白降解率心功能异常 Ⅲ度烫伤体表面积大鼠模型腹腔注射

微生物分子生态技术:16S rRNA/DNA方法

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微生物学通报 2003年第2期30卷 97-101页

作者：张彤方汉平香港大学土木工程系环境工程中心环境生物技术实验室

综述了以 1 6SrRNA/DNA为基础的分子生物学技术在环境微生物种群分析中的应用 ,目的是使相关的科研人员能够对 1 6SrRNA/DNA技术有一个比较完整的了解 ,并可以开展初步的实验工作。主要内容包括 :DNA指纹技术、 1 6SrDNA文库的建立、DN... 详细信息

综述了以 1 6SrRNA/DNA为基础的分子生物学技术在环境微生物种群分析中的应用 ,目的是使相关的科研人员能够对 1 6SrRNA/DNA技术有一个比较完整的了解 ,并可以开展初步的实验工作。主要内容包括 :DNA指纹技术、 1 6SrDNA文库的建立、DNA测序及微生物分类鉴定 (即系统发育树分析 )、基因探针设计和测试。

关键词：微生物分子生态技术 16SrRNA/DNA方法环境微生物种群分析 DP4A指纹技术系统发育树荧光原位杂交核酸印迹杂交

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生物芯片技术的原理

山东医药 2005年第26期45卷 69-71页

作者：韩金祥山东省医药生物技术研究中心山东济南250062

生物芯片(biochip)技术是90年代中期以来影响最深远的重大科技进展之一,是融微电子学、生物学、物理学、化学、计算机科学为一体的高度交叉的新技术,具有重大的基础研究价值及明显的产业化前景。该技术可将大量探针同时固定于支持物上,... 详细信息

生物芯片(biochip)技术是90年代中期以来影响最深远的重大科技进展之一,是融微电子学、生物学、物理学、化学、计算机科学为一体的高度交叉的新技术,具有重大的基础研究价值及明显的产业化前景。该技术可将大量探针同时固定于支持物上,一次可以对大量的生物分子进行检测分析,从而弥补传统核酸印迹杂交(SouthernBlotting和NorthernBlot-ting等)技术复杂、自动化程度低、检测目的分子数量少、低通量等不足。而且,通过设计不同的探针阵列、使用特定的分析方法可使该技术具有多种应用价值,如基因表达谱测定、突变检测、多态性分析、基因组文库作图及杂交测序(SBH)等,为“后基因组计划”时期基因功能的研究及现代医学科学及医学诊断学的发展提供强有力的工具,有助于在新基因的发现、基因诊断、药物筛选、给药个性化等方面取得重大突破,为整个人类社会带来深刻广泛的变革。

关键词：生物芯片技术 Blotting Northern 原理核酸印迹杂交检测分析计算机科学自动化程度基因表达谱

抑癌基因ARHI与子宫内膜异位症相关性研究

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抑癌基因ARHI与子宫内膜异位症相关性研究

作者：汪淑娟中国人民解放军军医进修学院

学位级别：硕士

目的：研究抑癌基因ARHI mRNA与蛋白在正常子宫内膜组织、子宫内膜异位症在位内膜、异位内膜组织中的表达，探讨抑癌基因ARHI与子宫内膜异位症的发病及进展之间的相关性。材料与方法： 1．选取2005年6-12月间在解放军总医院妇产科行... 详细信息

目的：研究抑癌基因ARHI mRNA与蛋白在正常子宫内膜组织、子宫内膜异位症在位内膜、异位内膜组织中的表达，探讨抑癌基因ARHI与子宫内膜异位症的发病及进展之间的相关性。材料与方法： 1．选取2005年6-12月间在解放军总医院妇产科行诊断性子宫内膜刮除术患者23例。其中增殖期子宫内膜12例，分泌期子宫内膜11例。以地高辛标记的单链DNA探针，采用Northern印迹杂交的方法，检测ARHI mRNA的表达情况，化学发光法检测杂交结果，X光片暗室曝光。测量X光片上各条带的灰度值，比较正常子宫内膜组织中ARHI mRNA在月经周期不同阶段表达水平的变化情况，并分析ARHI mRNA水平与年龄的相关性。 2．选取2005年8-12月我院妇产科行腹腔镜手术患者30例，分为EMs在位内膜组、EMs异位内膜组及正常子宫内膜组(对照组，因不孕或其它妇科良性疾病而手术)，每组10例。以抗ARHI单克隆抗体采用Western免疫印迹的方法检测组织中ARHI蛋白的表达，用Array 3000扫描仪扫描X光片，观察Western blot结果，用GDS8000型凝胶成像分析系统分析图片的灰度值和比值。结果： 1．在正常子宫内膜组织中存在ARHI mRNA的普遍表达，无一例出现表达缺失;*** mRNA在分泌期子宫内膜的水平低于增殖期内膜，统计学分析无显著性差异(P＞0.05)，且ARHI水平与年龄无明显相关;***蛋白在内异症患者在位内膜中的表达水平低于正常子宫内膜，但无显著性差异(P＞0.05);***蛋白在内异症患者的异位内膜中表达水平高于在位内膜和正常子宫内膜组织，差异有显著性(p＜0.001)。结论： 1．抑癌基因ARAHI在正常子宫内膜组织和内异症患者内膜组织中普遍表达，且其表达水平与月经周期和年龄无明显相关。 ***基因在内异症患者的在位内膜表达低于正常子宫内膜，可能与其在异位的种植能力增强有关。 ***基因在内异症患者的异位内膜呈高表达，提示其与内异症发病及进展可能相关。 4．在卵巢恶性肿瘤中常出现ARHI表达缺失，提示ARHI表达下降可能为内异症恶变的机制之一，可为内异症的基因诊断与治疗提供新的靶点。

关键词： ARHI基因子宫内膜异位症蛋白免疫印迹核酸印迹杂交