检索结果-南通市图书馆

柴胡皂甙d抑制博来霉素诱导的肺纤维化小鼠细胞焦亡机制的研究

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

柴胡皂甙d抑制博来霉素诱导的肺纤维化小鼠细胞焦亡机制的研究

作者：丁慢玲江苏大学

学位级别：硕士

目的间质性肺疾病(Interstitial lung disease,ILd)是一组引起炎症反应及组织纤维化的肺部弥漫性实质病变的总称。特发性肺纤维化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis,IPF)是其中最常见、最具侵袭性的病种之一,其特征为慢性、进行性间质纤维... 详细信息

目的间质性肺疾病(Interstitial lung disease,ILd)是一组引起炎症反应及组织纤维化的肺部弥漫性实质病变的总称。特发性肺纤维化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis,IPF)是其中最常见、最具侵袭性的病种之一,其特征为慢性、进行性间质纤维化,肺功能快速下降并进展为呼吸衰竭,最终导致患者死亡。IPF患者确诊后的平均中位生存期仅2-3年,但其病因与发病机制仍未明确。目前仅有吡非尼酮和尼达尼布获FdA批准应用于IPF临床治疗,但仍不能逆转肺纤维化。因此,寻找新的治疗靶点与药物是亟须突破的难题。本课题旨在通过研究柴胡皂甙d(Saikosaponin d,SSd)对IPF中的细胞焦亡(pyroptosis)及上皮间充质转化(Epithelial Mesenchymal Transformation,EMT)的干预作用,探讨细胞焦亡在博来霉素诱导构建的IPF模型小鼠中的活化水平及SSd对于细胞焦亡的调控作用。并进一步探讨其可能的分子机制,即SSd是否通过对细胞焦亡经典通路核转录因子-κB(NF-κB)下游NLR家族PYRIN域蛋白3(NLRP3)和半胱天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)进行调控从而发挥抗肺纤维作用,为SSd应用于IPF临床治疗提供依据。方法健康雄性C57BL/6小鼠108只按随机数字表法分为6组,其中5组使用博来霉素(Bleomycin,BLM)进行气管内注射构建肺纤维化小鼠模型,分为模型组(BLM+vehicle组)、低浓度SSd组(BLM+L-SSd组)、中浓度SSd组(BLM+M-SSd组)、高浓度SSd组(BLM+H-SSd组)和地塞米松(dexamethasone,dXM)组(BLM+dXM组),18只/组;造模后1h,dXM组和低、中、高浓度SSd组分别腹腔注射dXM 5 mg/kg(0.1 m L)和SSd 1.5mg/kg(0.15 m L)、2.0 mg/kg(0.20 m L)、2.5 mg/kg(0.25 m L),模型组腹腔注射0.25 m L生理盐水,1次/日,持续进行28天。另一组为假手术组(Sham+vehicle组),共18只,将固定量生理盐水注入小鼠气管内,随后每日固定时间腹腔注射对应量生理盐水。在给予药物处理后第7天、第14天和第28天随机选取各组小鼠6只进行处死取样,每周记录小鼠体质量变化趋势及一般情况,并计算第28天肺系数评估肺水肿及肺纤维化水平。取各组小鼠左肺进行组织染色(HE和Masson),评估肺组织炎症程度及纤维化水平;碱裂解法测量各组肺组织羟脯氨酸(HYP)含量;蛋白印迹法(Western blot)和免疫组织化学染色法(IHC)测定各组肺组织上皮与间质相关蛋白、细胞焦亡相关蛋白及NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路相关蛋白表达;实时荧光定量PCR法(Real Time Quantitative PCR,RT-qPCR)检测各组转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)m RNA表达量,酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组小鼠肺组织细胞焦亡细胞因子相对表达情况。结果(1)记录小鼠一般情况,左肺石蜡包埋后行HE染色和Masson染色:与模型组相比,中、高浓度SSd组可以明显减缓纤维化小鼠体质量下降,改善小鼠一般情况。同时显著减轻肺纤维化小鼠早期肺泡炎症和中晚期肺部胶原沉积程度(PdXM组无统计学差异(P>0.05)。(2)碱裂解法检测肺组织HYP含量:与假手术组相比,模型组肺组织中HYP含量在第7天开始呈上升趋势,随后持续上升并在第28天达峰值;与模型组相比,在第7天及第28天时,除低浓度SSd组外,余各浓度SSd组与dXM组的HYP表达水平均有统计学差异(PdXM组相比,中浓度SSd组在3个时间段均有升高(Pd组无统计学差异(P>0.05)。(3)Western blot法及RT-qPCR法检测TGF-β1表达水平:TGF-β1在假手术组肺组织中有少量表达,而经BLM作用后,第7天TGF-β1表达开始上升,第28天TGF-β1含量最高。除低浓度SSd组外,余中、高浓度SSd组及dXM组均较模型组TGF-β1显著降低(PdXM组相比,中浓度SSd组TGF-β1含量上升(Pd组差异不明显(P>0.05)。(4)Western blot法和IHC法检测上皮及间质相关蛋白:α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原蛋白(Type I collagen,Col-I)含量在各组变化趋势一致。与假手术组相比,模型组α-SMA、Co

关键词：特发性肺纤维化柴胡皂甙d 细胞焦亡 NLRP3 Caspase-1

柴胡皂甙d诱导肝癌细胞同时发生凋亡及类凋亡性细胞死亡

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

西安交通大学学报（医学版） 2020年第6期41卷 966-971页

作者：卢新兰卢朝辉曹琰张旭王新李雅睿郭丹和水祥西安交通大学第一附属医院消化内科陕西西安710061 西安交通大学基础医学院病原生物学与免疫学系陕西西安710061 渭南市第一人民医院消化内科陕西渭南714000

目的探讨柴胡皂甙d(saikosaponin-d,SSd)诱导人肝癌Hep3B细胞死亡的作用及其可能机制。方法将肝癌Hep3B细胞分为空白对照组、dMSO(溶媒)对照组和3个SSd(5、10、15μmol/L)处理组,MTT法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双标记后采用流式... 详细信息

目的探讨柴胡皂甙d(saikosaponin-d,SSd)诱导人肝癌Hep3B细胞死亡的作用及其可能机制。方法将肝癌Hep3B细胞分为空白对照组、dMSO(溶媒)对照组和3个SSd(5、10、15μmol/L)处理组,MTT法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双标记后采用流式细胞仪定量检测死亡细胞的比例;Hoechst 33258染色后在形态学方面检测细胞凋亡;分光光度法检测半胱天冬酶-3(caspase-3)凋亡蛋白酶活性;倒置显微镜观察细胞形态改变;Western blotting和Real-time PCR技术分别用于检测CHOP(C/EBP homology protein)蛋白和mRNA表达。结果MTT结果显示,SSd浓度和时间依赖性抑制Hep3B细胞生长;流式细胞术结果表明SSd诱导Hep3B细胞死亡;Hoechst 33258染色后在荧光显微镜下观察,发现SSd处理组的细胞核出现凋亡细胞特征性的核染色体凝集、核固缩和碎裂;SSd可明显激活关键的凋亡执行分子caspase-3;通过倒置显微镜观察到SSd处理的细胞内出现大量空泡样改变——类凋亡的发生;总caspase抑制剂Z-VAd-FMK预处理能够有效抑制caspase-3活性,但仅能部分抑制SSd诱导的细胞死亡,且不能减少SSd诱导的细胞内空泡形成;SSd诱导应激诱导性分子CHOP蛋白和mRNA表达上调,该作用不能被Z-VAd-FMK抑制。结论SSd可诱导人肝癌Hep3B细胞同时发生caspase依赖性凋亡和非caspase依赖性类凋亡,其中CHOP表达升高可能是参与SSd诱导类凋亡的分子机制之一。

关键词：柴胡皂甙d 细胞凋亡类凋亡肝癌 CHOP

柴胡皂甙d通过调控TGF-β1/Smads信号通路抑制人胚肺成纤维细胞增殖和胶原蛋白产生

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2019年第3期35卷 256-261页

作者：孙金玲郑金旭史小东钱海金承基徐莉莉江苏大学附属医院江苏镇江212000

目的研究柴胡皂甙d(SSd)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖、转分化以及TGF-β1/果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白家族(Smads)信号通路的影响。方法体外培养HELF,设立正常对照组、 1 ng/mL TGF-β1处理组、 1 ng/m... 详细信息

目的研究柴胡皂甙d(SSd)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖、转分化以及TGF-β1/果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白家族(Smads)信号通路的影响。方法体外培养HELF,设立正常对照组、 1 ng/mL TGF-β1处理组、 1 ng/mL TGF-β1联合0.5μmol/L SSd处理组、 1 ng/mL TGF-β1联合1μmol/L SSd处理组、 1 ng/mL TGF-β1联合2μmol/L SSd处理组。采用CCK-8法检测HELF的增殖情况,荧光定量PCR法检测Smad2、 Smad3、 Smad7的mRNA水平, Western blot法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、 1型胶原蛋白(Col1)、 Smad2、 Smad3、磷酸化的Smad2(p-Smad2)、 p-Smad3、 Smad7的蛋白水平。结果与正常对照组比较, TGF-β1处理组细胞增殖明显, Col1、α-SMA蛋白水平增加, Smad2和Smad3 mRNA和蛋白磷酸化水平显著增加, Smad7 mRNA和蛋白水平显著降低;与TGF-β1处理组比较,不同浓度SSd处理组细胞增殖降低,可逆转以上各指标的改变,呈一定的量效关系。结论 SSd通过调控TGF-β1/Smads信号通路,发挥抗肺纤维化的作用。

关键词：柴胡皂甙d 人胚肺成纤维细胞(HELF) 转化生长因子β1(TGF-β1) 果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白(Smads)

柴胡皂甙d对人肝癌细胞BECN1表达及自噬功能的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西安交通大学学报（医学版） 2017年第1期38卷 127-130,150页

作者：肖祎任牡丹卢桂芳赵艳张丹刘亚萍卢新兰和水祥西安交通大学第一附属医院超声科陕西西安710061 西安交通大学第一附属医院消化内科陕西西安710061

目的观察柴胡皂甙d(SSd)对肝癌细胞SMMC-7721生长增殖及自噬作用的影响,初步探讨其可能的机制。方法肝癌SMMC-7721细胞株经不同终浓度SSd(5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、和17.5mg/L)作用24、48、72h,MTT法检测细胞增殖,筛选最适作用浓度... 详细信息

目的观察柴胡皂甙d(SSd)对肝癌细胞SMMC-7721生长增殖及自噬作用的影响,初步探讨其可能的机制。方法肝癌SMMC-7721细胞株经不同终浓度SSd(5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、和17.5mg/L)作用24、48、72h,MTT法检测细胞增殖,筛选最适作用浓度及时间,RT-PCR测定自噬基因BECN1 mRNA表达水平,Western blot检测BECN1蛋白表达水平。结果 SMMC-7721细胞增殖的抑制率随着SSd浓度的增大而增大,浓度达12.5mg/L时,抑制率最高(60%);SSd作用后BECN1在基因和蛋白水平的相对表达量比对照组明显升高(Pd作用后的BECN1的表达。结论 SSd对肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用呈现浓度和时间的依赖性,基本符合药物剂量-效应关系。SSd可能通过上调自噬基因BECN1的表达诱导自噬性死亡的发生,从而达到抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖的作用。

关键词：柴胡皂甙d 原发性肝癌自噬 BECN1

柴胡皂甙d对人肝癌细胞HIF-1α/COX-2信号通路的调节作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西安交通大学学报（医学版） 2011年第1期32卷 80-84页

作者：侯和磊和水祥朱占芳任牡丹李红霞陈静宏王治伦西安交通大学医学院第一附属医院消化内科陕西西安710061 西安交通大学医学院公共卫生学系陕西西安710061

目的观察缺氧条件下人肝癌细胞转录因子HIF-1α和COX-2表达的变化以及柴胡皂甙d的干预作用,探讨柴胡皂甙d对HIF-1α/COX-2信号通路的影响。方法①应用氯化钴模拟细胞缺氧,观察氯化钴模拟缺氧条件下人肝癌SMMC-7721细胞中HIF-1α及COX-2... 详细信息

目的观察缺氧条件下人肝癌细胞转录因子HIF-1α和COX-2表达的变化以及柴胡皂甙d的干预作用,探讨柴胡皂甙d对HIF-1α/COX-2信号通路的影响。方法①应用氯化钴模拟细胞缺氧,观察氯化钴模拟缺氧条件下人肝癌SMMC-7721细胞中HIF-1α及COX-2的表达;②应用氯化钴模拟细胞缺氧,以mTOR抑制剂雷帕霉素抑制HIF-1α蛋白合成后,观察SMMC-7721细胞中COX-2表达的改变;③应用不同浓度的柴胡皂甙d作用于氯化钴模拟缺氧条件下培养的人肝癌SMMC-7721细胞,作用24 h后,分别检测肝癌细胞中HIF-1α及COX-2的表达。结果①在正常肝癌SMMC-7721细胞中HIF-1α的蛋白表达较低,氯化钴模拟缺氧显著增加了HIF-1α的蛋白水平;正常SMMC-7721细胞中便有一定量的COX-2蛋白表达,氯化钴模拟缺氧条件下其蛋白水平进一步升高。②雷帕霉素显著降低了氯化钴模拟缺氧条件下HIF-1α的蛋白水平,同时可以观察到该组细胞COX-2蛋白显著降低。③柴胡皂甙d抑制了氯化钴模拟缺氧条件下HIF-1α的蛋白表达,并呈现出剂量依赖性,COX-2的蛋白水平随柴胡皂甙d浓度增加呈下降趋势。结论转录因子HIF-1α参与了缺氧条件下人肝癌SMMC-7721细胞COX-2表达的调节,柴胡皂甙d可能通过影响HIF-1α/COX-2信号通路发挥其抗癌作用。

关键词：肝癌低氧诱导因子-1α 环氧合酶-2 柴胡皂甙d

柴胡皂甙d对实验性大鼠肝癌Ang-2及VEGF表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西安交通大学学报（医学版） 2013年第5期34卷 664-668页

作者：王艳丽宋涛胡雅楠卢新兰张雅欣刘恩岐和水祥西安交通大学校医院陕西西安710049 西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科陕西西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院消化内科陕西西安710061 西安交通大学医学院实验动物中心陕西西安710061

目的探讨柴胡皂甙d(saikosaponins-d,SSd)对实验性大鼠肝癌血管形成的影响及其作用机制。方法清洁级雄性Sd大鼠100只,随机分为3组:模型组、SSd干预组和dMSO对照组。模型组经口灌注二乙基亚硝胺(diethylinitrosamine,dEN)溶液造模,每周5... 详细信息

目的探讨柴胡皂甙d(saikosaponins-d,SSd)对实验性大鼠肝癌血管形成的影响及其作用机制。方法清洁级雄性Sd大鼠100只,随机分为3组:模型组、SSd干预组和dMSO对照组。模型组经口灌注二乙基亚硝胺(diethylinitrosamine,dEN)溶液造模,每周5次至14周;dMSO对照组和SSd干预组在造模的同时分别每日给予腹腔注射SSd 1mg/kg和等体积量的dMSO。至18周末处死所有大鼠,记录大鼠的一般情况,取肝脏标本,HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学法和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测肝癌组织及血清中血管生成素2(Ang-2)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达。结果 SSd可抑制肿瘤形成,减轻肝脏损害,降低死亡率。免疫组化和ELISA法检测结果显示,SSd下调大鼠肝癌组织及血清中Ang-2和VEGF表达,与模型组和对照组相比差异具有统计学意义(Pd可以抑制实验大鼠肝癌发生及血管形成,下调Ang-2和VEGF的表达,这可能是其抑制肝癌的作用机制之一。

关键词：柴胡皂甙d 肝癌血管生成素2 血管内皮细胞生长因子

柴胡皂甙d抑制人肝癌细胞低氧诱导因子-1α的表达及相关机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国现代医学杂志 2011年第18期21卷 2100-2105页

作者：侯和磊卢新兰和水祥赵刚朱占芳李红霞陈静宏王治伦西安交通大学医学院第一附属医院消化内科陕西西安710061 西安交通大学医学院公共卫生学系陕西西安710061

目的观察转录因子信号转导与激活因子3(STAT3)活化在人肝癌细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达中的作用,探讨柴胡皂甙d是否可以通过影响STAT3/HIF-1α信号通路参与调节人肝癌细胞的HIF-1α表达,以进一步阐释其抗肿瘤作用的机制。方法①... 详细信息

目的观察转录因子信号转导与激活因子3(STAT3)活化在人肝癌细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达中的作用,探讨柴胡皂甙d是否可以通过影响STAT3/HIF-1α信号通路参与调节人肝癌细胞的HIF-1α表达,以进一步阐释其抗肿瘤作用的机制。方法①以AG-490抑制STAT3磷酸化后观察氯化钴模拟缺氧条件下人肝癌SMMC-7721细胞中p-STAT3、HIF-1α蛋白及STAT3和HIF-1α的mRNA水平。②应用不同浓度的柴胡皂甙d作用于氯化钴模拟缺氧下培养的人肝癌SMMC-7721细胞,干预24h后,分别检测肝癌细胞中p-STAT3、HIF-1α蛋白及STAT3和HIF-1α的mRNA水平。结果①AG-490干预细胞后,细胞中p-STAT3的表达明显降低,而HIF-1α的蛋白水平随之出现显著下降,各组STAT3和HIF-1α的mRNA水平没有明显改变。②柴胡皂甙d抑制了氯化钴模拟缺氧条件下p-STAT3蛋白的表达,并呈现出剂量依赖性,HIF-1α的蛋白水平随柴胡皂甙d的浓度呈下降趋势,各处理组STAT3和HIF-1α的mRNA水平没有明显改变。结论转录因子STAT3的活化参与了缺氧条件下人肝癌细胞HIF-1α表达的调节,柴胡皂甙d可以抑制缺氧条件下肝癌细胞HIF-1α的表达,部分机制是通过影响STAT3的活化来实现的,柴胡皂甙d可以通过抑制HIF-1α的表达发挥其抗肿瘤作用。

关键词：肝癌低氧诱导因子-1α 信号转导与转录激活因子-3 柴胡皂甙d

柴胡皂甙d对肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西安交通大学学报（医学版） 2006年第6期27卷 572-574页

作者：王艳丽和水祥罗金燕徐俊丽赵刚符寒西安交通大学医学院第一附属医院消化内科陕西西安710061 西安交通大学医学院第二附属医院消化内科陕西西安710004

目的观察柴胡皂甙d(SSd)对肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响及其作用机制。方法肝癌SMMC-7721细胞株经内毒素(脂多糖,LPS)诱导,加入不同质量浓度的SSd作用后,MTT比色法检测细胞增殖抑制率,光学、电子显微镜和流式细胞仪观察细胞凋亡,放免法... 详细信息

目的观察柴胡皂甙d(SSd)对肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响及其作用机制。方法肝癌SMMC-7721细胞株经内毒素(脂多糖,LPS)诱导,加入不同质量浓度的SSd作用后,MTT比色法检测细胞增殖抑制率,光学、电子显微镜和流式细胞仪观察细胞凋亡,放免法检测细胞前列腺素E2(PGE2)产生量。结果SSd对肝癌细胞增殖有明显的抑制作用,并呈剂量和时间依赖性。镜下观察,SSd作用组细胞可见典型凋亡小体形成,细胞凋亡率达17.5%。肿瘤细胞前列腺素E2的产生量,SSd作用组明显下降,接近环氧合酶2(COX-2)抑制剂尼美舒利(Nimesulide)作用组水平。结论SSd可能通过下调COX-2的表达,抑制PGE2产生而发挥抗癌作用。

关键词：柴胡皂甙d 前列腺素E2 肝癌细胞凋亡

柴胡皂甙d通过磷酸化p38诱导视网膜母细胞瘤细胞凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国中西医结合杂志 2005年第S1期25卷 100-103页

作者：闵红波黄勤郭志勇王建文步世忠解放军第455医院眼科上海200052 上海长海医院内分泌科第二军医大学生理教研室

目的研究柴胡皂甙d(SSd)抑制视网膜母细胞瘤(Rb)细胞生长并诱导其凋亡的作用及信号转导机制。方法应用~3H-胸腺嘧啶掺入分析法观察SSd对细胞生长的抑制作用,用流式细胞仪分析SSd对Y79细胞周期的影响,以dNA片段凝胶电泳分析细胞凋亡,用We... 详细信息

目的研究柴胡皂甙d(SSd)抑制视网膜母细胞瘤(Rb)细胞生长并诱导其凋亡的作用及信号转导机制。方法应用~3H-胸腺嘧啶掺入分析法观察SSd对细胞生长的抑制作用,用流式细胞仪分析SSd对Y79细胞周期的影响,以dNA片段凝胶电泳分析细胞凋亡,用Westem blot分析p38的磷酸化。结果SSd可明显地抑制Y79细胞的生长,10μg/ml SSd处理9h时,~3H-胸腺嘧啶掺入率下降达55．15%,此条件下,SSd可诱导Y79细胞凋亡。在此过程中,p38被激活,即磷酸化。结论SSd可抑制Y79细胞生长并诱导其凋亡,其过程是由磷酸化的p38介导。

关键词：柴胡皂甙d 视网膜母细胞瘤 p38 Y79 细胞凋亡