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HPLC波长切换法同时测定栀子柏皮汤中8种成分的含量

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沈阳药科大学学报 2023年第8期40卷 1028-1035页

作者：尹然张瓒佟伊晨于新颖逄小博韩飞辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847 沈阳药科大学药学院辽宁沈阳110016

目的建立高效液相色谱(HPLC)波长切换法同时测定栀子柏皮汤中8种成分京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、4-O-阿魏酰奎尼酸、5-O-阿魏酰奎尼酸、甘草苷、盐酸小檗碱和甘草酸的含量。方法色谱柱采用Phenomenex Kinetex C18柱(150 mm... 详细信息

目的建立高效液相色谱(HPLC)波长切换法同时测定栀子柏皮汤中8种成分京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、4-O-阿魏酰奎尼酸、5-O-阿魏酰奎尼酸、甘草苷、盐酸小檗碱和甘草酸的含量。方法色谱柱采用Phenomenex Kinetex C18柱(150 mm×4.6 mm,2.6μm);流动相为乙腈-0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH至3.0)进行梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1);柱温40℃;检测波长为240 nm(检测京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱)、280 nm(检测4-O-阿魏酰奎尼酸、5-O-阿魏酰奎尼酸、甘草苷、盐酸小檗碱)和250 nm(检测甘草酸)。结果京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、4-O-阿魏酰奎尼酸、5-O-阿魏酰奎尼酸、甘草苷、盐酸小檗碱和甘草酸分别在质量浓度15.57~185.9、59.18~706.6、5.316~63.48、14.10~168.3、11.92~142.4、3.078~36.76、20.57~245.6、6.150~73.43 mg·L^(-1)内与峰面积呈良好的线性关系(r>0.999),平均加样回收率分别为102.1%、99.7%、98.3%、94.8%、99.5%、99.6%、98.2%和103.5%,RSD均小于2%(n=6)。结论本研究建立的HPLC波长切换法简便可行,可用于栀子柏皮汤中上述8种成分含量的同时测定。

关键词：栀子柏皮汤高效液相色谱波长切换法成分含量测定

栀子柏皮汤对胆酸饲料诱导胆汁淤积症小鼠肝保护机制研究

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上海中医药大学学报 2022年第S1期36卷 154-160页

作者：李玥宋国超徐晓青邹斌赵婧翁凤仪成思金静怡严东明谭波裘福荣上海中医药大学附属曙光医院临床药代动力学实验室上海201203 上海中医药大学附属曙光医院检验科上海201203

目的:研究栀子柏皮汤对含1%胆酸(CA)饲料诱导胆汁淤积症小鼠的肝保护作用及其机制。方法:C57BL/6雄性小鼠随机分为3组,即正常对照组、1%CA模型组、栀子柏皮汤组,每组5只。栀子柏皮汤组灌胃给予栀子柏皮汤(6 g/kg,每10 g小鼠体质量0.1 m... 详细信息

目的:研究栀子柏皮汤对含1%胆酸(CA)饲料诱导胆汁淤积症小鼠的肝保护作用及其机制。方法:C57BL/6雄性小鼠随机分为3组,即正常对照组、1%CA模型组、栀子柏皮汤组,每组5只。栀子柏皮汤组灌胃给予栀子柏皮汤(6 g/kg,每10 g小鼠体质量0.1 ml),每日1次,连续10 d。正常对照组和1%CA模型组分别灌胃等体积0.9%NaCl溶液。所有组前3 d喂食正常饲料,于第4天灌胃后将1%CA模型组及栀子柏皮汤组换为含1%CA饲料饲养,直至实验结束,正常对照组仍继续用普通饲料饲养。干预结束后,检测小鼠血浆碱性磷酸酶(ALP)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性;HE染色观察小鼠肝脏病理改变;LC-MS/MS检测小鼠肝脏胆汁酸含量;Western blot法测定小鼠肝脏Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)炎性小体、衔接子(ASC)和消皮素D的N端剪切体(GSDMD-N)蛋白表达。结果:与1%CA模型组比较,栀子柏皮汤组显著降低血浆ALT和ALP活性,缓解肝脏坏死及汇管区炎性细胞浸润,显著减少肝内总胆汁酸、牛磺胆酸(TCA)和牛磺脱氧胆酸(TDCA)的含量,并能下调NLRP3、ASC和GSDMD-N的蛋白表达,差异均有统计学意义(P栀子柏皮汤对1%CA饲料诱导肝内胆汁淤积症小鼠具有肝保护作用,其机制可能与缓解肝内胆汁酸蓄积以及抑制NLRP3炎性小体活化、减少细胞焦亡有关。

关键词：栀子柏皮汤胆汁淤积症胆汁酸 NLRP3炎性小体细胞焦亡

栀子柏皮汤及含栀子配伍组对免疫性肝损伤小鼠的保护作用

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中国药理学通报 2015年第12期31卷 1764-1769页

作者：杨扬吴小琴李小枫李晚霞黄成李俊安徽医科大学药学院安徽医科大学肝病研究所安徽省创新药物产业共性研究院安徽合肥230032

目的探讨栀子柏皮汤各及含栀子配伍组对刀豆蛋白(ConA)诱导免疫性损伤小鼠的保护作用及可能作用机制。方法观察栀子柏皮汤及各含栀子配伍组对尾静脉注射刀豆蛋白(ConA,20 mg·kg^(-1))诱发的免疫性肝损伤小鼠肝脏病理变化及血清中谷丙... 详细信息

目的探讨栀子柏皮汤各及含栀子配伍组对刀豆蛋白(ConA)诱导免疫性损伤小鼠的保护作用及可能作用机制。方法观察栀子柏皮汤及各含栀子配伍组对尾静脉注射刀豆蛋白(ConA,20 mg·kg^(-1))诱发的免疫性肝损伤小鼠肝脏病理变化及血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血清中干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。Western blot法检测与免疫炎症相关的NF-κB-p65的蛋白表达情况。结果栀子柏皮汤及各含栀子配伍组均能够降低血清ALT、AST及肝组织中MDA的含量;提高肝组织中SOD活性;降低NF-κB-p65及NF-κB-p-p65的表达,其中栀子柏皮汤全方组对免疫性肝损伤小鼠保护作用最佳。结论栀子柏皮汤对ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠具有保护作用,其作用机制可能与调控免疫反应的NF-κB通路有关。

关键词：栀子柏皮汤含栀子配伍组刀豆蛋白免疫性肝损伤 NF-κB-p65 NF-κB-p-p65

栀子柏皮汤对小分子靶向药相关性皮疹疗效的影响及安全性评价

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中国中西医结合皮肤性病学杂志 2023年第6期22卷 542-545页

作者：艾晓晴贾喜花郭连英王菊美崔俊霞毕丽华田敬荣李晶武兴娣邯郸市中心医院河北邯郸056001 保定市第一中心医院河北保定071000

目的探讨栀子柏皮汤对小分子靶向药相关性皮疹疗效的影响及安全性。方法选择2018年4月—2021年5月本院收治的80例小分子靶向药相关性皮疹患者作为研究对象,以数字奇偶法将其分为观察组与对照组各40例。对照组给予氢化可的松软膏治疗,研... 详细信息

目的探讨栀子柏皮汤对小分子靶向药相关性皮疹疗效的影响及安全性。方法选择2018年4月—2021年5月本院收治的80例小分子靶向药相关性皮疹患者作为研究对象,以数字奇偶法将其分为观察组与对照组各40例。对照组给予氢化可的松软膏治疗,研究组在对照组的基础上给予栀子柏皮汤治疗,治疗时间为4周。比较2组治疗前后临床症状评分、皮疹严重程度分级、血清白细胞介素-17(IL-17)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的差异,并观察2组治疗4周后临床疗效和治疗4周内药物不良反应发生情况。结果治疗前2组临床症状总评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后,2组临床症状总评分均降低(均P皮疹严重程度分级比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后,2组皮疹严重程度分级差异有统计学意义(P皮疹严重程度分级差异无统计学意义(P>0.05),治疗前后观察组皮疹严重程度分级差异有统计学意义(P0.05);治疗4周后,2组的血清IL-17和TNF-α水平均降低(均P0.05)。结论栀子柏皮汤联合氢化可的松软膏治疗小分子靶向药相关性皮疹疗效显著,可改善患者的临床症状,促进皮损恢复,减轻炎性反应,且安全性良好。

关键词：栀子柏皮汤小分子靶向药抑制剂相关性皮疹疗效安全性

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栀子柏皮汤及其拆方保肝利胆作用实验研究

中药材 2013年第7期36卷 1132-1135页

作者：肖旭朱继孝罗光明李磊朱玉野曾金祥王晓云吴波江西中医学院江西省中药种质资源工程技术研究中心江西南昌330004

目的:研究栀子柏皮汤及其拆方的保肝利胆作用,为探讨栀子柏皮汤的组方原理提供实验依据。方法:采用四氯化碳(CCl4)引起的急性肝损伤小鼠模型观察栀子柏皮汤及其拆方的保肝作用;采用正常大鼠胆总管引流的方法,观察药物的利胆作用。结果:... 详细信息

目的:研究栀子柏皮汤及其拆方的保肝利胆作用,为探讨栀子柏皮汤的组方原理提供实验依据。方法:采用四氯化碳(CCl4)引起的急性肝损伤小鼠模型观察栀子柏皮汤及其拆方的保肝作用;采用正常大鼠胆总管引流的方法,观察药物的利胆作用。结果:栀子柏皮汤及各含栀子配伍药对均可降低CCl4所致肝损伤小鼠血清ALT、AST及肝组织中MDA水平,并显著提高正常大鼠胆汁流量及胆汁内胆红素含量,其中栀子黄柏配伍保肝利胆作用效果最佳。结论:栀子柏皮汤具有保肝利胆作用,其君药栀子在方中发挥重要作用,栀子和黄柏交互协同,发挥清热利湿作用。

关键词：栀子柏皮汤拆方保肝利胆

栀子柏皮汤在正常和肝损伤模型大鼠体内药动学比较研究

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沈阳药科大学学报 2021年第4期38卷 373-378页

作者：邸馥郁王鑫刘有平邸欣沈阳药科大学药学院辽宁沈阳110016

目的比较栀子柏皮汤中5个活性成分在正常和肝损伤模型大鼠体内的药动学差异,为该复方的临床应用提供参考。方法 12只健康雄性SD大鼠随机分为正常组和肝损伤模型组,灌胃给予栀子柏皮汤(13 g·mL-1,按生药量计),采用LC-MS/MS法测定给药后... 详细信息

目的比较栀子柏皮汤中5个活性成分在正常和肝损伤模型大鼠体内的药动学差异,为该复方的临床应用提供参考。方法 12只健康雄性SD大鼠随机分为正常组和肝损伤模型组,灌胃给予栀子柏皮汤(13 g·mL-1,按生药量计),采用LC-MS/MS法测定给药后不同时刻大鼠血浆中京尼平苷、小檗碱、延胡索乙素、巴马汀和甘草素的浓度。以葛根素为内标,血浆样品经乙腈(含体积分数0.1%甲酸)沉淀蛋白处理,采用Thermo Syncronis C18柱(100 mm×2.1 mm, 5μm)分离,以乙腈-2 mmol·L-1乙酸铵(含体积分数0.1%甲酸)(体积比30∶70)为流动相;质谱检测采用ESI源正离子化方式,以选择反应监测(SRM)模式进行扫描定量。用DAS 2.1.1软件按非房室模型计算主要药动学参数,并比较5个活性成分的药动学参数在正常组和模型组之间是否有统计学差异。结果与正常组比较,模型组大鼠体内除小檗碱外的其他4个活性成分的ρmax、AUC0-t和AUC0-∞均显著增加,tmax和t1/2显著延长。除ρmax和t1/2外,小檗碱其他参数呈现出与另外4种活性成分相同的变化趋势。小檗碱的ρmax和t1/2在模型组中表现的变化趋势与其他化合物稍有差异,并且统计学检验结果显示这两项指标在正常组和模型组之间不存在统计学差异。结论肝损伤状态对栀子柏皮汤中活性成分的体内过程有一定影响。

关键词：栀子柏皮汤肝损伤药动学血浆 LC-MS/MS

栀子柏皮汤及其拆方对中医阳黄证黄疸大鼠退黄作用的研究

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中药新药与临床药理 2015年第1期26卷 25-30页

作者：朱继孝李雪溦李磊钟国跃熊浩仲刘春花罗光明江西中医药大学中药资源与民族药研究中心江西南昌330004 威海诺达药业集团有限公司山东威海264200 江西中医药大学基础医学院江西南昌330004

目的研究栀子柏皮汤及其拆方对中医阳黄证模型大鼠的治疗作用及机制,并探讨组方配伍规律,为临床使用该方提供实验依据。方法采用以异硫氰酸萘酯(ANIT)灌胃诱导大鼠肝损伤基础上,结合高温高湿的环境因素、高糖高脂的饮食,复制阳黄证大鼠... 详细信息

目的研究栀子柏皮汤及其拆方对中医阳黄证模型大鼠的治疗作用及机制,并探讨组方配伍规律,为临床使用该方提供实验依据。方法采用以异硫氰酸萘酯(ANIT)灌胃诱导大鼠肝损伤基础上,结合高温高湿的环境因素、高糖高脂的饮食,复制阳黄证大鼠模型,灌胃给予栀子柏皮汤及其拆方,观察给药后大鼠的一般生物学状态,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、胆汁酸(TBA)和补体C3、C4水平,以及肝组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,光镜下观察大鼠肝组织病理变化。结果与正常组比较,阳黄证模型组各指标均有明显变化;与阳黄证模型组比较,阳性药茵栀黄颗粒组及栀子柏皮汤组、栀子黄柏组大鼠血清中ALT、AST、TBIL、TBA和补体C3、C4水平均显著降低(P栀子甘草组、栀子组大鼠血清中ALT、AST、TBA的活性和补体C3、C4水平均显著降低(P栀子甘草组大鼠肝脏MDA含量显著降低(P柏甘草给药组能显著降低大鼠血清中补体C3、C4表达水平(P栀子柏皮汤,其中缺栀子的黄柏甘草组、黄柏组以及甘草组与栀子柏皮汤组比较差异有统计学意义(P栀子柏皮汤及其拆方组可不同程度的缓解肝损伤。结论栀子柏皮汤对阳黄证模型大鼠具有明显的治疗作用,其退黄机制可能为抑制炎症反应、清除自由基,从而减轻肝脏损伤;拆方结果显示全方疗效优于其他拆方组,初步阐明了栀子柏皮汤组方配伍的科学性、合理性。

关键词：栀子柏皮汤拆方阳黄证生化指标病理学

栀子柏皮汤合煎液与分煎液中有效成分含量的比较研究

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时珍国医国药 2014年第11期25卷 2657-2659页

作者：李磊程虹毓朱继孝曾金祥朱玉野罗光明关志宇江西中医药大学中药资源与民族药研究中心江西南昌330004 江西中医药大学人文学院江西南昌330004

目的探究栀子柏皮汤合煎与分煎提取液中有效成分栀子苷、西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、甘草苷和甘草酸的变化。方法采用Agilent TC-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相以乙腈-0.2%磷酸水溶液,分别... 详细信息

目的探究栀子柏皮汤合煎与分煎提取液中有效成分栀子苷、西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、甘草苷和甘草酸的变化。方法采用Agilent TC-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相以乙腈-0.2%磷酸水溶液,分别在238nm波长下检测栀子苷、甘草苷和甘草酸,在265nm波长下检测盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱,在440nm波长下检测西红花苷-Ι和西红花苷-ΙΙ;流速为0.8 ml/min,梯度洗脱,柱温30℃。结果合煎剂中总生物碱、甘草酸的含量低于分煎剂;西红花苷类化合物(西红花苷-I、西红花苷-ΙΙ)的含量明显高于分煎剂;合煎剂中栀子苷、甘草苷与分煎剂中含量无明显变化。结论栀子柏皮汤合煎剂中有效成分溶出增加、毒性成分含量降低,比分煎剂质量优越。

关键词：栀子柏皮汤合煎分煎有效成分高效液相色谱

栀子柏皮汤对小鼠急性肝损伤的保护作用及对大鼠的利胆作用研究

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时珍国医国药 2012年第12期23卷 2998-3000页

作者：肖旭朱继孝罗光明朱玉野曾金祥吴波王晓云江西中医学院江西省中药种质资源工程技术研究中心江西南昌330004

目的研究栀子柏皮汤对小鼠急性肝损伤的保护作用及对大鼠的利胆作用。方法采用四氯化碳(CCl4)引起的急性肝损伤小鼠模型观察药物的保肝作用;采用正常大鼠胆总管引流的方法,观察该药的利胆作用。结果栀子柏皮汤低、中、高剂量组可显著降... 详细信息

目的研究栀子柏皮汤对小鼠急性肝损伤的保护作用及对大鼠的利胆作用。方法采用四氯化碳(CCl4)引起的急性肝损伤小鼠模型观察药物的保肝作用;采用正常大鼠胆总管引流的方法,观察该药的利胆作用。结果栀子柏皮汤低、中、高剂量组可显著降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT和AST的水平及肝组织MDA水平,改善CCl4引起的小鼠肝细胞肿大、肝小叶中央区弥漫性多发性点状坏死和灶性坏死等症状,显著增加给药后60 min内正常大鼠的胆汁流量及胆汁内胆红素含量。结论栀子柏皮汤具有明显的保肝利胆作用。

关键词：栀子柏皮汤保肝利胆