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作者：赵丽娟西北农林科技大学

学位级别：硕士

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起,以仔猪呼吸系统疾病和妊娠母猪的繁殖障碍为特征,给世界各地的养猪业带来巨大损失。然而,PRRSV的具体致病机制和免疫机理尚不明确,因此抗PRRSV的相关研究具有意义。此前课题组研究发现,增强血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达能显著抑制PRRSV在易感细胞中的复制,但其具体作用机制尚不明确。本研究拟从HO-1基因启动子的转录因子核因子-红细胞-2相关因子(Nuclear factor-erythroid-2-related factor 2,Nrf-2)对HO-1基因表达影响的角度出发,进而探究Nrf-2在PRRSV感染中的作用。本研究的主要工作和结果如下:***-2与HO-1启动子结合促进其表达双荧光素酶活性检测定点突变Nrf-2位点的质粒转染HO-1启动子活性显著下降;增强Nrf-2表达处理后HO-1启动子活性显著上升,HO-1的m RNA及蛋白表达也显著上调。表明:HO-1核心启动子区(-2065～-2021)44 bp区间荧光素酶活性较高,并含有Nrf-2的结合位点,Nrf-2能与HO-1启动子区结合并促进其表达。***-2抑制PRRSV对靶细胞的感染利用慢病毒系统介导的过表达Nrf-2和t BHQ增强Nrf-2表达与si RNA敲低基础水平Nrf-2表达探究Nrf-2在PRRSV感染中的作用。感染病毒后检测病毒对细胞感染情况,结果显示:上调Nrf-2表达抑制PRRSV对细胞的感染;敲低Nrf-2表达后促进了PRRSV对易感细胞的的感染,说明Nrf-2对PRRSV感染具有抑制作用。综上所述,增强Nrf-2表达促进HO-1的表达,进而在PRRSV感染过程中发挥了显著地抗病毒作用,对受PRRSV感染的宿主细胞发挥了有益的保护作用。因此推测诱导Nrf-2表达或过表达Nrf-2是预防和控制PRRSV感染的有效途径。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核因子-红细胞-2相关因子2 血红素加氧酶-1 转录调控抑制作用

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丹酚酸B对2型糖尿病小鼠心肌病氧化应激的作用及机制

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贵州医科大学学报 2024年第8期49卷 1093-1109页

作者：肖红罗红张宇菲陶玲徐旖旎沈祥春贵州医科大学贵州医科大学天然药物资源优效利用重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学贵州省特色天然药物资源高效利用工程中心贵州贵阳550025

目的探讨丹酚酸B(Sal B)对2型糖尿病小鼠心肌病(DCM)氧化应激的作用及潜在机制。方法60只C57BL/6J小鼠分为空白组(n=12,Control组,正常饲料,灌胃生理盐水)和高脂高糖(HG)组[n=48,HFG组,链脲佐菌素(STZ)联合HFG饲料构建DCM模型],造模成功... 详细信息

目的探讨丹酚酸B(Sal B)对2型糖尿病小鼠心肌病(DCM)氧化应激的作用及潜在机制。方法60只C57BL/6J小鼠分为空白组(n=12,Control组,正常饲料,灌胃生理盐水)和高脂高糖(HG)组[n=48,HFG组,链脲佐菌素(STZ)联合HFG饲料构建DCM模型],造模成功的HFG组小鼠分为DCM组(灌胃生理盐水)、Sal B低剂量[1.50 mg/(kg·d)]组(Sal B.L组)、Sal B高剂量[3.00 mg/(kg·d)]组(Sal B.H组)及200 mg/(kg·d)二甲双胍治疗组(Metformin组),灌胃连续8周;麻醉各组小鼠,采用小动物超声仪检测仰卧位时各组小鼠心脏的左室射血分数(LVEF)、缩短分数(FS)、左室收缩末期容积(LVESV)及左室收缩期末期内径(LVIDs);处死各组小鼠,取心脏制作切片、苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察心肌组织形态学特征;采用试剂盒检测各组小鼠心肌组织中细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽(GSH)的水平,采用Western blot分析氧化应激蛋白Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、核因子-E2相关因子2(Nrf2)、磷酸化Nrf2(pNrf2)、过氧化物酶1(PRDX1)、血红素加氧酶1(HO-1)及凋亡相关蛋白活化的半胱氨酸蛋白(Cleaved-caspase3)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl2)、Bcl2关联X(bax)蛋白的表达;SD乳鼠心脏提取分离培养原代新生大鼠心肌细胞(PNRCMs)构建DCM体外模型,将PNRCMs分为40 mmol/L甘露醇(Mannitol)组、空白(Control)组、40 mmol/L HG(HG)组、40 mmol/L HG+25μmol/L Sal B(Sal B低剂量,Sal B.L)组、40 mmol/L HG+50μmol/L Sal B(Sal B高剂量,Sal B.H)组、40 mmol/L HG+0.25 mmol/L二甲双胍(Metformin)组,检测各组细胞的活性氧(ROS)、MDA、SOD及GSH水平,采用Western blot检测氧化应激蛋白Keap1、Nrf2、pNrf2、PRDX1、HO-1及凋亡相关蛋白Cleaved-caspase3、bax、Bcl2蛋白的表达;采用实时定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测氧化应激相关基因Keap1、Nrf2、PRDX1及HO-1信使RNA(mRNA)的表达;采用Nrf2抑制剂(ML385)和激动剂(甲基巴多索隆)进一步分析氧化应激蛋白Keap1、Nrf2、pNrf2、PRDX1及HO-1的表达。结果与Control组比较,DCM组小鼠的LVEF、FS降低(P细胞增多并伴有炎性细胞浸润及胶原沉积,心肌组织中MDA含量增加、SOD和GSH减少(P细胞中ROS表达增加,SOD表达下降(P细胞中的Keap1、Cleaved-caspase3及bax蛋白表达增加(P细胞中的Keap1 mRNA表达升高(P细胞浸润减少、心肌胶原沉积减少,心肌组织中MDA含量减少、SOD和GSH含量增加(P相比,Sal B.L和Sal B.H量组心肌细胞中ROS表达、MDA含量减少,SOD和GSH含量增加(P细胞中的Keap1、Cleaved-caspase3及bax蛋白表达减少(P细胞中的Keap1 mRNA表达降低(P相比,

关键词：糖尿病心肌病氧化性应激细胞凋亡心肌丹酚酸B 核因子-红细胞-2相关因子2

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外周血LRG1和HIF-1α联合Nrf-2蛋白对肛瘘镜下手术治疗肛瘘患者切口感染的早期诊断价值

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临床和实验医学杂志 2022年第23期21卷 2529-2532页

作者：夏长河刘芳张傲夏长江牛志新闫丽丽吴剑冬秦皇岛市第一医院肛肠外科河北秦皇岛066000 秦皇岛市第一医院体检中心河北秦皇岛066000 唐山市人民医院药剂科河北唐山063000 秦皇岛市第一医院消化内科河北秦皇岛066000

目的探讨外周血富含亮氨酸的Alpha-2糖蛋白-1(LRG1)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)联合核因子-红细胞-2相关因子2(Nrf-2)蛋白对肛瘘镜下手术治疗肛瘘患者切口感染的早期诊断价值。方法回顾性选取2019年6月至2021年12月在秦皇岛市第一医院... 详细信息

目的探讨外周血富含亮氨酸的Alpha-2糖蛋白-1(LRG1)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)联合核因子-红细胞-2相关因子2(Nrf-2)蛋白对肛瘘镜下手术治疗肛瘘患者切口感染的早期诊断价值。方法回顾性选取2019年6月至2021年12月在秦皇岛市第一医院肛肠外科接受肛瘘镜下手术治疗肛瘘的126例患者作为研究对象,根据是否发生术后切口感染分为感染组(n=20)和非感染组(n=106)。采集术前、术后第1天和术后第3天外周静脉血,酶联免疫吸附试验分析血清LRG1、HIF-1α和Nrf-2水平,并采用操作者工作特征(ROC)曲线分析血清LRG1、HIF-1α和Nrf-2水平对术后切口感染发生的预测价值。结果感染组术后第1天和第3天血清LRG1、HIF-1α和Nrf-2水平均高于术前,且术后第1天高于术后第3天,差异均有统计学意义(P2水平高于术前及术后第3天,差异均有统计学意义(P2水平分别为(23.58±2.40)pg/mL、(85.12±14.06)pg/mL、(236.58±32.74)ng/mL和(15.09±2.85)pg/mL、(55.07±11.38)pg/mL、(186.19±27.04)ng/mL,均高于非感染组[第1天:(5.18±1.34)pg/mL、(44.89±7.30)pg/mL、(30.70±4.57)ng/mL;第3天:(5.04±1.12)pg/mL、(45.32±7.25)pg/mL、(28.56±4.72)ng/mL],差异均有统计学意义(P2水平单独及联合预测评估术后切口感染发生的ROC曲线下面积(95%CI)分别为0.805(0.642~0.971)、0.750(0.655~0.829)、0.763(0.592~0.946)、0.874(0.791~0.940)。结论肛瘘镜下手术治疗肛瘘患者有术后切口感染风险,术后第1天血清LRG1、HIF-1α和Nrf-2水平对术后切口感染的发生有一定预测价值,3者联合检测的预测价值更高。

关键词：富含亮氨酸的Alpha-2糖蛋白-1 缺氧诱导因子1α 核因子-红细胞-2相关因子2 肛瘘镜下手术早期诊断切口感染

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