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青岛烟区马铃薯Y病毒株系鉴定及系统传导特性

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中国烟草科学 2023年第6期44卷 59-68页

作者：郭光耀宋丽云江连强沈广材张富强董文凤何青云申莉莉中国农业科学院烟草研究所青岛266101 潍坊职业学院农林科技学院山东潍坊262737 四川省烟草公司凉山州公司四川西昌615000 云南省烟草公司保山市公司云南保山678000

为明确引起青岛试验田烟草脉坏死及花叶的PVY的发生规律、分子进化和系统传导特性,通过病毒病害表型,发病率和病情指数明确青岛试验田病毒病害流行规律;利用MEGA7构建系统发育树鉴定PVY青岛分离物的株系;通过q RT-PCR,western blotting... 详细信息

为明确引起青岛试验田烟草脉坏死及花叶的PVY的发生规律、分子进化和系统传导特性,通过病毒病害表型,发病率和病情指数明确青岛试验田病毒病害流行规律;利用MEGA7构建系统发育树鉴定PVY青岛分离物的株系;通过q RT-PCR,western blotting和PVY-GFP荧光明确PVY侵染烟株的传导路径;通过不同叶位、不同症状病叶取样,利用q RT-PCR检测PVYCPm RNA相对含量,明确显症和隐症叶片的病毒含量差异,以及TMV、CMV、PVY单独、两者混合、三者混合侵染时的干扰或协生作用。结果显示:烟株成熟期,PVY与TMV和CMV混合发生严重,PVY分离物为N:O株系,未突破va基因抗性。在侵染早期,病毒从接种叶沿叶脉进入茎,开始双向运输时,先向根部移动,进而到达苗端;再扩散至上部叶,较慢移动至下部叶;最后伴随烟株生长持续向两端新生部位运输。侵染中期病株上部叶隐症现象显著,病叶症状与病毒浓度呈正相关。烟田中后期,PVY与TMV和CMV混合侵染,病毒间的干扰和协生作用导致症状复杂多变。研究结果有助于提高品种抗性鉴定试验的准确性和药效试验的靶标性。

关键词：马铃薯Y病毒株系鉴定系统传导隐症混合侵染

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黑龙江烟区烟草马铃薯Y病毒株系的分子鉴定

烟草科技 2015年第10期48卷 13-18,25页

作者：万秀清乔婵赵淑娟李若李丽杰郭振楠牡丹江烟草科学研究所

为明确黑龙江烟区烟草马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)株系种类及其分布状况,采用多重PCR技术及测序手段,对采集黑龙江省烟叶产区的107份疑似PVY样品进行了鉴定分析。结果表明:4个有代表性的PVY分离物HLJ-SH8、HLJ-SC2、HLJ-SC6和HLJ-M... 详细信息

为明确黑龙江烟区烟草马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)株系种类及其分布状况,采用多重PCR技术及测序手段,对采集黑龙江省烟叶产区的107份疑似PVY样品进行了鉴定分析。结果表明:4个有代表性的PVY分离物HLJ-SH8、HLJ-SC2、HLJ-SC6和HLJ-MDJ4的基因组序列全长分别为9 698、9 702、9 702和9 698 bp,都包含一个由9 186 bp组成的开放读码框(ORF),编码一个由3 061个氨基酸组成的多聚蛋白。系统进化树分析结果表明这4个PVY分离物分别为PVYNTN、PVYN、PVYNW和PVYNTN-NW株系,其中PVYNTN-NW株系是侵染黑龙江烟草的优势株系。

关键词：黑龙江烟区马铃薯Y病毒(PVY) 株系鉴定多重PCR 测序

河北省马铃薯Y病毒株系分子鉴定及其RT-PCR检测

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河北农业大学学报 2005年第3期28卷 54-59页

作者：吴志明时星谢晓亮温春秀张庆良河北省农林科学院经济作物研究所河北石家庄050051 河北省高碑店农业局河北保定074000 河北科润农业技术有限公司河北石家庄050051

根据马铃薯Y病毒(PotatovirusY,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,从感染PVY的马铃薯田间病叶组织中提取出病毒的RNA,进行cDNA合成及PCR扩增,得到一条长度约800bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的基因片段大小一致,本... 详细信息

根据马铃薯Y病毒(PotatovirusY,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,从感染PVY的马铃薯田间病叶组织中提取出病毒的RNA,进行cDNA合成及PCR扩增,得到一条长度约800bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的基因片段大小一致,本试验建立了快速、灵敏、简便的PVY检测的方法。将RT-PCR扩增产物克隆到质粒pGEM-T上,并进行了序列分析。结果表明,克隆的cDNA片段由801个核苷酸组成,编码267个氨基酸组成的理论分子量为29kD蛋白,与PVY外壳蛋白的大小一致,与基因库登记的代表性株系相比,它们之间的核苷酸序列同源性为89 6%～98 8%,氨基酸序列的同源性为93 3%～98 5%,说明PVYCP基因具有高度的保守性(记为PVY-HBEI),与国内报道的PVY-CHU、PVY-ZHJ和PVY-ZHOU株系的氨基酸序列同源性分别为96 6%、98 5%和97 8%,与PVYN和PVYO株系的氨基酸序列同源性分别为93 6%和97 8%,从分子水平上确定PVY-HBEI归属于普通株系(PVYO株系)。

关键词：马铃薯Y病毒反转录-聚合酶链式反应病毒检测外壳蛋白基因(CP) 序列分析株系鉴定

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安徽省SMV株系的鉴定及其抗源筛选

中国油料作物学报 2014年第3期36卷 374-379页

作者：王大刚李华伟智海剑田震胡晨胡国玉黄志平张磊安徽省农业科学院作物研究所/安徽省农作物品质改良重点实验室安徽合肥230031 南京农业大学大豆研究所/国家大豆改良中心/作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095

为明确安徽省大豆花叶病毒（soybean mosaic virus,SMV）株系的最新组成、分布及消长动态,以及筛选对流行株系的抗性种质,2009-2010年广泛采集安徽省各大豆主产区疑似SMV病样461份,采用生物学及血清学方法鉴定得到83个SMV分离物。用全... 详细信息

为明确安徽省大豆花叶病毒（soybean mosaic virus,SMV）株系的最新组成、分布及消长动态,以及筛选对流行株系的抗性种质,2009-2010年广泛采集安徽省各大豆主产区疑似SMV病样461份,采用生物学及血清学方法鉴定得到83个SMV分离物。用全国统一的10个鉴别寄主对这些分离物进行鉴定,共鉴定出14个SMV株系,如SC3~SC9、SC11、SC13~SC15、SC17、SC19和SC22,其中SC5、SC11、SC14、SC15、SC17、SC19和SC22是本研究在大豆主产区新发现的。进一步比较分析发现,SMV株系SC3和SC7仍为目前安徽省大豆产区的流行株系,分别占分离物总数的16.9%和25.3%;其次为新发现的强毒株系SC15,在安徽省也有较为广泛的分布,比率为12.1%。针对流行株系SC3和SC7的抗源筛选结果表明,来自参加安徽省区试的149份资源中有中作J8023、中黄45、L85-2308、中涡47号和濉科13等5份材料对SC3表现高抗,中黄45、宿03-4-1-4和鲁06-7等9份材料对SC7表现高抗;参加我国南方区试的95份种质资源中有13份对强毒株系SC15表现抗病,占鉴定品种的13.7%。本研究明确了安徽省大豆产区的流行株系及变化趋势,筛选出针对SMV流行株系的抗源,为培育抗病品种和抗病品种布局提供了依据。

关键词：大豆大豆花叶病毒株系鉴定抗源筛选

青海省BYDV株系鉴定及BYDV-GAV燕麦分离物基因组序列的测定与分析

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麦类作物学报 2021年第8期41卷 937-946页

作者：乔世英季英华魏有海闫佳会郭青云青海大学农林科学院/青海省农业有害生物综合治理重点试验室/农业农村部西宁作物有害生物科学观测试验站青海西宁810016 江苏省农业科学院植物保护研究所/江苏省食品质量安全重点试验室-省部共建国家重点试验室培养基地江苏南京210014

大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf virus,BYDV)所引起的麦类作物黄矮病是世界范围内的一个重要病害,对麦类作物生产影响巨大。近年来,该病害在青海省内不断发生流行,为明确该病害在青海省内的主要流行株系,采集90份来自6个地区(青海省... 详细信息

大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf virus,BYDV)所引起的麦类作物黄矮病是世界范围内的一个重要病害,对麦类作物生产影响巨大。近年来,该病害在青海省内不断发生流行,为明确该病害在青海省内的主要流行株系,采集90份来自6个地区(青海省西宁市、海西州、海南州、海东市、玉树州、黄南州)的小麦、燕麦、青稞田间病样,利用RT-PCR、基因克隆、序列拼接等技术进行相关试验及分析。结果表明,BYDV-GAV为青海省BYDV的主要流行株系。对青海省BYDV-GAV燕麦分离物进行全基因组克隆与序列分析,发现本试验所获得的BYDV-GAV燕麦分离物与BYDV-GAV中国分离物聚类到一个组内,序列同源性达96.85%~98.08%,说明该燕麦分离物为中国BYDV-GAV的一个分离物。本研究明确了青海省BYDV的流行株系,并获得了燕麦BYDV-GAV全基因组序列,可为后期该病害的防治提供一定的理论支持。

关键词：青海小麦黄矮病株系鉴定燕麦全基因组

黄淮和长江中下游地区大豆花叶病毒株系鉴定与分布

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大豆科学 2003年第2期22卷 102-107页

作者：王修强盖钧镒濮祖芹南京农业大学大豆研究所

通过生物学测定和血清学方法检测了从黄淮和长江中下游地区采集的 135个病样 ,其中 81个表现为SMV阳性反应。证明大豆花叶病毒仍为该地区的优势病毒 ,根据这 81个SMV分离物在 2 5个鉴别寄主上的反应 ,结合分离物来源进行分析 ,结果表明 ... 详细信息

通过生物学测定和血清学方法检测了从黄淮和长江中下游地区采集的 135个病样 ,其中 81个表现为SMV阳性反应。证明大豆花叶病毒仍为该地区的优势病毒 ,根据这 81个SMV分离物在 2 5个鉴别寄主上的反应 ,结合分离物来源进行分析 ,结果表明 :⑴黄淮和长江中下游地区大豆花叶病毒可划为SC - 1～SC - 8八个株系群 ;⑵从多组鉴别寄主体系中挑选出的南农 1138- 2、齐黄10号、810 1、铁丰 2 5、Davis、Buffalo、早熟 18、Kwanggyo、齐黄 1号九个大豆品种可以作为一套综合的SMV株系鉴别寄主 ;⑶弱毒株系群SC - 1和SC - 3在黄淮和长江中下游地区分布较广 ,强毒株系群SC - 8仅在江苏南京发现。

关键词：大豆花叶病毒株系鉴定鉴别寄主株系分布

马铃薯Y病毒河北分离物外壳蛋白基因序列分析和株系鉴定

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园艺学报 2005年第2期32卷 324-326页

作者：吴志明董志茹刘小娟温春秀谢晓亮张庆良河北省农林科学院经济作物研究所保定市教育局仪器站保定071000 河北科润农业技术有限公司

对河北张家口感病马铃薯的一个马铃薯Y病毒分离物(PXYHBEI)的外壳蛋白基因进行了克隆和序列分析。以提取的RNA为模板,应用RTPCR扩增目的基因,扩增产物克隆到质粒pGEMT,上并序列分析。结果表明,克隆cDNA片段由801个核苷酸组成,编码267个... 详细信息

对河北张家口感病马铃薯的一个马铃薯Y病毒分离物(PXYHBEI)的外壳蛋白基因进行了克隆和序列分析。以提取的RNA为模板,应用RTPCR扩增目的基因,扩增产物克隆到质粒pGEMT,上并序列分析。结果表明,克隆cDNA片段由801个核苷酸组成,编码267个氨基酸。与基因库中PVY代表株系相比,它们的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为89.6%～98.8%和93.3%～98.5%,与PVYN和PVYO株系的氨基酸序列同源性分别为93.6%和97.8%,确定PVYHBEI归属于普通株系(PVYO株系),同时建立了快速、灵敏、简便的PVYRTPCR检测方法。

关键词：马铃薯Y病毒反转录-聚合酶链式反应外壳蛋白基因(CP) 序列株系鉴定

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承德春小麦黄矮病毒（WYDV）株系鉴定

河北农业大学学报 1996年第3期19卷 29-32页

作者：苗洪芹陈巽祯吴和平河北农科院植保所

承德春麦在历史上曾为河北省小麦黄矮病的主要流行区，近年再度严重流行。严重威胁着小麦生产。经多点取样，采用３种无毒蚜虫即麦长管蚜［Ｍａｃｒｏｓｉｐｈｕｍ（ｓｉｔｏｂｉｏｎ）ａｖｅｎａｅ（Ｆａｂｒｉｃｉｕｓ）］（Ｍａ）。... 详细信息

承德春麦在历史上曾为河北省小麦黄矮病的主要流行区，近年再度严重流行。严重威胁着小麦生产。经多点取样，采用３种无毒蚜虫即麦长管蚜［Ｍａｃｒｏｓｉｐｈｕｍ（ｓｉｔｏｂｉｏｎ）ａｖｅｎａｅ（Ｆａｂｒｉｃｉｕｓ）］（Ｍａ）。麦二叉蚜［Ｓｃｈｉｚａｐｈｉｓ（Ｔｏｘｏｐｔｅｒａ）ｇｒａｍｉｎｕｍ（Ｒｏｎｄ）］（ｓｇ）和禾缢管蚜［Ｒｈｏｐａｌｏｓｉｐｈｕｍｐａｄｉ（Ｌｉｎｎａｅｕｓ）］（Ｒｐ）传毒进行生物测定和血清学酶标（ＤＡＳ—ＥＬＩＳＡ）试验，明确了河北省承德春麦黄矮病流行有２种株系类型；麦二又蚜、麦长管蚜株系（ＧＡＶ）和禾缢管蚜、麦长管蚜、麦二叉蚜株系）ＰＡＧＶ）混合发生，且ＧＡＶ株系为主流株系。蚜虫调查结果明确了造成该病害在生产上流行、传毒的主要蚜虫介体是麦长管蚜。试验结果为生产上抗病育种和治蚜防病提供了依据。

关键词：小麦黄矮病毒株系鉴定生物测定

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黄淮中北部大豆花叶病毒株系的鉴定与分布

中国油料作物学报 2005年第4期27卷 64-68页

作者：郭东全智海剑王延伟盖钧镒周新安杨崇良李凯李海朝南京农业大学大豆研究所国家大豆改良中心作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095 中国农业科学院油料作物研究所湖北武汉430062 山东省农业科学院植保所山东济南250100

2002-2003年采集了黄淮中北部地区为主的32个县市的大豆SMV病样981份,经初步繁殖鉴定、生物纯化及DAS-ELISA血清学检测,得到95个SMV分离物,根据95个分离物在27个鉴别寄主上的症状反应,最终确定南农1138-2、诱变30、8101、铁丰25、Davis... 详细信息

2002-2003年采集了黄淮中北部地区为主的32个县市的大豆SMV病样981份,经初步繁殖鉴定、生物纯化及DAS-ELISA血清学检测,得到95个SMV分离物,根据95个分离物在27个鉴别寄主上的症状反应,最终确定南农1138-2、诱变30、8101、铁丰25、Davis、Bullfalo、早熟18、Kwanggyo、齐黄1号和科丰1号10个品种作为该地区SMV株系的鉴别寄主.利用它们可将95个SMV分离物划分成10个株系群,其中5个与以往鉴定株系群相同,另5个为新发现的株系群,分别将5个新株系群定名为SC-11～SC-15.研究还发现,SC-11株系群所占比例最大,是本地区优势株系;其次为SC-8株系群;SC-11和SC-13株系群分布最广,在黄淮北部各省均有分布.

关键词：大豆花叶病毒株系鉴定株系分布