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抗组织相容性复合物Ⅱ类分子转录激活因子核糖核酸酶P的切割活性

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中华肝脏病杂志 2003年第12期11卷 745-748页

作者：郭荣邹萍吴树山曹谊林陆华中范华骅高峰协和医院血液病研究所武汉430022 河南省淮滨县医院外科上海市组织工程研究与开发中心上海市血液中心血液工程研究室

目的研究抗组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类分子转录激活因子(CⅡTA)核糖核酸酶P(RNaseP)抑制肝细胞表面MHC Ⅱ分子的表达。方法 M1—RNA是RNaseP的催化活性单位,设计并克隆针对C Ⅱ TA第629位点的M1-RNA(M1—629—GS)及其对应的C Ⅱ TA靶序... 详细信息

目的研究抗组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类分子转录激活因子(CⅡTA)核糖核酸酶P(RNaseP)抑制肝细胞表面MHC Ⅱ分子的表达。方法 M1—RNA是RNaseP的催化活性单位,设计并克隆针对C Ⅱ TA第629位点的M1-RNA(M1—629—GS)及其对应的C Ⅱ TA靶序列,分别插入腺相关病毒载体psNAV(psNAV—M1—629-GS)及pGEM—7zf(+)载体(pGEM—629),进行体外转录和切割反应鉴定其活性。通过纳米载体介导psNAV—M1—629—GS稳定转染人胎肝细胞,流式细胞术检测MHC Ⅱ类抗原表达,逆转录聚合酶链反应检测CⅡTA mRNA水平。结果 M1—629—GS与pGEM—800体外切割产物电泳见预期切割条带(553 nt和176 nt)。psNAV—M1—629—GS^+肝细胞表面人白细胞抗原(HLA)—DR、DP、DQ的诱导型表达分别为(1.01±0.51)％、(4.37±1.28)％、(1.98±0.42)％,对照组psNAV-M1—452-GS^+分别为(10.81±3.09)％、(40.12±2.60)％、(5.71±0.11)％,两组比较分别下调90.65％、89.11％及65.32％;psNAV—M1-629一GS^+克隆诱导型CⅡTA mRNA与β-actin比值为0.94±0.25,空载体组比值为2.30±0.49,M1—629—GS可明显下调C Ⅱ TA mRNA含量(t=5.56,P核酸药物。

关键词：肝移植核糖核酸酶类组织相容性抗原排斥反应流式细胞术核酸药物

核糖核酸酶抑制因子对四氯化碳诱发小鼠肝脏损伤的保护作用

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中华肝脏病杂志 2003年第4期11卷 248-249页

作者：傅攀峰潘东宁王红崔秀云大连医科大学生物化学教研室大连116027

核糖核酸酶抑制因子(RI),是RNA酶的体内抑制剂,广泛存在于哺乳动物细胞内[1],RI分子中半胱氨酸的氧化还原状态,直接影响到其结合与抑制RNA酶的活性[2].根据以往的研究[3],试图证明核糖核酸酶抑制因子是否在体内具有抵抗过氧化损伤的作用... 详细信息

核糖核酸酶抑制因子(RI),是RNA酶的体内抑制剂,广泛存在于哺乳动物细胞内[1],RI分子中半胱氨酸的氧化还原状态,直接影响到其结合与抑制RNA酶的活性[2].根据以往的研究[3],试图证明核糖核酸酶抑制因子是否在体内具有抵抗过氧化损伤的作用,并试图阐明其抗氧化损伤的机制.

关键词：保护作用核糖核酸酶类四氯化碳肝损伤

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耐核糖核酸酶病毒样颗粒的构建和表达

中华检验医学杂志 2003年第2期26卷 86-88页

作者：李金明宋如俊王露楠邓巍卫生部北京医院卫生部临床检验中心100730

目的　为耐核糖核酸酶 (RNase)的RNA标准品和质控品的表达制备提供 1个通用载体平台。方法　将MS2 噬菌体基因组中成熟酶蛋白和包膜蛋白基因编码序列的 1 7kbcDNA目的片段 ,用HindⅢ和EcoRⅠ酶切后 ,用于相同内切酶酶切的表达载体质粒pE... 详细信息

目的　为耐核糖核酸酶 (RNase)的RNA标准品和质控品的表达制备提供 1个通用载体平台。方法　将MS2 噬菌体基因组中成熟酶蛋白和包膜蛋白基因编码序列的 1 7kbcDNA目的片段 ,用HindⅢ和EcoRⅠ酶切后 ,用于相同内切酶酶切的表达载体质粒pET2 8b中 ,并在T4 DNA连接酶的存在下连接 ,构建一新的表达载体pINCCL ,再转化BL2 1 DE3E Coli进行原核表达。结果　成功构建出新的表达载体pINCCL ,经原核表达为耐RNase的病毒样颗粒。结论　本研究得到的pINCCL表达载体及原核表达系统 ,可作为 1个耐RNase的RNA标准品与质控品的构建和制备表达通用载体平台 ,以促进有关标准品和质控品的研究。

关键词：核糖核酸噬菌体核糖核酸酶类原核表达

miR-5011-5p对膀胱癌细胞系J82凋亡和迁移的影响及机制研究

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中国基层医药 2022年第9期29卷 1345-1348页

作者：王蕾黄耿叶志华姜卫东柯霓鄂东医疗集团黄石市中心医院湖北理工学院附属医院超声影像科黄石435000 鄂东医疗集团黄石市中心医院湖北理工学院附属医院泌尿外科黄石435000

目的观察miR-5011-5p对膀胱癌细胞系J82凋亡和迁移的影响并探讨可能的作用机制。方法以J82细胞为研究对象,分别转染随机序列分子(NC组)和miR-5011-5p序列分子(miR-5011-5p组)。通过流式细胞术和划痕实验分析miR-5011-5p对J82细胞凋亡和... 详细信息

目的观察miR-5011-5p对膀胱癌细胞系J82凋亡和迁移的影响并探讨可能的作用机制。方法以J82细胞为研究对象,分别转染随机序列分子(NC组)和miR-5011-5p序列分子(miR-5011-5p组)。通过流式细胞术和划痕实验分析miR-5011-5p对J82细胞凋亡和迁移的影响,通过生物信息学预测miR-5011-5p的靶基因,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Western blot分别检测miR-5011-5p对靶基因表达的影响。结果miR-5011-5p组J82细胞中miR-5011-5p相对表达量为10.73±1.67,显著高于NC组的1.04±0.16(t=5.81,P<0.01)。NC组、miR-5011-5p组J82细胞凋亡率分别为(8.83±1.67)%、(34.96±3.80)%,差异有统计学意义(t=6.30,P<0.01)。NC组、miR-5011-5p组J82细胞迁移率分别为(71.31±7.69)%、(37.43±5.01)%,差异有统计学意义(t=3.69,P<0.05)。miR-5011-5p的靶基因可能是Yes相关蛋白1(YAP1)。与NC组相比,miR-5011-5p对J82细胞YAP1表达具有显著抑制效应(P<0.01)。结论miR-5011-5p可能通过靶向抑制YAP1基因表达,促进膀胱癌J82细胞的凋亡并抑制其迁移。

关键词：膀胱肿瘤核糖核酸酶类非编码RNA 微小RNA 肿瘤转移细胞凋亡细胞迁移肿瘤细胞培养的

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抗肿瘤核糖核酸酶研究进展

国外医学（肿瘤学分册） 2005年第9期32卷 650-653页

作者：王瑾徐瑞南克俊西安交通大学第一医院肿瘤内科 710061

核糖核酸酶(RNase)是一类广泛存在于动植物体内的核酸水解酶,近年来一系列研究表明核糖核酸酶及其结构类似物具有抗肿瘤活性,通过破坏RNA发挥抗肿瘤作用。有一些因素决定RNase的细胞毒性,了解这些因素有助于改造Rnase,以增强其细胞毒性... 详细信息

核糖核酸酶(RNase)是一类广泛存在于动植物体内的核酸水解酶,近年来一系列研究表明核糖核酸酶及其结构类似物具有抗肿瘤活性,通过破坏RNA发挥抗肿瘤作用。有一些因素决定RNase的细胞毒性,了解这些因素有助于改造Rnase,以增强其细胞毒性,更好地发挥抗肿瘤治疗作用。RNase的研究为临床治疗肿瘤提供了新的前景,有望成为一类新型的抗肿瘤药物。

关键词：核糖核酸酶类抗肿瘤药细胞毒素类

竞争性内源RNA及其调控网络在皮肤病理性瘢痕中的作用研究进展

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中华烧伤杂志 2019年第9期35卷 701-704页

作者：李敏刘德伍雷弯南昌大学第一附属医院妇产科 330006 南昌大学第一附属医院烧伤科 330006 南昌大学第一附属医院科技处 330006

皮肤病理性瘢痕是一组以成纤维细胞异常增殖、细胞外基质过度沉积为组织学特点的皮肤纤维增生性疾病,发生发展机制不清是制约其诊疗的重要原因。近年来研究证实,微小RNA在病理性瘢痕的调控机制中发挥着重要作用。竞争性内源RNA(ceRNA)... 详细信息

皮肤病理性瘢痕是一组以成纤维细胞异常增殖、细胞外基质过度沉积为组织学特点的皮肤纤维增生性疾病,发生发展机制不清是制约其诊疗的重要原因。近年来研究证实,微小RNA在病理性瘢痕的调控机制中发挥着重要作用。竞争性内源RNA(ceRNA)由于拥有微小RNA应答元件,可通过海绵吸附作用竞争性结合微小RNA,实现RNA间的相互调节,从而调控靶基因的表达,参与疾病的发展过程。本文从ceRNA假说入手,对ceRNA在皮肤病理性瘢痕发生发展机制中的生物学功能及临床意义进行系统综述,探讨ceRNA及RNA-微小RNA-RNA调节网络在皮肤病理性瘢痕中的作用。ceRNA治疗可能成为未来RNA治疗皮肤瘢痕性疾病的新模式。

关键词：核糖核酸酶类瘢痕竞争性内源核糖核酸

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核糖核酸酶的抗肿瘤研究进展

国外医学（生理病理科学与临床分册） 2003年第1期23卷 67-69页

作者：付勇第四军医大学基础部病理学教研室陕西西安710032

核糖核酸酶〔ribonuclease ,RNase〕是一类能够特异性切割RNA的酶 ,既有催化活性 ,又有细胞毒性。它们的生物学活性由激动剂和抑制剂所控制。迄今为止 ,已分离纯化出多种不同种类的RNase ,并对其结构和功能进行了深入的研究。研究表明 ... 详细信息

核糖核酸酶〔ribonuclease ,RNase〕是一类能够特异性切割RNA的酶 ,既有催化活性 ,又有细胞毒性。它们的生物学活性由激动剂和抑制剂所控制。迄今为止 ,已分离纯化出多种不同种类的RNase ,并对其结构和功能进行了深入的研究。研究表明 ,其中BS RNase、Onconase和RC RNase等具有抗肿瘤作用 ,可作为细胞毒素进入肿瘤细胞 ,抑制肿瘤细胞的生长 ,因此RNase的研究为临床治疗肿瘤提供了新的前景。

关键词：研究进展核糖核酸酶类血管生成因子抗肿瘤药

血清微小RNA-1和微小RNA-155表达与急性脑梗死患者疾病程度和预后的关系

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中国基层医药 2021年第12期28卷 1824-1830页

作者：赵江徐小辉何金峰汪立松台州市立医院神经内科浙江省318000 温岭人民医院神经内科浙江省317500

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清微小RNA-1(miR-1)和微小RNA-155(miR-155)的表达与ACI疾病程度及预后的关系。方法选取台州市立医院2018年4月至2019年8月收治的ACI患者173例为研究组,并根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为... 详细信息

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清微小RNA-1(miR-1)和微小RNA-155(miR-155)的表达与ACI疾病程度及预后的关系。方法选取台州市立医院2018年4月至2019年8月收治的ACI患者173例为研究组,并根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻度组(78例)、中度组(54例)、重度组(41例)三个亚组。同期选取体检健康者180例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测所有受试者血清miR-1和miR-155表达水平。根据90 d内患者改良Rankin量表(mRS)评分将患者分为预后不良与预后良好组。评估血清miR-1和miR-155表达对ACI预后的预测效能以及ACI不良预后的危险因素。结果研究组高血压史[56.65%(98/173)]、收缩压[(134.02±27.35)mmHg]、舒张压[(88.45±9.52)mmHg]、总胆固醇[(3.78±0.82)mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇[(2.08±0.73)mmol/L]、血清miR-1(2.07±0.37)和miR-155(1.56±0.32)表达水平均显著高于对照组[39.44%(71/180)、(119.37±22.14)mmHg、(81.46±14.13)mmHg、(3.59±0.68)mmol/L、(1.74±0.69)mmol/L、(1.01±0.22)、(1.02±0.24)],高密度脂蛋白胆固醇[(1.24±0.22)mmol/L]显著低于对照组[(1.31±0.26)mmol/L],差异均有统计学意义(χ^(2)=10.462,t=5.542、5.429、2.373、4.498、32.865、17.982、2.725,均P<0.05);随着疾病程度的增加,ACI患者血清miR-1、miR-155表达水平逐渐升高(t=10.212、13.050、3.092、7.027、3.983、4.099,均P<0.05);预后不良组高血压史[64.47%(49/76)]显著高于预后良好组[42.27%(41/97)](χ^(2)=8.419,P<0.05),收缩压[(136.51±12.56)mmHg]、舒张压[(89.53±6.65)mmHg]、NIHSS评分[(7.26±0.58)分]、血清miR-1(1.32±0.15)、miR-155(1.21±0.12)表达水平均显著高于预后良好组[42.27%(41/97)、(132.19±9.32)mmHg、(86.34±5.62)mmHg、(6.44±0.62)分、(1.01±0.07)、(0.99±0.05)](t=2.597、3.418、8.880、10.695、4.633,均P<0.05);受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析结果表明血清miR-1和miR-155表达预测ACI预后的曲线下面积(AUC)分别为0.814(95%CI:0.745~0.884)、0.839(95%CI:0.780~0.897),二者联合对预测ACI预后的AUC为0.944(95%CI:0.912~0.976);logistic回归分析表明入院NIHSS评分、miR-1与miR-155升高是ACI预后不良的危险因素(P<0.05)。结论 miR-1和miR-155表达水平与ACI患者疾病严重程度有关,可能是ACI预后不良的预测指标。

关键词：脑梗死卒中核糖核酸酶类基因表达高血压胆固醇预后疾病严重程度指数

LncRNA-MIAT在肿瘤坏死因子α介导的血管内皮细胞炎症中的表达及作用

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中国循环杂志 2017年第6期32卷 607-611页

作者：任成龙张璐宁险峰赵青蔡尚郎张文忠青岛大学附属医院心内科山东省青岛市266003 青岛大学附属医院中心实验室山东省青岛市266003

目的:体外观察血管内皮细胞(ECs)在肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激下,细胞内长链非编码核糖核酸(LncR NA)心肌梗死相关转录本(LncR NA-MIAT)的表达变化,并探讨LncR NA-MIAT对ECs炎症的调控作用。方法:以TNF-α诱导ECs表达LncR NA-MIAT,采... 详细信息

目的:体外观察血管内皮细胞(ECs)在肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激下,细胞内长链非编码核糖核酸(LncR NA)心肌梗死相关转录本(LncR NA-MIAT)的表达变化,并探讨LncR NA-MIAT对ECs炎症的调控作用。方法:以TNF-α诱导ECs表达LncR NA-MIAT,采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)、聚合酶链反应(PCR)及实时荧光定量PCR(qR T-PCR)方法分别检测ECs炎症状态下细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和LncR NA-MIAT的表达情况。应用MIAT小干扰核糖核酸(siR NAMIAT)转染ECs细胞,观察LncR NA-MIAT敲低对ICAM-1表达的影响。结果:Lnc RNA-MIAT随着TNF-α刺激时间的延长与浓度的增高呈上升趋势,刺激24 h、48 h分别与刺激0 h、6 h、12 h比较,Lnc RNA-MIAT表达量均增多,差异均具有统计学意义(P<0.05);TNF-α刺激浓度为1.000 ng/ml、10.000 ng/ml分别与刺激浓度为0.000 ng/ml、0.125 ng/ml比较,LncR NA-MIAT表达量增多,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。ECs经siR NAMIAT转染后,TNF-α诱导的ICAM-1蛋白表达被显著抑制(P<0.05)。结论:LncR NA-MIAT可能参与血管ECs的炎症反应,并可能起到促炎作用。

关键词：核糖核酸酶类肿瘤坏死因子α 细胞间黏附分子-1