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广西大学学报（自然科学版） 2020年第2期45卷 421-426页

作者：暴玮李丽丽马丽赖芳刘雄民桂林理工大学南宁分校广西南宁530001 广西大学化学化工学院广西南宁530004

为提高柠檬桉树的综合利用率,采用乙醇作为提取剂对柠檬桉树脂中的多酚进行初步提取,分别用乙酸乙酯萃取提纯法、醇提水沉—正丁醇萃取提纯法对粗提物进一步纯化,得到质量分数分别为28.31%和39.65%的多酚纯化物;定性实验表明,柠檬桉树... 详细信息

为提高柠檬桉树的综合利用率,采用乙醇作为提取剂对柠檬桉树脂中的多酚进行初步提取,分别用乙酸乙酯萃取提纯法、醇提水沉—正丁醇萃取提纯法对粗提物进一步纯化,得到质量分数分别为28.31%和39.65%的多酚纯化物;定性实验表明,柠檬桉树脂的提取物中含有多酚物质;抗氧化活性实验表明抗坏血酸(VC)的总抗氧化能力最强,其次为粗提物,再次为醇提水沉—正丁醇提纯物,最后为乙酸乙酯纯化物。各提纯物的活性表现为多酚纯化物的质量分数越大,其抗氧化能力越大;多酚粗提物的抗氧化能力较提纯物更强,表明多酚粗提物中可能含有其他更强抗氧化能力的化学成分。

关键词：柠檬桉树脂多酚提取纯化抗氧化活性

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柠檬桉树脂有效成分的提取、纯化及抗氧化活性研究

柠檬桉树脂有效成分的提取、纯化及抗氧化活性研究

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作者：李丽丽广西大学

学位级别：硕士

柠檬桉是广西重要林业树种之一,具有很好的经济价值。本论文以柠檬桉树脂为原料,开展了柠檬桉树脂总黄酮、多酚、多糖及蛋白质的提取、纯化及抗氧化活性研究。主要研究内容和取得结果如下:(1)柠檬桉树脂中黄酮的提取纯化和抗氧化活性。... 详细信息

柠檬桉是广西重要林业树种之一,具有很好的经济价值。本论文以柠檬桉树脂为原料,开展了柠檬桉树脂总黄酮、多酚、多糖及蛋白质的提取、纯化及抗氧化活性研究。主要研究内容和取得结果如下:(1)柠檬桉树脂中黄酮的提取纯化和抗氧化活性。首先采用盐酸-锌粉、薄层层析等方法定性鉴别了柠檬桉树脂含有总黄酮,进而以芦丁为标准品构建了紫外可见分光光度法测定黄酮的定量分析方法,黄酮浓度(C)与吸光度(A)的线性关系为:A=25.11c+0.08。采用该法测定柠檬桉树脂总黄酮粗提液(A)含量,结果表明树脂中含有4.64%总黄酮。然后分别采用氯仿-乙酸丁酯、氯仿-二甲基甲酰胺、二甲基甲酰胺-氯仿两次超声萃取后得到纯化物B、C、D,它们的总黄酮质量分数分别为10.39%、18.03%、44.15%。最后,进行了A、B、C、D抗氧化活性研究,结果表明,A、B、C、D清除2,2-二苯基-1-苦味基肼自由基(DPPH·)的活性分别为91.75%、74.22%、88.44%、91.56%，总抗氧化能力分别为19.99、1.75、4.39、3.79 μmol 芦丁当量(RE).g-1,还原能力分别为1.16、0.36、0.39、0.45 μmol RE·g-1。(2)柠檬桉树脂中多酚的提取纯化和抗氧化活性。采用明胶溶液、三氯化铁溶液等定性鉴别方法检验柠檬桉树脂中含有多酚且属于水解类多酚。以没食子酸为标准品,用紫外分光光度法建立了多酚定量分析方法,给出了浓度(C)与吸光度(A)线性方程为:A=145.30c+0.16。用该法测定得到树脂中多酚含量为13.40%。用乙酸乙酯、醇提水沉-正丁醇萃取纯化得到质量分数分别为28.01%和39.60%纯化物。柠檬桉树脂多酚粗提液、乙酸乙酯纯化物、醇提水沉-正丁醇纯化物和维生素(Vc)进行了抗氧化活性实验,结果表明,它们清除DPPH·自由基活性分别为89.68%、86.45%、89.11%、91.12%,总抗氧化活性分别为13.44、12.68、15.46、14.89μmol.没食子酸当量(GE)·g-1,还原能力活性分别为0.99、0.78、1.04、1.20 μ***·g-1。(3)柠檬桉树脂中多糖的提取纯化及其抗氧化活性研究。采用3%α-萘酚乙醇溶液、斐林试剂定性鉴别了柠檬桉树脂中含有多糖,以葡萄糖为标准品,建立了3，5-二硝基水杨酸吸光光度法测定总糖定量分析方法,给出总糖浓度(C)与吸光度(A)线性关系为:A=4.38c-0.47。用该法测得柠檬桉树脂的总糖含量为18.21%。用苯酚-硫酸吸光光度法建立了多糖的定量分析方法,多糖浓度(C)与吸光度(A)线性关系为:A=12.34c+0.05。该法测得柠檬桉中多糖含量为16.78%。采用Sevage法、三氯乙酸法等多种手段进行柠檬桉多糖的纯化,分别获得质量分数为22.14%、38.56%、51.66%纯化多糖,并进行了它们抗氧化活性研究,结果表明不同质量分数多糖的抗氧化活性顺序为:80%纯化多糖>60%纯化多糖>30%纯化多糖,即质量分数增高,抗氧化活性增大。(4)柠檬桉树脂中蛋白质的提取纯化及其抗氧化活性研究。以牛血清蛋白为标准品,采用紫外分光光度法建立了柠檬桉树脂蛋白质定量分析方法,给出蛋白质浓度(C)与吸光度(A)线性关系为:A=5.70c+0.02。此法测得柠檬桉树脂蛋白质含量为7.47%。并考察了树脂蛋白质粗提液的抗氧化活性,结果表明蛋白质粗提液的抗氧化能力随浓度的增加,有所增强。

关键词：柠檬桉树脂总黄酮多酚多糖蛋白质提取纯化抗氧化活性

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柠檬桉树脂多糖的提取纯化及其生物活性的研究

柠檬桉树脂多糖的提取纯化及其生物活性的研究

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作者：何业通广西大学

学位级别：硕士

柠檬桉树脂是从树干创口中流出的分泌物,树脂中含有大量的天然成分,多糖就是其中之一。多糖凭借广泛的生物活性成为研究的热点。本文通过对柠檬桉树脂多糖的提取、分离纯化、结构表征以及生物活性进行研究,得到以下主要结论:(1)、以柠... 详细信息

柠檬桉树脂是从树干创口中流出的分泌物,树脂中含有大量的天然成分,多糖就是其中之一。多糖凭借广泛的生物活性成为研究的热点。本文通过对柠檬桉树脂多糖的提取、分离纯化、结构表征以及生物活性进行研究,得到以下主要结论:(1)、以柠檬桉树脂为原料,采用苯酚-硫酸法测定多糖的含量,通过单因素实验,考察提取料液比、提取温度和提取次数对柠檬桉树脂多糖提取率的影响。以单因素实验结果为基础,选取合适的料液比、提取温度、提取次数为参考因素,进行三因素三水平的正交试验设计,得到最佳的提取条件为:提取温度95℃,提取料液比1:20,提取次数3次,醇沉时间6 h,醇沉比例为75%,此条件下得到的柠檬桉树脂粗多糖提取率为7.79%。(2)、对柠檬桉树脂粗多糖(ERPC)提取液进行分离纯化,采用Sevage法和三氯乙酸法(TCA)对柠檬桉树脂多糖进行脱蛋白,结果表明三氯乙酸法对柠檬桉树脂多糖脱蛋白效果更好,且在TCA浓度达到6%时,蛋白的清除率达到98.90%,多糖的保留率为82.99%。采用聚酰胺层析柱脱色和活性炭脱色法对柠檬桉树脂多糖进行脱色实验,发现聚酰胺柱层析比活性炭的脱色效果更好,脱色率为77.95%,多糖的保留率为71.94%。对脱色脱蛋白后的多糖进行进一步分离纯化,采用DEAE-52和Bio-gel p-10进行分级纯化得到RP1-2和RP2-1两种均一组分的多糖。对两种多糖进行理化性实验、红外光谱分析、分子量和纯度的测定以及单糖组成分析。结果表明,RP1-2为中性多糖,分子量为11461 Da,主要由葡萄糖和甘露糖组成,比例为1:0.2。而RP2-1为酸性多糖,分子量为8915 Da,主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖和半乳糖组成,比例为0.3:0.5:0.3:0.8:1.0。(3)、对柠檬桉树脂多糖进行清除DPPH·自由基、清除·OH自由基、还原能力、总抗氧化活性测定。结果表明,柠檬桉树脂多糖有较好的清除自由基能力。通过线性拟合计算得到ERPC、ERP1、ERP2、RP1-2、RP2-1清除DPPH·自由基的IC分别为9.82、13.6、11.3、18.05、24.09 mg/L;清除·OH自由基的IC分别为23.6、26.9、53.7、55.02、74.06 mg/m L;柠檬桉树脂多糖有着良好的总抗氧化能力和还原能力。(4)、考察了柠檬桉树脂多糖的体外抗肿瘤活性。采用MTT比色法测定了多糖对肠癌细胞HT、肝癌细胞Hep G2和肺癌细胞A549等体外增殖细胞活性的抑制作用。结果表明,在1-400 ug/m L的浓度范围内,RP1-2和RP2-1对肠癌细胞HT的抑制作用相对较小,抑制率分别为6.12%和6.43%;对肝癌细胞Hep G2的抑制作用相对较好,抑制率分别为35.27%和28.58%,IC值分别为7.310和14.49 mg/m L;对肺癌细胞A549抑制活性测定结果显示,RP1-2相较于RP2-1的的抑制率更好,RP1-2的IC值为13.46 mg/m L。经本文对柠檬桉树脂多糖及其生物活性的试验研究表明,柠檬桉树脂多糖具有较好的生物活性,开展其多糖研究对柠檬桉树的开发利用具有重要的指导意义。

关键词：柠檬桉树脂多糖提取纯化抗氧化活性抗肿瘤活性

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